总RNA提取试剂盒说明书
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组织、细胞总RNA提取试剂盒(目录号:RG200、RG201)【产品说明】本试剂盒采用独特的裂解液配方,优化了实验程序,能快速裂解细胞包膜,主要用于细胞或组织中总RNA的提取。
所有操作均可室温下进行。
整个过程操作简单,90分钟即可完成提取RNA 程序。
应用本品提取的RNA,不经任何处理可直接用于PCR实验。
【试剂盒内容】试剂盒组成RG200(60次)RG201(100次)裂解液30ml 50ml缓冲液10ml 15ml稀释液15ml 25ml说明书1份【贮存条件及有效期】4-8℃保存,有效期2年。
【需自备试剂】75%乙醇和异丙醇【操作方法】1.样本:50mg动物组织,1×107组织培养细胞,50μl全血。
2.准备:动物组织应研磨碎,培养细胞应离心去上清。
3.加入裂解液500µl至试验样品中,立即混匀,室温放置10分钟。
4.加入缓冲液 150µl,稀释液 250µl,充分混匀,10000rpm离心10分钟;5.取上清600µl加入600µl异丙醇,-20℃ 30分钟或-20℃过夜,10000rpm离心15分钟;6.吸掉上清,在沉淀物原管内加75%乙醇300µl,8000rpm离心2分钟,吸掉液体及水珠,沉淀物含RNA,可直接用于RT-PCR。
【操作说明及注意事项】1.使用本试剂前,如出现结晶,请置室温或稍加热即可溶解,不影响裂解效果。
2.将本品加入被检血清中,应立即摇匀。
3.本试剂含挥发成分,用后应及时拧紧瓶盖。
4.离心时转速为参考值,可根据实验室条件稍作调整,安全第一,以防EP管因转速太高而爆裂。
5.本品对皮肤、粘膜有损害,使用时应特别注意。
如果粘到皮肤上,可立即用异丙醇或乙醇洗掉。
6.本品仅供实验室研究使用。
北京甘棠飞华生物科技有限公司Beijing Gantangfh Biotech Co.,Ltd.地址:北京市海淀区清河安宁庄路4号11号办公楼323室邮编:100085电话:(010)62930532 Email:******************。
血液总RNA 提取试剂盒产品组分组分R1081(50 次) 溶液 NL溶液RG60 ml 50µl 溶液 MP10 ml 溶液 MW12 ml DEPC 处理水10 ml RNase-free 纯化柱50 个 RNase-free 离心管50 个 说明书1 份需要自备的溶液● 氯仿● 无水乙醇注意事项-------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------- ● 第一次使用前应该在溶液RW 中加入无水乙醇,加入量请参见瓶上标签。
● 严防操作环境、使用的容器、耗材和试剂的RNase 污染。
操作过程中要勤换手套。
● 请严格遵照操作步骤操作。
实例--------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------T1T2R1 R2 M上图中T1/T2是使用血液总RNA 提取试剂盒(R1081)以人类全血为材料提取的血液total RNA ,R1/R2分别是以T1/T2为模板的逆转录产物电泳图,产物大小为750bp ,M 为DS TM 5000。
操作步骤-------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------1. 取200-500µl新鲜血液,加入1ml裂解液NL,再加入10µl硫基乙醇,混匀,冰浴5min;2. 加入200 μl 氯仿,轻微混匀,静置3min,12,000rpm离心10min;3. 此时,样品会分成三层:黄色的有机相,中间层和无色的水相,RNA 主要在水相中,水相的体积约为所用溶液NL试剂的60%。
总RNA提取试剂盒(配合TRIZOL使用)Catalog No. TR205-50 (50次反应含DNaseI)TR205-200 (200次反应含DNaseI)TR205-50N (50次反应无DNaseI)TR205-200N (200次反应无DNaseI)Highlights∙适用于从细胞,组织,酵母菌,植物,细菌或生物液体(任何TRIZOL或类似产品可以裂解的样品)中提取到总RNA(含microRNA)。
∙无需进行相分离,无需使用氯仿,无需沉淀过程。
∙提取到的RNA不含DNA,并可应用于Q-PCR,高通量测序等实验。
∙整个过程仅需10分钟。
Ver.1.0.9产品组成:50200RNA洗涤液1 室温40 ml 160 ml第一次使用前按说明加指定量乙醇RNA洗涤液2室温12 ml 48 ml第一次使用前按说明加指定量乙醇DNase I -20℃ 300μl x 1管(5U/μl) 300μl x 4管(5U/μl)DNA消化液室温 4 ml 16 mlRNase-free H2O 室温 6 ml 30 ml2号柱室温50个200个收集管(2ml)室温50个200个特性:1.样品来源:TRIZOL等类似试剂裂解的样品。
