铁皮石斛总生物碱含量变异规律

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铁皮石斛的生物碱研究

铁皮石斛的生物碱研究,铁皮石斛的化学成分
铁皮石斛的生物碱研究,铁皮石斛的化学成分金蓉鸾等采用酸性染料比色法.对11
种石斛的生物碱含量进行测定。

结果表明，金钗石斛总生物碱含量达0.41%-0.64% ，远较其他石斛为高;而铁皮石斛的总生物碱含量为0.018%。

丁亚平等报道了安徽霍山3种石斛总生物碱的测定及其分布规律研究。

结果表明:
(1) 由于石斛在传统上以其茎作药用，所以考察不同生长期的茎中主要有效成分生
物碱的含量对于确定石斛的最佳采收期等有重要的指导意义。

霍山石斛和铜皮石斛茎
中总生物碱在前3年是逐年递增的，3年以后，霍山石斛含量降低，铜皮石斛含量增
加不显著，基本保持恒定，这与它们在3年以后开始枯萎(且前者快于后者)相一致。

因此霍山石斛和铜皮石斛均以第三年采收为宜。

而铁皮石斛茎中总生物含员则一直保
持递增势头，至第四年仍未见大的衰减，这也与它在第四年时仍留有部分叶子，可继
续进行光合作用和其他代谢的实际情况相吻合，所以铁皮石斛最好在3年以后(第四年左右)采收。

(2) 从各部位来看，3种石斛生物碱含缺都呈现“叶>(成熟期)茎二根”的规律，故此，不能轻易否定石斛叶和根的药用价值。

(3) 从3种石斛茎的比较来看，总生物碱含量大致有如下顺序:霍山石斛>铜皮石斛>铁皮石斛，这与它们的实际价值相符合。

另一方面，3种石斛在各时期产生生物碱的
量不同:铁皮石斛按逐年加倍递增的方式积累生物碱，而霍山石斛和铜皮石斛则在第一年就有较多的生物碱形成，以后各年递增较少。

石斛中总生物碱量的测定

斛中提取分离出十多种生物碱Ｊ。金钗石斛（Ｄ．ｎｏｂｉｌｅ）
即取溶液于分液漏斗中，加人５ｍＬ邻苯二甲酸氢钾一氢氧化钠缓冲液，２ｍＬ溴甲酚绿，摇匀，静置３０ａｒｉｎ，取５ｍＬ氯仿液，加入ｌｍＩＤ．Ｏ１Ｎ氢氧化钠无水乙醇溶液，于６ｏ ℃热水中加热。２Ｏ～４０ａｒｉｎ内于６２０ｎｍ处测紫外吸收Ｊ。以１０ｍＬ
收率为９８．６％。采用８０％乙醇索氏提取较好，测定总生物碱量为０．４２６％。
关键词：石斛；总生物碱；索氏提取
中图分类号：０６５６．３文献标识码：Ａ文章编号：１００８—０２１Ｘ（２０１５）０７—００８９～０２
ＤｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆＴｏｍｌＡｌｋａｌｏｉｄＦｒｏｍＣａｕｉｓｆＤｅｎｄｒｏｂｉｉ
，ｌｇＸｉａｏｆａｎ，ＷａｎｇＷｅｎｊｉａｎ
（ＢｏｚｈｏｕＴｅａｃｈｅｒｓＣｏＵｅｇｅ，Ｂｏｚｈｏｕ２３６８００，Ｃｈｉｎａ）
分别取０．４、０．８、１．２、１．６、２．０ｍＬ盐酸金刚烷胺标储液于１０ｍＬ容量瓶中，用氯仿稀释至刻度，即得２、４、６、８、１０１￣ｒ：，／ｍＬ的盐酸金刚烷胺溶液，用酸性染料比色法测定吸光度。

