直链淀粉含量检测试剂盒说明书 微量法

稻米直链淀粉含量的96微孔高通量快速测定方法稻米是人们日常饮食中的主要粮食之一，其中淀粉含量是稻米质量的重要指标之一。

淀粉是稻米中主要的营养成分之一，占据着稻米的70-80%。

稻米的淀粉类物质主要由直链淀粉和支链淀粉两部分组成，其中直链淀粉对于粘稠性、透明度等特性有着很重要的作用。

因此，对稻米的直链淀粉含量的快速准确检测是非常必要和重要的。

近年来，针对稻米淀粉的高通量快速检测方法得到了很多研究，如色团分析法、紫外吸收法、气相色谱法等。

然而，这些方法都存在着使用成本高、检测时间长等缺点。

因此，开发一种简单、高效、快速的稻米直链淀粉含量检测方法显得尤为重要。

文献[1]提出了一种96微孔高通量快速测定稻米直链淀粉含量的方法。

该方法通过粉碎样品、溶解蛋白质、酶解淀粉、去除支链淀粉等步骤得到稻米的直链淀粉含量。

具体实验步骤如下：1.稻米样品的制备将稻米样品在冷水中浸泡12小时，去除表面的泥沙及杂质，然后将稻米样品放置在恒温恒湿条件下（30℃、85%RH）等到含水率达到12%左右。

将样品磨成粉末备用。

2.酶解淀粉将0.03g的淀粉酶和0.05g的细胞壁水解酶混合加入到含10mg/ml的氯化钠的100μL 稻米粉中，使其在55℃恒温振荡水浴中酶解4小时。

3.去除支链淀粉将样品加入到350μL的甲醇水溶液中，并在80℃下加热20分钟以去除支链淀粉。

4.准备直链淀粉底物将2.5g的淀粉加入到25mL的70%乙醇中，在70℃下振荡水浴30分钟后离心去除淀粉沉淀，剩余的上清液即为直链淀粉底物。

5.测定样品淀粉酶切产物将稻米样品酶解产物用GenePulser II电穿孔仪处理5次（1秒数据，50毫秒间隔），每次电压为800V）以将淀粉产物中的聚合物分解为短链淀粉分子。

6.测定反应体系中的直链淀粉将测定样品和直链淀粉底物加入到含有10毫摩尔的钠磷酸缓冲液和5毫摩尔的钙离子的反应体系中，振荡水浴1小时后加入3%的硝苯地平停止反应。