2.样品范围:≥17核苷酸。
3.RNA纯度:高质量的RNA可应用于高通量测序等敏感的下游实验。
4.RNA结合量:每个柱子可最多结合50μg的RNA。
试剂制备RNA洗涤液在使用之前一定要配好,添加好乙醇后在试剂瓶上做好标记!!!添加10ml或40ml的无水乙醇(95-100%)到40ml或160ml的RNA洗涤液1中。
添加48ml100%的乙醇(或52 ml95%的乙醇)到12ml的RNA洗涤液2添加192ml100%的乙醇(或208 ml95%的乙醇)到48ml的RNA洗涤液2操作步骤:整个操作步骤是由2个步骤组成:(I)样品裂解匀浆(I I)样品纯化(I)样品裂解匀浆此步骤主要参考TRIZOL等类似裂解试剂说明书的裂解液用量,以下给出我公司提供的可完美替换TRIZOL的TRIcom试剂用量作为参考。
全血总RNA提取试剂盒(离心柱型)货号:KTSM2908■产品简介:本产品采用全新技术从全血和血浆中进行RNA提取,本产品在提取时添加了特殊组分,可大幅度提高RNA和硅基质膜的结合能力。
在RNA提取过程中,加入RNase-Free DNase I,可完全去除痕量DNA杂质,而RNase-Free DNase I和其他残留的物质会在随后的漂洗过程中去除,从而有效地保证了提取RNA的得率和纯度。
本产品在常温下1小时内即可完成操作,且不使用酚氯仿等有机试剂。
■产品内容:■储存条件:该试剂盒置于室温(15-25℃)干燥条件下,可保存12个月,更长时间的保存可置于2-8℃。
2-8℃保存条件下,若溶液产生沉淀,使用前应将试剂盒内的溶液在室温放置一段时间,必要时可在37℃水浴中孵育10 min,以溶解沉淀。
■注意事项(请务必在使用本试剂盒之前阅读此注意事项):(1)自备试剂与耗材:β-巯基乙醇,无水乙醇,1.5 ml RNase-Free离心管。
(2)样品的储存和处理:RNA容易被降解,所以新鲜的血液样品应储存于-70℃,冻存的样品不能反复冻融以避免RNA的降解,样品也可以在匀浆后加入裂解液RL,储存于-70℃,冻存的样品可稳定储存数月。
(3)RNA Carrier:当处理血浆时,可使用试剂盒中提供的RNA Carrier,RNA Carrier的加入将提高RNA的得率,且不会影响后续实验。
(4)所有步骤在室温进行,为了尽量避免RNA的降解,操作越快越好。
(5)在使用前,请用RNase-Free ddH 2O配制乙醇溶液。
(6)操作前在RL中加入β-巯基乙醇至终浓度1%,最好现用现配。
■操作步骤:使用前请先在去蛋白液和漂洗液中加入无水乙醇,加入体积请参照瓶子上的标签。
(1)取100 μl全血或血浆,加入350 μl裂解液RL,涡旋振荡1 min后用匀浆器匀浆30 s。
(2)加入0.1倍体积的醋酸钠,振荡混匀。
总RNA纯化试剂盒产品说明书此款RNA纯化试剂盒提供了一种从培养的动物细胞、组织样品、血液、细菌、酵母、真菌、植物和病毒中快速提取和纯化总RNA的方法,。
该试剂盒可以纯化所有大小的RNA,从大的mRNA和核糖体RNA到小RNA(microRNA或miRNA)和小干涉RNA(siRNA)。
RNA优先从蛋白等的细胞组分中纯化出来,而不使用抑制的苯酚或者氯仿。
纯化的RNA是高度完整的,可以应用到一系列的下游应用试验中,包括实时PCR,Northern免疫印迹分析,RNase保护实验和引物延伸,以及表达芯片分析。
纯化技术纯化的基础是旋转柱色谱法,用特有的树脂作为分离介质。
RNA优先从其他细胞组分(如蛋白质)中分离出来,而不使用苯酚或者氯仿。
纯化步骤包括首先用合适的裂解液融解细胞或组织,然后裂解液中加入乙醇后上样到旋转柱中。
树脂结合RNA是基于离子的浓度,所以只有RNA结合到柱子上而所有剩余的蛋白和其他的污染物会在流动液中而被除去或者仍在树脂的顶部。
然后结合的RNA用试剂盒提供的洗涤液洗涤以除去所有残余的杂质,然后纯化的总RNA用抽提缓冲液洗涤。
纯化的RNA是高度完整的,可以用于一系列的下游实验分析。
说明优点•使用旋转柱提取,步骤快且简单•提取总RNA,从大的核糖体RNA(rRNA)到小(RNAmicroRNA或者miRNA)•不需要苯酚或氯仿作提取液•从多种种类来源样品中提取高质量的总RNA•可以提取和检测到的RNA组织样品可以小到单个动物细胞试剂盒成分储存条件和产品稳定性所有的溶液需在室温密闭保存。
所有的试剂在不开封条件下稳定保存1年。
预防措施和警告事项该试剂盒只为科研目的设计,不可用于人或者临床。
要确保有合适的实验服,在操作化学试剂时一次性的手套和护目镜会磨损。
需要更多信息,请参考适合的材料安全表(MSDSs)。