不同生长龄铁皮石斛茎与叶中总多糖、总生物碱及总黄酮含量的差异

不同生长龄铁皮石斛茎与叶中总多糖、总生物碱及总黄酮含量的差异唐丽;李菁;龙华;李贵【摘要】采用苯酚硫酸法、酸性染料比色法以及硝酸铝比色法分别测定并比较不同生长龄铁皮石斛茎与叶中总多糖、总生物碱及总黄酮的含量差异,为铁皮石斛资源的充分合理利用提供科学依据.结果表明,不同生长龄铁皮石斛茎与叶中总多糖、总生物碱、总黄酮的含量均有显著差异,其中总多糖主要集中于茎,总生物碱和总黄酮主要集中于叶;总多糖含量以2年龄茎最高,为35.32％,总生物碱含量以1年龄叶最高,为0.036％,总黄酮含量以半年生叶最佳,为0.104％;总多糖含量随着生长龄的增加而逐渐减少;3年龄以内的总生物碱和总黄酮含量明显较高,且不同龄之间含量差异较小,而当植株生长至4、5年龄时,其总生物碱及总黄酮的含量明显较低.铁皮石斛茎与叶中各含有较高的不同有效成分,茎和叶均可作为药用资源加以充分利用;为获取最佳效益,综合考虑生长周期、生物量及药用成分含量等因素,人工栽培的铁皮石斛以3年龄内采收为宜,不宜栽种4年以上.【期刊名称】《广东农业科学》【年(卷),期】2015(042)008【总页数】5页(P17-21)【关键词】铁皮石斛;生长龄;总多糖;总生物碱;总黄酮【作者】唐丽;李菁;龙华;李贵【作者单位】植物资源保护与利用湖南省高校重点实验室/吉首大学生物资源与环境科学学院,湖南吉首416000;植物资源保护与利用湖南省高校重点实验室/吉首大学生物资源与环境科学学院,湖南吉首416000;植物资源保护与利用湖南省高校重点实验室/吉首大学生物资源与环境科学学院,湖南吉首416000;植物资源保护与利用湖南省高校重点实验室/吉首大学生物资源与环境科学学院,湖南吉首416000【正文语种】中文【中图分类】S567.9铁皮石斛（Dendrobium candidum）为兰科石斛属植物，又名黑节草，为我国传统名贵中药材，兼具医疗与保健养生双重功效，居“九大仙草”之首［1］。

铁皮石斛和重唇石斛杂交F_1代总生物碱和多糖含量测定

摘要：用酸性染料分光光度法和苯酚一酸比色法测定铁皮石斛、重唇石斛及其Ｆ硫代石斛碱、石斛多糖含
量，杂交Ｆ代各单株的石斛碱和石斛多糖的含量均介于铁皮石斛和重唇石斛之问，其中的２８２３４。、５、６、６、７、
陈海柳．六价铬抑制淡水绿藻生长对毒性效应［］环境Ｊ．
科学，２０，２（）１— １０３４２：４５．
ＢｒｄｏｄＭＭ．Ａｒｐｄａｄｓｎｉｖｍｅｈｄｆｒｔｅａｆｒａｉｎｅｓｔｅｉｔｏｏｈｑａｔａｉｎｆｕｎｉｔｏｍｉｒｇａｔｏｃｏｒｍｑａｔｉｓｏｐｏｅｎｕｉｚｎｔｅｕｎｉｅｆｒｔｉｔｉｉｇｈｔｌ
Ｒｎｒ．Ｇｏｉｇｃｎｅｎｏｅｅｆｏｉａｅｈｍｃｌ［］ｅｎＲｒｗｎｏｃｒｖｒｒｕｒｔｄｃｅｉａＪ．ｐｌｎｓ
ＥｖｏｃＴｃ，２０，３（）５ｎｉｎＳｉｅｈ０ｌ５７：１４—１Ｏｒ６．
魏正贵，尹明．稀土元素在赣南非稀土矿区和不同稀土矿区土壤一铁芒萁（ｉａｏｔｉｌｅｒ）系统中的分布、累Ｄｃｎｐｅｓｉａｉｒｒｎｓ积和迁移［］生态学报，２０，２（）０Ｊ．０１１６：９０—９６０．