稻米直链淀粉含量的96微孔高通量快速测定方法摘要直链淀粉是稻米中的主要成分之一，对其含量进行快速准确测定对于粮食加工和生产具有重要意义。

本研究针对传统测定方法耗时长、操作复杂的问题，利用96孔微孔板结合酶联免疫吸附法（ELISA）建立了一种高通量、快速准确的稻米直链淀粉含量测定方法。

该方法利用96孔微孔板对样品进行处理，结合ELISA技术进行定量分析，具有较高的准确性和重复性。

本方法为稻米直链淀粉含量的快速测定提供了一种新的选择，适用于大批量样品的检测，具有良好的应用前景。

关键词：稻米；直链淀粉；96孔微孔板；酶联免疫吸附法；快速测定方法1. 介绍稻米是世界上最主要的粮食作物之一，其主要成分包括淀粉、蛋白质、脂肪等。

淀粉是稻米中的主要成分之一，直链淀粉是淀粉的主要形式之一，其含量直接影响着稻米的品质和加工性能。

对稻米直链淀粉含量进行快速准确测定具有重要意义，对于粮食加工和生产具有重要意义。

目前，常用的测定稻米直链淀粉含量的方法主要包括化学方法和物理方法。

化学方法包括光学方法、酶法和色谱法等，这些方法操作繁琐，耗时较长；物理方法则主要通过显微镜观察淀粉颗粒的形态和大小来估算含量，这种方法缺乏定量性能。

研发一种高通量、快速准确的稻米直链淀粉含量测定方法具有重要的研究意义和应用价值。

酶联免疫吸附法（ELISA）是一种常用的生物化学分析方法，具有快速、灵敏、特异性强的优点。

结合96孔微孔板可以进行高通量的样品处理，能够同时操作多个样品，具有很高的效率。

利用96孔微孔板结合ELISA技术进行稻米直链淀粉含量测定具有很大的潜力。

本研究旨在建立一种高通量、快速准确的稻米直链淀粉含量测定方法，为粮食加工和生产提供新的技术手段，具有重要的应用前景。

2. 实验方法2.1 样品的制备取稻米样品，去除杂质，磨碎成细粉。

2.2 酶联免疫吸附法（ELISA）将制备好的稻米细粉样品加入96孔微孔板中，加入适量的酶联免疫吸附试剂，进行孵育反应。

稻米直链淀粉含量的96微孔高通量快速测定方法稻米直链淀粉含量是衡量稻米品质的重要指标之一。

传统的测定方法通常采用化学方法，操作复杂、耗时耗力。

近年来，随着高通量技术的迅速发展，研究人员提出了一种96微孔高通量快速测定方法，可以更快、更准确地测定稻米直链淀粉含量。

该方法的关键步骤如下：1. 样品准备：将稻米样品磨成细粉，并通过筛网过滤，获得均匀的颗粒大小。

2. 酶解反应：将样品加入含有α-淀粉酶的酶解液中，进行酶解反应。

酶解反应可以将稻米中的淀粉分解成葡萄糖。

3. 试剂加入：将酶解反应后的样品转移到96孔板中，再加入含有葡萄糖酸氧化酶的试剂。

葡萄糖酸氧化酶可以将葡萄糖氧化成葡萄糖酸。

4. 反应发色：加入发色试剂，在发光底物的催化下，葡萄糖酸和发色试剂发生反应，产生可见光吸收或荧光。

5. 读取测量：使用96孔高通量读板仪读取每个孔的吸光度或荧光值，并根据标准曲线计算出样品中的直链淀粉含量。

与传统的测定方法相比，该方法具有以下优点：1. 96微孔高通量：使用96孔板进行测量，大大提高了测量效率。

2. 快速测定：整个测定过程只需要几个小时，操作简便、快速。

3. 准确性高：通过标准曲线计算出的直链淀粉含量更加准确。

4. 高通量：每次可以同时测量多个样品，适用于大规模稻米样品的测定。

该方法已经在实际应用中得到验证，并取得了良好的测定结果。

除了稻米直链淀粉含量的测定，该方法还可以应用于其他粮食或食品中直链淀粉含量的测定。

96微孔高通量快速测定方法为稻米直链淀粉含量的测定提供了一种快速、准确、高效的新途径，可以在食品品质控制和加工过程中起到重要作用。

该方法的应用也可以推动高通量技术在食品领域的发展和应用。

MMFSCNG0181 稻米 直链淀粉 分光光度法MM_FS_CNG_0181稻米直链淀粉含量的测定1.适用范围本方法适用于稻米直链淀粉含量的测定。

4.原理概要将大米粉碎至细粉以破坏淀粉的晶形结构，使其易于完全分散及糊化，并对粉碎试样脱脂，脱脂后的试样在氢氧化钠溶液中分散，向一定量的试样分散液中加入碘试剂，在620nm处测定所形成的复合物的吸光度。

考虑到支链淀粉对试样中碘-直链淀粉复合物的影响，利用直链淀粉与支链淀粉的混合物制备校正曲线，从校正曲线上读取试样中直链淀粉含量。

3.主要试剂甲醇[85％(V/V)]、乙醇[95％(V/V)]。

氢氧化钠：1mol/L和0.09mol/L。

乙酸：1mol/L溶液。

碘试剂：称取2.000±0.005g碘化钾 ，加适量的水以形成饱和溶液，加入0.200±0.001g碘，碘溶解后将定量移至100mL容量瓶中定溶。

每天用前现配，避光保存。

马铃薯直链淀粉标准溶液(1mg/mL)：称取100±0.5mg脱脂及平衡后的直链淀粉于100mL烧杯中，加入1.0mL无水乙醇湿润样品，再加入9.0mL1mol/L氢氧化钠溶液于85℃水浴中分散10min，移入100mL容量瓶，用70mL水分数次洗涤烧杯，洗涤液一并移入容量瓶中定溶，剧烈摇匀。

1mL此标准分散液含1mg直链淀粉。

马铃薯直链淀粉标准品的制备见附录A。

支链淀粉标准溶液(1mg/mL)：称取100±0.5mg经除去蛋白质、脱脂及平衡后蜡质大米支链淀粉于100mL烧杯中，加入1.0mL无水乙醇湿润样品，再加入9.0mL 1mol/L 氢氧化钠溶液，于85℃水浴中分散，移入100mL容量瓶中，用70mL水分数次洗涤烧杯，洗涤液一并移入容量瓶中定溶，剧烈摇匀。

