血清蛋白电泳临床意义
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血清免疫固定电泳临床意义
血清免疫固定电泳是一种能够区分蛋白类型的技术手段,主要是通过分离血清蛋白的各种成分,从而达到辨别其类型的目的。
血清免疫固定电泳技术是将血清、血浆等在凝胶或薄膜处,使血液中的抗原与相应抗体发生沉淀反应,形成免疫复合物,对其进行染色并观测结果的技术,主要可用于分析抗体成分、分析蛋白成分两方面。
1、分析抗体成分:血清免疫固定电泳可用于抗原或抗体成分、纯度的分析,常用于免疫反应后不同抗体组分的动态变化研究,了解红斑狼疮、类风湿关节炎等免疫疾病的进展;
2、分析蛋白成分:还可用于正常或异常体液蛋白的分析、检测和鉴定,可辅助诊断无丙种球蛋白血症、冷球蛋白血症等,还可用于多发性骨髓瘤、白血病、系统性红斑狼疮、肝病等患者的血清蛋白成分的分析,帮助鉴别疾病,了解疾病发展,对于多发性骨髓瘤患者血清M蛋白的检测和鉴定、多发性骨髓瘤疾病诊断有重要意义。
【名称】血清蛋白电泳【英文名】serum protein electrophoresis【别名】【概述】蛋白质等生物分子在缓冲液中带负电荷或正电荷,在电场中向阳极或阴极运动,称为电泳(electmphomsis)。
由于其等电点不同,分子大小、形状和荷质比的不同,使不同蛋白质分子具有不同的电泳迁移率,在一定的支持介质中可借以分离各种蛋白质。
常用的电泳技术有:醋酸纤维素薄膜电泳、琼脂糖凝胶电泳、聚丙烯酰胺凝胶电泳、免疫电泳等。
血清蛋白电泳以醋酸纤维素薄膜应用最为普遍。
【原理】血清中各种蛋白质都有其特有的等电点,各种蛋白质在各自的等电点时呈电中性状态,它的分子所带正电荷与所带负电荷量相等。
将蛋白质置于pH比值等电点较高的缓冲液中,它们将形成带负电荷的质点,在电场中均向正极泳动。
由于血清蛋白质的等电点不同,带电荷的量多少差异,蛋白质分子量大小也不同,所以在同一电场中泳动速度也不同。
蛋白质分子越小带电越多,移动速度越快;分子越大而带电越少,移动速度越慢。
按其泳动速度可以分出以下的主要区带,从正极端起,依次为白蛋白、α球蛋白和α球蛋白,β球蛋白和γ球蛋白5条区带。
【试剂】(1)巴比妥-巴比妥钠缓冲液(pH8.6±0.1、μ=0.06):以巴比妥2.21g、巴比妥钠12.36g于500ml蒸馏水中,加热溶解,待冷却至室温后加蒸馏水至1000ml。
(2)染色液:①丽春红S染色液:丽春红9.04g、三氯醋酸6g,用蒸馏水溶解,并稀释至100ml。
②氨基黑10B染色液:氨基黑10B 0.1g,溶于无水乙醇20ml中,加冰醋酸5ml甘油0.5ml使溶解。
然后将磺柳酸2.5 g,溶于少量蒸馏水中,加入前液,再以蒸馏水补足至100ml。
(3)漂洗液:①30ml/L醋酸溶液:用于丽春红染色的漂洗。
②甲醇45ml,冰醋酸5ml和蒸馏水50ml混匀。
用于氨基黑10B染色的漂洗。
(4)透明液:柠檬酸(C H Na O·2H O)21g和N-甲基-吡咯烷酮150g,用蒸馏水溶解,并稀释到500ml。
血清蛋白醋酸纤维薄膜电泳的临床意义