所有人和动物组织的问题是要考虑到潜在的感染。
当操作全血样品时,所有在使用国家的有关当局建议的预防措施都要执行。
Version Number:1.1Plant Total RNA Isolation Kit PlusCat.No.RE-05021/05024For total RNA purification from general plant samples containing high polysaccharide and polyphenol componentsFor research use only Store at room temperature目录产品介绍 (3)产品特点 (3)试剂盒应用 (4)RNA的应用 (4)RNA的储存 (4)产品质量控制 (4)试剂盒内容 (5)产品信息 (5)储存条件 (5)DNA-Cleaning Column特性 (6)RNA-Only Column特性 (6)RNA提取得率与纯度 (7)RNA完整性 (7)RNA洗脱回收效率 (8)注意事项 (9)操作前准备事项 (10)实验材料和设备 (10)自备试剂 (10)安全性 (10)操作指南 (11)样本选取和保存 (11)样本初始用量 (11)植物组织破碎 (12)RNA污染预防 (12)基因组DNA污染及清除 (12)操作步骤 (13)RNA浓度及纯度检测 (15)DNA污染及检测 (15)快速操作示意图 (16)问题分析指南 (17)该试剂盒采用本公司研制的离心柱和配方,可以从各种多糖多酚含量高的植物组织中高效率的提取得到高纯度高质量的总RNA。
提供DNA-Cleaning Column能轻松的让上清液和组织裂解物分离,去除样品中的DNA,操作简便、省时;RNA-Only Column 能高效的结合RNA,搭配独特的配方,可以同时处理大量样品。
全体系RNase-Free,使得提取的RNA无降解;Buffer PRW1、Buffer PRW2缓冲液洗涤体系,使得获得的RNA纯度极高。
产品特点◆全程常温(15-25°C)操作,无需冰浴和低温离心。
Trizol使用说明书一、分离纯化的基本原理研究基因的表达和调控时常常要从组织和细胞中分离和纯化RNA。
RNA质量的高低常常影响cDNA库,RT-PCR和Northern Blot等分子生物学实验的成败。
Trizol是一种新型总RNA抽提试剂,内含异硫氰酸胍等物质,能迅速破碎细胞,抑制细胞释放出的核酸酶。
二、用户需自备的试剂和材料无水乙醇、氯仿、Glycogen(可能需要)、 1.5ml Eppendorf管(RNase-free)、 ips (RNase-free)三、准备工作RNase酶非常稳定,是导致RNA降解最主要的物质。
它在一些极端的条件可以暂时失活,但限制因素去除后有迅速复性。
用常规的高温高压蒸气灭菌方法和蛋白抑制剂都不能是RNase完全失活。
它广泛存在于人的皮肤上,因此,在与RNA制备有关的分子生物学实验时,必须戴手套。
RNase的又一污染源是取液器,根据取液器制造商的要求对取液器进行处理。
一般情况下采用用DEPC配制的70%乙醇擦洗取液器的内部和外部,基本达到要求。
取RNase-free的物品时必须戴手套。
1、料制品的处理尽可能使用无菌,一次性塑料制品,已标明RNase-Free 的塑料制品,如没有开封使用过通常没有必要再次处理。
对于国产塑料制品,原则上都必须处理方可使用。
处理步骤如下:1)在玻璃烧杯中注入去离子水,加入DEPC使DEPC的终浓度为0.1%。
注意:DEPC 为剧毒物,活性很强,小心在通风柜中使用。
2)处理的塑料制品放入一个可以高温灭菌的容器中,注入DEPC水溶液,使塑料制品的所有部分都浸泡到溶液中。
3)在通风柜中室温处理过夜。
4)将DEPC水溶液小心倒到废液瓶中,用铝箔封住含已DEPC水处理过的塑料制品的烧杯,高温高压蒸气灭菌至少30分钟。
5)烘箱用合适的温度烘拷至干燥。
置于干净处备用。
2、璃玻和金属物品 250°C烘烤3小时以上。
四、从组织中提取总RNA1) 液氮研磨,组织块直接放入研钵中,加入少量液氮,迅速研磨,待组织变软,再加少量液氮,再研磨,如此三次,按50-100mg组织/ml Trizol加入Trizol,转入离心管进行第2步操作。
TaKaRa Code N0.9769 TaKaRa MiniBEST Plant RNA Extration Kit 说明书
一、制品说明
本试剂盒是小量提取植物组织Total RNA 的试剂盒。
试剂盒采用了独特的裂解系统,可以对各种简单的植物材料(叶片、茎、幼苗等)富含多糖多酚的植物组织材料(果实、种子)、真菌等进行RNA的提取,适用范围广。
按照标准流程使用本试剂盒可以有效提取分子量大于200nt的RNA,也可以按照可选步骤提取得到包含Small RNA(<200nt)的Total RNA。