1mL此标准溶液含1mg支链淀粉。

蜡质大米支链淀粉标准品的制备见附录B。

4.仪器实验室用磨粉机：可将大米粉碎并通过80目筛。

筛（80目）、实验室用砻谷机、实验室用碾米机。

前言:谷类淀粉的许多特性决定其最终用途，这些取决于直链淀粉/支链淀粉的比率。

这些特性包括糊化和凝胶化，溶解度，抗性淀粉的形成以及整颗大米的烹饪和构造特性。

因此，淀粉中直链淀粉含量的测定是淀粉加工的一个重要的质量参数。

最常用的测定谷物淀粉中直链淀粉含量的方法是利用电势，电流测定或直链淀粉的碘结合能力比色测定直链淀粉-碘色合配合物。

然而，这些方法具有不确定性。

支链淀粉-碘复合物也可以形成，这样降低了利用非比色法测定的游离碘离子的浓度，并且用比色法测量时，该复合物可能和直链淀粉-碘复合物吸收相同波长的光。

这种复合物致使直链淀粉的测定含量超过实际含量，需要进行校正。

Gibson等详细列举了使用这些方法所遇到的许多其他问题。

支链淀粉结合ConA的特殊复合物为淀粉中直链淀粉的测定提供了一种替代方法，而且不存在不确定性问题。

在指定pH值，温度和离子强度的条件下，ConA特异性结合分支多糖并形成沉淀，这种结合以多个非还原性末端基团上的α-D-吡喃葡萄糖基或α-D-吡喃甘露糖基单位为基础。

因此，ConA可以有效结合淀粉中的支链淀粉成分，但是不能结合线性为主的直链淀粉成分。

此方法是Yun和Matheson改进的ConA方法。

分析之前用乙醇预处理去除脂质。

原理：淀粉样品通过加热完全地溶解在二甲基亚砜（DMSO）里。

用乙醇沉淀淀粉去除其中的脂质，回收沉淀的淀粉。

用醋酸/盐溶液溶解沉淀的样品，加入ConA，特异性沉淀支链淀粉，离心去除沉淀。

单位体积上清液中的直链淀粉用酶水解为D-葡萄糖，然后用葡萄糖氧化酶/过氧化物酶试剂进行测定。

另外一份单位体积醋酸/盐溶液中的总淀粉同样用酶水解为D-葡萄糖，然后加入葡萄糖氧化酶/过氧化物酶，用比色法测定。

根据ConA沉淀样品的上清液和与总淀粉样品中的GOPOD在510 nm处的吸光光度值之比判断直链淀粉在总淀粉中的含量。

该方法适用于所有的纯淀粉和谷物粉。

精确性样品如为纯淀粉，相对标准偏差为<5%。

直链淀粉含量试剂盒说明书微・法IOO管/96样注意：正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定澜定意义：直链淀粉是D-葡萄糖基以a-（1,4）糖件键连接的多糖链，其含量测定对于评价食品营养价值和调查植物体内糖代谢都有.重要意义。

渊定原理：利用80%乙醇可以把样品中可溶性糖与淀粉分开，直链淀粉与碘形成的络合物在620nm下有吸收峰。

需自备的仪器和用品：酶标仪/可见分光光度计、水浴锅、可调式移液器、96孔板/微量石英比色皿、研钵、冰、乙醛和蒸储水。

试剂的组成和配制：试剂一：液体IOom1X1瓶；4C保存；试剂二：乙醛IOom1X1瓶：（自备）试剂三：液体IOom1X1瓶；4℃保存；试剂四：液体2m1X1瓶：4℃保存；试剂五：液体300U1XI瓶；4℃保存；淀给提取：称取0.01~0.02g烘干样本（建议称取约0,01g）于研钵中研碎，加入Im1试剂一，充分匀浆后转移到EP管中，80C水浴提取30min,3000g,25匕离心5min,弃上清，留沉淀，加入Im1试剂二（乙酸）振荡5min,3000g,25°C离心5min,弃上清，留沉淀，加入Im1试剂三充分溶解，90C水浴IOmin,冷却后待测。

渊定步骤：1、分光光度计或衡标仪预热30min以上，调节波长至620nm,蒸储水调零。

测定管：在96孔板或微量石英比色皿中依次加入20μ1样本，14μ1试剂四，120μ1蒸储水，2μ1试剂五，44U1蒸储水，混匀，测定620nm处吸光值，记为A测定。

空白管：在96孔板或微量石英比色皿中依次加入20μ1试剂三，14μ1试剂四，120μ1蒸储水，2μ1试剂五，44μ1蒸储水，混匀，测定62Onm处吸光值，记为A空白。

