第3代BiFC载体
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超顺磁性Fe3O4磁性聚合物载药胶束的制备与磁靶向载药体系性能研究一、概述随着医学领域的深入发展,癌症治疗已成为当代医学面临的重大挑战之一。
尽管传统的手术、放疗和化疗等手段在一定程度上能够控制病情,但其对正常细胞的损伤以及药物的非特异性分布等问题仍亟待解决。
探索新型的、具有靶向性的药物传输体系成为了当前的研究热点。
超顺磁性Fe3O4磁性聚合物载药胶束作为一种新型的磁靶向载药体系,因其独特的磁响应性和生物相容性,在肿瘤治疗中显示出巨大的潜力。
超顺磁性Fe3O4纳米粒子,作为一种重要的磁性材料,具有优异的磁响应性能,能够在外部磁场的作用下实现定向移动。
与此其超顺磁性质使得粒子在去除外部磁场后能够迅速失去磁性,从而避免了对生物体的潜在危害。
将Fe3O4纳米粒子与聚合物载药胶束相结合,不仅可以实现药物的靶向输送,还能通过调控聚合物的性质和结构,优化药物在体内的释放行为。
本研究旨在制备具有优良磁靶向性能的超顺磁性Fe3O4磁性聚合物载药胶束,并对其性能进行深入研究。
我们将通过化学合成法制备出粒径均匀、磁性能稳定的Fe3O4纳米粒子。
利用聚合物反应合成不同分子量的嵌段聚合物,并通过适当的方法将Fe3O4纳米粒子与聚合物相结合,形成稳定的磁性聚合物载药胶束。
在此基础上,我们将进一步探讨载药胶束的制备工艺、药物释放行为以及磁靶向性能等关键问题。
通过本研究的开展,我们期望能够为磁靶向载药体系的设计和优化提供新的思路和方法,为癌症等重大疾病的治疗提供更为安全、有效的药物传输手段。
我们也期望通过本研究的成果,推动磁性纳米材料在生物医学领域的广泛应用,为人类的健康事业做出更大的贡献。
1. 介绍药物传输系统的重要性及磁靶向载药体系的研究背景在现代医学领域,药物传输系统的重要性日益凸显。
药物传输系统不仅关乎药物的治疗效果,更直接影响患者的生存质量。
一个高效、精准的药物传输系统能够确保药物准确到达病灶部位,发挥最大的治疗作用,同时减少药物在非病灶部位的分布,从而降低副作用,提高患者的生活质量。
bifc实验原理BIFC实验原理。
BIFC(Bimolecular Fluorescence Complementation)是一种用于研究蛋白质相互作用的生物技术方法。
它基于两个融合蛋白质互相结合并激活荧光素酶的原理,从而产生荧光信号,用于检测蛋白质相互作用的发生。
本文将介绍BIFC实验原理及其应用。
BIFC实验原理主要包括以下几个步骤,构建融合蛋白质表达载体、共转染细胞、添加底物激活荧光素酶、观察荧光信号。
首先,研究人员需要将感兴趣的蛋白质的编码序列克隆至BIFC表达载体中,通常是将其与荧光素酶的N端(NLuc)或C端(CLuc)融合,形成NLuc-fusion或CLuc-fusion蛋白质。
然后,将这两种融合蛋白质表达载体共转染至目标细胞中,使它们在细胞内表达。
当这两种融合蛋白质相互结合时,将激活荧光素酶,产生荧光信号。
最后,研究人员通过荧光显微镜或流式细胞术观察和记录荧光信号的强度和分布,从而分析蛋白质相互作用的发生和特性。
BIFC实验原理的应用非常广泛。
首先,它可以用于筛选蛋白质相互作用的靶点,帮助研究人员发现新的蛋白质相互作用。
其次,它可以用于研究蛋白质相互作用在细胞内的时空动态变化,揭示蛋白质相互作用的调控机制。
此外,BIFC还可以用于筛选和评估药物干预蛋白质相互作用的效果,为药物研发提供重要参考。
总之,BIFC实验原理在生物医学研究中具有重要的应用前景。
总结而言,BIFC实验原理是一种重要的蛋白质相互作用研究方法,通过荧光信号的产生和检测,可以揭示蛋白质相互作用的发生和特性。
它在药物研发、疾病机制研究和生物学基础研究中具有广泛的应用前景。
希望本文对BIFC实验原理有所帮助,能够促进相关领域的研究和应用。
3细胞自噬及其在肝纤维化中的作用代倩兰,刘绍能中国中医科学院广安门医院消化内科,北京100053摘要:自噬是指真核细胞内细胞器、蛋白质等在溶酶体中被降解及其降解产物被重新利用的过程,其对细胞的增殖、分化及稳态起着重要作用。
近年来,自噬在肝纤维化中的作用受到越来越多的关注,干预自噬也许成为治疗肝纤维化的新方法。
总结了自噬的过程、功能及在肝纤维化中作用,这些研究揭示了自噬对肝纤维化作用机制的复杂性,也启示未来需要找到干预自噬更加可靠、确定的机制和靶点,进而为治疗肝纤维化提供新途径。
关键词:自噬;肝硬化;肝星状细胞中图分类号:R575.2 文献标志码:A 文章编号:1001-5256(2021)06-1440-05RoleofautophagyinliverfibrosisDAIQianlan,LIUShaoneng.