下载文档原格式
rna提取试剂盒的提取流程及注意事项下载提示：该文档是本店铺精心编制而成的，希望大家下载后，能够帮助大家解决实际问题。
文档下载后可定制修改，请根据实际需要进行调整和使用，谢谢！本店铺为大家提供各种类型的实用资料，如教育随笔、日记赏析、句子摘抄、古诗大全、经典美文、话题作文、工作总结、词语解析、文案摘录、其他资料等等，想了解不同资料格式和写法，敬请关注！Download tips: This document is carefully compiled by this editor. I hope that after you download it, it can help you solve practical problems. The document can be customized and modified after downloading, please adjust and use it according to actual needs, thank you! In addition, this shop provides you with various types of practical materials, such as educational essays, diary appreciation, sentence excerpts, ancient poems, classic articles, topic composition, work summary, word parsing, copy excerpts, other materials and so on, want to know different data formats and writing methods, please pay attention!RNA提取试剂盒的提取流程及注意事项RNA提取是分子生物学实验中常见的一项操作，而RNA提取试剂盒则是简化这一过程的重要工具。
杭州昊鑫生物科技股份有限公司 htpp://DNase I 柱上消化试剂盒（RNase free ）使 用 说 明 书包装量：产品储存： DNase Buffer -20 ℃保存， 去蛋白液RW1常温或者4 ℃保存，RNase free DNase －20 ℃保存，避免反复冻融。
注意：DNase Buffer 含Mn 2+，可能有轻度发黄发黑，甚至黑色沉淀为正常现象，颠倒混匀后正常使用即可。
产品介绍：任何总RNA 提取试剂在提取过程中无法完全避免DNA 的微量残留，本公司的EASYspin 系列RNA 提取产品，由于采取了本公司独特的缓冲体系和特殊硅胶吸附膜，可以去除绝大多数的DNA 污染，所以一般不用进行DNase I 消化。
但是对于一些敏感的下游实验，需要去除微量的DNA 残留，可以购买本公司DNase I 柱上消化试剂盒（RNase free ），直接在离心吸附柱上面消化残留的DNA ，然后纯净RNA 可以洗脱下来直接使用。
本产品兼容所有硅胶膜离心柱式RNA 提取试剂盒。
产品特点： 1.简单快速，条件经过优化，一般15分钟可以消化清除硅胶膜上残留DNA 。
2.确保RNase free ， 可以保证RNA 分子完整性。
3.兼容性广，可整合进所有硅胶膜离心柱式RNA 提取试剂盒柱上消化，不需要提取到总RNA 后再单独去除里面的残留DNA 。
注意事项：DNase 是非常敏感，易物理损坏变性丧失活性，所以不要漩涡混匀DNase I 和工作液。
轻轻吹打或者上下颠倒混匀混合液。
每次在抽提RNA 抽提前配置新鲜的工作液。
DNase I buffer 是和RNase-free DNase I 配套专门用于柱上消化，一般的10 x DNase buffer 并不能用于膜上的DNase 消化，不能替代。
操作步骤： 1.按照正常RNA 提取步骤操作，裂解混合物过柱离心完全后（RNA 包括残留DNA 吸附到离心柱硅胶膜上），加入去蛋白液RW1步骤前按照以下步骤操作。
EASYspin Plus大量组织/细胞RNA快速提取试剂盒目录号：RN41目录编号包装单位RN4101 10次适用范围：适用于快速提取动物细胞和易裂解动物组织总RNA，使用独有基因组DNA清除柱技术确保有效清除gDNA残留，不需要使用DNase消化，RNA可直接用于PCR，荧光定量PCR.。
