快速瑞氏染液
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外周血涂片的制作方法1、采血:胶头滴管吸取血液,血液直接滴加到洗净烘干并且硅化过的载玻片的一头。
2、推片:将推片的平齐端置载玻片上血滴的稍前方,将推片略向后移使与血液相接触,血液遂于推片与载玻片的夹角间散开。
以约30度的夹角向前均匀地推动推片即可制成血涂片。
其薄厚度要适中,分布均匀而无空泡,边缘整齐。
3、固定:推片做好后,涂片后潮干固定,以免细胞漂落太多,影响制片质量,甲醇固定液固定:涂片直接浸入固定液内,因固定液充足,固定效果较好。
但细胞易脱落而发生交叉污染,因此应该分瓶固定,固定液回收时应过滤。
多数标本用此法固定,固定时间15-30分钟。
4、染色:瑞氏-基姆萨双染1)从固定缸里取出载片后,在室温下通风晾干。
将载片平放在玻璃板上准备染色。
2)所用的两种染料事先过滤好(染料中有颗粒物,会沉淀在载玻片上影响载片的质量)3)将染料滴加到载玻片上以后,让其均匀覆盖住载片上的血细胞,染色时间约为2到3分钟。
等瑞氏染液有变红的趋势时,迅速滴加与瑞氏染液等量的PBS溶液。
继续染色2到3分钟。
4)染色时间到后,用PBS溶液冲片,小股水流,防止将大量的细胞从载片上冲落下来从而影响以后的观察。
冲片结束后将载片放到阴凉处风干。
5)在玻璃板上放好牙签,将风干的载片倒扣在一根牙签上,从背面滴加基姆萨染液进行扣染。
染色时间约为10分钟。
时间到后用蒸馏水冲片,洗净染液后常温下风干。
5、封片:中性树胶封片,制作成永久涂片。
6、显微观察:将干燥后的血涂片置显微镜下观察。
用低倍镜观察血涂片体、尾交界处的血细胞。
在显微镜下,成熟红细胞染成粉红色;血小板染成紫色;中性粒细胞胞质染成粉红色,含紫红色颗粒;嗜酸性粒细胞含大的桔黄色颗粒;嗜碱性粒细胞胞质含有大量深紫蓝色颗粒;单核细胞胞质染成灰蓝色;淋巴细胞胞质染成淡蓝色。
所需材料:硅化过的载玻片,推片,甲醇瑞氏-基姆萨双染,过滤,PBS,牙签,蒸馏水,中性树胶,显微镜,吸耳球1.载玻片使用前,必须仔细清洗,并用乙醇或软布清洁。
瑞氏染色原理
瑞氏染色原理是一种用于生物组织和细胞染色的技术,它是通过染色剂与细胞
或组织中的特定成分发生化学反应,从而使这些成分显现出颜色,从而进行显微镜观察和分析的方法。
瑞氏染色原理在生物学、医学和生物化学领域有着广泛的应用,它是研究细胞结构和功能的重要手段之一。
瑞氏染色原理的基本原理是利用染色剂与细胞或组织中的特定成分发生化学反应,从而形成着色物质,使这些成分显现出颜色。
常用的染色剂包括伊红、伊红染色、伊红-嘌呤染色、伊红-伊红染色、伊红-嘌呤-绿染色等。
这些染色剂可以选择
性地染色细胞核、细胞质、细胞器或特定的细胞结构,从而使它们在显微镜下清晰可见。
瑞氏染色原理的应用非常广泛,它可以用于观察细胞的形态、结构和功能,研
究细胞生物学、组织学和病理学等领域。
在医学诊断中,瑞氏染色原理常用于组织病理学检查,通过染色可以清晰地显示出肿瘤细胞、病原微生物等,为临床诊断提供重要依据。
在生物学研究中,瑞氏染色原理也被广泛应用于细胞生物学和分子生物学的研究中,帮助科学家们观察和分析细胞的结构和功能。
瑞氏染色原理的优点是操作简便、成本低廉、结果直观,可以快速获得细胞和
组织的显微镜图像,为科研和临床诊断提供重要的信息。
然而,瑞氏染色原理也存在一些局限性,比如染色结果受到操作技术和染色剂质量的影响,染色效果可能不稳定;染色过程可能会影响细胞和组织的形态和结构,导致染色结果不真实等。
总的来说,瑞氏染色原理是一种重要的生物组织和细胞染色技术,它在生物学、医学和生物化学领域有着广泛的应用。
随着科学技术的不断发展,瑞氏染色原理的方法和应用也在不断地完善和拓展,为科研和临床诊断提供更多更好的帮助。
瑞氏-姬姆萨染液编码名称规格单位北京华越洋生物GT79355 瑞氏-姬姆萨染液100ml 瓶瑞氏-姬姆萨染液说明:华越洋瑞氏-姬姆萨染液是一种复合染液,兼有瑞氏和姬姆萨染液二者优点,主要应用于血液和骨髓涂片染色。