石斛鲜汁加工方法对总生物碱溶出量影响研究

石斛鲜汁加工方法对总生物碱溶出量影响研究陈敏;陈婧超;黄文璐;刘淑芸;薛青荣;冯英鹏;惠爱玲;张文成【摘要】以铁皮石斛鲜条压榨汁为试验对象,研究不同加工方法对鲜汁中总生物碱溶出量的影响.结果表明:冷冻预处理及超声波辅助浸提对石斛汁中总生物碱溶出量影响较大.石斛鲜条宜切段冷冻处理后加入30倍40℃酸水(pH 4.0)压榨制汁,且辅以400 W超声波处理10 min,此时石斛汁中总生物碱溶出量达到10.24μg/g,较常规榨汁(5.26μg/g)提高94.68％.石斛汁经巴氏杀菌处理(80℃,30 min)后,其总生物碱溶出量降低8.00％,但保存期可延长至6周～7周;冷藏7周的石斛汁中总生物碱溶出量仍高于常规榨汁52.47％.该研究促进了石斛资源合理利用,并为石斛汁保健饮品开发提供技术支持.【期刊名称】《食品研究与开发》【年(卷),期】2019(040)012【总页数】7页(P103-109)【关键词】铁皮石斛;冷冻预处理;超声波;总生物碱;溶出量;巴氏杀菌【作者】陈敏;陈婧超;黄文璐;刘淑芸;薛青荣;冯英鹏;惠爱玲;张文成【作者单位】农产品生物化工教育部工程研究中心,合肥工业大学,安徽合肥230009;农产品生物化工教育部工程研究中心,合肥工业大学,安徽合肥230009;农产品生物化工教育部工程研究中心,合肥工业大学,安徽合肥230009;农产品生物化工教育部工程研究中心,合肥工业大学,安徽合肥230009;农产品生物化工教育部工程研究中心,合肥工业大学,安徽合肥230009;农产品生物化工教育部工程研究中心,合肥工业大学,安徽合肥230009;农产品生物化工教育部工程研究中心,合肥工业大学,安徽合肥230009;农产品生物化工教育部工程研究中心,合肥工业大学,安徽合肥230009【正文语种】中文铁皮石斛具有益胃生津、滋阴清热等功效，中国药典2010 版、2015 版均有收载。

药效成分分析显示其主要含有多糖、总生物碱等[1]，其中石斛多糖具有增强免疫力、抗炎、抗氧化、抗肿瘤等药理作用[2-3]；总生物碱具有胃肠道保护、神经保护等作用[4-8]。

真菌诱导子对铁皮石斛原球茎生物碱含量影响及其机理

真菌诱导子对铁皮石斛原球茎生物碱含量影响及其机理铁皮石斛(Dendrobium officinale Kimura et Migo)是兰科石斛属多年生附生草本植物,是一种兼具观赏价值与药用价值的中草药。

本文选用铁皮石斛原球茎为材料(产地为福建连城),对原球茎离体培养条件进行优化,并以此为基础测定不同浓度和处理时间尖孢镰刀菌诱导子处理下铁皮石斛原球茎总生物碱含量的变化。