(DepartmentofGastroenterology,Guang’anmenHospital,ChinaAcademyofChineseMedicalSciences,Beijing100053,China)Abstract:Autophagyreferstotheprocessinwhichorganellesandproteinsineukaryocytesaredegradedinlysosomesandtheirdegradationproductsarereused,anditplaysanimportantroleincellproliferation,differentiation,andhomeostasis.Inrecentyears,theroleofautoph agyinliverfibrosishasattractedmoreandmoreattention,andinterventionofautophagymaybecomeanewmethodforthetreatmentofliverfibrosis.Thisarticlesummarizestheprocessandfunctionofautophagyanditsroleinliverfibrosis.Thesedatarevealthecomplexmechanismofactionofautophagyinliverfibrosisandpointouttheneedtofindmorereliableanddefinitemechanismsandtargetsforautophagyinterven tioninthefuture,soastoprovidenewwaysforthetreatmentofliverfibrosis.Keywords:Autophagy;LiverCirrhosis;HepaticStellateCellDOI:10.3969/j.issn.1001-5256.2021.06.046收稿日期:2020-11-23;修回日期:2020-12-16基金项目:国家自然科学基金(81973832)作者简介:代倩兰(1991—),女,主要从事肝纤维化的基础和临床研究通信作者:刘绍能,liushaoneng@126.com 自噬是机体维持内环境稳态的重要机制,也是近年来国内外研究的热点。
华中科技大学硕士学位论文MNTflt2gtlt3gt催化合成2-苯基苯并噻唑类化合物姓名:崔进申请学位级别:硕士专业:有机化学指导教师:聂进20080608 华中科技大学硕士学位论文摘要苯并噻唑的衍生物具有抗菌、抗癌活性,荧光性和光致变色性等性质,在生理及光学的研究与开发方面有着广泛的应用。
全氟烷基磺酰亚胺的盐类作为一类新型的Lewis 酸被广泛应用于催化许多有机合成反应。
本文主要研究了以三氟甲基磺酰亚胺的盐(MNTf23)为催化剂,催化合成2-取代苯并噻唑类化合物的方法。
本论文的工作主要包括了以下方面:优化了作为合成2-取代苯并噻唑类化合物常用的原料——邻氨基苯硫酚的合成方法。
在现有的合成方法的基础上,通过对合成方法的优化和改进,能够比较方便和经济的合成该化合物,并对一些新的合成方法进行了探索。
研究了催化合成2-取代基苯并噻唑化合物的方法。
通过三氟甲基磺酰亚胺的盐和三氟甲基磺酸盐的催化合成2-苯基苯并噻唑的对比,发现在THF 中,三氟甲基磺酸盐有较好的催化效果,另一方面,在硝基甲烷中,三氟甲基磺酰亚胺盐则有更好的催化效果。
通过对反应时间,反应温度,以及催化剂用量等反应条件的研究,确定了以下的优化的反应条件:在通入氧气的条件下,加入 2 mol的催化剂,在室温下反应2 h,反应的产率就能达到90以上。
在上述反应条件下,研究了三氟甲基磺酰亚胺盐催化合成2-取代基为其他取代基(呋喃基,对硝基苯基,丙基)的苯并噻唑类化合物。
通过实验证明了,三对于催化合成取代基为呋喃基化合物,(三氟甲基磺酰亚胺)钐盐较之三氟甲基磺酸盐有较大的优势。
本文通过一系列的实验对反应条件进行了优化,建立了一个新的有效的合成2-取代苯并噻唑的新方法。
关键词:催化合成三氟甲基磺酰亚胺盐2-取代苯并噻唑邻氨基苯硫酚I 华中科技大学硕士学位论文Abstract Benzothiazole derivatives with antibacterial anti-cancer activity fluorescence andphotochromic activity are widely applied in physical and optical research anddevelopment. As a series of highly efficient catalysts perfluoroalkyl methyl polyimidesalts as novel Lewis acids are diffusedly used for much organic synthesis. This paper isabout method to synthesis for 2-substituted benzothiazole compound by trifluoromethylmethyl imide salt MNTf23. In this paper the work includes the following two aspects: We optimized the method of prepared for o-aminothiophenol used for synthesis of 2-substituted benzothiazole compounds commonly. Based on the reported synthesismethods through the optimization and improvement of the method we found a newway in which it can be more convenient and economy to get a certain amount of thecompound. And as well a novel synthetic method has been explored. On