试剂盒中包含了RNA提取所需的全部是局,无需额外购买其他试剂。
本试剂盒具有高效、快速、方便的特点,组织或自爆裂解后,提取操作仅需要30min 便可完成操作。
提取过程中无需苯酚氯仿抽提等步骤。
利用该试剂盒提取的RNA纯度高,基本不含蛋白质及及基因组DNA污染。
本试剂盒可以从50mg—100mg植物组织中纯化得到多至数十微克的高纯度RNA。
提取得到的RNA可以直接用于Northern杂交、斑点杂交、mRNA纯化、体外翻译、RNA分解酶的保护分析、RT-PCR、Real Time PCR、构建cDNA文库等各种分子生物学实验。
二、制品内容(50次量)
本试剂盒分两部分|Part 1和Part 2。
磁珠法总RNA 提取试剂盒(细胞)操作步骤1.样本前处理:细胞用PBS洗两次后,沉淀备用;2.裂解结合:在细胞沉淀中,加入400 μl Buffer CRL重悬细胞、400 μl异丙醇和30 μl磁珠,颠倒混匀,室温放置10分钟(期间不时颠倒混匀,重悬磁珠),将离心管放置于磁力架上,待磁珠完全吸附后吸弃液体。
;注意:如果改变样品使用量,裂解液、磁珠悬浮液和异丙醇醇的使用量也需要按比例做相应的调整。
3.漂洗:(1)将离心管从磁力架上取下,向离心管中加入500 μl Buffer CRW 0,轻微振荡混匀(或用移液器吹打混匀),重悬磁珠,将离心管放置于磁力架上,待磁珠完全吸附后吸弃液体;(2)向离心管中加入500μl Buffer CRW I,轻微振荡混匀(或用移液器吹打混匀),重悬磁珠,将离心管放置于磁力架上,待磁珠完全吸附后吸弃液体,重复上述洗涤步骤1次,第二次洗涤待磁珠完全吸附后充分吸弃液体(不要有残留),室温晾干5-10min。
注意:要将上清尽量弃净,乙醇晾干,以免影响DNase I消化效果4.DNA消化:将离心管从磁力架上取下,向离心管中加入75μl DNase I 反应液,移液器吹打重悬磁珠,37°C孵育15分钟,每隔5分钟轻弹管底悬浮磁珠,以防磁珠成团。
5.漂洗:(1)将离心管从37°C加热器上离开,加入700 μl Buffer CRW 0,移液器吹打重悬磁珠,室温颠倒混匀5分钟,将离心管放置于磁力架上,待磁珠完全吸附后吸弃液体;(2)加500 μl Buffer CRW I,轻微振荡混匀(或用移液器吹打混匀),将离心管放置于磁力架上,待磁珠完全吸附后吸弃液体;(3)再次加入500 μl Buffer CRW I,轻微振荡混匀(或用移液器吹打混匀),请注意将磁珠聚集在管底,待磁珠完全吸附后吸弃液体,室温晾干2min。
6.洗脱:将离心管从磁力架上取下,向离心管中加入50-100 μl 洗脱液EB,56°C 孵育5分钟,将离心管重新放置于磁力架上,待磁珠完全吸附后小心将总RNA 溶液转移至新的离心管,放入-80 °C保存备用。
E.Z.N.A. Total RNA Kit I (R6834-01 50 preps) 步骤A.真核细胞和组织自备材料:β-巯基乙醇、70%乙醇(DEPC水配置)、除RNase的枪头和EP管、一次性乳胶手套。
细胞的步骤1.在离心管中用TRK裂解缓冲液裂解细胞,使细胞团松散,轻弹EP管或者用枪头吹旋,再用漩涡振荡混匀。
使用前每1ml TRK裂解缓冲液加入20ul的β-巯基乙醇。
如果是单层的组织培养细胞(成纤维细胞,内皮细胞等),可以直接在细胞培养器里裂解细胞。
吸净培养基后直接加TRK裂解缓冲液至细胞中。
加600ul的TRK到T35细颈瓶或10cm的培养皿中,更小的培养器则加350ul的TRK。
用移液管吸取buffer布满整个器皿表面,确保细胞裂解完全。
将裂解产物转移至干净的1.5mlEP管中,然后进行第2步。
如果细胞是悬液培养,收集细胞(≤1,500rpm or 400*g)*5min,弃上清,加入TRK)裂解液,漩涡振荡混匀(具体略,见说明书)。
2.匀浆化裂解产物“裂解和匀浆化样品”-第四页有更详细的说明,如果细胞≤1*105,漩涡振荡1min。
样品匀浆化不完全会显著的减少RNA的产量并容易造成柱子堵塞。
a)用匀浆器(rotor-stator )30 s,使样品匀浆化,而后进行第3步。
b)使裂解产物通过钝的针头的注射器(0.9mm直径20-gauge),使之匀浆化。
注射器要除RNase。
进行第3步。
c)将裂解物转移入omega homogenizer spin column,10000g离心1分钟。
将流出液移入新的tube中,进行第3步。
组织的步骤:1.TRK裂解缓冲液在离心管中裂解细胞,使用前每1ml TRK裂解缓冲液加入20ul的β-巯基乙醇。
350ulTRK裂解液最多能有效裂解20mg组织(-3mm3)。
对20mg以上组织用600ul的TRK裂解液。
然而,不要超过30mg组织,这是推荐的最大量。