试剂盒组成、储存、稳定性：试剂盒组成保存10次裂解液RLT Plus 室温100 ml去蛋白液RW1 室温120 ml漂洗液RW 室温25 ml X 2第一次使用前按说明加指定量乙醇70%乙醇室温15ml X 2第一次使用前按说明加指定量乙醇RNase-free H2O 室温10 ml基因组DNA清除柱和收集管室温10套RNase-free吸附柱RA和收集管室温10套本试剂盒在室温储存6个月不影响使用效果。
储存事项：1.所有的溶液应该是澄清的，如果环境温度低时溶液可能形成沉淀，此时不应该直接使用，可在37℃水浴加热几分钟，即可恢复澄清。
2.不合适的储存于低温（4℃或者－20℃）会造成溶液沉淀，影响使用效果，因此运输和储存均在室温下（15℃－25℃）进行。
3.4.避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、PH值变化，各溶液使用后应及时盖紧盖子。
注意事项1.所有的离心步骤均可在室温完成，使用可容纳50ml 离心管的离心机。
2.3.样品处理量绝对不要超过基因组吸附柱DA和和RNA吸附柱RA处理能力，否则造成DNA残留或者产量降低。
不同组织细胞种类RNA/DNA相差极大，例如胸腺脾脏DNA含量丰富，超过100mg就会超过柱子处理能力。
COS细胞RNA含量丰富，超过6x107细胞就会超过柱子吸附能力。
所以开始摸索实验条件时，如果不清楚样品DNA/RNA含量时宁可使用较少的样品处理量，如细胞不超过6x107，组织不超过200mg。
将来根据样品试验情况增加或者减少处理量。
4.5.6.裂解液RLT Plus 和去蛋白液RW1中含有刺激性化合物，操作时要戴乳胶手套，避免沾染皮肤，眼睛和衣服。
rna提取试剂盒的提取流程及注意事项下载温馨提示:该文档是我店铺精心编制而成，希望大家下载以后，能够帮助大家解决实际的问题。
文档下载后可定制随意修改，请根据实际需要进行相应的调整和使用，谢谢!并且，本店铺为大家提供各种各样类型的实用资料，如教育随笔、日记赏析、句子摘抄、古诗大全、经典美文、话题作文、工作总结、词语解析、文案摘录、其他资料等等，如想了解不同资料格式和写法，敬请关注!Download tips: This document is carefully compiled by theeditor.I hope that after you download them,they can help yousolve practical problems. The document can be customized andmodified after downloading,please adjust and use it according toactual needs, thank you!In addition, our shop provides you with various types ofpractical materials,such as educational essays, diaryappreciation,sentence excerpts,ancient poems,classic articles,topic composition,work summary,word parsing,copy excerpts,other materials and so on,want to know different data formats andwriting methods,please pay attention!RNA提取试剂盒的提取流程及注意事项详解RNA，即核糖核酸，是生物体内的重要分子，对遗传信息的传递和表达起着关键作用。
EASYspin 组织/细胞RNA快速提取试剂盒目录号：RN07目录编号包装单位RN0702 50次适用范围：适用于快速提取各种细胞组织总RNA试剂盒组成、储存、稳定性：试剂盒组成保存50次裂解液RLT 室温50 ml 去蛋白液RW1 室温40 ml漂洗液RW 室温10ml第一次使用前按说明加指定量乙醇RNase-free H2O 室温10 ml70%乙醇室温9ml RNase-free H2O第一次使用前按说明加指定量乙醇RNase-free吸附柱RA和收集管室温50套本试剂盒在室温储存12个月不影响使用效果。