同时克隆了两个调控生物碱合成途径相关酶的基因——DoHDR基因和DoIspF基因,并进行了基因相对表达量分析。

1铁皮石斛离体培养条件优化以连城铁皮石斛为材料,优化铁皮石斛离体培养条件。

①对比水杨酸、蛋白胨和番茄汁对铁皮石斛原球茎增殖的影响,结果显示,当水杨酸浓度为2 mg/L时原球茎增殖效果最好,但原球茎生长状态不好。

蛋白胨浓度为2 mg/L时最有利原球茎增殖,番茄汁添加量为100 ml/L时原球茎增殖效果最好,且原球茎生长旺盛。

②比较几组不同混合有机添加物对铁皮石斛原球茎增殖的影响,采用的添加物组合分别为香蕉和土豆、苹果和土豆、香蕉和苹果、番茄和土豆。

结果表明添加50g/L土豆增殖效果最好③比较不同容器和培养方式对原球茎增殖的影响,结果表明,采用三角瓶液体振荡培养最有利原球茎增殖。

2真菌诱导子对铁皮石斛总生物碱含量的影响基于优化的离体培养条件下所得到的大量原球茎,比较不同浓度不同处理时间尖孢镰刀菌诱导子对铁皮石斛总生物碱的影响,结果发现当诱导子浓度较低时(100mg/L,200mg/L),总生物碱含量随处理时间增加呈先上升后下降的趋势,当诱导子浓度较高时(500 mg/L),总生物碱含量先下降后上升,而当诱导子浓度过高时(1000 mg/L)总生物碱合成受到抑制,含量都比较低。

而最适宜生物碱合成与积累的条件为200 mg/L诱导子处理3天,总生物碱含量最高。

3铁皮石斛HDR基因和IspF基因的克隆和生物信息学分析以铁皮石斛原球茎为材料采用同源克隆与RACE相结合的方法,得到铁皮石斛MEP途径的2个基因——DoHDR和DoIspF,DoHDR全长1784 bp,包含完整ORF,长度为1382 bp,编码460个氨基酸,生物信息学分析表明该基因编码的蛋白为稳定的酸性亲水蛋白,不具有跨膜结构,不含信号肽,二级结构预测表明,该蛋白主要含有α-螺旋、p-折叠和无规则卷曲。

快速测定铁皮石斛总生物碱含量方法的优化

舱）总生物碱在０．０１９％一０．０４３％，生物碱含量因种质和种植年限的不同而异，其中云南产铁皮石斛总生物碱明显高于浙江产铁皮石斛。１９６４年，
收稿日期：２ｏ１３— ０９ — ２８基金项目：云南省自然科学基金项目（２０１２ＦＢ１９３）作者简介：刘莉（１９８２一），女，云南昆明人，助研，硕士，主要从事中药农业研究，・为通讯作者，Ｅ．ｍａｉｌ：ｗｙｌ￣０１２＠１２６．ｅｏｍ。
要：通过取样量、超声时间、漫提剂量、粒径等４个石斛生物碱的超声提取影响因素的正交和单因素试验。结果表明，石斛生
物碱含量超声提取测定的最佳参数：０．０５０ｇ的取样量、６ｏ目的粒径、５０ｒａｉｎ的超声时间、６ｏ的漫提试剂用量与取样量比。该方法
具有样品前期处理时间短，测定仪器操作简便，测定速度快、样品用量少的特点，能在较短时间内对大量单株个体进行检测鉴定，为石斛的品质育种提供了有效途径和手段。
关键词：石斛；超声提取；总生物碱含量
中图分类号：Ｓ５６７．９文献标识码：Ａ
应，且每种石斛的生物碱含量变化很大。铁皮石斛具有抗衰老、抗肿瘤、降低血糖、提高免疫功能等作用，对恶性肿瘤、胃肠道疾病、糖尿病、白内障、关节
炎、血栓闭塞性脉管炎及慢性咽炎等疾病具有很好的疗超声３种不同方式及甲醇、乙醇、氯仿、丙酮等不同溶剂对铁皮石斛

安徽霍山三种石斛总生物碱的测定及其分布规律研究

安徽霍山三种石斛总生物碱的测定及其分布规律研究
丁亚平;杨道麒;吴庆生;于力文;徐云
【期刊名称】《安徽农业大学学报》
【年(卷),期】1994(21)4
【摘要】研究了用溴甲酚绿测定石斛碱的条件和方法，并用该法对安徽省霍山县
产的三种石斛不同生长期的不同部位中总生物碱含量进行了测定，结果表明：霍山石斛、铜皮石斛和铁皮石斛茎部总生物碱含量分别为０．０２９１％、０．０２８０％和０．０２４０％。