the2-subsitituted benzothiazole compounds of synthesis approach throughtrifluoromethylimide and trifluoromethyl sulfonate salts 2-phenyl benzothiazole catalyticsynthesis contrast we found that in solvent THF trifluoromethyl sulfonate salts is a goodcatalyst while in the nitromethane trifluoromethyl imide salt has a better catalytic effect.The reaction condition such as the reaction time temperature and the amount of catalysthas been studied to determine the optimized reaction conditions. we found under thefollowing conditions: accessing to oxygen ,adding 2 mol catalyst reacting two hoursat room temperature the reaction yield can be up to 90. On the other substituents furylnitrophenyl propyl aldehydes we investigated the effectiveness of the catalyst tosynthesize benzothiazole compounds. The experiments proved that furan substituted thecompounds tri-trifluoromethylimide Sm have greater advantages than trisulfonate salts. This paper through a series of experiments on the optimization of conditionsestablishes anovel and effective method to catalytic synthesis of 2-substitutedbenzothiazole. Keywords: Catalytic synthesis Trifluoromethyimide salts 2-Substituted benzothiazoleo-Aminothiophen II 独创性声明本人声明所呈交的学位论文是我个人在导师的指导下进行的研究工作及取得的研究成果。
第29卷第4期2010年8月电子显微学报Journal of Chinese Electron Microscopy SocietyVol.29,No.42010-08文章编号:1000-6281(2010)04-0338-06多铁性BiFeO 3/SrTiO 3多层膜的透射电镜研究唐兆俊1,王君伟2,朱银莲1,唐为华2,马秀良1*(1.中国科学院金属研究所沈阳材料科学国家(联合)实验室,辽宁沈阳110016;2.浙江理工大学光电材料与器件中心,浙江杭州310018)摘要:本文利用透射电子显微镜(TEM )研究了由磁控溅射法生长的多铁性BiFeO 3/SrTiO 3多层膜的微观结构。
衍衬分析及高分辨电子显微(HRTEM )像显示出界面清晰的各个单层。
BiFeO 3外延生长在SrTiO 3(001)衬底上,生长方向沿基体c 轴。
随着薄膜厚度的增加,即多层膜周期的加长,层与层之间界面不再平直。
原子序数Z 衬度成像,EDS 线扫以及各种元素的能量过滤综合分析确定了多层膜的成分变化特征。
关键词:多铁性;多层膜;界面;透射电子显微术中图分类号:TG115.21+5.3;TB383;TG142.33文献标识码:A收稿日期:2010-05-16基金项目:国家自然科学基金面上资助项目(No.50871115及No.50672088),科技部973资助项目(No.2009CB623705).作者简介:唐兆俊,男(汉族),硕士.*通讯作者多铁(multiferroic )材料是指同一体系中同时具有铁电、铁磁等多种铁性(ferroic )的材料。
由于不同铁性之间的耦合而导致磁电效应(magnetoelectric effect )的出现。
该效应显示出“乘积效应”,在单相及两相复合多铁材料中都可以实现[1,2]。
在众多单相多铁性材料中,BiFeO 3是目前已知少数同时具有室温以上铁电转变居里温度(T C =850ħ)和反铁磁转变尼尔温度(T N =370ħ)的材料之一[3]。