储存事项：1.所有的溶液应该是澄清的，如果环境温度低时溶液可能形成沉淀，此时不应该直接使用，可在37℃水浴加热几分钟，即可恢复澄清。
2.不合适的储存于低温（4℃或者－20℃）会造成溶液沉淀，影响使用效果，因此运输和储存均在室温下（15℃－25℃）进行。
3.避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、PH值变化，各溶液使用后应及时盖紧盖子。
注意事项1.所有的离心步骤均在室温完成，使用转速可以达到13,000 rpm的传统台式离心机，如Eppendorf 5415C 或者类似离心机。
2.需要自备乙醇，一次性注射器，研钵。
3.裂解液RLT 和去蛋白液RW1中含有刺激性化合物，操作时要戴乳胶手套，避免沾染皮肤，眼睛和衣服。
若沾染皮肤、眼睛时，要用大量清水或者生理盐水冲洗。
4.预防RNase 污染，应注意以下几方面：1)经常更换新手套。
因为皮肤经常带有细菌，可能导致RNase 污染。
2)使用无RNase 的塑料制品和枪头避免交叉污染。
3)RNA 在裂解液RLT 中时不会被RNase 降解。
但提取后继续处理过程中应使用不含RNase 的塑料和玻璃器皿。
玻璃器皿可在150℃烘烤4 小时，塑料器皿可在0.5 M NaOH 中浸泡10 分钟，然后用水彻底清洗，再灭菌，即可去除RNase。
4)配制溶液应使用无RNase 的水。
EASYspin Plus Complex Plant RNA KitEASYspin Plus多糖多酚/复杂植物RNA快速提取试剂盒目录号：RN53适用范围：适用于快速提取植物组织细胞总RNA，使用独有基因组DNA清除柱技术可有效清除电泳可见gDNA残留，RNA可用于反转录PCR，荧光定量PCR等。
试剂盒组成、储存、稳定性：试剂盒组成保存50次(RN5301)裂解液CLB 室温50 ml裂解液RLT Plus 室温25 ml去蛋白液RW1 室温40 ml漂洗液RW 室温10 ml第一次使用前按说明加指定量乙醇RNase-free H2O 室温10 ml基因组DNA清除柱和收集管室温50套RNase-free吸附柱RA和收集管室温50套本试剂盒在室温储存12个月不影响使用效果。
储存事项：1.不合适的储存于低温（4℃或者－20℃）会造成溶液沉淀，影响使用效果，因此运输和储存均在室温下（15℃－25℃）进行。
2.避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、PH值变化，各溶液使用后应及时盖紧盖子。
注意事项1.所有的离心步骤均可在室温完成（4℃离心也可以），使用转速可以达到13,000 rpm的传统台式离心机，如Eppendorf 5415C 或者类似离心机。
2.需要自备β-巯基乙醇，乙醇，研钵(可选)。
3.样品处理量绝对不要超过基因组清除柱DA和和RNA吸附柱RA处理能力，否则造成DNA残留或产量降低。
开始摸索实验条件时，如果不清楚样品DNA/RNA含量时可使用较少的样品处理量，将来根据样品试验情况增加或者减少处理量。
4.裂解液CLB和RLT Plus 和去蛋白液RW1中含有刺激性化合物，操作时戴乳胶手套，避免沾染皮肤，眼睛和衣服。
若沾染皮肤、眼睛时，要用大量清水或者生理盐水冲洗。
5.关于DNA 的微量残留:一般说来任何总RNA提取试剂在提取过程中无法完全避免DNA的微量残留（DNase消化也无法做到100%无残留），本公司的EASYspin Plus RNA提取产品，由于采取了本公司独特的缓冲体系和基因组DNA清除柱技术，绝大多数DNA已经被清除，不需要DNase消化，可直接用于反转录PCR和荧光定量PCR。
EASYspin Plus 细菌RNA快速提取试剂盒目录号：RN43目录编号包装单位RN4302 50次适用范围：适用于快速提取细菌总RNA，使用独有基因组DNA清除柱技术确保有效清除gDNA残留，不需要使用DNase消化，RNA可直接用于反转录PCR，荧光定量PCR.。