霍山石斛总生物碱含量１年茎＜２年茎＜３年茎＞４年茎，宜３年采收；铁皮石斛１年茎＜２年茎＜３年茎＜４年茎，宜４年采收；铜皮石斛３年茎与４年茎含量差异不显著，也宜３年采收。

３种石斛总生物碱含量均为叶＞茎≈根，建议重新考查根、叶的药用价值及其综合开发利用的可行性。

【总页数】4页(P503-506)
【关键词】石料;生物碱;测定;霍山;安徽
【作者】丁亚平;杨道麒;吴庆生;于力文;徐云
【作者单位】安徽农业大学
【正文语种】中文
【中图分类】R284.1
【相关文献】
1.不同来源铁皮石斛不同部位生物碱的分布规律研究 [J], 尚喜雨
2.安徽霍山3种石斛营养成分分析及其分布规律 [J], 于力文;蔡永萍
3.三种川产石斛有效成分的测定及其分布规律研究 [J], 陈蕤;崔盛;陶宗娅
4.石斛中总生物碱的含量测定方法研究 [J], 徐宁
5.霍山三种石斛与其栽培土壤中微量元素分布关系研究 [J], 吴庆生;杨道麒;毕守东;丁亚平;于力文;徐云
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铁皮石斛化学成分及其药理作用研究进展

衰老等方面有一定的功效。
尚喜雨通过对铁皮石斛的不同部位、不同采收阶段的生物
碱进行比较分析，结果表明生物碱含量基本都呈现 “ 茎上段
２．１对免疫系统的影响植物多糖是一类重要的天然药物，它能显著提高巨噬细胞的吞噬功能，增强ＮＫ细胞的活性，促
为１年比较恰当。
１．５其他成分
铁皮石斛还含有一些其它联苄类、倍半萜
类、香豆素等化学成分，其中有些成分是首次发现的。王
涵从云南普洱铁皮石斛首次提取得到具有一定的抗炎与抗肿瘤功效铁皮石斛素Ｓ这一新组分。据罗镭 “ 等人通过
需氨基酸的平均质量分数为０．２８— ２．９６ａｒｇ・ｇ～，其含量随着铁皮石斛生长周期的延长而增加。１．４微量元素药材中的微量元素含量往往会对药效会造成一定的影响，同时药材中的重金属的微量超标会影响药材的品质。黎万奎等对铁皮石斛中１０种微量元素进行研究表明除铜外，铁皮石斛组织培养物中其他微量元素均高于其
＞叶一根＞茎中段茎下段” 的大体趋势；１年生石斛的生物
碱含量１１２年生 ≥野生型。＞
津益胃、润肺止咳等功效。在诸多经典的医学古籍如《本草纲目》、《道藏》、《神农本草经》等中里均有记载，并被录入于２０１０版中国药典。铁皮石斛常以新鲜或干燥茎作为药用，铁
的功效。高建平ｕ等人的试验研究表明，灌胃给予铁皮石斛

