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植物总rna提取试剂植物总RNA提取试剂是一种用于从植物组织中提取总RNA的试剂盒。
总RNA是植物细胞中的一个重要组成部分，可以用于基因表达研究、转录组学和其他分子生物学研究。
本文将介绍植物总RNA提取试剂的原理、操作流程、优缺点以及注意事项。
一、植物总RNA提取试剂的原理植物总RNA提取试剂通过破碎细胞壁和细胞膜，溶解蛋白质，并在碱性条件下使DNA和RNA不同程度地溶解从而实现总RNA的提取。
它通常包括下述主要步骤：1.细胞破碎：将植物样品研磨或经过冻融循环处理，释放细胞。
2.蛋白质沉淀：添加试剂进行蛋白质沉淀，将细胞残渣上清液中的蛋白质沉淀下来。
3. RNA沉淀：通过加入酒精等试剂使RNA从上清液中沉淀下来。
4.清洗：用特定的试剂将沉淀洗涤，去除污染物。
5.溶解：加入溶剂溶解沉淀，得到纯度较高的总RNA。
二、植物总RNA提取试剂的操作流程1.准备样品：收集新鲜的植物组织，将其迅速冷冻在液氮中，然后使用试剂研磨或液氮研磨法将其破碎。
2.加入试剂：向研磨好的样品中加入试剂，根据试剂盒的要求进行操作。
3.离心：离心样品，以将细胞碎片和蛋白质沉淀分离。
4.沉淀RNA：将上清液转移至新的离心管中，加入酒精等试剂，使RNA沉淀下来。
5.清洗：用特定的试剂洗涤RNA沉淀，去除杂质。
6.溶解：使用特定的溶剂将RNA沉淀溶解，使其完全溶解。
7.检测：采用比色法、荧光法或电泳等方法对提取得到的RNA进行定量和质量检测。
三、植物总RNA提取试剂的优缺点1.优点：-操作简单，不需要复杂的仪器和设备。
-高效提取总RNA，得到纯度较高的RNA。
-可以快速提取大量的样品。
-可以适用于多个植物种类和组织类型。
2.缺点：-可能存在某些试剂无法完全溶解质体等问题。
-部分试剂存在对环境的污染隐患。
四、植物总RNA提取试剂的注意事项1.使用新鲜的植物组织进行提取，以确保RNA的质量和完整性。
2.严格按照试剂盒的说明进行操作，不要改变试剂的使用顺序或添加量。
RNAblood 超纯全血总RNA快速提取试剂盒目录号：RN25目录编号包装单位RN2502 50次❖适用范围：适用于快速提取全血高纯度总RNA❖试剂盒组成、储存、稳定性：﹢试剂盒组成保存50次10X红细胞裂解液RLB 裂解液RL室温4℃避光25 ml50 ml去蛋白液RE 室温25 ml漂洗液RW 室温10 ml第一次使用前按说明加指定量乙醇RNase-free H2O 室温10 ml70%乙醇室温9ml RNase-free H2O第一次使用前按说明加指定量乙醇RNase-free吸附柱RA 室温50个收集管（2ml）室温50个本试剂盒在室温储存12个月不影响使用效果。
储存事项：1.所有的溶液应该是澄清的，如果环境温度低时溶液可能形成沉淀，此时不应该直接使用，可在37℃水浴加热几分钟，即可恢复澄清。
2.不合适的储存于低温（4℃或者－20℃）会造成溶液沉淀，影响使用效果，因此运输和储存均在室温下（15℃－25℃）进行。
裂解液RL可以常温运输，收到后4℃避光保存。
3.避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、PH值变化，各溶液使用后应及时盖紧盖子。
❖产品介绍：1.第一次使用前请先在漂洗液RW瓶和70%乙醇瓶中加入指定量乙醇，加入后请及时打钩标记已加入乙醇，以免多次加入!2.所有离心步骤如未加说明，均在室温进行。
使用转速可以达到13，000 rpm的传统台式离心机，如Eppendorf 5415C 或者类似离心机。