试剂盒组成、储存、稳定性：试剂盒组成保存50次TE (PH8.0) 室温 6 ml溶菌酶4℃20 mg裂解液RLT Plus 室温25 ml去蛋白液RW1 室温40 ml漂洗液RW 室温10ml第一次使用前按说明加指定量乙醇70%乙醇室温9ml RNase-free H2O第一次使用前按说明加指定量乙醇RNase-free H2O 室温10 ml 基因组DNA清除柱和收集管室温50套RNase-free吸附柱RA和收集管室温50套本试剂盒在室温储存6个月不影响使用效果。
储存事项：1.所有的溶液应该是澄清的，如果环境温度低时溶液可能形成沉淀，此时不应该直接使用，可在37℃水浴加热几分钟，即可恢复澄清。
2.不合适的储存于低温（4℃或者－20℃）会造成溶液沉淀，影响使用效果，因此运输和储存均在室温下（15℃－25℃）进行。
3.避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、PH值变化，各溶液使用后应及时盖紧盖子。
注意事项1.所有的离心步骤均在室温完成，使用转速可以达到13,000 rpm的传统台式离心机，如Eppendorf 5415C 或者类似离心机。
2.样品处理量绝对不要超过基因组吸附柱DA和和RNA吸附柱RA处理能力，否则造成DNA残留或产量降低。
开始摸索实验条件时，如果不清楚样品DNA/RNA含量时宁可使用较少的样品处理量，将来根据样品试验情况增加或者减少处理量。
3.裂解液RLT Plus 和去蛋白液RW1中含有刺激性化合物，操作时戴乳胶手套，避免沾染皮肤，眼睛和衣服。
若沾染皮肤、眼睛时，要用大量清水或者生理盐水冲洗。
4.关于DNA 的微量残留:一般说来任何总RNA提取试剂在提取过程中无法完全避免DNA的微量残留（DNase消化也无法做到100%无残留），本公司的EASYspin Plus RNA提取产品，由于采取了本公司独特的缓冲体系和基因组DNA清除柱技术，绝大多数DNA已经被清除，不需要DNase消化，可直接用于反转录PCR和荧光定量PCR。
EASYspin Plus组织/细胞RNA快速提取试剂盒目录号：RN28目录编号包装单位RN2802 50次适用范围：适用于快速提取动物细胞和易裂解动物组织总RNA，使用独有基因组DNA清除柱技术确保有效清除gDNA残留，不需要使用DNase消化，RNA可直接用于PCR，荧光定量PCR.。
试剂盒组成、储存、稳定性：试剂盒组成保存50次裂解液RLT Plus 室温50 ml去蛋白液RW1 室温40 ml漂洗液RW 室温10ml第一次使用前按说明加指定量乙醇RNase-free H2O 室温10 ml70%乙醇室温9ml RNase-free H2O第一次使用前按说明加指定量乙醇基因组DNA清除柱和收集管室温50套RNase-free吸附柱RA和收集管室温50套本试剂盒在室温储存12个月不影响使用效果。
储存事项：1.所有的溶液应该是澄清的，如果环境温度低时溶液可能形成沉淀，此时不应该直接使用，可在37℃水浴加热几分钟，即可恢复澄清。
2.不合适的储存于低温（4℃或者－20℃）会造成溶液沉淀，影响使用效果，因此运输和储存均在室温下（15℃－25℃）进行。
3.避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、PH值变化，各溶液使用后应及时盖紧盖子。
注意事项1.所有的离心步骤均在室温完成，使用转速可以达到13,000 rpm的传统台式离心机，如Eppendorf 5415C 或者类似离心机。
2.样品处理量绝对不要超过基因组吸附柱DA和和RNA吸附柱RA处理能力，否则造成DNA残留或者产量降低。
不同组织细胞种类RNA/DNA相差极大，例如胸腺脾脏DNA含量丰富，超过5mg就会超过柱子处理能力。
COS细胞RNA含量丰富，超过3x106细胞就会超过柱子吸附能力。
所以开始摸索实验条件时，如果不清楚样品DNA/RNA含量时宁可使用较少的样品处理量，如细胞不超过3-4x106，组织不超过10mg。
将来根据样品试验情况增加或者减少处理量。
EASYspin 石蜡包埋组织RNA 快速提取试剂盒目录号：RN3001适用范围：适用于快速从福尔马林固定、石蜡包埋组织样品中提取总RNA ，RNA 可用于反转录PCR ，荧光定量PCR 。