不同来源铁皮石斛中多糖_氨基酸和生物碱含量比较

Journal of Chinese Medicinal Materials 第 37 卷第 5 期 2014 年 5 月
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在一定程度上解决这一问题。近年来，研究人员已经构建了棉花、番茄、铁皮石斛和橡胶树的全长均一化 cDNA 文库，并成功用于功能基因的筛选和克隆用改良的 TＲIzol 方法获得了足够量的丹参根部总ＲNA，并进一步制备了丹参根部全长均一化 cDNA，为后续丹参功能基因克隆及丹参ＲNA 干涉突变体库的构建奠定了基础。
［3］王维婷，单成钢，倪大鹏，等 . 丹参有效成分代谢生理生化及分子生物学研究进展［J］．中药材，2009，32 （ 9 ）： 1472-1476.
［4］李滢，孙超，罗红梅，等 . 基于高通量测序 454 GS FLX 的丹参转录组学研究［J］．药学学报，2010，45（ 4）： 524-
人工栽培品 4. 7 3. 1 3. 9 11. 8 4. 6 8. 5 8. 5 7. 6 6. 9 9. 3 3. 6 6. 3 － 3. 6 9. 5 2. 1
2. 3 铁皮石斛总生物碱含量的测定用碱性氯仿提取生物碱，溴甲酚绿酸性染料比色法测定其含量。铁皮石斛样品在 60 ℃ 烘箱中烘干，粉碎，过 60 目筛。取各种样品粗粉 0. 1 g，用适量的氨水润湿密塞 30 min，精密加入氯仿 10 mL 称重，水浴加热回流 2 h，冷却后，氯仿补足失重，过滤，以酸性染料比色法测定含量〔5〕。结果表明，不同来源铁皮石斛中氨基酸生物碱含量顺序为：组培品＞野生品＞人工栽培
表 3 不同来源铁皮石斛的总生物碱含量（ n =3）
材料来源野生品组培品人工栽培品
总生物碱含量 /% 0. 085 0. 091 0. 043