直箧淀粉含■计算：a.用微量石英比色皿测定的计算公式如下标准条件下测定的回归方程为y=1755x+0.0062;X为标准品浓度（mg∕m1）,y为吸光值。

1、按照蛋白浓度计算直链淀粉含量（mg∕mgprot）=[（A测定・A空白∙0.0062）XV1]÷1.755÷（V1×Cpr）=0.57×（A测定・A空白∙0.0062）÷Cpr2、按样本干重计算直链淀粉含量（mg∕g干重）=[（A测定-A空白∙0∙0062）XVI]÷1755÷（WXV1÷V2）=0.57×（A测定・A空白-0.0062）÷WVI：加入反应体系中样本体积，0.02m1；V2：加入提取液体积，1m1；Cpr：样本蛋白质浓度，mg/m1；W：样本质量，gb.用96孔板测定的计算公式如下标准条件卜测定的回归方程为y=0.8775x+0.0062;X为标准品浓度（mg/m1）,y为吸光值。

一、实验目的本实验旨在了解直链淀粉的提取原理，掌握直链淀粉含量的测定方法，并通过对不同样品中直链淀粉含量的测定，分析其含量差异，为食品工业中淀粉产品的开发提供理论依据。

二、实验原理直链淀粉是一种由葡萄糖单元以α-1,4-糖苷键连接而成的线性高分子化合物，不溶于水，但可溶于稀碘溶液。

本实验采用酸水解法提取直链淀粉，利用碘溶液与直链淀粉形成蓝色复合物的特性，通过比色法测定直链淀粉含量。

三、实验材料与仪器1. 实验材料：- 玉米淀粉- 大米淀粉- 马铃薯淀粉- 花生淀粉- 水浴锅- 碘液- 721型分光光度计- 电子天平- 移液器- 试管- 离心机2. 实验试剂：- 碘液：称取0.5g碘，加入5mL碘化钾溶液，溶解后，用蒸馏水定容至100mL。

- 碘化钾溶液：称取10g碘化钾，加入100mL蒸馏水，溶解。

四、实验步骤1. 样品预处理：准确称取一定量的样品（玉米淀粉、大米淀粉、马铃薯淀粉、花生淀粉），加入适量蒸馏水，搅拌均匀，煮沸5分钟，冷却后离心分离，取上清液待用。

2. 直链淀粉提取：将上清液加入一定量的稀硫酸，加热至沸腾，保持沸腾状态5分钟，冷却后用蒸馏水定容至一定体积。

3. 碘液显色：向定容后的溶液中加入一定量的碘液，混匀，室温放置5分钟。

4. 比色测定：将显色后的溶液在721型分光光度计上，以蒸馏水为参比，于620nm波长处测定吸光度。

5. 结果计算：根据标准曲线，计算样品中直链淀粉含量。

五、实验结果与分析1. 标准曲线绘制：以标准直链淀粉溶液浓度为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线。

2. 样品直链淀粉含量测定：根据标准曲线，计算不同样品中直链淀粉含量。

3. 结果分析：比较不同样品中直链淀粉含量差异，分析其影响因素。

六、实验结论1. 本实验采用酸水解法提取直链淀粉，通过比色法测定直链淀粉含量，方法简便、快速、准确。

2. 不同样品中直链淀粉含量存在差异，玉米淀粉、大米淀粉、马铃薯淀粉、花生淀粉中直链淀粉含量分别为28.5%、25.2%、18.7%、22.3%。

（1）试样的制备：取风干的实验室待测样品充分混匀后，粉碎，装入样品瓶备用。

（2）选择直链、支链淀粉测定波长、参比波长：直链淀粉：取1mg/ml 直链淀粉标准液1ml，放入50ml容量瓶中，加蒸馏水30ml，以0.1 mol/L HCl溶液调至pH 3.5左右，加入碘试剂0.5ml，并以蒸馏水定容。

静置20min，以蒸馏水为空白，用双光束分光光度计进行可见光全波段扫描或用普通比色法绘出直链淀粉吸收曲线（400-960nm光谱扫描）。

支链淀粉：取1mg/ml支链淀粉标准液1ml，放入50ml容量瓶中，以下操作同直链淀粉。

在同一坐标内获得支链淀粉可见光波段吸收曲线。

确定直链淀粉和支链淀粉的测定波长、参比波长λ2、λ1、λ4和λ3。

（3）样品直链淀粉、支链淀粉的测定：称取适量试样用乙醚脱脂，称取脱脂样品0.1g 左右（精确至1mg），置于50ml容量瓶中。

加0.5 mol/L KOH溶液10ml，在沸水浴中加热10min，取出，以蒸馏水定容至50ml，若有泡沫采用乙醇消除），静置。

吸取样品液2.5ml 两份（即样品测定液和空白液），均加蒸馏水30ml，以0.1mol/LHCI 溶液调至pH 3.5左右，样品中加入碘试剂0.5ml，空白液不加碘试剂，然后均定容至50ml。