❖ 试剂盒组成、储存、稳定性：本试剂盒在室温储存12个月不影响使用效果。
储存事项：1. 所有的溶液应该是澄清的，如果环境温度低时溶液可能形成沉淀，此时不应该直接使用，可在37℃水浴加热几分钟，即可恢复澄清。
2. 不合适的储存于低温（4℃或者－20℃）会造成溶液沉淀，影响使用效果，因此运输和储存均在室温下（15℃－25℃）进行。
3. 为避免降低活性，方便运输，提供蛋白酶K 为冻干粉状，收到后，可短暂离心后，加入0.5毫升灭菌水溶解（终浓度40mg/ml ）。
因为反复冻融可能会降低酶活性，试剂盒组成 保存50次(RN3001) 裂解液PKD 室温 15 ml 结合液RBC 室温25 ml 漂洗液RW 室温10ml 第一次使用前按说明加指定量乙醇 蛋白酶K 粉 40mg/ml -20℃ 20mg RNase-free H 2O 室温 10 ml 基因组DNA 清除柱和收集管室温 50套 RNA 吸附柱RA 和收集管 室温 50套因此溶解后立即按照每次使用量)分装冻存，－20℃保存。
4.避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、PH值变化，各溶液使用后应及时盖紧盖子。
❖注意事项1.所有的离心步骤均在室温完成，使用转速可以达到13,000 rpm的传统台式离心机，如Eppendorf 5415C 或者类似离心机。
2.样品处理量绝对不要超过基因组DNA清除柱和RNA吸附柱RA处理能力，否则造成DNA残留或者产量降低。
不同组织细胞种类RNA/DNA相差极大，例如胸腺脾脏DNA含量丰富，超过5mg就会超过柱子处理能力。
COS细胞RNA含量丰富，超过3x106细胞就会超过柱子吸附能力。
所以开始摸索实验条件时，如果不清楚样品DNA/RNA含量时宁可使用较少的样品处理量，如不超过2个10μm厚度石蜡切片。
快速核酸提取试剂盒
1、产品介绍
本裂解液具有样本用量少，步骤简单，不需要特殊仪器，而且能够沉淀样本血清中的杂蛋白及其他影响PCR反应的大分子有机物，是目前快速检测中较理想的选择之一。
该技术将标本直接加入到PCR 扩增管，不需振荡、无需开管盖和移液等操作，可采用与标准质控品和标本同步进行处理和扩增，实现全程监控，具有无污染、操作简单、快速、准确等独特优点。
2
3、适用范围
适用于血清，无抗凝的血浆或者全血，病毒培养液，尿液，唾液，咽拭子浸提液等标本。
4、实验步骤
（1）用200ul PCR管加入5ul Buffer1 溶液，再加入5ul样本，轻柔混匀，短离；
（2）新的200ul PCR管中，加入3ul MB裂解液，再加入3ul（1）中的混合液，10000转离心1min；
（3）将加好MB 裂解液的PCR管置于PCR仪（带热盖）中，99℃，10min；（4）取出样本后再室温平衡2-3min，10000转离心1min，PCR管底可见白色沉淀物，说明裂解完全；
（5）直接进行PCR扩增程序；
※注：若样本为血清或者无抗凝血浆，可跳过步骤（1），直接从步骤（2）开始。
其他样本（非组织），需要加Buffer1预混，从步骤（1）开始。
5、注意事项
※尽量避免多次冻融，可置于4℃保存，长期保存于-20℃。
※血浆样品不能含有任何抗凝剂，会影响后续实验。
※MB裂解液使用体积为PCR总体积的1/8。
骨组织总RNA提取及反转录标准操作流程模板一、仪器试剂Trizol 试剂三氯甲烧(4℃预冷)异丙醇（4℃预冷）75%乙醇（超纯水处理水配置）(4℃预冷)DEPC处理水RNase free water (反转录试剂盒)1.5mL无酶EP管200uL无酶PCR管冷冻离心机Nano Drop 2000反转录试剂盒(Takara RR036A)二、样品处理1.组织样品处理将骨组织在液氮中磨成粉末后，再以50-100mg组织加入1 ml Trizol 溶液，混匀，冰上放置10-15min使其充分裂解。
注1：样品总体积不能超过所用Trizol体积的10%。
注2：组织样品收取后应立即处理或液氮冷冻并-80℃保存。
研磨过程中注意保持样品低温状态。
三、总RNA提取(冰浴)1.每1ml Trizol（500ml）溶液加入200μL（100μL）三氯甲烷，立即盖上盖子，涡旋混匀15s，使水相和有机相充分接触，冰上静置10min。