首先,我们需要明确的是,血清蛋白醋酸纤维薄膜电泳(SDS-PAGE)是一种常用的电泳技术,用于分析血清中不同蛋白质的浓度,从而了解血清中某些特定的蛋白质的变化情况。
它主要用于检测血清中球蛋白,如血清白蛋白,球蛋白,糖蛋白,凝血酶原,凝血抑制因子,C-反应蛋白等。
血清蛋白醋酸纤维薄膜电泳的临床意义在于,可以帮助医生快速准确地诊断患者的疾病。
例如,血清中白蛋白和球蛋白的浓度可以帮助诊断肝病,糖蛋白的浓度可以帮助诊断糖尿病,而C-反应蛋白的浓度可以帮助诊断肺炎等疾病。
此外,血清蛋白醋酸纤维薄膜电泳还可以作为一种检测患者身体状况的工具,可以检测患者身体是否发生了某种变化。
这对于监测患者的身体状况和治疗效果非常重要,因为它可以检测出患者身体的细微变化,从而及时调整治疗方案,以改善患者的病情。
总之,血清蛋白醋酸纤维薄膜电泳的临床意义非常重要,可以帮助医生准确快速的诊断患者的疾病,并作为一种检测患者身体状况的工具,从而及时调整治疗方案,以改善患者的病情。
血清蛋白电泳的临床意义血清蛋白电泳(serum protein electrophoresis, SPE)是一种常用的临床检查方法,用于评估血清蛋白的种类和含量。
它是通过电泳将血清中的蛋白质分离,根据其不同的迁移速度和电荷大小来确定蛋白质的种类和量。
血清蛋白电泳可以用于许多不同的临床情况,具有广泛的临床应用价值。
血清蛋白电泳的主要用途是分析血液中的蛋白质组成。
血液中的蛋白质主要由白蛋白、球蛋白和补体三部分组成。
白蛋白占血清蛋白总量的60%,球蛋白占30%,补体占10%。
血清蛋白的分布在正常情况下是稳定的,但是在某些疾病条件下,血清蛋白的分布可能会发生改变。
血清蛋白电泳可以为医生提供血清蛋白的详细信息,帮助他们诊断和治疗各种疾病。
血清蛋白电泳可以用于诊断多种疾病,例如:1.多发性骨髓瘤:多发性骨髓瘤是一种恶性肿瘤,白蛋白水平通常低于正常值,球蛋白水平则高于正常值。
在多数情况下,瘤细胞会产生单克隆免疫球蛋白,这种免疫球蛋白可以通过血清蛋白电泳检测到。
2.淋巴瘤:淋巴瘤是一种癌症,通常表现为球蛋白生产的增加和血清蛋白的异常分布。
血清蛋白电泳可以帮助医生诊断淋巴瘤。
3.炎症性疾病:炎症性疾病,如类风湿性关节炎、狼疮等,可以导致血清蛋白异常分布。
血清蛋白电泳可以帮助医生确定疾病的类型和严重程度。
4.肝病:肝病可以导致血清蛋白的异常分布,例如肝硬化可以导致白蛋白水平下降。
血清蛋白电泳可以辅助医生对肝病进行诊断和治疗。
5.蛋白病:蛋白病包括一组非常规的疾病,这些疾病都与蛋白质代谢畸形有关。
血清蛋白电泳可以帮助医生确定蛋白病的类型和严重程度。
总之,血清蛋白电泳是一种非常有用的临床检查方法,可以帮助医生诊断和治疗许多疾病。
对于那些需要血清蛋白检查的患者来说,血清蛋白电泳是一种可靠和有效的检查方法。
各位临床医生:我科新购入的全自动蛋白电泳分析仪,可进行血清蛋白电泳及血红蛋白电泳检测,现开展将近一个月了,从开展的情况看,血红蛋白电泳检测项目比较多,可血清蛋白电泳开单比较少,现用图表的格式将血清蛋白电泳检测的临床意义提供给各位,敬请各位临床医生多开单检查!血清蛋白电泳临床意义图表图1 典型的正常的血清蛋白电泳图谱图2 多发性骨髓瘤异常的血清蛋白电泳带型。