3.裂解液RL和去蛋白液RE中含有刺激性有害化合物，操作时要戴乳胶手套，避免沾染皮肤、眼睛和衣服。
若沾染皮肤、眼睛时，要用大量清水或者生理盐水冲洗。
4.考虑到环保问题，本试剂盒不含有实验室常用试剂氯仿，用户使用前需要自备氯仿。
5.常规的琼脂糖凝胶电泳和变性胶电泳均可以用来分析RNA的质量。
好的RNA产物在电泳后应该可以看到明显的二条优势核糖体RNA带，分别为~5Kb（28S），~2Kb （18S），条带亮度比值约为2：1。
质粒小量提取试剂盒(磁珠法)目录号：PL02试剂盒组成保存PL0202100次PL0203200次RNaseA（10mg/ml）-20℃300µl 300µl×2 溶液P1 4℃30ml 30ml×2 溶液P2 室温30ml 30ml×2 溶液P3 室温40ml 40ml×2漂洗液WB 室温25ml 25ml×2第一次使用前按说明加指定量乙醇洗脱缓冲液EB 室温15ml 10ml×2磁珠悬浮液室温 1.5ml 1.5ml×2保存条件：本试剂盒在室温储存18个月不影响使用效果。
储存事项:1.第一次使用时，将试剂盒所带的全部RNase A加入溶液P1后（终浓度100ug/ml）置于2-8℃保存。
如果溶液P1中RNase A失活，提取的质粒可能会有微量RNA 残留，在溶液P1中补加RNase A即可。
2.环境温度低时溶液P2中SDS可能会析出浑浊或者沉淀，可在37℃水浴加热几分钟，即可恢复澄清，不要剧烈摇晃，以免形成过量的泡沫。
3.避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、pH值变化。
产品介绍：本试剂盒采用改进SDS-碱裂解法裂解细胞，磁珠在高盐、低pH值状态下选择性地结合溶液中的质粒DNA，再通过漂洗液将杂质和其它细菌成分去除，最后低盐、高pH值的洗脱缓冲液将纯净质粒DNA从磁珠上洗脱。
产品特点：1.磁珠吸附量差异极小，可重复性好。
克服了国产试剂盒膜质量不稳定的弊端。
2.快速、方便，不需要使用有毒的苯酚、氯仿等试剂，也不需要乙醇沉淀。
获得的质粒产量高、纯度好，可以直接用于酶切、转化、PCR、体外转录、测序等各种分子生物学实验。
自备仪器及试剂：1，小型离心机，2磁力架(博迈德)，3无水乙醇注意事项1.所有的离心步骤均在室温完成，使用转速可以达到13,000rpm的传统台式离心机，如Eppendorf 5415C 或者类似离心机。
试剂盒组成、储存、稳定性：试剂盒组成保存50次(RN2201) 裂解液VLB 室温20 mlPoly Carrier -20℃200μl去蛋白液RE 室温25 ml漂洗液RW 室温10 ml第一次使用前按说明加指定量乙醇RNase-free H2O 室温10 mlRNase-free吸附柱RA和收集管室温50套室温储存12个月不影响使用效果，各溶液使用后应及时盖紧盖子。
产品介绍：采用特异性结合病毒DNA/RNA 的离心吸附柱和独特的缓冲液系统，病毒DNA/RNA提取试剂盒适合于从无细胞体液，包括血浆、血清、腹水、培养细胞上清液、脑脊髓液及尿液等中快速提取高纯的病毒DNA/RNA。
该产品可以满足绝大多数的病毒RNA/DNA的同时提取要求，如病毒RNA：HCV（丙肝病毒）,HIV（艾滋病毒）,和HTLV（人类嗜T淋巴细胞病毒）；病毒DNA：HBV（乙肝病毒）和CMV（巨细胞病毒）等等。
病毒裂解后，DNA/RNA后在高离序盐状态下选择性吸附于离心柱内硅基质膜（特别配备了Poly Carrier可以从体系中轻松捕获微量核酸），再通过一系列快速的漂洗－离心的步骤，将盐、细胞代谢物、蛋白等杂质去除，最后低盐的洗脱缓冲液将纯净的病毒DNA/RNA从硅基质膜上洗脱。