各种细胞及细胞的各种成分由于其化学性质不同,对瑞氏-姬姆萨染色液中的酸性染料和碱性染料的亲和力也不同,因此,标本涂片经瑞氏-姬姆萨染色液染色后,相应各类细胞呈现不同的着色,从而达到辨别其形态特征的目的。
姬姆萨染色液对胞浆着色力较强,能较好的显示胞浆的嗜碱性程度,着色清晰,色泽纯正,但是对胞核着色偏深,核结构显示较差。
瑞氏染色对细胞核着色程度适中,细胞核结构和色泽清晰艳丽,对核结构的识别较佳,但对胞浆着色较差,故采用瑞氏姬姆萨混合染色,具有染色效果好,对比清晰,操作简便等特点。
瑞氏-姬姆萨染液操作说明:华越洋瑞氏-姬姆萨染液可作为多种组织或细胞的染色使用,不同组织、细胞,不同的用途可以有不同的使用方法。
具体方法请根据自己需求参考既有文献,瑞氏-姬姆萨染液以涂片为例,仅供参考。
1、取涂片、自然干燥。
2、滴加瑞氏-姬姆萨染液2-3 滴覆盖整个标本涂片,染1-2 分钟。
3、滴加等量0.01M磷酸盐缓冲液(pH6.4-6.8),轻轻晃动玻片, 与瑞氏-姬姆萨染色液充分混匀,染色3-5 分钟。
4、水洗、吸干、镜检。
5、染色后胞浆和胞核的染色清晰分明,细胞核着色呈深浅不同的紫红色,胞浆呈浅红色,胞浆中颗粒区分明显。
瑞氏-姬姆萨染液注意事项:1、涂片厚薄适宜,涂片干透后固定,否则细胞在染色过程中容易脱落。
2、所加染液不能过少,以免蒸发而使染料沉淀。
冲洗时间不能过久,以防脱色。
3、染色对pH 十分敏感,稀释染液必须用缓冲液,冲洗用水应接近中性,否则可能会导致细胞染色异常,形态难以识别,甚至错误。
4、染色过淡可以复染,复染时应先加缓冲液,然后加染液。
染色过深可用流水冲洗或浸泡,也可用甲醇脱色。
瑞氏-姬姆萨染液相关染色液:名称规格名称规格中性红染色液(0.33%)500ml结晶紫水溶液(0.1%)100ml中性红染色液(0.5%)500ml核固红染色液(0.1%)100ml中性红染色液(0.1% 常规染色)100ml天狼星红染色试剂盒2*50mLTTC染色液(0.4%)500ml0.5%伊文斯蓝/埃文斯蓝溶液100mLMasson三色染色试剂盒7×50ml茜素红S染色液(1%,pH4.2)100mL普鲁士蓝染色试剂盒2*50ml0.2%核固红染色液100ml尼氏染色液(焦油紫法)2*100ml改良Lillie-Mayer苏木素染色液100ml吕氏碱性美蓝染色液(0.4%)100ml改良Lillie-Mayer苏木素染色液500ml亮绿SF染色液100ml Ehrlich苏木素染色液100ml溴甲酚绿-甲基红指示剂溶液100ml Ehrlich苏木素染色液500ml饱和油红O染色液100ml苏木素伊红混合染色液(一步法)100mlVan Gieson 染色液50ml苏木素伊红混合染色液(一步法)500mlVan Gieson 染色试剂盒3×50ml改良Harris苏木素染色液100mlSchiff试剂50ml改良Harris苏木素染色液500ml茜素红S染色液(0.2%)100ml Mayer苏木素染色液100ml煌焦油蓝染色液100ml Mayer苏木素染色液500ml2% TTC染色液100ml苏木素伊红(HE)染色液2×100ml革兰氏染色液试剂盒4×10ml苏木素伊红(HE)染色液2×500ml醋酸洋红染色液100ml Core苏木素染色液100ml姬姆萨原液100ml Core苏木素染色液500ml姬姆萨工作液100ml Carazzi苏木素染色液100ml瑞氏-姬姆萨复合染液100ml Carazzi苏木素染色液500ml瑞氏染液50ml Delafield苏木素染色液100ml结晶紫染色液(2.5%)10ml Delafield苏木素染色液500ml结晶紫染色液(1%)10ml Gill苏木素染色液(Gill No.1)100ml结晶紫染色液(0.1%)10ml Gill苏木素染色液(Gill No.1)500ml荚膜染色液(试剂盒)50ml×2Gill苏木素染色液(Gill No.2)100ml芽孢染色液(试剂盒)50ml×2Gill苏木素染色液(Gill No.2)500ml鞭毛染色液(试剂盒)100ml Gill苏木素染色液(Gill