脂质纳米微粒载体在核酸药物递送中的应用黄健;谢向阳;梅兴国【期刊名称】《国际药学研究杂志》【年(卷),期】2008(35)2【摘要】脂质微粒作为基因药物载体,用于全身药物递送,目前已进行了大量深入的研究.其中,脂质纳米微粒(Iipid-based nanoparticles,NP)药物载体,在进行基因药物递送时,为克服体内的各种生理屏障,粒径需在100 nm以下,本文将重点介绍这类NP的配方和组装.NP作为一种核酸药物的.脂质微粒递送载体,与阳离子脂质体/DNA复合物区别主要在于粒径大小,NP的粒径通常在100nm以下.影响NP粒径的主要因素包括脂质的构成、脂质与核酸的比例,以及制备方法等.NP所递送的核酸主要包括质粒DNA,siRNA,反义寡核苷酸.【总页数】4页(P145-147,150)【作者】黄健;谢向阳;梅兴国【作者单位】军事医学科学院毒物药物研究所,北京,100850;军事医学科学院毒物药物研究所,北京,100850;军事医学科学院毒物药物研究所,北京,100850【正文语种】中文【中图分类】R944【相关文献】1.固体脂质纳米粒和纳米结构脂质载体在药物传递中的研究进展 [J], 宋春晓;何书莲;曹春凤;张国锋;张文君;王嵩;王立2.固体脂质纳米粒和纳米结构脂质载体在药物传递中的研究进展 [J], 宋春晓;何书莲;曹春凤;张国锋;张文君;王嵩;王立;3.表面修饰型纳米结构脂质载体在肿瘤药物递送系统中的应用研究进展 [J], 刘美娟;朱艳华4.表面修饰型纳米结构脂质载体在肿瘤药物递送系统中的应用研究进展 [J], 刘美娟;朱艳华;5.基因治疗中的核酸药物及非病毒递送载体的研究进展 [J], 刘健因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
第三代BiFC (目的基因可以连接到YFP N/C 上游或下游)
● 在YFP N 和YFP C 的5’和3’ 端都有多克隆位点MCS (1, 2, 3), 可根据需要把目的基因装在适
合的位置。
如果目的基因的结合域在靠近N 端,可优先考虑接在YFP 的5’端;如果目的基因的结合域在靠近C 端,可优先考虑接在YFP 的3’端。
● 使用两组不可逆重组LoxP 突变位点(LoxP1L/1R 、Lox2L/2R )把2个表达盒整合在一个质粒
(LoxP1L 只能与LoxP1R 不可逆重组;LoxP2L 只能与LoxP2R 不可逆重组),可以大大提高2个表达盒的共转化效率。
● 在NOS 终止子末端EcoRI 位点旁增加I-SceI 位点。
NE1L2L-nsI: MCS TCT AGA GTT AAC CGG GCT CAG GCC T GG CGC GCC ACT AGT GGA TCC ATC GA T AGT
Xba I Hpa I Stu I Asc I Spe I BamH I Cla I ACT GTC GAC CTC GAG GGT ACC GCT CCC GGG ATG GAG CAA AAG TTG ATT TCT GAG
Sal I Xho I KpnI /Acc65 I Xma I/ Sma I
GAG GAT CTT ATG -YFP N -
SacII NheI NotI BglII FseI ApaI
AgeI
FseI ApaI AgeI
操作流程
NE1L2L-nsI CE1R2R- nsI
将2种质粒等量混合,稀释成约10ng/ul ,取1ul 转化E. coli NS3529 (表达Cre 酶), Amp (50ug/ml )/Kam (25ug/ml )双抗平板筛选,37℃培养>20h 。
或在平板培养~12h 后(下午/晚上至第二天上午)混收少量菌接种到Amp (50ug/ml )/Kam (25ug/ml )-LB 液体培养基成OD 约0.5,再培养6-8h (到傍晚)。
从平板混收菌,提取质粒,稀释成~0.1ng/ul (过高浓度容易出现不同质粒的共转化,因此要避免高浓度质粒转化),取1ul 转化E. coli DH10B (或NS3529以外的其它菌株),Amp/Kam 双抗筛选。
取单菌落培养,提取和纯化质粒
在(洋葱) 细胞瞬间表达
用EcoRI 或I-Sce I 切出整个表达盒,连接到pCAMBIA1300或pCAMBIA1300(I-SceI)
农杆菌转化植物,恒定表达
{注:I-SceI 位点是17-base 非回文序列,切割产生的粘性末端也是非回文;在pCAMBIA1300的MCS 中加入了2个方向相反的I-SceI 位点,酶切后载体的2个末端不能自连,因此不需要脱磷反应}
NE-1L2Lns: 加I-SceI 位点
TCGCGCGTTTCGGTGATGACGGTGAAAACCTCTGACACATGCAGCTCCCGGAGACGGTCACAGCTTGTCTGTAAGCGGATGCCGGGAGCAGACAAGCCCGTC AGGGCGCGTCAGCGGGTGTTGGCGGGTGTCGGGGCTGGCTTAA CTA TGCGGCATCAGAGCAGATTGTACTGAGAGTGCACCATATGCGGTGTGAAATACCGC ACAGATGCGTAAGGAGAAAATACCGCATCAGGCGCCATTCGCCATTCAGGCTGCGCAACTGTTGGGAAGGGCGATCGGTGCGGGCCTCTTCGCTATTACGCC
CE-1R2Rns: 加I-SceI位点
TCGCGCGTTTCGGTGATGACGGTGAAAACCTCTGACACATGCAGCTCCCGGAGACGGTCACAGCTTGTCTGTAAGCGGATGCCGGGAGCAGACAAGCCCGTC AGGGCGCGTCAGCGGGTGTTGGCGGGTGTCGGGGCTGGCTTAA CTA TGCGGCATCAGAGCAGATTGTACTGAGAGTGCACCATATGCGGTGTGAAATACCGC ACAGATGCGTAAGGAGAAAATACCGCATCAGGCGCCATTCGCCATTCAGGCTGCGCAACTGTTGGGAAGGGCGATCGGTGCGGGCCTCTTCGCTATTACGCC。