纯化后的病毒核酸无杂质和PCR抑制剂，可直接适用于PCR/RT-PCR分析。
产品特点：1.不需要使用有毒的苯酚等试剂，也不需要乙醇沉淀等步骤。
2.节省时间，简捷，单个样品操作一般可在20分钟内完成。
3.多次柱漂洗确保高纯度，提取的病毒DNA/RNA 纯度高，质量稳定可靠，可适用于各种常规操作，包括PCR/RT-PCR、酶切、测序、Southern 杂交等。
注意事项：1.所有的离心步骤均在室温完成，使用转速可以达到13,000rpm的传统台式离心机，如Eppendorf 5415C 或者类似离心机。
2.开始实验前将需要的水浴先预热到特定温度备用。
3.裂解液VLB和去蛋白液RE中含有刺激性化合物，操作时戴乳胶手套，避免沾染皮肤、眼睛和衣服。
TRIpure ReagentTRIpure Reagent总RNA提取试剂目录号：RN01试剂盒组成、储存、稳定性：试剂盒组成(RN0101) (RN0102)TRIpure （4℃避光）50 ml 100 ml储存事项：TRIpure 在室温下能稳定保存12个月。
尽管如此，为达到最佳效果，我们建议保存在2~8°C的环境下。
重要提示：本品中含有苯酚，具有毒性和腐蚀性。
如果吸入体内、接触皮肤、吞食等会导致中毒、灼伤以及其他身体伤害。
使用本制品时应穿戴防护物品，如防护服装、手套、眼罩、面罩等。
如果不小心接触，应立即用大量的水冲洗并前往医院治疗。
注意事项：1.样品用TRIpure匀浆后，如果不即刻加入氯仿之前，，置于-70°C下可放置一个月以上。
保存在75%乙醇中的RNA沉淀，2-8°C可以保存一周，-20°C条件下可以保存1年。
RNA半衰期比较短，容易降解，建议提取后尽快进行后续实验，如反转录成cDNA，Northern Blot等。
2.若下游实验对DNA非常敏感，建议用RNase free DNase I（货号：RN45）对RNA进行处理。
3.自备试剂：氯仿、异丙醇（新开封或提取RNA专用）、75%乙醇(用DEPC处理过的水配制)、RNase free water或者DEPC处理过的水。
4.本公司生产TRIpure Reagent质量优异，可以完美替代Invitrogen的TrizolReagent。
提取质量和下游实验完全一样。
已经销售8年数万瓶。
从无质量问题。
客户如果购买本公司TRIpure Reagent证明不能替换Invitrogen的Trizol，无条件退货，并3倍销售价格赔偿。
RNA抽提操作步骤：（实验前请先阅读注意事项）提示：用TRIpure 抽提RNA时要戴手套和护眼罩。
避免接触皮肤和衣服。
在化学通风橱完成操作。
避免呼吸道吸入。
如无特殊说明，所有的操作应该在在15~30°C 的室温条件下。
使用说明◆RNAliquid超速全血(液体样本)总RNA提取试剂盒◆目录号1123◆使用手册◆实验室使用，仅用于体外RNAliquid 超速全血(液体样本)总RNA提取试剂盒目录号：1123目录编号包装单位112301 20次112302 50次适用范围：适用于快速提取全血（液体样本）高纯度总RNA试剂盒组成、储存、稳定性：试剂盒组成保存20次50次裂解液RLS 4℃避光25 ml 50 ml 去蛋白液RE 室温15 ml 25 ml漂洗液RW 室温5 ml 10 ml 第一次使用前按说明加指定量乙醇RNase-free H2O 室温10 ml 10 ml70%乙醇室温4ml RNase-free H2O 9ml RNase-free H2O 第一次使用前按说明加指定量乙醇RNase-free吸附柱RA 室温20个50个收集管（2ml）室温20个50个本试剂盒在室温储存12个月不影响使用效果。