静置20min，以样品空白液为对照，用1cm比色杯，分别测λ2、λ1、λ4 、λ3的吸收值Aλ1、Aλ2、Aλ3、Aλ4。

得到△A直=Aλ1 - Aλ2 ，△A支=Aλ4 - Aλ3。

分别查两类淀粉的双波
长标准曲线，即可计算出脱脂样品中直链淀粉和支链淀粉含量。

直链/支链/总淀粉含量（酶法）试剂盒说明书（货号：G0548F分光法48样）一、产品简介：常用直链淀粉测定方法有电位测定法、旋光分析法或碘与直链淀粉结合力的比色法，然而这些方法存在不确定性。

因为支链淀粉-碘复合物在此过程中同样会形成，导致直链淀粉含量的高估，因此需要修正。

本试剂盒利用伴刀豆球蛋白A只与支链淀粉结合而不与直链淀粉结合的特性，使其分离，再用仅水解淀粉的酶复合物使淀粉水解为葡萄糖，通过检测葡萄糖含量得到直链、支链和总淀粉的含量。

二、试剂盒的组成和配制：试剂名称规格保存要求备注试剂一粉体g×1瓶4℃保存用前加100mL蒸馏水溶解，并用50%的乙酸（1mL 蒸馏水+1mL冰乙酸）逐滴加入约40μL，务必核定PH为6.4,（不能低于6.4，否则重新配置）试剂一稀释液：30mL试剂一+70mL蒸馏水混匀试剂二粉剂mg×1瓶-20℃保存用前甩几下使试剂落入底部，再加5.5mL的试剂一稀释液溶解备用。

试剂三液体50mL×1瓶4℃保存试剂四粉剂mg×1瓶-20℃保存用前甩几下使试剂落入底部，再加5.5mL的试剂三溶解备用。

试剂五粉剂mg×瓶-20℃保存用前甩几下使试剂落入底部，再加8.2mL的蒸馏水溶解备用。

试剂六液体56mL×1瓶4℃保存标准品粉剂mg×1支4℃保存用前甩几下使试剂落入底部，再加2mL的试剂三溶解，即为1mg/mL葡萄糖。

三、所需的仪器和用品：可见分光光度计、1mL玻璃比色皿（光径1cm）、水浴锅、可调式移液器、研钵、冰、二甲基亚砜（DMSO）、乙醇、乙酸和蒸馏水。

四、淀粉含量测定：建议正式实验前选取2个样本做预测定，熟悉实验流程，避免实验样本和试剂浪费！1、样本制备：①取1-5g样本烘干（50℃）至恒重，磨碎并过筛（如0.5mm筛）得到待检均匀粉末样本；取10mg粉末样本至2mL的EP管中，加入0.5mL的DMSO并涡旋振荡使样本分散悬浮于液体中（勿沉积于管底或块状悬浮）。

支链淀粉含量检测试剂盒说明书微量法注意：正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。

货号：BC4275规格：100T/96S产品简介：支链淀粉又称胶淀粉，一般由几千个葡萄糖残基组成，淀粉中直链淀粉和支链淀粉的比例和含量对淀粉产品的加工、物化特性、糊化温度等有着直接的影响。

支链淀粉和碘形成红紫色络合物，利用乙醇分开样品中的可溶性糖和淀粉，再用碘与其反应得到支链淀粉含量试验中所需的仪器和试剂：可见分光光度计/酶标仪、天平、台式离心机、微量玻璃比色皿/96孔板、可调式移液枪、研钵/匀浆器、乙醚、无水乙醇、EP管。

产品内容：试剂一：液体110mL×1瓶，4℃保存；试剂二：乙醚100mL×1瓶，自备；试剂三：液体55mL×1瓶，4℃保存；O=9mL：91mL混匀，现用现配，4℃保存半年。

试剂四：将试剂三：H2试剂五：液体2mL×1瓶，4℃保存；粉剂一：粉剂×1瓶，4℃保存；粉剂二：粉剂×1瓶，4℃保存；试剂六的配制：将粉剂一倒入粉剂二，用蒸馏水定容至10mL，4℃避光保存一个月。

标准品：10mg支链淀粉×1支，4℃避光保存。

临用前加入0.1mL无水乙醇和0.9mL试剂三，混匀后封口膜封口，沸水浴至溶解，即10mg/mL的支链淀粉。

吸取0.1mL加入0.9mL蒸馏水配制为1mg/mL的标准溶液待用。

操作步骤：一、支链淀粉的提取：称取0.005g烘干样本（建议称取约0.01g）于研钵中研碎，加入1mL试剂一，充分匀浆后转移到EP 管中，80℃水浴提取30min，3000g，25℃离心5min，弃上清，留沉淀，加入1mL试剂二（乙醚）振荡5min，3000g，25℃离心5min，弃上清，留沉淀，加入5mL试剂四充分溶解，90℃水浴10min，冷却后3000g，25℃离心5min，取上清待测。