No.3)100ml石炭酸复红染液(苯酚品红染液)100ml Gill苏木素染色液(Gill No.3)500ml改良型石炭酸复红染液(苯酚品红染液)100ml Heidenhain铁苏木素染色液3×100ml 抗酸染色液(试剂盒)50ml×3天青石蓝苏木素染色液2×50ml 吕氏碱性美蓝染色液(0.1%)100ml改良MacConaill铅苏木素染色液140ml卢戈碘液(革兰氏染色)10ml苏木素无水乙醇溶液(5%)100ml番红染色液(沙黄)10ml苏木素无水乙醇溶液(10%)100ml卢戈碘液(标准碘液)100ml伊红染色液(进口水溶)100ml Mayer'苏木素染液(免疫组化)10ml伊红染色液(进口水溶)500ml HE染色液(试剂盒)3×10ml伊红染色液(水溶)100ml Cole氏苏木素染色液(常规染色)100ml伊红染色液(水溶)500ml Weigert苏木素染色液2×50ml伊红染色液(水溶,5%)100ml AB-PAS染色试剂盒50ml*6伊红染色液(醇溶)100ml糖原PAS染色液(过碘酸-雪夫染色液)50ml×2伊红染色液(醇溶)500ml糖原PAS染色液试剂盒(过碘酸-雪夫染色液)50ml×4Scott蓝化液500ml伊红染色液100ml氨水溶液(0.1%)500ml标准阿利新蓝染色液3×50ml氨水溶液(0.3%)500ml阿利新蓝染色液(pH2.5)100ml氨水溶液(0.5%)500ml阿利新蓝染色液(pH=1.0)(试剂盒)3×50ml氨水溶液(1%)500ml碱性品红乙醇溶液(5%)100ml天青石蓝B染色液50ml碱性品红水溶液(1%)100ml天青石蓝B染色液100ml。
瑞氏染色瑞氏染色是目前最常用而又最简单的染色方法。
1原理:瑞氏试剂中之酸性伊红和碱性美篮混合经化学作用后,变成中性之伊红化美蓝,久置后,经氧化而含有天青。
此三种染料分别和细胞核及浆中的NH3+和COO-等结合,使细胞核及胞浆着色。
由于系中性染料,又有缓冲液调节酸碱度,所以细胞受染后,蓝红等颜色都较适中,核染质、胞浆及其中之颗粒显色较为清楚。
2 试剂配制:1、瑞氏试剂瑞氏染料(粉)1克,加不含醋酮之甲醇600毫升溶解过滤后即成。
混合方式可将瑞氏染料置于研钵内,加适量甲醇混合研磨,使染料溶解,将已溶解的液体倒入清洁玻瓶,再放入甲醇继续溶解剩下染料,直至染料及甲醇均用完为止,然后过滤,以深色中性之玻璃瓶储备待用。
亦可将1克染料一次加入600毫升甲醇中,盛深色玻璃瓶内,塞好瓶口,置于温暖而黑暗之处或37度温箱内,每日振荡5min,连续7天以上,然后过滤储备用。
染液宜久置后使用,通常存放愈久,染色效果愈好。
2、缓冲液由1%的磷酸氢二钠和1%的磷酸二氢钾各30毫升加蒸馏水1000毫升配成,或以上两药各1克加2500毫升左右蒸馏水制成。
以石蕊试纸检验、调整酸碱度,使PH在6.5-7之间即可。
缓冲液亦可永新鲜蒸馏水或煮沸后密闭保存的蒸馏水。
如蒸馏水与空气过多接触,则可因吸收空气中之二氧化碳而使PH值变低,影响染色,故不宜使用。
3、染色步骤1 将已编号之涂片水平置于染色板或者染色架上,涂片两端各划一道蜡笔线,主要防止染液外溢。
2 滴加瑞氏染色液。
其多少依标本所占面积大小而定,一般为4-8滴,至染液将标本完全盖住为止。
染液不宜过少,否则,甲醛挥发后,易产生沉淀;不可过多,以免因过盛而流失,影响染色。
3 1-2分钟后,滴入缓冲液(染液与缓冲液的比例约为1:1.5,冬季1:1,夏季1:2)。
以气囊向玻璃片上轻轻打气,使染液和缓冲液混合均匀,一般不宜口吹起,以免呼出二氧化碳改变缓冲液酸碱度而影响染色。
4 自缓冲液滴入10-15分钟后,用自来水冲洗。
一种快速瑞氏-姬姆萨染色液的配制和应用
许艳英
【期刊名称】《医学理论与实践》
【年(卷),期】2002(015)007
【摘要】@@ 传统的瑞氏染色法染色时间长,胞核着色差,而姬姆萨染色法虽然胞核着色好,但胞浆染色欠佳.本文介绍一种瑞氏-姬姆萨染色液,它具有对胞浆和胞核的染色效果好,结构清晰,染色速度快,简单易行等优点,使染色在30s内一步完成,此染色液尤其适用于临床常规检验.