2.4℃下，12000rpm离心15min，液体分为三层，RNA位于上层水相，移至新无酶EP管中(用20-200μL的枪吸取上清，吸上清时，EP管倾斜大约45度，枪头应沿着液面上层吸取上清，枪头不可碰到、吸到中间白色层。
（取少不取多)。
3.加入与上清液等体积异丙醇，轻柔地充分混匀(上下颠倒15-30次)，冰上静置10min。
4°C下，12,000rpm离心10min，可见羽毛状白色RNA沉淀，倒出上清。
4.1mL 75%乙醇洗涤两次(4°C 7500g离心5min，加入乙醇后只需轻轻颠倒EP管即可，不可使用振荡器震荡或枪头吸打沉淀）。
弃上清，保留沉淀，4℃下，12,000rpm离心1min，小枪头吸干。
注：RNA可与75%乙醇中4℃保存一周，-80°C保存一年。
5.超净台上管子倒置晾干10min，注意不要干燥过分，否则会降低RNA的溶解度。
视沉淀量加入适10-20量DEPC水(15μL，10～20μL,10μL)溶解沉淀，使用Nano Drop测定RNA浓度。
EASYspin Plus Bone Tissue RNA Kit
EASYspin Plus骨组织RNA快速提取试剂盒
目录号：RN54
适用范围：
适用于快速提取骨组织细胞总RNA，使用独有基因组DNA清除柱技术可有效清除电泳可见gDNA残留，RNA可用于反转录PCR，荧光定量PCR等。
试剂盒组成、储存、稳定性：
试剂盒组成保存50次(RN5401)
裂解液CLB 室温50 ml
PLANTaid 室温 5 ml
裂解液RLT Plus 室温25 ml
去蛋白液RW1 室温40 ml
漂洗液RW 室温10 ml
第一次使用前按说明加指定量乙醇
RNase-free H2O 室温10 ml 基因组DNA清除柱
和收集管室温
50套
RNase-free
吸附柱RA和收集管
室温50套
本试剂盒在室温储存12个月不影响使用效果。
储存事项：
1.不合适的储存于低温（4℃或者－20℃）会造成溶液沉淀，影响使用效果，因此运输和储存均在室温下（15℃－25℃）进行。
2.避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、PH值变化，各溶液使用后应及时盖紧盖子。
注意事项
1.所有的离心步骤均可在室温完成（4℃离心也可以），使用转速可以达到13,000 rpm
的传统台式离心机，如Eppendorf 5415C 或者类似离心机。
2.需要自备乙醇，研钵或者其它合适的破碎骨组织装置。
3.样品处理量绝对不要超过基因组清除柱DA和和RNA吸附柱RA处理能力，否则造
成DNA残留或产量降低。
开始摸索实验条件时，如果不清楚样品DNA/RNA含量时可使用较少的样品处理量，将来根据样品试验情况增加或者减少处理量。
4.裂解液CLB和RLT Plus 和去蛋白液RW1中含有刺激性化合物，操作时戴乳胶手
套，避免沾染皮肤，眼睛和衣服。
若沾染皮肤、眼睛时，要用大量清水或者生理盐水冲洗。
5.关于DNA 的微量残留:
一般说来任何总RNA提取试剂在提取过程中无法完全避免DNA的微量残留（DNase消化也无法做到100%无残留），本公司的EASYspin Plus RNA提取产品，由于采取了本公司独特的缓冲体系和基因组DNA清除柱技术，绝大多数DNA已经被清除，不需要DNase消化，可直接用于反转录PCR和荧光定量PCR。
个别特殊情况如DNA含量过于丰富造成残留或者要进行严格的mRNA表达量分析荧光定量PCR，我们建议在进行模板和引物的选择时：
1)选用跨内含子的引物，以穿过mRNA中的连接区，这样DNA就不能作为模板参与
扩增反应。
2)选择基因组DNA和cDNA上扩增的产物大小不一样的引物对。
3)将RNA提取物用RNase-free的DNase I 处理。
本试剂盒还可以用于DNase I处理后
的RNA清洁(cleanup) ，请联系我们索取具体操作说明书。
4)在步骤去蛋白液RW1漂洗前，直接在吸附柱RA上进行DNase I柱上消化处理。
购
买DNA酶柱上消化试剂盒(货号：RN34)前可先索取具体操作说明书。
操作步骤：（实验前请先阅读注意事项）
提示：
⇨第一次使用前请先在漂洗液RW瓶加入指定量无水乙醇!