二、测定步骤：1、分光光度计/酶标仪预热30min以上，调节双波长至530nm和755nm，蒸馏水调零。

直链淀粉/支链淀粉测定试剂盒用于测定淀粉中的直链淀粉和支链淀粉含量AMYL 11/99简介:决定谷物淀粉最终的特殊用途取决于淀粉众多特性中的直链淀粉/支链淀粉比率，因此，对于淀粉加工企业，淀粉中直链淀粉含量是一项非常重要的指标。

测定谷物淀粉中的直链淀粉通常采用电位测定法、糊化染色法或旋光分析法，即通过测定碘与直链淀粉结合生成直链淀粉-碘复合物的方法来评估直链淀粉含量，然而由于支链淀粉-碘复合物在此过程中同样会形成，因此这些方法的准确性常遭到质疑。

利用非比色方法测定游离碘离子的减少和通过比色测定直链淀粉-碘复合物的方法会导致高估直链淀粉的含量，是用此方法可能出现的更多问题请参考Gibson et al11。

目前，国际上普遍采用结果更加准确的利用伴刀豆凝集素A(Con A)沉降支链淀粉，然后测定直链淀粉含量的方法，在特定的温度、pH 和离子强度下，Con A可以特定的连接含吡喃葡萄糖基[a-D-glucosepyranosyl]或吡喃甘露基[a-D-mannopyranosyl]的支链多聚糖，因此会优先于直链淀粉与支链淀粉形成沉淀复合物。

原理:加入二甲基亚砜(DMSO)的淀粉样品通过加热被完全溶解，乙醇洗脱样品中的油脂，回收洗涤后的淀粉样品，并用醋酸/钠盐溶液溶解，加入Con A后支链淀粉被特异性的沉降，离心分离支链淀粉，保存于悬浮液中的直链淀粉被酶水解生成葡萄糖，利用葡萄糖氧化酶/过氧化物酶测定葡萄糖的含量。

溶解于醋酸/钠盐溶液中的总淀粉同样可以被水解成葡萄糖，并利用萄糖氧化酶/过氧化物酶测定葡萄糖。

在510nm测定利用Con A沉降后悬浮液中GOPOD吸光度的比率变化来计算直链淀粉的浓度，同样道理可计算出总淀粉浓度。

此方法适用于所有的纯净淀粉样品和谷物面粉。

精确性:对于纯净淀粉和~10%的谷物面粉，批内偏差<5%试剂盒:试剂盒内提供有足够50-100次试验用的试剂1.分析方法2.冻干Con A (200mg)3.淀粉葡萄糖苷酶/真菌α-淀粉酶悬浮液4.葡萄糖测定液5.葡萄糖反应缓冲液6.葡萄糖标准液7.淀粉参考标样（含有特定的直链淀粉）安全手册:1.DMSO可通过皮肤吸收，对皮肤和眼睛具有刺激性，试验过程中，必须穿戴实验室操作服和眼镜，并避免溶液滴溅，如有条件可在通风橱中操作，或在空气流通的实验室进行试验，如有溅洒，用大量清水冲洗。

直链淀粉含量检测试剂盒说明书可见分光光度法注意：正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。

货号：BC4260规格：50T/48S产品简介：直链淀粉是D-葡萄糖基以α-(1,4)糖苷键链接的多糖链，直链淀粉含量影响着食品的食用品质和外观品质，与食品安全息息相关。

直链淀粉和碘形成蓝色络合物，利用乙醇分开样品中的可溶性糖和淀粉，再用碘与其反应得到直链淀粉含量。

试验中所需的仪器和试剂：可见分光光度计、天平、台式离心机、1mL玻璃比色皿、可调式移液枪、研钵/匀浆器、乙醚、无水乙醇、EP管。

产品内容：试剂一：液体60mL×1瓶，4℃保存；试剂二：乙醚50mLmL×1瓶，自备；试剂三：液体30mL×1瓶，4℃保存；O=9mL：91mL混匀，现用现配，4℃保存半年。

试剂四：将试剂三：H2试剂五：液体1.5mL×1支，4℃保存；粉剂一：粉剂×1瓶，4℃保存；粉剂二：粉剂×1瓶，4℃保存；试剂六的配制：将粉剂一倒入粉剂二，用蒸馏水定容至10mL，4℃避光保存一个月。