请注意gamma区域的带型特点表3.表4:1)持续高浓度型:诊断的特异性高,中晚期肝癌居多;2)马鞍型:较少见,但容易漏诊,当AFP增高在后峰时,往往已出现明显的肝癌表现;3)急剧上升型:多见于肿瘤发生迅速,恶性程度较高的肝癌,但是偶见AFP急剧升高,又迅速下降伴ALT升高的急性肝坏死;4)稳定上升型,定期检查,稳定上升,最有诊断价值;5)反复波浪型,多见于急慢性良性肝病。
并且人血清中的甲胎蛋白浓度的升降对于病情的发展、疗效的观察、肝癌的复发观察有很大的价值。
本公司推出的甲胎蛋白试剂盒是检测人血清中的甲胎蛋白水平,胶乳增强的免疫方法,有较高的准确性和重复性。
HCY:用于检测血浆或血清中的同型半胱氨酸同型半胱氨酸(Hcy)是蛋氨酸代谢产生的一种含硫的氨基酸,80%的Hcy在血中通过二硫键与蛋白结合,只有很少一部分游离同型半胱氨酸参加循环。
Hcy水平与心血管疾病密切相关。
是心血管疾病发病的一个重要危险因子。
血液中增高的Hcy因为刺激血管壁引起动脉血管的损伤,导致炎症和管壁的斑块形成,最终引起心脏血流受阻。
高同型半胱氨酸尿症患者,由于严重遗传缺陷影响Hcy代谢,造成高Hcy血症。
轻微的遗传缺陷或VB营养缺乏会伴随中度或轻度的Hcy升高,也会增加心脏病的危险。
Hcy升高还可引起神经管畸形及先天性畸形等出生缺陷类疾病HbA1C:糖化血红蛋白是美国糖尿病协会,英国糖尿病研究计划和糖尿病控制和临床实验室推荐的一项重要检测项目。
目前,糖化血红蛋白实验反映糖尿病病人近2-3个月的平均血糖水平,用于糖尿病病人的监测管理。
实验一血清蛋白电泳(醋酸纤维薄膜法)[目的]了解电泳法分离蛋白质的原理、操作方法及临床意义。
[原理]带电荷的蛋白质,在电场中向着与其所带电荷电性相反的电极泳动称为电泳。
血清中各种蛋白质的等电点不同,但大都在pH7以下,若将血清置于pH8.6的缓冲液中,则这些蛋白质均带负电,在电场中都向阳极移动。
由于各种蛋白质在同一pH环境中所带负电荷多少及分子大小不同,所以在电场中向阳极泳动速度也不同。
蛋白质分子小而带电荷多者,泳动速度快;反之,则泳动速度慢。
因此可将血清蛋白质依次分为清蛋白、a1-球蛋白、a2-球蛋白、b-球蛋白和g球蛋白五条区带,经染色可计算出各血清蛋白质含量的百分数。
醋酸纤维薄膜电泳具有微量、快速、简便及分辨率较高等优点,广泛应用于血清蛋白、血红蛋白、脂蛋白、同工酶的分离和测定。
[仪器与材料]1.仪器:电泳仪、电泳槽、分光光度计或光密度仪。
2.材料:醋酸纤维薄膜、培养皿、滤纸、镊子、点样器、直尺、铅笔、剪刀等。
[试剂]1.巴比妥—巴比妥钠缓冲液(pH8.6,m=0.06)。
称取巴比妥2.21克和巴比妥钠12.36克,溶于500毫升蒸馏水中,加热溶解。
待冷至室温后,再加蒸馏水稀释至1000毫升。
2.染色液。
称取丽春红S0.4克及三氯醋酸6克;用蒸馏水溶解,并稀释至100毫升。
3.漂洗液。
3%(V/V)醋酸溶液。
4.透明液。
取无水乙醇75毫升和冰醋酸25毫升混匀备用。
5.0.4mol/L氢氧化钠溶液。