杭州昊鑫生物科技股份有限公司 htpp://RNApure Total RNA KitRNApure高纯总RNA快速提取试剂盒目录号:RN03试剂盒组成、储存、稳定性:试剂盒组成50次(RN0302)裂解液RL(4℃避光)50 ml去蛋白液RE 25ml漂洗液RW10 ml第一次使用前按说明加指定量乙醇RNase-free H2O 10 mlRNase-free吸附柱RA 50个收集管(2ml)50个本试剂盒在室温储存12个月不影响使用效果。
储存事项:1.因此运输和储存均在室温下(15℃-25℃)进行。
裂解液RL可以常温运输,收到后4℃避光可长期保存,常温保存3个月也不影响使用质量。
2.避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、PH值变化,各溶液使用后应及时盖紧盖子。
产品介绍:改进的异硫氰酸胍/酚一步法(TRIzol法)裂解细胞和灭活RNA 酶,然后总RNA 在高离序盐状态下选择性吸附于离心柱内硅基质膜,再通过一系列快速的漂洗-离心的步骤, 去蛋白液和漂洗液将细胞代谢物、蛋白等杂质去除,最后低盐的RNase free water将纯净RNA从硅基质膜上洗脱。
产品特点:1.离心吸附柱内硅基质膜全部采用进口世界著名公司特制吸附膜,柱与柱之间吸附量差异极小,可重复性好。
2.结合了异硫氰酸胍/酚一步法试剂稳定性好,纯度高和离心柱方便快捷的优点,不需要异丙醇沉淀和乙醇洗涤过程,RNA可以直接从离心柱上洗脱避免了过度干燥不易溶解问题。
3.独有的RL裂解液配方,可以有效的消除基因组污染。
4.多次漂洗去蛋白过程,提取RNA纯度更高。
5.有效的去除了5S在总RNA中含量,提高了纯度。
注意事项1.第一次使用前请先在漂洗液RW瓶中加入指定量乙醇,加入后请及时打钩标记已加入乙醇,以免多次加入!2.本试剂盒抑制RNA酶效果极佳,所有离心步骤如未加说明,均可在常温进行。
3.裂解液RL和去蛋白液RE中含有刺激性有害化合物,操作时要戴乳胶手套,避免沾染皮肤、眼睛和衣服。
E.Z.N.A. Total RNA Kit I (R6834-01 50 preps) 步骤A.真核细胞和组织自备材料:β-巯基乙醇、70%乙醇(DEPC水配置)、除RNase的枪头和EP管、disposable latex gloves。
细胞的步骤1.在microfuge tube中用TRK裂解缓冲液裂解细胞,使细胞团松散,轻弹EP管或者用枪头吹旋,再用漩涡振荡混匀。
使用前每1ml TRK裂解缓冲液加入20ul的β-巯基乙醇。
如果是单层的组织培养细胞(成纤维细胞,内皮细胞等),可以直接在细胞培养器里裂解细胞。
吸净培养基后直接加TRK裂解缓冲液至细胞中。
加600ul的TRK到T35细颈瓶或10cm的培养皿中,更小的培养器则加350ul的TRK。
Pipette buffer over entire surface of vessel 以使裂解完全。
将液体布满整个器皿表面,确保细胞裂解完全。
将裂解产物转移至干净的1.5mlEP管中,然后进行第2步。
如果细胞是悬液培养,收集细胞(≤1,500rpm or 400*g)*5min,弃上清,加入TRK)裂解液,漩涡振荡混匀(具体略,见说明书)。
2.匀浆化裂解产物“裂解和匀浆化样品”-第四页有更详细的说明,如果细胞≤1*105,漩涡振荡1min。
样品匀浆化不完全会显著的减少RNA的产量并容易造成柱子堵塞。
a)用匀浆器(rotor-stator )30 s,使样品匀浆化,而后进行第3步。
b)使裂解产物通过钝的针头的注射器(0.9mm直径20-gauge),使之匀浆化。
注射器要除RNase。
进行第3步。
c)将裂解物转移入omega homogenizer spin column,10000g离心1分钟。
将flow-though移入新的tube中,进行第3步。
组织的步骤:1.TRK裂解缓冲液在microfuge tube中裂解细胞,使用前每1ml TRK裂解缓冲液加入20ul 的β-巯基乙醇。
TRIpure ReagentTRIpure Reagent总RNA提取试剂目录号:RN01试剂盒组成、储存、稳定性:试剂盒组成(RN0101) (RN0102)TRIpure (4℃避光)50 ml 100 ml储存事项:TRIpure 在室温下能稳定保存12个月。
尽管如此,为达到最佳效果,我们建议保存在2~8°C的环境下。
重要提示:本品中含有苯酚,具有毒性和腐蚀性。
如果吸入体内、接触皮肤、吞食等会导致中毒、灼伤以及其他身体伤害。
使用本制品时应穿戴防护物品,如防护服装、手套、眼罩、面罩等。
如果不小心接触,应立即用大量的水冲洗并前往医院治疗。
注意事项:1.样品用TRIpure匀浆后,如果不即刻加入氯仿之前,,置于-70°C下可放置一个月以上。
保存在75%乙醇中的RNA沉淀,2-8°C可以保存一周,-20°C条件下可以保存1年。
RNA半衰期比较短,容易降解,建议提取后尽快进行后续实验,如反转录成cDNA,Northern Blot等。