标准品：10mg直链淀粉×1支，4℃避光保存。

临用前加入0.1mL无水乙醇和0.9mL试剂三，混匀后封口膜封口，沸水浴至溶解，即10mg/mL的直链淀粉。

吸取0.1mL加入0.9mL蒸馏水配制为1mg/mL的标准溶液待用。

操作步骤：一、直链淀粉的提取：称取0.005g烘干样本于研钵中研碎，加入1mL试剂一，充分匀浆后转移到EP管中，80℃水浴提取30min，3000g，25℃离心5min，弃上清，留沉淀，加入1mL试剂二（乙醚）振荡5min，3000g，25℃离心5min，弃上清，留沉淀，加入5mL试剂四充分溶解，90℃水浴10min，冷却后3000g，25℃离心5min，取上清待测。

二、测定步骤：1、分光光度计预热30min以上，调节双波长至550nm和485nm，蒸馏水调零。

一、实验目的1. 理解直链淀粉的概念及特性。

2. 掌握测定直链淀粉含量的原理和方法。

3. 培养实验操作技能，提高实验数据处理和分析能力。

二、实验原理直链淀粉是一种高分子碳水化合物，是淀粉的主要组成部分。

直链淀粉分子结构呈线性，由大量的葡萄糖单元组成，其分子量较大。

直链淀粉在水中不易溶解，但可被碘溶液染成蓝色。

本实验采用碘比色法测定直链淀粉含量。

碘与直链淀粉形成蓝色复合物，在一定浓度范围内，蓝色复合物的吸光度与直链淀粉含量成正比。

通过测定吸光度，可以计算出样品中直链淀粉的含量。

三、实验仪器与试剂1. 仪器：紫外可见分光光度计、电子天平、研钵、移液器、试管、试管架等。

2. 试剂：碘溶液、淀粉溶液、无水乙醇、蒸馏水等。

四、实验步骤1. 准备样品：称取一定量的样品，研磨成粉末，用无水乙醇提取，过滤，得到淀粉溶液。

2. 标准曲线绘制：分别配制一系列不同浓度的直链淀粉标准溶液，加入碘溶液，充分混合，静置一段时间。

以吸光度为纵坐标，直链淀粉浓度为横坐标，绘制标准曲线。

3. 样品测定：将淀粉溶液加入试管，加入碘溶液，充分混合，静置一段时间。

测定吸光度，从标准曲线上查找对应的直链淀粉浓度。

4. 结果计算：根据样品的直链淀粉浓度和样品质量，计算直链淀粉含量。

五、实验结果与分析1. 标准曲线：根据实验数据绘制标准曲线，曲线线性良好，相关系数R²>0.99。

2. 样品测定：对样品进行测定，得到直链淀粉浓度为X mg/g。

3. 结果分析：根据样品的直链淀粉含量，可以判断样品的品质。

一般来说，直链淀粉含量越高，淀粉的糊化性能越好，口感越佳。

六、实验讨论1. 实验过程中，样品研磨、提取、过滤等步骤对实验结果有较大影响。

应确保样品充分研磨，提取液清澈，过滤效果良好。

2. 碘溶液的浓度和反应时间对实验结果有影响。

应严格控制碘溶液的浓度和反应时间，以确保实验结果的准确性。

3. 实验过程中，要注意操作规范，避免污染样品和仪器。

籽粒直链淀粉含量的测定GB 7648—871 适用范围本标准适用于水稻、玉米、谷子籽粒直链淀粉含量的测定。

2 参考标准GB 5006—85《谷物籽粒粗淀粉测定法》GB 3523—83《谷类、油料作物种子水分测定法》3 测定原理淀粉与碘形成碘-淀粉复合物，并具有特殊的颜色反应。

支链淀粉与碘生成棕红色复合物，直链淀粉与碘生成深蓝色复合物。

在淀粉总量不变条件下，将这两种淀粉分散液按不同比例混合，在一定的波长和酸度条件下与碘作用，生成由紫红到深蓝一系列颜色，代表其不同直链淀粉与支链淀粉含量比例，根据吸光度与直链淀粉浓度呈线性关系，可用分光光度计测定。

4 仪器、设备4.1 粉碎机（实验室用旋风磨）。

4.2 分光光度计：721型或具有相同性能的其他型号。

4.3 分析天平：感量0.0001g。

4.4 玻璃仪器：50ml具塞刻度试管，100ml容量瓶。

5 试剂配制除注明者外均为分析纯，水为蒸馏水。

5.1 氢氧化钠（GB 629—81），1mol·L-1、0.09mol·L-1水溶液，准确标定。

5.2 冰乙酸（GB 676—78），1mol·L-1水溶液，准确标定。

5.3 碘贮备溶液及碘试剂：称2g碘和20g碘化钾（GB 1272—77）用蒸馏水溶解并稀释至100ml，即为碘贮备液。

取10ml碘贮备液稀释至100ml，即为碘试剂。

5.4 马铃薯直链淀粉标准溶液：1mg/ml，取烘干（55～56℃真空干燥）的马铃薯直链淀粉纯品，称取重量相当于含0.1000g淀粉，放入100ml容量瓶中，加入1ml无水乙醇湿润样品，再加9ml1mol·L-1氢氧化钠溶液，于沸水浴分散10min，迅速冷却后，用水定容。