【总页数】1页(P828-828)
【作者】许艳英
【作者单位】河北省秦皇岛市山海关铁路医院,066205
【正文语种】中文
【相关文献】
1.加吐温20的瑞氏-姬姆萨染色液 [J], 梁维岗
2.改良涂片法和瑞氏-姬姆萨染色法对支气管肺泡灌洗液及痰嗜酸性粒细胞计数检测的比较 [J], 唐金凤;肖九长;林霖;乐永宏;张友三;黄承斌;吕春;张荣山
3.一种改良瑞氏-姬姆萨染色液的染色效果评价 [J], 林志远;黄建玲
4.拉曼光谱技术在鉴别瑞氏-姬姆萨染色的肿瘤细胞与正常细胞中的应用 [J], 李浩;于华杰;李胜;韩露;沈阳洋
5.介绍一种快速瑞氏-姬姆萨染色法 [J], 刘国成
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瑞氏染液的主要成分及染色原理
瑞氏染液是一种常用的染发产品,它的主要成分包括氧化剂、碱性成分、染料等。
这些成分共同作用,实现头发颜色的变化。
1. 氧化剂
在瑞氏染液中,氧化剂是一个必不可少的成分。
它的主要作用是使染
料的分子中断,将其氧化为一个更易于结合的形式。
氧化剂在染色过
程中也起到氧化头发的角色,打开头发的鳞片,促进染料的渗透。
通
常瑞氏染液中的氧化剂为氢氧化物或双氧水。
2. 碱性成分
碱性成分也是一种重要的成分,它通过增加头发表面的pH值,使头发
表面的鳞片变得松散,增加瑞氏染液和头发之间的结合力,确保染料
分子渗透得更深入。
瑞氏染液中的碱性成分通常为氨水、碳酸氢钠等。
3. 染料
染料是瑞氏染液的主要成分之一。
通常情况下,它们是由芳香族化合物、非芳香族化合物和金属盐等材料制成的。
这些染料分子按啤酒-兰
布特定律吸收特定的波长,实现了染发的效果。
染料的浓度和染发时
间也是影响染色效果的两个重要因素。
染色原理
瑞氏染液实现染发的原理非常简单,就是将染料分子渗透到头发纤维中,然后和头发中的天然色素分子进行化合反应。
通过这种反应,天
然色素分子被氧化,瑞氏染液中的染料分子便被结合到了头发纤维上,
从而实现了颜色的变化。
总结
瑞氏染液是一种富有活力的染发产品,其主要成分包括氧化剂、碱性成分和染料等。
在染色过程中,这些成分共同发挥着作用,实现了头发颜色的变化。
了解瑞氏染液的成分和染色原理有助于我们更好地理解染发的过程,同时也能够提高我们选择染发产品的标准。
瑞氏染色原理及作用本篇文章由专业生化试剂供应商岚兴生物为您提供。
瑞氏染液由酸性染料伊红和碱性染料美蓝组成的复合染料,溶于甲醇 ,后解离为带正电的美蓝和带负电的伊红离子。
瑞氏染色法就是用瑞氏染色液对细菌进行染色。
那么瑞氏染色原理是什么?瑞氏染色原理:瑞氏染料是由碱性染料美蓝( Methvlem blue )和酸性染料黄色伊红( Eostm Y )合称伊红美蓝 染料即瑞氏 (美蓝-伊红Y)染料。
伊红钠盐的有色部分为阴离子,无色部分为阳离子,其有色部分为酸性,故称伊红为酸性染料。
美蓝通常为氯盐是碱性的,美蓝的中间产物结晶为三氯化镁复盐,其有色部分为阳离子,无色部分为阴离子,恰与伊红钠盐相反。
为了观察细胞内部结构,识别各种细胞及其异常变化,血涂片必须进行染色。
瑞氏染色法是血细胞分析最经典和最常用的染色法。
细胞的各大种成分均由蛋白质构成,由于蛋白质是两性电解质,所带正电荷的数量随溶液pH而定。
对某一蛋白质而言,如环境pH<pI,(pI为蛋白质的等电点),则该蛋白质在酸性环境中正电荷增多,易与伊红结合,染色偏红;相反,当环境的pH>pI,即在碱性环境中负电荷增多,易与美蓝结合,染色偏蓝。
临床上常用缓冲液(pH6.4~6.8)来调节染色时的pH值,同时还应注意使用清洁、中性的玻片,优质的甲醇配制染液,以期达到满意的染色效果。
瑞氏染色的染料配方浓度对细胞核着色程度适中,细胞核结构和色泽清晰艳丽,对核结构的识别较佳,但对胞浆着色偏酸,色泽偏红,对细胞浆内颗粒特别是嗜天青颗粒及嗜中性颗粒着色较差。