2.若下游实验对DNA非常敏感,建议用RNase free DNase I(货号:RN45)对RNA进行处理。
3.自备试剂:氯仿、异丙醇(新开封或提取RNA专用)、75%乙醇(用DEPC处理过的水配制)、RNase free water或者DEPC处理过的水。
4.本公司生产TRIpure Reagent质量优异,可以完美替代Invitrogen的TrizolReagent。
提取质量和下游实验完全一样。
已经销售8年数万瓶。
从无质量问题。
客户如果购买本公司TRIpure Reagent证明不能替换Invitrogen的Trizol,无条件退货,并3倍销售价格赔偿。
RNA抽提操作步骤:(实验前请先阅读注意事项)提示:用TRIpure 抽提RNA时要戴手套和护眼罩。
避免接触皮肤和衣服。
在化学通风橱完成操作。
避免呼吸道吸入。
如无特殊说明,所有的操作应该在在15~30°C 的室温条件下。
磁珠法总RNA提取试剂盒MagBeads Total RNA Extraction Kit【目录号】TRE-5010;TRE-5030;TRE-5100;【运输条件】2~25℃;【保存条件】磁珠悬浮液2~8℃;其它组分室温;【试剂盒组成】【注意事项】1. 磁珠悬浮液严禁反复冻融和离心,以免磁珠受到损害,使用前务必充分混匀;2. 清洗液1使用前请按照瓶身标签描述加入异丙醇,稀释备用;3. 清洗液2使用前请按照瓶身标签描述加入无水乙醇,稀释备用;4. 建议使用新鲜或4℃存放少于3天样本进行提取,反复冻融导致核酸得量明显降低;5. 请仔细阅读本说明书,并严格按照操作步骤完成操作。
【产品简介】本试剂盒适用于从植物材料、动物组织、各种微生物、培养细胞等样本中提取总RNA。
试剂盒采用独特分离作用的纳米磁珠和缓冲液体系,磁珠表面修饰有特殊化学基团,在一定条件下对核酸具有极强的富集能力,当条件改变时可以可逆的释放所吸附的核酸,从而达到快速分离纯化核酸的目的。
试剂盒经过磁珠与核酸结合、清洗、洗脱等步骤,最大限度的去除了蛋白质及其它杂质,所得RNA产物纯度优良,可直接应用于酶切、PCR、qPCR、文库构建、测序等各种下游分子生物学实验。
【试剂盒说明】仪器自动版英芮诚ETP-300型全自动核酸提取仪、核酸提取仪配套用磁棒套、EP管离心机、涡旋振荡仪、96孔方孔圆底板、EP管、无水乙醇、异丙醇以及氯仿、PBS溶液(1×)。
手动版水浴锅或金属浴、EP管离心机、涡旋振荡仪、EP管、EP管配套用磁力架、无水乙醇、异丙醇、氯仿、PBS溶液(1×)。
【手动版操作步骤】1. 样本前处理及裂解1)贴壁培养细胞倒弃培养液,用PBS溶液(1×)冲洗一次,按照每10cm2生长细胞中加入1mL的比例加入裂解液,轻微晃动使裂解液均匀分布于细胞表面,将内含细胞的裂解液转移至EP管中,涡旋振荡至无明显颗粒物,室温静置5min。
高纯总RNA快速提取试剂盒(RLT-离心柱型)GK3091 20次GK3092 50次一.试剂盒组成Components GK3091 GK3092GenClean Column 2.0-ml Collection TubeRLT Solution aRW SolutionRPE Solution bDEPC-WaterProtocol202014ml15ml5ml2ml1copy505035ml30ml12ml4ml1copya. 在收到试剂盒后,应将RLT Solution取出存放于4ºC。
b. RPE Solution在首次使用前,必须加入4倍体积的无水乙醇。
无水乙醇必须是新开封的,保证无RNase污染。
用户自备试剂、材料:无水乙醇、70%乙醇(DEPC-H2O配制,植物和丝状真菌用)、PBS(动物细胞用)、液氮(植物和丝状真菌用)、RNase-free的Eppendorf管和Tips。
二.基本原理幼嫩组织和对数生长期的细胞生长旺盛,含有大量的RNA。
RLT Solution能使细胞裂解,释放出RNA的同时灭活RNase。
GenClean柱中的膜能选择性的与RNA结合,而蛋白等杂质不能结合,经RW Solution和RPE Solution的几步洗涤后结合在膜上的RNA用DEPC-H2O洗脱,可用于各种分子生物学实验。
三. 主要特点1. 安全,整个过程没有用酚和氯仿抽提,无须担心酚和氯仿对皮肤和呼吸道的腐蚀。
2. 纯度高,本试剂盒抽提得到的RNA样品可用于任何分子生物学操作。
3. 快速,整个抽提过程只需要20分钟。
四. 操作步骤表1 不同组织和细胞最大使用量样品最大使用量动物细胞 1x107动物组织 50mg细菌 1x109酵母 1x107植物组织 100mg丝状真菌 100mg为获得最佳的结果,采用的样品数量一定要合适。
可以参考表1。
细胞培养物、细菌菌体、酵母以及真菌菌丝应该在对数生长期收集,动物和植物样品应该取生长旺盛的幼嫩部位。