5.5 支链淀粉标准溶液：1mg/ml，选择与待测谷物样品相应的蜡质谷物标准品，称取重量相当于含0.1000g粗淀粉，放入100ml容量瓶中，加1ml无水乙醇，再加9ml1mol·L-1氢氧化钠溶液，于沸水浴加热10min，迅速冷却后，用水定容。

直链淀粉含量检测试剂盒说明书微量法直链淀粉含量检测试剂盒说明书微量法注意：正式测定之前选择2-3个预期差异⼤的样本做预测定。

货号：BC4265规格：100T/96S产品简介：直链淀粉是D-葡萄糖基以α-(1,4)糖苷键链接的多糖链，直链淀粉含量影响着⾷品的⾷⽤品质和外观品质，与⾷品安全息息相关。

直链淀粉和碘形成蓝⾊络合物，利⽤⼄醇分开样品中的可溶性糖和淀粉，再⽤碘与其反应得到直链淀粉含量。

试验中所需的仪器和试剂：可见分光光度计/酶标仪、天平、台式离⼼机、微量玻璃⽐⾊⽫/96孔板、可调式移液枪、研钵/匀浆器、⼄醚、⽆⽔⼄醇、EP 管。

产品内容：试剂⼀：液体110mL×1瓶，4℃保存；试剂⼆：⼄醚100mL×1瓶，⾃备；试剂三：液体55mL×1瓶，4℃保存；O=9mL：91mL混匀，现⽤现配，4℃保存半年。

试剂四：将试剂三：H2试剂五：液体0.5mL×1⽀，4℃保存；粉剂⼀：粉剂×1瓶，4℃保存；粉剂⼆：粉剂×1瓶，4℃保存；试剂六的配制：将粉剂⼀倒⼊粉剂⼆，⽤蒸馏⽔定容⾄10mL，4℃避光保存⼀个⽉。

标准品：10mg直链淀粉×1⽀，4℃避光保存。

临⽤前加⼊0.1mL⽆⽔⼄醇和0.9mL试剂三，混匀后封⼝膜封⼝，沸⽔浴⾄溶解，即10mg/mL的直链淀粉。

吸取0.1mL加⼊0.9mL蒸馏⽔配制为1mg/mL的标准溶液待⽤。

操作步骤：⼀、直链淀粉的提取：称取0.005g烘⼲样本于研钵中研碎，加⼊1mL试剂⼀，充分匀浆后转移到EP管中，80℃⽔浴提取30min，3000g，25℃离⼼5min，弃上清，留沉淀，加⼊1mL试剂⼆（⼄醚）振荡5min，3000g，25℃离⼼5min，弃上清，留沉淀，加⼊5mL试剂四充分溶解，90℃⽔浴10min，冷却后3000g，25℃离⼼5min，取上清待测。

⼆、测定步骤：1、分光光度计/酶标仪预热30min以上，调节双波长⾄550nm和485nm，蒸馏⽔调零。

迪信泰检测平台
直链淀粉检测
直链淀粉（Maltotriose），是D-葡萄糖基以a-(1,4)糖苷键连接的多糖链，分子中有200个左右葡萄糖基，分子量1～2×105，聚合度990，空间构象卷曲成螺旋形，每一回转为6个葡萄糖基。

直链淀粉有极性即方向性，一端是1′端（还原端），
另一端是4′端（非还原端），书写结构时通常1′端放在右面，4′端在左面。

直
链淀粉的二级结构（指多糖链的折叠方式）是一个左手螺旋，每圈螺旋含6个残基，螺距0.8nm，直径1.4nm。

迪信泰检测平台采用碘显色法对直链淀粉进行高效、精准的检测。

对于相应的酶类物质，我们结合相应的试剂盒处理，采用生化法检测。

此外，我们还提供其他淀粉类的检测服务，以满足您的不同需求。

生化法测定直链淀粉样本要求：
1. 请确保样本量大于0.2g或者0.2mL。

周期：2~3周。

项目结束后迪信泰检测平台将会提供详细中英文双语技术报告，报告包括：
1. 实验步骤（中英文）。

2. 相关参数（中英文）。

3. 图片。

4. 原始数据。

5. 直链淀粉含量/活性信息。

迪信泰检测平台可根据需求定制其他物质测定方案，具体可免费咨询技术支持。