瑞氏染液染色鉴定瑞氏或姬姆萨染色液鉴定:刚配好或放置一个月以上的染液可进行下列鉴定: 1.取1滴染液于乳白玻板上,自行迅速扩散开,其颜色变紫红色,且有伪足形成。
2.取1滴染液加1滴缓冲液,染液由深蓝色立即变为紫红色。
3.取血片或骨髓片进行试染检查,观察染色后各类细胞的胞核、胞浆及颗粒着色情况,pH是否合适及染色合适时间。
瑞氏染液中甲醇的作用引言瑞氏染液中的甲醇是一种常见的溶剂,广泛应用于染料工艺中。
甲醇在瑞氏染液中起着重要的作用,它能够促进染料的分散和溶解,并改善染色效果。
本文将详细探讨瑞氏染液中甲醇的作用机制、影响因素以及对染色效果的影响。
作用机制瑞氏染液中的甲醇通过以下几种机制发挥作用:溶剂作用作为溶剂的甲醇能够有效地溶解染料,帮助将染料分散在染液中。
染料与纺织物接触时需要溶解在染液中,才能够更好地渗透进纤维中,实现染色的目的。
甲醇作为一种极性溶剂,能够与染料分子发生相互作用,促进染料的溶解和分散,从而提高染料在染液中的浓度和均匀度。
水与有机溶剂互溶瑞氏染液中既包含水溶性染料,又包含有机溶性染料。
甲醇作为一种有机溶剂,具有良好的水解性,能够与水发生互溶。
这使得瑞氏染液中的水溶性染料和有机溶性染料能够形成均匀的染液,提高染色的一致性和稳定性。
调节pH值甲醇还可以用作调节瑞氏染液的pH值。
染液的pH值对于染色过程中染料分子的电离状态、纤维表面电荷等都有重要影响。
甲醇的加入可以改变染液的酸碱度,进而影响染料分子的溶解性和纤维与染料之间的相互作用。
不同的染料对pH值的要求也不同,通过调节染液的pH值,可以使染料分子更好地与纤维相互作用,提高染色效果。
影响因素在瑞氏染液中,甲醇的作用受到多种因素的影响。
以下是主要的影响因素:甲醇浓度甲醇的浓度是影响其作用的重要因素。
较低的甲醇浓度可能无法有效溶解和分散染料,从而影响染料与纤维的接触和渗透。
而过高的甲醇浓度则可能导致染液浓度过高,降低染料的分散度。
染料种类不同种类的染料对甲醇的要求也不同。
有些染料对甲醇的溶解性没有特殊要求,而有些染料可能对甲醇的极性和溶解度有较高的要求。
因此,在选择染料时,需要考虑染料与甲醇的相容性,以确保染液中染料能够充分溶解。
温度温度对瑞氏染液中甲醇的作用有一定影响。
较高的温度可以增加甲醇的挥发速率,帮助染料迅速浸入纤维内部。
而较低的温度则可能降低甲醇的挥发速率,延缓染液中染料与纤维的接触和渗透。
瑞⽒-吉姆萨染液配法英⽂拼写 Wright's stain是由酸性染料伊红和碱性染料美蓝组成的复合染料,溶于甲醇。
后解离为带正电的美蓝和带负电的伊红离⼦。
使⽤⽅法瑞⽒(Wright's staim;美蓝-伊红Y)染⾊:1.瑞⽒染料是由碱性染料美蓝(Methvlem blue)和酸性染料黄⾊伊红(Eostm Y)合称伊红美蓝染料即瑞⽒(美蓝-伊红Y)染料。
2.⽤甲醇作瑞⽒染料溶剂,即成瑞⽒染液。
甲醇是瑞⽒染料良好溶剂,有两种作⽤:(1)甲醇使瑞⽒染料中美蓝(M)与伊红(E)在溶液中离解,可使细胞成分选择性吸附其中的有⾊物质⽽着⾊。
甲醇ME(瑞⽒染料)----→M+ + E-在配制的瑞⽒染液中美蓝如放置过久即可氧化⽽含有天青,美蓝天青与伊红化合物能使核染成紫红⾊,但不能使胞浆染为蓝⾊,多余美蓝就可以使胞浆染成蓝⾊,染⾊主要是化学作⽤,是离⼦彼此结合的反应。
(2)甲醇具有强⼤的脱⽔⼒,可将细胞固定在⼀定形态及增加细胞结构的表⾯积,提⾼细胞对染料吸收作⽤,同时由于甲醇吸附染⾊液中的⽔,使染⾊液升温,加速染⾊反应。
染液配制(1) 瑞⽒染液配制:瑞⽒染料 830gm或1g甲醇(AR)500ml或600ml○先称⼲燥(事先放⼊温箱⼲燥过夜)瑞⽒染料放置乳钵内,⽤乳棒轻轻敲碎染料成粉末,再⾏研磨⾄听不到研芝⿇声即呈细粉末,加少许⽢油或甲醇溶解研磨,使染料在乳缸内显“⼀⾯镜”光泽,⽽⽆染料粉粒沉着。
○再加较多量甲醇研磨呈⼀⾯镜光亮,静置⽚刻,将上层液体倒⼊⼀清洁储存瓶内(最好⽤甲醇空瓶),再加甲醇研磨,重复数次,⾄乳钵内染料及甲醇⽤完为⽌,摇匀,密封瓶⼝。