6.40%(V/V)醋酸溶液。
[操作]1.薄膜的准备:取醋纤薄膜(2厘米*8厘米)在毛面的一端约1.5厘米处,用铅笔轻划一直线,表露点样位置并编号。
然后将此薄膜置于巴比妥缓冲液中浸泡,待充分浸透(即膜条无白斑时)后取出,用洁净滤纸轻轻吸去表面的多余缓冲液。
2.点样。
取少量血清置于普通玻璃板上,用点样器的钢口蘸取血清(约3~5ml),随后将钢口垂直“印”在点样线上,待血清渗入膜后移开点样器。
点样应注意,要适量、均匀和垂直,并避免弄破薄膜。
诊断学知识姓名:刘佳得分:0.00 总分:100 及格分:60 考试时间:2016-07一 . 单选题(共80题,每题1分)1 .关于血清蛋白电泳的临床意义,下列哪项是正确的?A . 肝细胞受损时,血清白蛋白、α1球蛋白、α2球蛋白增加B . 受损肝细胞作为自身抗原刺激淋巴系统,使γ球蛋白增加C . 肝硬变时,白蛋白中度或高度减少,γ球蛋白亦明显减少D . 轻症急性肝炎时,γ球蛋白可以明显增多E . 病情加重后即有α球蛋白和β球蛋白增加2 .慢性肾炎晚期出现大量蛋白尿时,尿蛋白为:A . 小分子量蛋白尿B . 中分子量蛋白尿C . 高中分子量蛋白尿D . 大分子量蛋白尿E . 混合性蛋白尿3 . Cabot环形成的可能原因是:A . 可能是红细胞内存在异常血红蛋白所致B . 能是胞浆中脂蛋白变性或纺缍体的残留物所致C . 可能是血红蛋白合成过程中原卟啉与铁结合受阻所致D . 可能是胞核残存物E . 有核红细胞脱核时产生4 .网织红细胞的叙述正确的是:A . 是介于中幼红细胞与晚幼红细胞之间的过渡型红细胞B . 是晚幼红细胞到成熟红细胞之间尚未完全成熟的红细胞C . 成人参考值为5%~15%D . 即幼稚红细胞E . 外周血涂片经瑞氏染色,细胞体积比成熟红细胞略小的嗜多色性红细胞即网织红细胞5 . S2有两个主要成分即A2和P2,P2在哪个部位听诊最清楚?A . 心尖部B . 胸骨左缘第2肋间C . 胸骨右缘第2肋间D . 胸骨左缘第3肋间E . 胸骨体下端左缘6 . S1,S2同时减弱见于:A . 二尖瓣关闭不全B . 房颤C . 主动脉粥样硬化D . 发热E . 心包积液7 .血小板粘附功能增高见于:A . SLEB . 血小板无力症C . 甲状腺功能亢进D . 骨髓增生性疾病E . von Willebrand病8 .触诊正常脾脏,下列叙述哪项正确?A . 坐位前倾可触及B . 左侧卧位可触及C . 右侧卧位可触及D . 仰卧位可触及E . 正常情况下脾不能被触及9 .关于脊柱的活动度,下列哪项是错误的?A . 正常人脊柱有一定的活动度,但各部活动范围明显不同B . 颈椎段与腰椎段活动范围最小C . 胸推段活动范围较小D . 骶椎各节已融合成骨块状,几乎无活动性E . 尾推各节融合固定无活动性10 .某患者,心电图表现为:V1、V2导联QRS波群呈rS型,V5、V6导联呈R 型,且顶峰有明显切迹,QRS时间0.11s,应考虑为:A . 完全性左束支传导阻滞B . 完全性右束支传导阻滞C . 左前分支传导阻滞D . 左后分支传导阻滞E . 不完全性左束支传导阻滞11 .