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上均为国产分析试剂 ) 。石斛碱对照品自制 [ 4] , 面积归一法检测含量达 99% 。 1 2 供试药材
2008年 11月至 2009月 2 月, 采集浙江省铁皮石斛人工栽培基地 11 个种质一至三年生 ( 铁皮石斛萌蘖生理年龄 ) 样品 33个, 云南省铁皮石斛人工栽培基地 6 个种质一年生 ( 铁皮石斛萌蘖生理年龄 ) 样品 6个、齿瓣石斛 D devoninum 样品 2个, 其中铁皮石斛样品采集地产量占全国 90% 以上。购买杭州胡庆余堂、杭州青藏奇珍铁皮枫斗 ( 药材基原为铁皮石斛 ) 样品 2个, 杭州吴山广场、杭州胡庆余堂、杭州青藏奇珍等枫斗 ( 药材基原为非铁皮石斛 ) 样品 9个。浙江省人工栽培基地铁皮石斛药材样品详见文献 [ 5]。 1 3 铁皮石斛总生物碱含量的测定 1 3 1 样品处理样品在 60 烘箱中烘干, 粉碎, 过 60目筛。取各种样品粗粉 0 1 g, 用适量的氨水润湿密塞 30 m in, 精密加入氯仿 10 mL 称重, 水浴加热回流 2 h, 冷却后, 氯仿补足失重, 过滤, 以酸性染料比色法测定含量 [ 6] , 试验平行 3次。部分样品氯仿稀释后再进行测定。
10 0 mL, 加入 pH 4 5缓冲液 5 0 mL 和 0 04% 溴甲酚绿溶液 1 0 mL, 剧烈振摇 3 m in, 静置 30 m in, 氯仿层经氯仿浸泡处理并干燥后的药棉滤过, 取续滤液 5 0 mL 加 0 01 m o l L- 1氢氧化钠无水乙醇液 1 0 mL 摇匀, 以氯仿 10 0 mL 为空白, 同法操作, 于波长 620 nm 处测得吸收度。吸光度与浓度的回归方程为 C = 9 542 9A - 0 038, r = 0 999 8。在 0 01~ 0 05 m g, 浓度 ( C )与吸光度 (A ) 具有良好的线性关系。
元 /g
药材基原
总生物碱 /%
S1 杭州吴山广场 0. 4 枫斗
非铁皮石斛 0. 060 0
S2 杭州吴山广场 1. 2 枫斗
非铁皮石斛 0. 027 5
S3 杭州吴山广场 2. 2 枫斗
非铁皮石斛 0. 087 5
S4 杭州吴山广场 4. 0 枫斗
非铁皮石斛 0. 022 5
S5 杭州吴山广场 5. 0 枫斗
0. 033 7
12
0. 036 0
0. 039 0
0. 042 5
0. 039 2
13
0. 033 0
0. 028 5
0. 020 5
0. 027 3
表 2 云南省人工栽培石斛总生物碱质量分数
种质
14 15 16 17 18 19 20 21
产地
德宏德宏景洪德康景洪勐海德宏德宏
药材基原
0 027 5% ~ 0 043 0% , 市场购买铁皮枫斗 (药材基原为铁皮石斛, 年龄未知 ) 为 0 032 5% , 0 039 0% , 齿瓣石斛总生物碱为 0 023 0% , 0 024 5% , 其他枫斗 ( 非铁皮石斛 ) 样品总生物碱为 0 022 50% ~ 0 087 5% 。目前, 浙江铁皮石斛骨干基地一般都在二至三年生采收, 云南铁皮石斛骨干基地一般都在一年生采收, 根据上述结果可以基本确定总生物碱明显偏离 0 019 0% ~ 0 043 0% 的样品为非铁皮石
浙江人工栽培不同种质铁皮石斛总生物碱含量
见表 1, 云南省人工栽培铁皮石斛、齿瓣石斛和市售枫斗药材总生物碱含量见表 2, 3, 供试铁皮石斛其生物碱质量分数为 0 019 0% ~ 0 043 0% , 其中浙江人工栽培骨干基地生产的铁皮石斛一至三年生药材总生物碱质量分数为 0 019 0% ~ 0 042 5% , 云南一年生铁皮石斛总生物碱质量分数为
非铁皮石斛 0. 031 5
S10 青藏奇珍
66. 0 铁皮枫斗铁皮石斛 0. 039 0
23 89
第 35卷第 18 期 2010年 9 月
V ol 35, Issu e 18 Sep tember, 2010
2 2 种质、年龄、产地与铁皮石斛总生物碱含量的关系
表 1 同时可见, 产地环境差异不大的浙江人工栽培铁皮石斛, 不同种质总生物碱含量均存在极显著的差异。 11个种质一至三年药材平均总生物碱质量分数 1号种质最低, 为 0 022 5% , 12号种质最高, 达到 0 039 2% , 两者相差 0 016 7% 。其中 1 ~ 6号种质药材样品采自同一产地, 栽培环境、栽培基质与基地管理完全一致, 不同种质间总生物碱含量同样存在极显著差异, 一至三年生样品平均值变幅为 0 022 5% ~ 0 030 5% 。因此, 人工栽培铁皮石斛其总生物碱含量的差异主要来自遗传差异。