○存室温暗处,储存愈久,则染料溶解、分解就越好,⼀般储存3个⽉以上为佳。
(2) 缓冲液:●缓冲液作⽤:○染⾊对氢离⼦浓度是⼗分敏感的,据观察pH值的改变,可使蛋⽩质与染料形成的化合物重新离解。
○缓冲液须保持⼀定的pH使染⾊稳定,PBS的pH ⼀般在6.4~6.8,○偏碱性染料可与缓冲液中酸基起中和作⽤,偏酸性染料则与缓冲液中的碱基起中和作⽤,使pH恒定。
介绍一种快速瑞氏-姬姆萨染色法
刘国成
【期刊名称】《青岛医药卫生》
【年(卷),期】2000(000)002
【摘要】传统的瑞氏染色法染色时间长、细胞着色差,而姬姆萨染色法虽然细胞核着色好,但胞浆染色欠佳,本文介绍一种瑞氏姬姆萨染色液,使染色在30″内一步完成,染色效果和原法一致,此液尤其适用于临床常规工作。
1 染液的配制 1.1 贮存液:瑞氏染粉2.0g,姬姆萨染液0.6g,天青Ⅱ0.6g,甘油10ml,聚乙烯呲咯烷酮2.0g,甲醇1000ml混合即可。
1.2 磷酸盐缓冲液(pH6.2~6.8):磷酸二氢钾6.64g,磷酸氢工钠0.25g,白碳酸4ml,蒸馏水加至100ml。
1.3 染色应用液:将上述贮存液,缓冲液按3:1比例混
【总页数】1页(P153-153)
【作者】刘国成
【作者单位】山东省平度市田庄镇卫生院 266700
【正文语种】中文
【中图分类】R446
【相关文献】
1.附红细胞体病瑞氏、姬姆萨、吖啶橙染色法及PCR检测法的比较研究 [J], 郑丽艳;张衍俊;常维山
2.改良涂片法和瑞氏-姬姆萨染色法对支气管肺泡灌洗液及痰嗜酸性粒细胞计数检
测的比较 [J], 唐金凤;肖九长;林霖;乐永宏;张友三;黄承斌;吕春;张荣山
3.一种改良瑞氏-姬姆萨染色液的染色效果评价 [J], 林志远;黄建玲
4.一种快速瑞氏-姬姆萨染色液的配制和应用 [J], 许艳英
5.瑞氏-姬姆萨与巴氏染色法对精子形态染色效果比较 [J], 肖婉芬;谢文燕;李志凌;郑燕銮
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清洁液(洗液)重铬酸钾(工业品纯)300g浓硫酸(工业品纯)300ml自来水3000ml实际上重铬酸钾、硫酸和自来水之比为1:1:10。
先将重铬酸钾溶于水,如加热须待冷后,再缓慢加入浓硫酸,边加边搅。
不准将水倒入浓硫酸内!!!另外,清洁液只能用于玻璃仪器的清洗,不能浸泡金属器械。
血涂片的制备:1、载玻片及盖玻片泡酸时间大于24小时,一张一张放,保证每一张都浸湿2、冲洗,先用自来水冲净至没有颜色,再用流水冲洗一夜3、放在95%的酒精中浸泡过夜4、取出后用棉布擦干,涂片,并用甲醇固定,竖直干燥。
Wright染色法制作血涂片1、取涂好的血片,用玻璃笔划出染色区,以防染液滴落后溢流。
2、将涂片平放桌上或者架上,滴加Wright染液至恰好布满所划范围的血膜,混动使混匀,染色约3分钟。
Wright染液配法:Wright粉剂0.1g,加甲醇60毫升。
将Wright粉剂放在乳钵内,充分研磨,越细越好。
然后取甲醇逐步加入乳钵内,边加边研磨,直至染料全部溶解,置试剂瓶中密封,以后走后可用,以放置一个月后再用最佳。
3、加入等量磷酸盐缓冲液(pH6.8~7),不断晃动,染色约12分钟,直接放与流水下冲洗。
4、染色后甩干或者直立晾干,用中性树胶或者合成树脂或香柏油封片,或不封片直接镜检。
时间:温度较低时约15分钟(染3分钟,加缓冲液不断晃动12分钟。
温度较高时,总时间约5分钟。
剂量:染液与缓冲液剂量之比为1:1如果染色不够,蒸馏水冲洗后,在按照原步骤重新染封片:干燥后的血涂片,浸入二甲苯中后在其干燥前,擦去蜡线,滴明胶与血涂片的一边(半滴至一滴),眼科镊捏住盖玻片正面在酒精灯上烘烤一下后反面贴于载玻片上。
结果:红细胞呈橘红色;中性粒细胞颗粒蓝紫色至紫红色;嗜酸性粒细胞鲜红色至橘红色;嗜碱性粒细胞颗粒深蓝紫色;淋巴细胞核深蓝紫色,胞质天蓝色;单核细胞核蓝紫色,胞质灰蓝色。