关于抗凝血酶Ⅲ的临床意义,下列哪项是正确的?A . AT-Ⅲ活性增高为异常,活性减低无临床意义B . AT-Ⅲ活性减低为异常,增常无临床意义C . AT-Ⅲ活性增高或减低,均可导致出血D . AT-Ⅲ活性增高可导致出血,减低可导致血栓形成E . AT-Ⅲ活性减低可导致出血,增高可导致血栓形成12 .下列关于间接叩诊法的叙述,哪项是正确的?A . 为了更好地分辨叩诊音,在每个部位叩诊时,每次均可叩4~5次B . 确定心、肝的相对浊音界,宜采取轻叩诊法C . 确定心、肝绝对浊音界,宜采取重叩诊法D . 病灶位置距体表深达7cm左右,需使用中度叩诊法E . 确定肝上界时,应采取重叩诊法13 .正常成人血钾浓度(mmol/L)为:A . 2.5~3.5B . 3.5~5.5C . 4.5~5.5D . 3~5E . 4~614 .内源性甘油三酯主要由血浆中哪一种脂蛋白运输?A . HDLB . LDLC . VLDLD . CME . Lp(a)15 .某患者,男,60岁,有高血压病史10年,其心电图表现为:R V5=3.0mV,R V5+S V1=4.5mV,电轴为-40°,QRS时间为0.10s,应考虑为:A . 左房肥大B . 右房肥大C . 左室肥大D . 右室肥大E . 双心室肥大16 .心脏听诊,听到“大炮音”应考虑哪种可能?A . 二尖瓣狭窄B . P-R间期缩短C . 运动或发热D . 完全性房室传导阻滞E . 甲状腺功能亢进17 .风湿性二尖瓣关闭不全患者可有下列哪项症状?A . 咳嗽、咯B . 晕厥C . 心绞痛D . 吞咽困难E . 乏力、心悸18 .脑脊液抗酸染色主要查找:A . 脑膜炎奈瑟菌B . 肺炎链球菌C . 结核杆菌D . 新型隐球菌E . 铜绿假单胞菌19 .男,25岁,畏寒,发热8天,体温为39℃,全身不适,乏力,稍感腹胀,曾用过青霉素治疗无效,检查发现胸腹部皮肤有数个鲜红色圆形的皮疹,约3mm大小,指压褪色。
血清蛋白质醋酸纤维薄膜电泳实验报告
实验临床意义:
临床意义血清蛋白质醋酸纤维薄膜电泳在临床上常用于分析血、尿等样品中的蛋白质,供临床上诊断肝、肾等疾病参考。
如肾病综合症患者,血浆蛋白中小分子量的白蛋白漏出随尿液排出体外,导致醋酸纤维素薄膜电泳图谱中白蛋白区带明显变小变浅。
又如,慢性肝炎和肝硬化患者,由于肝细胞受损,肝脏合成血浆蛋白质的能力大大下降,使血浆白蛋白显著降低,γ 球蛋白相对显著增加。
多发性骨髓瘤患者血清蛋白质醋酸纤维素薄膜电泳图谱中可见不正常的球蛋白条带。
实验注意事项:
1. 电泳时,电压应控制在 110 ~ 140V ,不能过高,若电压
太高,产热量大,则蛋白质标本会破坏,并且电压高则带电颗粒移
动速度快,分离效果不理想。
2. 醋酸纤维素薄膜在电泳前,一定要在缓冲液中浸透,否则有
碍电泳分离,最好是浸泡过夜,效果最佳。
3. 点样时样品一定要点在无光泽面,否则很难吸入,点样量
不宜过多(血清样品最适宜3μl )。
其原因是醋酸纤维素薄膜承受
蛋白质有限。
量过多则分子量相近的物质相互争夺迁移而重叠,影响结果观察。
4. 电泳开始后,不能再取放薄膜,以防触电。
如必需进行,要先关闭电源。