1 3 2 线性试验精密称取石斛碱 1 00 m g置 100 mL 量瓶中加氯仿至刻度。精密量取 1 0, 2 0, 3 0, 4 0, 5 0 mL 分别置分液漏斗中, 用氯仿准确稀释至
第 35卷第 18 期 2010年 9 月
V ol 35, Issu e 18 Sep tember, 2010
非铁皮石斛 0. 032 5
S6 杭州吴山广场 8. 0 枫斗
非铁皮石斛 0. 025 0
S6 杭州胡庆余堂 4. 0 枫斗
非铁皮石斛 0. 023 5
S7 杭州胡庆余堂 10. 0 枫斗
非铁皮石斛 0. 035 0
S8 杭州胡庆余堂 20. 0 铁皮枫斗铁皮石斛 0. 032 5
S9 青藏奇珍
15. 0 枫斗
斛, 但总生物碱含量在此范围的样品也可能不是铁皮石斛。因此, 总生物碱含量是鉴别铁皮石斛药材真伪与优劣的一个重要指标, 但尚不能根据总生物碱单一指标辨别铁皮石斛药材真伪与优劣, 必须结合多糖含量与其他活性化学组分才能真正辨别铁皮石斛药材的真伪与优劣。
表 1 浙江人工栽培铁皮石斛总生物碱质量分数 %
第 35卷第 18 期 2010年 9 月
V ol 35, Issu e 18 Sep tember, 2010
铁皮石斛总生物碱含量变异规律
诸燕1, 张爱莲 1, 何伯伟2, 张新凤 1, 俞巧仙3, 斯金平 1*
( 1 浙江农林大学亚热带森林培育国家重点实验室培育基地天然药物研发中心, 浙江临安 311300; 2 浙江省中药材产业协会, 浙江杭州 310020; 3 浙江森宇药业有限公司, 浙江义乌 322000)
种质
一年生
二年生
三年生
平均值
1
0. 020 5
0. 021 0
0. 026 0
0. 022 5
2
0. 022 5
0. 026 5
0. 037 5
0. 028 8
3
0. 024 0
0. 032 0
0. 035 5
0. 030 5
5
0. 024 0
0. 027 5
0. 035 5
0. 029 0
6
0. 026 5
[ 摘要 ] 目的: 全面了解不同种质、不同采收年限铁皮石斛药材总生物碱含量及其变异规律, 为铁皮石斛真伪鉴别与优质药材培育提供依据。方法: 采集铁皮石斛人工栽培骨干基地一至三年生铁皮石斛 17个种质 41 个样品, 以及市售不同价位枫斗药材 11个样品; 采用酸性染料比色法测定总生物碱含量。结果 : 人工栽培的铁皮石斛与市场购买的铁皮枫斗药材总生物碱在 0 019 0% ~ 0 043 0% ; 浙江省 11个铁皮石斛种质一年生、二年生、三年生样品平均总生物碱为 0 025 3% , 0 027 0% , 0 032 6% , 云南产一年生铁皮石斛平均总生物碱为 0 034 3% 。结论: 不同种质、年龄的铁皮石斛总生物碱含量差异很大, 并且总生物碱含量随着生长年限的增加而增加, 云南产铁皮石斛总生物碱明显高于浙江产铁皮石斛 , 但正宗的铁皮石斛总生物碱含量具有明显限量范围, 总生物碱含量明显偏离限量范围的样品可以基本确定为非铁皮石斛, 总生物碱含量在此范围的样品必须结合多糖含量与其他活性化学组分才能真正辨别铁皮石斛药材的真伪与优劣。
1 3 3 稳定性试验精取某一样品溶液 10 m L, 另以氯仿 10 0 mL 为空白, 按线性试验项上操作, 分别在 0, 10, 20, 30, 40 m in测定吸光度。结果显示该显色在 20 m in内稳定。 1 3 4 精密度试验精取 0 001 g L- 1的石斛碱溶液 10 m L, 另以氯仿 10 0 mL 为空白, 其余操作同上, 测定 5次。结果显示, RSD 1 7% 。 1 3 5 重复性试验取同一样品 5份, 按照样品中总生物碱提取步骤提取样品溶液, 精取样品溶液 10 mL, 另以氯仿 10 0 mL 为空白, 其余操作同上, 测定吸光度。结果显示, RSD 4 7% 。 1 3 6 加样回收率试验取某一已知含量样品 5 份, 精密加入石斛碱对照品溶液, 按照样品中石斛碱提取步骤提取样品溶液, 精取样品溶液 10 0 m L, 另以氯仿 10 0 mL 为空白, 其余操作同上, 测定吸光度。平均回收率 101% , RSD 4 9% 。 2 结果与分析 2 1 铁皮石斛总生物碱含量
铁皮石斛铁皮石斛铁皮石斛铁皮石斛铁皮石斛铁皮石斛齿瓣石斛齿瓣石斛
总生物碱 /%
0. 028 0 0. 043 0 0. 035 0 0. 040 0 0. 027 5 0. 032 0 0. 023 0 0. 024 5
表 3 市售枫斗药材总生物碱质量分数
样品号购买点
单价 / 商品名
0. 025 0