储存事项：1.所有的溶液应该是澄清的，如果环境温度低时溶液可能形成沉淀，此时不应该直接使用，可在37℃水浴加热几分钟，即可恢复澄清。
2.不合适的储存于低温（4℃或者－20℃）会造成溶液沉淀，影响使用效果，因此运输和储存均在室温下（15℃－25℃）进行。
裂解液RLS可以常温运输，收到后4℃避光保存。
3.避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、PH值变化，各溶液使用后应及时盖紧盖子。
产品介绍：改进的异硫氰酸胍/酚一步法裂解细胞和灭活RNA 酶，然后总RNA在高离序盐状态下选择性吸附于离心柱内硅基质膜，再通过一系列快速的漂洗－离心的步骤, 去蛋白液和漂洗液将细胞代谢物、蛋白等杂质去除，最后低盐的RNase free water将纯净RNA从硅基质膜上洗脱。
产品特点：1.离心吸附柱内硅基质膜全部采用进口世界著名公司特制吸附膜，柱与柱之间吸附量差异极小，可重复性好。
克服了国产试剂盒膜质量不稳定的弊端。
2.结合了异硫氰酸胍/酚一步法试剂稳定性好，纯度高和离心柱方便快捷的优点，不需要异丙醇沉淀和乙醇洗涤过程，RNA可以直接从离心柱上洗脱避免了过度干燥不易溶解问题。
总RNA提取试剂盒操作流程1.准备工作首先，准备实验室所需的所有试剂和材料。
包括总RNA提取试剂盒，标本样本（细胞培养物或组织样本），RNase去除剂、DNase处理试剂、异硫氰酸盐混合物、洗涤缓冲液、乙醇，10%叠氮化钠溶液，TE缓冲液和脱水酒精。
2.样本预处理对于细胞培养物，将其转移到离心管中，用1×PBS缓冲液洗涤细胞，然后将PBS去除。
对于组织样本，使用刀片将组织切碎，并将其转移到离心管中。
3.细胞裂解和组织裂解使用总RNA提取试剂盒提供的裂解缓冲液，将培养细胞或组织完全裂解。
对于细胞裂解，直接将缓冲液加入细胞，并彻底混匀。
对于组织裂解，将裂解缓冲液加入裂解管中，然后使用离心机将组织完全裂解。
4.清洁RNA将裂解的细胞或组织样本转移到离心管中，添加RNase去除剂，摇动混匀，然后在室温下孵育10分钟。
5.微量RNA精炼将异硫氰酸盐混合物添加到离心管中，摇动混匀，然后孵育10分钟以精炼RNA。
6.RNA沉淀和洗涤根据试剂盒提供的指引，将样品以及裂解缓冲液转移到分离管中。
加入等体积的酒精，然后彻底混匀。
样品将出现白色絮状，代表RNA已经沉淀。
使用离心机将样品离心10分钟，将沉淀收集到离心管底部。
轻轻倒出上清液，并加入预先配制好的洗液进行洗涤。
洗涤过程中，将洗涤缓冲液加入沉淀中，并轻轻混匀。
然后使用离心机将样品离心，去除上清液，并加入新的洗液进行额外的洗涤。
重复上述洗涤步骤2-3次，以确保完全清洁RNA。
最后，去除所有的上清液。
7.去除基因组DNA污染使用DNase处理试剂，按照试剂盒提供的指引，去除所有的基因组DNA污染。
将DNase处理试剂加入裂解液中，并轻轻混匀。
在室温下孵育15分钟。
8.乙醇沉淀RNA加入等体积的乙醇，并轻轻混匀。
样品将再次出现白色絮状，代表RNA再次沉淀。
使用离心机将样品离心10分钟，然后倒出上清液。
9.干燥RNA使用10%叠氮化钠溶液将RNA片段再次洗涤，并轻轻混匀。
实验二、总RNA的提取和电泳一、总RNA的提取（Tripure法）（一）试剂和仪器：组织匀浆器，离心管(DEPC处理)Tripure液（异硫氰酸胍，水饱和酚），氯仿，异丙醇，75% 冰冷乙醇（用DEPC处理过的水配制），无RNase水， DEPC（焦碳酸二乙酯）水溶液：按1∶1000体积比将DEPC加入到灭菌双蒸水中，室温放置过夜，然后高压消毒。