⇨取1ml裂解液CLB至离心管内(如果CLB有析出或者沉淀需先置于65°C水浴重新溶解），在裂解液CLB中加入100μl PLANTaid，颠倒混匀后65°C水浴中预热。
多个样品按照比例放大准备。
1.液氮研磨法:
a. 骨钳夹碎骨组织后放入研钵（研钵在180度干烤2小时），加入液氮后反复研
磨成细粉，注意液氮蒸发后不断补加保存液氮一直存在。
b. 转移100mg细粉加至预热的裂解液CLB（已加有PLANTaid）离心管中。
立
即剧烈涡旋30-60秒或者用吸头吹打混匀裂解直得到满意匀浆结果(或者电动匀浆30秒)，可以剪切DNA，降低粘稠度和提高产量。
c. 立刻接操作步骤的步骤3。
2.其它骨组织破碎方法：
a. 取100mg骨组织加入1ml预热的裂解液CLB（已加有PLANTaid）高速均质
仪粉碎匀浆。
或者取100mg液氮冷冻包埋切片粉碎的骨头加入裂解液CLB（已加有PLANTaid）粉碎匀浆。
b. 立刻接操作步骤的步骤3。
3.短时放回 65°C水浴中（10 min），中间偶尔颠倒1-2次帮助裂解。
4.将裂解物4°C 13,000 rpm离心10分钟，沉淀不能裂解的碎片。
5.取裂解物上清（在不超过基因组DNA清除柱能力的情况下可以取更多的上清，
这样可以提高产量）转到一个新离心管。
加入上清体积一半的无水乙醇(0.5体积)，此时可能出现沉淀，但是不影响提取过程，立即吹打混匀，不要离心。
若上清表面有漂浮物，用吸头挑开吸取下面液体即可。
6.将混合物(每次小于720μl，多可以分两次加入)加入一个基因组清除柱中，（清除
柱放入收集管中）13,000 rpm离心2分钟，弃掉废液。
确保离心后液体全部滤过去，膜上没有残留，如有必要，可以加大离心力和离心时间。
7.将基因组DNA清除柱子放在一个干净2ml离心管内（不用RNAse free 或者DEPC
处理，一般干净的新离心管即可。
也可使用RNA吸附柱配套的新的干净收集管），在基因组清除柱内加500μl裂解液RLT Plus，13,000 rpm离心30秒，收集滤液（RNA在滤液中），用微量移液器较精确估计滤过液体积（通常为450-500μl左右，滤过时候损失体积应该减去），加入0.5倍体积的无水乙醇，此时可能出现沉淀，但是不影响提取过程，立即吹打混匀，不要离心。
8.立刻将混合物(每次小于720μl，多可以分两次加入)加入一个吸附柱RA中，（吸
附柱放入收集管中）13,000 rpm离心2分钟，弃掉废液。
确保离心后液体全部滤过去，膜上没有残留，如有必要，可以加大离心力和离心时间。
9.加700μl 去蛋白液RW1，室温放置1分钟，13,000rpm 离心30秒，弃掉废液。
10.加入500μl漂洗液RW（请先检查是否已加入无水乙醇!），13,000 rpm 离心30秒，
弃掉废液。
加入500μl漂洗液RW，重复一遍。
11.将吸附柱RA放回空收集管中，13,000 rpm离心2分钟，尽量除去漂洗液, 以免
漂洗液中残留乙醇抑制下游反应。
12.取出吸附柱RA，放入一个RNase free离心管中，根据预期RNA产量在吸附膜的
中间部位加30-50μl RNase free water（事先在70-90℃水浴中加热可提高产量），室温放置1分钟，12,000 rpm 离心1分钟。
13.如果预期RNA产量>30μg，加30-50μl RNase free water重复步骤12，合并两次洗
液，或者使用第一次的洗脱液加回到吸附柱重复步骤一遍(如果需要RNA浓度高)。
洗脱两遍的RNA洗脱液浓度高,分两次洗脱合并洗脱液的RNA产量比前者高15–30%，但是浓度要低，用户根据需要选择。