、注:①Wright染料对pH较敏感,因此用缓冲液稀释染液,可使染色作用稳定,便于识别和比较细胞的变化。
瑞氏染色原理瑞氏染色原理是一种常用的细胞染色技术,广泛应用于生物学、医学和病理学领域。
该原理通过染色剂与细胞中的某些结构或成分发生特异性反应,从而使其显色,便于观察和分析。
瑞氏染色原理的基本步骤包括固定、染色和洗涤。
固定是指将待染色的细胞或组织固定在载玻片或载片上,常用的固定剂包括福尔马林、乙醛等。
固定的目的是保持细胞或组织的形态结构和某些化学成分,使其不被破坏或失去活性。
染色是瑞氏染色原理的核心步骤,根据目标的不同选择合适的染色剂。
常用的染色剂包括伊红、甲苯胺蓝、嘧啶蓝等。
这些染料可以与细胞或组织中的核酸、蛋白质、多糖等特定成分发生特异性反应,使其显色。
染色的结果可通过显微镜观察,从而获得目标结构或成分的信息。
洗涤是为了去除多余的染色剂和固定剂,使显色的结构或成分清晰可见。
洗涤的方法主要包括用缓冲液或溶剂进行冲洗和浸泡。
洗涤的过程需要控制好时间和温度,避免过度洗涤或不完全洗涤导致结果不准确。
瑞氏染色原理的应用非常广泛。
在生物学研究中,可以通过瑞氏染色来观察和分析细胞的形态、结构和功能。
在医学诊断中,瑞氏染色可以用于检测和鉴定病原体、细菌、真菌等微生物,帮助医生确定疾病的类型和治疗方案。
在病理学研究中,瑞氏染色可以用于检测和评估组织或细胞的异常变化,如肿瘤、炎症、坏死等。
然而,瑞氏染色原理也存在一些局限性。
首先,染色的结果受多种因素的影响,如固定剂的选择和浓度、染色剂的选择和浓度、染色时间和温度等。
因此,在进行瑞氏染色时需要严格控制这些因素,以保证结果的准确性和可靠性。
其次,染色的结果通常是定性的,难以定量分析。
因此,对于需要精确测量的研究或临床诊断,通常需要结合其他定量方法来进行分析。
瑞氏染色原理是一种简单、快速、经济的细胞染色技术。
通过瑞氏染色,可以观察和分析细胞或组织的形态、结构和成分,为生物学研究、医学诊断和病理学研究提供了重要的工具和方法。
随着科学技术的不断进步,瑞氏染色原理也在不断发展和完善,为科学家和医生提供更多更好的研究和诊断手段。
骨髓涂片中肥大细胞的快速瑞氏染色法王霄霞;周霞;杨熔熔;张卓;谢耀盛【摘要】目的比较常规瑞氏染色、快速瑞氏染色及甲苯胺蓝染色对骨髓涂片中肥大细胞的着色及检出情况.方法分别用3种方法对80×3张骨髓片染色,观察镜下肥大细胞的特征;低倍镜下计数每张骨髓涂片中肥大细胞的总数及低倍镜视野数,计算每个低倍镜视野中肥大细胞个数.结果肥大细胞的检出率分别为76.3%、87.5%及86.3%,每个低倍镜视野中肥大细胞中位数分别为O.045、0.206及0.203,快速瑞氏染色vs常规瑞氏染色,z=-6.200,P<O.05;甲苯胺蓝染色vs常规瑞氏染色,Z=-6.108,P<O.05;快速瑞氏染色vs甲苯胺蓝染色,Z=-0.473,P>O.05.结论快速瑞氏染色法与甲苯胺蓝染色法媲美,是一项简单、快速、有效且实用的肥大细胞染色方法.【期刊名称】《临床检验杂志》【年(卷),期】2011(029)002【总页数】2页(P157-158)【关键词】肥大细胞;染色方法;骨髓【作者】王霄霞;周霞;杨熔熔;张卓;谢耀盛【作者单位】温州医学院检验医学院,浙江温州,325000;温州医学院检验医学院,浙江温州,325000;温州医学院附属第一医院实验诊断中心,浙江温州,325000;温州医学院附属第一医院实验诊断中心,浙江温州,325000;温州医学院附属第一医院实验诊断中心,浙江温州,325000【正文语种】中文【中图分类】R446目前检测肥大细胞最经典、效果最好、应用最多的方法为甲苯胺蓝染色。
此外还有阿尔辛蓝-番红花红染色、硫堇染色、地衣红染色、Spatz俾土麦棕染色、硫素-吖啶橙染色和邻菲咯啉亚铁离子染色等方法[1-7],但存在染色效果欠佳和/或需特殊材料等缺点。
本研究介绍一种快速瑞氏(Wright)染色法,报道如下。