總RNA提取試劑盒產品編號:TR01/TR01-150產品包裝:50/150反應請儲存於室溫僅供研究用途使用產品敘述:總RNA提取試劑盒(Total RNA Purification Kit) 提供了簡便快速的方法,提取各種動植物組織、培養細胞和細菌之總量RNA(total RNA)。
本產品以離心管柱(spin column)方式,配合使用guanidium thiocyanate使組織細胞裂解及均質化,並加入酒精使RNA選擇性地與二氧化矽膜(silica membrane)結合。
試劑盒中附有DNase I,操作過程中加入管柱可將基因體DNA降解。
經過多次“清洗及離心”的步驟去除汙染雜質,再以無核酸酶水(Nuclease-free water)回收(elute)結合在二氧化矽膜上的RNA。
注意若RNA小於200 nt,例如:5S RNA, tRNA和microRNA,無法在此系統中被有效地回收。
Kit包裝內容物:*將DNase I Solution儲存於-20℃,將其他套組內容物儲存於室溫。
使用者需自備:●2-Mercaptoethanol (2-ME):製備RNA lysis solution用。
●小型組織均質器(Small homogenizer (如. Polytron))。
或研缽及研杵(mortarand pestle)或20G針頭的針筒。
●70%酒精(用於動物組織和培養之細胞)。
●100%酒精(製備RNA Wash Solution II用;純化動物纖維組織,例如:心臟、肌肉和皮膚;RNA清洗用)。
●Proteinase K (只用在動物纖維組織,例如,心臟、肌肉和皮膚)●PBS buffer (選擇性地用在貼附性培養之細胞)●Lysozyme (用於細菌樣品)實驗前注意事項:●將350 μl (TR01)或1.05 ml (TR01-150) 的2-Mercaptoethanol加入RNA LysisSolution中,將RNA Lysis/2-ME Solution儲存於4°C。
磁珠法总RNA提取试剂盒MagBeads Total RNA Extraction Kit【目录号】TRE-5010;TRE-5030;TRE-5100;【运输条件】2~25℃;【保存条件】磁珠悬浮液2~8℃;其它组分室温;【试剂盒组成】【注意事项】1. 磁珠悬浮液严禁反复冻融和离心,以免磁珠受到损害,使用前务必充分混匀;2. 清洗液1使用前请按照瓶身标签描述加入异丙醇,稀释备用;3. 清洗液2使用前请按照瓶身标签描述加入无水乙醇,稀释备用;4. 建议使用新鲜或4℃存放少于3天样本进行提取,反复冻融导致核酸得量明显降低;5. 请仔细阅读本说明书,并严格按照操作步骤完成操作。
磁珠法·自动化:为生命科学提供自动化磁纳米捕获方案【产品简介】本试剂盒适用于从植物材料、动物组织、各种微生物、培养细胞等样本中提取总RNA。
试剂盒采用独特分离作用的纳米磁珠和缓冲液体系,磁珠表面修饰有特殊化学基团,在一定条件下对核酸具有极强的富集能力,当条件改变时可以可逆的释放所吸附的核酸,从而达到快速分离纯化核酸的目的。
试剂盒经过磁珠与核酸结合、清洗、洗脱等步骤,最大限度的去除了蛋白质及其它杂质,所得RNA产物纯度优良,可直接应用于酶切、PCR、qPCR、文库构建、测序等各种下游分子生物学实验。
【试剂盒说明】仪器自动版英芮诚ETP-300型全自动核酸提取仪、核酸提取仪配套用磁棒套、EP管离心机、涡旋振荡仪、96孔方孔圆底板、EP管、无水乙醇、异丙醇以及氯仿、PBS溶液(1×)。
手动版水浴锅或金属浴、EP管离心机、涡旋振荡仪、EP管、EP管配套用磁力架、无水乙醇、异丙醇、氯仿、PBS溶液(1×)。
【手动版操作步骤】1. 样本前处理及裂解1)贴壁培养细胞倒弃培养液,用PBS溶液(1×)冲洗一次,按照每10cm2生长细胞中加入1mL的比例加入裂解液,轻微晃动使裂解液均匀分布于细胞表面,将内含细胞的裂解液转移至EP管中,涡旋振荡至无明显颗粒物,室温静置5min。
多糖多酚植物总RNA提取试剂盒产品说明
多糖多酚植物总RNA提取试剂盒产品说明:
多糖多酚植物总RNA提取试剂盒是于多糖多酚植物中提取总RNA的试剂。
当然它也可以用来提取动物组织和细胞的RNA。
它在破碎和溶解细胞时能保持RNA的完整性。
加入氯仿后离心,样品分成水样层和有机层。
RNA存在于水样层中。
收集上面的的水样层后,RNA可以通过异丙醇沉淀来还原。
在除去水样层后,样品中的DNA和蛋白也能相继以沉淀的方式还原。
乙醇沉淀能析出中间层的DNA,在有机层中加入异丙醇能沉淀出蛋白。
共纯化DNA对于样品间标准化RNA的产量十分有用。
多糖多酚植物总RNA提取试剂盒特点:
增加了多糖多酚沉淀剂,有效去除多糖多酚对RNA提取的影响,独特的溶液B有效去除多糖,进一步纯化RNA。
多糖多酚植物总RNA提取试剂盒提取范围:
仙人掌、仙人球、水仙、黄瓜、胡萝卜、辣椒、西红柿、烟草、玉米、大豆、百合、小麦、拟南芥和其他大多数植物。
多糖多酚植物总RNA提取试剂盒产量:
每100mg组织10~50μg不等。
UNIQ-10柱式Trizol 总RNA 抽提试剂盒抽提试剂盒 SK1321 20次反应SK1322 100次反应试剂盒组成: Components SK1321 SK1322Trizol a UNIQ-10 Column b 2.0-ml Collection Tube RPE Solution c DEPC-H 2O Manual 10ml 20 20 5ml 2ml 1 50ml10010022ml4ml1(a) Trizol 为强腐蚀性物质为强腐蚀性物质,,小心存放于4℃。
(b) 试剂盒中的UNIQ-10柱和2ml 收集管经过DEPC 和高温高压蒸汽灭菌处理和高温高压蒸汽灭菌处理。
柱、收集管可以重复进行DEPC 处理和高温高压蒸汽灭菌处理处理和高温高压蒸汽灭菌处理,,烘干温度为90℃左右左右。
(c) 首次使用前首次使用前,,必须在RPE Solution 瓶中加入4倍体积新开瓶的无水乙醇倍体积新开瓶的无水乙醇,,以避免RNase A 污染污染。
取无水乙醇的量筒必须按要求高温烘烤过的取无水乙醇的量筒必须按要求高温烘烤过的,,充分混匀后使用。
基本原理: 研究基因的表达和调控需要从组织或细胞中分离纯化RNA 。
RNA 质量的高低常常决定cDNA 构建,RT-PCR和Northern Blot 等分子生物学实验的成败。
Trizol 是一种新型总RNA 抽提试剂,内含异硫氰酸胍等物质,能迅速破碎细胞,抑制细胞释放出的核酸酶。
UNIQ-10柱中的膜能选择性的与RNA 结合,而蛋白等杂质不能结合,结合的DNA 和其它杂质用Solution RW 洗去。
结合在膜上的RNA 经DEPC-H 2O 洗脱,可用于各种分子生物学实验。
用户自备试剂用户自备试剂、、材料材料::氯仿、异戊醇、无水乙醇、糖原、1.5-ml 离心管(RNase-free )、Tips (RNase-free )准备工作准备工作::1. 注意事项:(1) RNA 酶(RNase) 是导致RNA 降解最主要的物质,非常稳定。
总RNA提取试剂盒说明书
货号:R1200
规格:50T/100T
产品内容:
试剂盒组成R1200-50R1200-100保存有效期
裂解液50ml100ml2-8℃一年
漂洗液15ml15ml×2RT一年
洗柱液50ml50ml×2RT一年
RNase free ddH2O15ml15ml×2RT一年
RNase free吸附柱50个100个RT一年
RNase free收集管(2ml)50个100个RT一年
操作步骤:
1.样品处理:
a.植物组织:取新鲜或-70℃冻存100mg组织在液氮中研磨,把粉末加入到1ml裂解液中混匀。
b.动物组织:取新鲜或-70℃冻存100mg组织加1ml裂解液,用组织研磨杵或匀浆器匀浆处理。
c.贴壁细胞:直接在培养板中加入裂解液裂解细胞,每106细胞加1ml裂解液。
用取样器吹打混匀。
d.细胞悬液:离心收集细胞。
每106动物、植物和酵母细胞或每107细菌细胞加1ml裂解液混匀。
e.血液处理:取0.2-1ml新鲜血液加3倍体积红细胞裂解液,混匀后室温放置10分钟,10000rpm离心1分钟。
弃上清,若沉淀含有红细胞,可加入2倍体积红细胞裂解液重复裂解步骤。
离心后沉淀加入1ml裂解液混匀。
2.将处理后的样品在室温放置5分钟,使得核酸蛋白复合物完全分离。
3.向匀浆样品中加0.2ml氯仿,盖好管盖,剧烈振荡15秒,室温放置3-5分钟。
4.2-8℃12000rpm离心10分钟。
RNA主要在上层无色的水相中,把水相转移到新管中,不要吸到沉淀。
5.吸附柱前处理:在吸附柱中加入500ul洗柱液,室温放置2分钟,2-8℃12,000rpm离心2min,弃废液。
6.第4步收集的上清中加入200ul无水乙醇混匀,加入吸附柱静置2分钟,2-8℃12000rpm离心2min,弃废
液。
7.向吸附柱中加入600ul漂洗液(使用前请先检查是否已加入无水乙醇),2-8℃12,000rpm离心2min,弃废液。
8.向吸附柱中加入600ul漂洗液,2-8℃12,000rpm离心2min,弃废液。
9.12000rpm离心2min,弃掉收集管,将吸附柱置于室温放置数分钟将吸附柱中残余的漂洗液去除。
10.将吸附柱放入新管中,向膜中央滴加50-100ul RNase free ddH2O,室温放置5min,12000rpm室温离心2min即得到RNA。
注意事项:
1,所有相关器皿耗材都应为RNase-free产品,操作过程要小心,带口罩、手套避免环境中RNA酶污染样品。
2,RNA在水溶液中OD值可能在1.5-1.9之间,但这并不表示RNA不纯,需电泳检测。