正确分析血清蛋白电泳扫描图

各位临床医生：我科新购入的全自动蛋白电泳分析仪，可进行血清蛋白电泳及血红蛋白电泳检测，现开展将近一个月了，从开展的情况看，血红蛋白电泳检测项目比较多，可血清蛋白电泳开单比较少，现用图表的格式将血清蛋白电泳检测的临床意义提供给各位，敬请各位临床医生多开单检查！血清蛋白电泳临床意义图表图1 典型的正常的血清蛋白电泳图谱图2 多发性骨髓瘤异常的血清蛋白电泳带型。

请注意gamma区域的带型特点表3.表4：1）持续高浓度型：诊断的特异性高，中晚期肝癌居多；2）马鞍型：较少见，但容易漏诊，当AFP增高在后峰时，往往已出现明显的肝癌表现；3）急剧上升型：多见于肿瘤发生迅速，恶性程度较高的肝癌，但是偶见AFP急剧升高，又迅速下降伴ALT升高的急性肝坏死；4）稳定上升型，定期检查，稳定上升，最有诊断价值；5）反复波浪型，多见于急慢性良性肝病。

并且人血清中的甲胎蛋白浓度的升降对于病情的发展、疗效的观察、肝癌的复发观察有很大的价值。

本公司推出的甲胎蛋白试剂盒是检测人血清中的甲胎蛋白水平，胶乳增强的免疫方法，有较高的准确性和重复性。

HCY:用于检测血浆或血清中的同型半胱氨酸同型半胱氨酸（Hcy）是蛋氨酸代谢产生的一种含硫的氨基酸，80%的Hcy在血中通过二硫键与蛋白结合，只有很少一部分游离同型半胱氨酸参加循环。

Hcy水平与心血管疾病密切相关。

是心血管疾病发病的一个重要危险因子。

血液中增高的Hcy因为刺激血管壁引起动脉血管的损伤，导致炎症和管壁的斑块形成，最终引起心脏血流受阻。

高同型半胱氨酸尿症患者，由于严重遗传缺陷影响Hcy代谢，造成高Hcy血症。

轻微的遗传缺陷或VB营养缺乏会伴随中度或轻度的Hcy升高，也会增加心脏病的危险。

Hcy升高还可引起神经管畸形及先天性畸形等出生缺陷类疾病HbA1C：糖化血红蛋白是美国糖尿病协会，英国糖尿病研究计划和糖尿病控制和临床实验室推荐的一项重要检测项目。

目前，糖化血红蛋白实验反映糖尿病病人近2－3个月的平均血糖水平，用于糖尿病病人的监测管理。

实验五血清蛋白质醋酸纤维薄膜电泳定量分析【目的要求】1.掌握血清蛋白电泳及其比色定量的基本原理、操作程序、技术要领和影响定量结果的主要因素及其排除2.熟悉血清蛋白醋纤膜电泳图谱的含义及临床意义。

3.了解血清蛋白醋纤膜电泳图谱的透明和扫描定量分析。

【实验原理】血清中各组分蛋白质的等电点均低于pH8.6，将其放在醋纤薄膜载体上，置于有pH8.6的电极缓冲液通过的电场中作电泳时都带负电荷、向正极移动。

由于它们等电点不同，荷电量不等，分子大小各异，在电场中移动速度不同而被彼此分离。

电泳膜经染色、漂洗后，便呈现出五条不连续的区带蛋白电泳图谱，从正极端起，依次为：清蛋白、α1-球蛋白、α2-球蛋白、β-球蛋白、γ-球蛋白。

由于蛋白质含量与吸附的染料有一定正比关系，据此，剪下各条谱带，用碱液洗下蛋白质吸附的染料，进行比色分析，即可求出血清样品中各区带蛋白质的百分含量。

此外，也可对透明处理过的电泳图谱进行扫描分析，依据扫描曲线中各区带的面积与总面积之比，亦可求算出各区带蛋白质的百分含量。

【实验准备】一、器材1.电泳仪和醋酸纤维薄膜电泳槽2.醋酸纤维薄膜（8.0×2.0 cm）3.721分光光度计4.万用电表5.加样器、无损伤薄膜镊、铅笔、滤纸、染液缸、漂洗缸、载玻片等6.试管（10cc）及试管架二、试剂1.pH为8.6，离子强度0.06的巴比妥电极缓冲液称取巴比妥钠12.76g，巴比妥1.66g，加水溶解并定容至1000ml即成。

2.氨基黑10B染色液取氨基黑10B 0.5g溶于50ml甲醇中，再加入冰醋酸10ml，蒸馏水40ml。

3.漂洗液用95%乙醇45ml加冰醋酸5ml、蒸馏水50ml混匀，室温贮存。

4.0.4mol/L NaOH溶液5.透明液：A液：15ml冰醋酸+85ml 95%乙醇；B液：25 ml冰醋酸+75ml 95%乙醇。

【实验操作】一、电泳详细操作步骤及要求见Ⅰ-03常规电泳技术训练。

血清蛋白电泳标准操作程序1规范血清蛋白电泳检测的操作程序，以保证临床检测结果的准确性。

2检测方法为电泳技术。

原理是：粒子在溶液中带有净电荷才能在电场中移动，其带电状态取决于粒子表面的化学基团和溶液的pH值。

蛋白质在电场中不再移动，溶液的这一pH值为该蛋白质的等电点。

若溶液pH处于等电点酸侧，则蛋白质带正电荷，向负极移动。

若溶液pH处于等电点碱侧，则蛋白质带负电荷，向正极移动。

血清中各种蛋白质等电点不同，在同一电场中泳动速度不同。

电泳后用酸兰染色，通过扫描检测。

白蛋白带负电荷最多，因此泳动在最靠阳极，以后依次为α-1 球蛋白、α-2 球蛋白、β球蛋白、γ球蛋白。

3血清。

4黄色胶头促凝试管，有促凝剂。

抽取静脉血 2~3ml 置黄头试管内送检。

血清样本 2~8℃可稳定 1 周。

如果需要延长保存样品时间，需将样品保存在-20℃条件下。

55.1 试剂：美国海伦娜血清蛋白电泳检测试剂盒。

5.1.1 染色液 I：取丽春红浓缩液一瓶(试剂盒内) 过滤，用 5 份甲醇、 5 份蒸镏水、1 份冰醋酸混匀稀释至 1000 ml ，装入专用壶内备用。

5.1.2 脱色液I：5 份甲醇、 5 份蒸镏水、 1 份冰醋酸混匀稀释至 1000ml ，装入专用壶内备用。

5.1.3 染色液 II：取酸性蓝染色试剂一瓶(试剂盒内)，用 50%冰醋酸 100ml ，使其完全溶解并过滤，加蒸镏水混匀稀释至 1000 ml ，装入专用壶内备用。

5.1.4 脱色液 II：配制 5%冰醋酸 1000 ml ，装入专用壶内备用。

5.2 试剂保存与有效期5.2.1 新购试剂保存于室温，勿冷冻，在有效期内使用。

5.3 仪器： SPIFE4000 电泳仪。

66.1 打开 SPIFE4000 全自动电泳分析系统主电源，然后打开电脑点击 SPIFE4000 图标使仪器初始化。

6.2 灌注样品处理器。

点击 Maintenance→ Prime→ Sample Delivery system 进行灌洗。