1 材料与方法1.1 骨髓涂片收集2008年6~12月本院血液科门诊及住院的80例患者的骨髓涂片。
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瑞氏染色液说明书
【产品名称】
瑞氏染色液
【包装规格】
货号:DM0005
单瓶包装规格分别为:100ml、250ml、500ml、5000ml;
每套/盒包装规格分别为:2×20ml/盒、2×100ml/盒、2×250ml/盒、2×500ml/盒、2×5000ml/盒。
【预期用途】
主要用于对血细胞进行染色。
【检验原理】
瑞氏色素是酸性染料伊红(Eosin)和碱性染料亚甲蓝(Methylene Blue)组成的复合染料,各种细胞成分
化学性质不同对各种染料的亲和力也不一样,如血红蛋白、嗜酸性颗粒为碱性蛋白质,与酸性染料伊红结
合,染粉红色,称为嗜酸性物质;细胞核蛋白、淋巴细胞、嗜碱性粒细胞胞质为酸性,与碱性染料结合后,
染紫蓝色或蓝色,称为嗜碱性物质;中性颗粒呈等电状态与伊红和亚甲蓝均可结合,染淡紫红色,称为嗜
中性物质;原始红细胞、早幼红细胞胞质、核仁含较多酸性物质,染成较浓厚的蓝色;中幼红细胞既含酸
性物质,又含碱性物质,染成红蓝色或灰红色;完全成熟红细胞,酸性物质彻底消失后,染成粉红色。本
染色液经常用于血液和细胞涂片、骨髓细胞涂片、细菌染色,细胞质呈红色,细胞核及细菌呈蓝色,嗜酸
性颗粒呈橘红色。
【主要组成成分】
试剂组成 主要成分
1、瑞氏染液 瑞氏染料、甲醇
2、磷酸盐缓冲液 磷酸盐
【储存条件及有效期】
5℃~35℃环境保存,原包装未开封染色液的有效期为24个月,在有效期内的已开封染色液应在开
封后6个月内使用完,每次用后应及时拧紧瓶盖,以免挥发或变质。
【样本要求】
1、血细胞涂片染色:要求新鲜全血或EDTA.2K抗凝血。
2、阴道分泌物(妇科白带)涂片染色:新鲜标本离开人体涂片后,需尽快以火焰或酒精固定,以避免细
胞变形。
3、骨髓涂片染色:涂片制成后,应在空气中快速摇动或扇干,防止细胞皱缩变形或固空气潮湿而溶
血,不能用高温或火烤干燥。
4、脱落细胞涂片:取样本并涂片,待检涂片固定可采用自然干燥法或湿片固定法(具体操作可根据不
同检体及所采用的固定液所对应的规范操作要求进行);若采用湿片固定法,标本浸泡时间稍长些,效果
会更佳;若采用湿片固定液固定标本,固定液用后需经常过滤,更换,防止细胞交叉污染。
【检验方法】
1、滴加瑞氏染液于涂片上,并让染液覆盖整个标本涂片,染色;
2、将等量的磷酸盐缓冲液滴加于瑞氏染液上面,以嘴或洗耳球使两液充分混合,染色;
3、水洗,冲洗时不能先倒掉染色液,可缓慢从玻片一端冲洗,以防有沉渣沉淀在标本上;
4、干燥、镜检。
【检验方法的局限性】
仅供形态学初检观察染色使用。
【注意事项】
1、血液涂片或骨髓涂片应厚薄均匀,必须充分干燥,否则在染色过程中容易脱落,以免影响染色效
果。
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2、染色时间须视何种标本、涂片厚薄、有核细胞多少及温度等而定。
3、pH值对染色有一定影响,载玻片应清洁、无酸碱污染,以免影响染色效果。
4、涂片染色中请勿先去除染色液或直接对涂片用力冲洗,不能先倒掉染液,以免染料沉着于涂片上。
5、染色液可重复使用,但不能多次重复,若有沉淀物应过滤后使用。
6、染色过深可用甲醇或酒精适当脱色,最好不复染。
7、如果染色过深或过浅,应调整染色时间或工作液浓度。
8、瑞氏染液用前应充分摇匀,保证染色的均一性;染色液用量应充足,勿使染色液蒸发干。
9、本产品仅用于体外诊断,应由专业人士使用及进行结果的判读。
10、使用前应详细阅读说明书,并做好个人卫生防护,在有效期内使用,生产日期、生产批号和失效
日期见包装。
11、用后应按医院或环保部门要求处置废弃物。
【基本信息】
备案人/生产企业名称:安徽雷根生物技术有限公司
住所:淮北凤凰山经济开发区凤冠路三期标准化厂房三号厂房