（二）样品准备：1．悬浮培养细胞: 300×g, 4℃离心收集1×10 8个细胞;用25 ml预冷的1×PBS漂洗细胞,离心收集;去上清,加1ml Tripure液,裂解。
2．贴壁培养细胞：计算好1×108个细胞所需培养瓶数后，用胰酶消化，离心收集细胞，细胞裂解同上。
3．组织：将50-100 mg新鲜或液氮冰冻组织置于匀浆器中，加入1ml Tripure液，匀浆。
（三）抽提方法：1．取500μl组织匀浆液移至一个1.5ml 离心管中，室温放置5分钟。
2．加入100μl氯仿，颠倒混匀15秒钟，室温放置2-3分钟。
3．4℃，12000g离心15分钟。
4．小心吸取上层水相至一个新的1.5ml 离心管中。
注意不要吸出中间层，该层富含蛋白质。
5．加250μl的异丙醇与样品颠倒混匀，置室温10分钟沉淀RNA。
6．4℃，12000g，离心10分钟沉淀RNA。
7．弃上清，加75%预冷乙醇500μl，漂洗沉淀。
10 7500g，离心5分钟。
弃上清。
11 室温干燥5分钟。
不宜完全干燥，否则沉淀难以溶解。
12 将RNA溶于20μl无RNase水中。
用紫外分光光度计分别测定样品在260nm和280nm的吸光度值估算RNA的收率和纯度，琼脂糖电泳鉴定RNA的质量，-70℃保存备用。
对于长期保存，RNA应重新补充NaAc（pH5.0）至0.25mol/L，再加入2.5倍体积乙醇， -70℃保存。
注意事项：1．所有玻璃器皿洗干净后，应在180℃至少干烤3h以上；所有塑料器皿均应用DEPC处理后，高压灭菌；操作时应勤换手套，禁止讲话。
北京艾德莱生物RNA提取产品选择指南首先询问客户提取的大致种类，是动物组织细胞？植物？血液样品？真菌？细菌？病毒？酵母？不同的种类应该选择不同的产品。
动物组织细胞(1)RN01 TRIpure reagent,这个就是Invitrogen的TRIzol，我们质量完全和进口一样可以100%替代进口TRIzol。
(2)RN04 总RNA提取试剂盒。
这款就是TRIzol，只是把TRIzol配套使用的氯仿，异丙醇，70%乙醇，DEPC处理的水和配全了。
等于是TRIpure（RN01）加氯仿，异丙醇，70%乙醇，DEPC处理的水。
该款产品用的人很少，因为大部分实验室肯定是有这些常见的试剂的，不需要买公司的。
(3)RN03 RNApure 超纯总RNA快速提取试剂盒。
这个等于是TRIzol加离心柱子（和天根的DP419完全一样），在TRIzol的基础上加了离心柱子，速度更快，纯度更高，操作更简单。
等于是TRIpure（RN01）加离心柱子。
(4)RN07 EASYspin组织/细胞RNA快速提取试剂盒。
这款等于是Qiagen的74104完全一样，它的优点在于不用苯酚，氯仿等毒性物质，速度最快，但是残留DNA可能稍多，必要时候还可能要用DNA酶消化。
(5)RN28 EASYspin Plus组织/细胞RNA快速提取试剂盒。
这款等于是Qiagen的74134完全一样，是目前世界上最先进的试剂盒。
15分钟提取，不用苯酚，氯仿，也不残留DNA，不用DNA酶消化直接可以做荧光定量PCR，价格只有Qiagen同类产品的四分之一。
目前国内就我们一家能做，天根没有此产品。
天根的DP431理论上是对应这个产品的，但是天根的需要DNA酶消化，时间长，步骤繁琐，还容易降解RNA。
动物组织细胞RNA提取的总结：1.首先推荐就是RN28 EASYspin Plus组织/细胞RNA快速提取试剂盒。
2.客户觉得RN28贵，或者客户习惯用天根的DP419就推RN03 （Trizol+离心柱，等于天根DP419)。
