血球计数板的构造和使用
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血球计数板原理一、前言血球计数板是临床实验室中常用的一种仪器,主要用于血液样本中的红细胞、白细胞和血小板数量的计数。
本文将介绍血球计数板的原理。
二、仪器组成血球计数板由两个部分组成:盖玻片和计数室。
盖玻片是一块尺寸为22×22毫米的方形玻璃,上面有一个0.1毫升容量的小孔。
计数室是一块由光学玻璃制成的方形玻璃,尺寸为3×3×0.1毫米。
在计数室内,有一个深度为0.02毫米、直径为0.05毫米的小孔。
三、原理当样本经过盖玻片上的小孔时,会在盖玻片上形成一个直径约为1.6毫米的圆形液滴。
这个液滴会被引入到计数室中,并通过小孔进入到深度为0.02毫米的区域。
此时,液滴会被压扁,并在两侧产生反射光。
四、测量红细胞数量当光线穿过压扁后的液滴时,会在液滴两侧产生反射光。
这些反射光会被透镜集中到目镜中观察。
在目镜中,可以看到一个明亮的圆环和一个暗色的中心。
这个圆环被称为“红细胞计数区”,直径约为1.6毫米。
在计数室中,红细胞密度大约为500万/毫升。
五、测量白细胞数量白细胞数量的测量需要先将样本进行稀释,并加入一种特殊的染料,使白细胞变成紫色。
当样本经过盖玻片上的小孔并进入计数室时,染料会渗透到整个液滴中,并使所有白细胞变成紫色。
此时,在目镜中可以看到一个深色的圆环和一个淡色的中心。
这个深色的圆环被称为“白细胞计数区”,直径约为1.6毫米。
在计数室中,白细胞密度大约为10000/毫升。
六、测量血小板数量血小板数量的测量需要先将样本进行稀释,并加入一种特殊的抗凝剂。
当样本经过盖玻片上的小孔并进入计数室时,抗凝剂会防止血小板凝聚。
此时,在目镜中可以看到一个深色的圆环和一个淡色的中心。
这个深色的圆环被称为“血小板计数区”,直径约为1.6毫米。
在计数室中,血小板密度大约为300000/毫升。
七、结论血球计数板通过光学原理实现对血液样本中红细胞、白细胞和血小板数量的测量。
在盖玻片上形成的液滴经过压扁后,在目镜中形成不同颜色和大小的圆环,从而实现对不同种类细胞数量的测量。
1. 血球计数板的定义和作用血球计数板是一种用于进行血液细胞计数的仪器。
通过对血液样本进行稀释并装填到计数板的特定区域,可以快速准确地计数不同类型的血细胞,包括红细胞、白细胞和血小板等。
血球计数板可用于血液疾病的诊断和监测,提供了宝贵的临床信息。
2. 血球计数板的构成和布局血球计数板通常由玻璃制成,具有特定的布局和区域划分。
它包括一个正方形计数区和周围边缘的计数区,正方形计数区上通常有25个小方格。
这些小方格被进一步划分为更小的九宫格。
3. 原理概述血球计数板使用了传统的血液计数技术,需要经过以下步骤来进行计数:•采集和稀释:从患者的静脉血中采集一定量的血液样本,然后将其稀释。
稀释是为了使血液中的细胞数量适合于计数板上的小方格。
•装填:将稀释后的血液样本装填到计数板的计数区。
通常使用吸管或移液器将血液沿着边缘流入计数区,直到填满为止。
装填后应该照明相当于九个小方格的区域。
•计数:使用显微镜在倍数为400倍的条件下,通过观察计数区内的血细胞,对不同类型的细胞进行计数。
4. 红细胞计数红细胞计数是血球计数板中最常见的计数类型之一。
在计数区中,从左上方的方格开始,逐个计数。
每计数到一个红细胞时,应记录在相应的方格上。
在计算总数时,需要考虑到方格总数、稀释倍数和计数区面积。
5. 白细胞计数白细胞计数通常使用九宫格法进行。
每个小方格的九宫格内计数一次白细胞,然后根据计数区的特定规则计算白细胞的数量。
与红细胞计数类似,需要考虑到方格总数、稀释倍数和计数区面积来计算总数。
6. 血小板计数血小板计数是另一个重要的血球计数参数。
在计数区中,使用九宫格法计数血小板。
通常,每个小方格的中央九宫格内计数一次血小板,并使用特定的计算公式来计算血小板数量。
7. 计数误差和控制血球计数板的使用可能会产生一定的计数误差。
这些误差可能来自于各种原因,如技术操作、仪器精度和样本制备等。
为了控制误差,可以采取以下措施:•样本制备:严格按照标准操作进行稀释和装填,避免空气泡和污染物的影响。
血球计数板生物实验用具血球计数板是显微镜上的外挂物件,可用来测量细胞,细菌等一些微小物体的长度,还有就是测量数量,如单位体积细胞的数量.血球计数板的构造和使用血球计数板是由一块比普通载玻片厚的特制玻片制成的.玻片中有四条下凹的槽,构成三个平台.中间的平台较宽,其中间又被一短横槽隔为两半,每半边上面,刻有一个方格网.方格网上刻有9个大方格,其中只有中间的一个大方格为计数室,供微生物计数用.这一大方格的长和宽各为1mm,深度为0.1mm,其体积为0.1mm3.计数室通常有两种规格.一种是大方格内分为16中格,每一中格又分为25小格;另一种是大方格内分为25中格,每一中格又分为16小格.但是不管计数室是哪一种构造;它们都有一个共同的特点,即每一大方格都是由16×25=25×16=400个小方格组成,见图.血球计数板的使用以计数酵母菌为例(1)用血球计数板计数酵母菌悬液的酵母菌个数.(2)样品稀释的目的是便于酵母菌悬液的计数,以每小方格内含有4-5个酵母细胞为宜,一般稀释10倍即可.(3)将血球计数板用擦镜纸擦净,在中央的计数室上加盖专用的厚玻片.(4)将稀释后的酵母菌悬液,用吸管吸取一滴置于盖玻片的边缘,使菌液缓缓渗入,多余的菌液用吸水纸吸取,捎待片刻,使酵母菌全部沉降到血球计数室内.(5)计数时,如果使用16格×25格规格的计数室,要按对角线位,取左上,右上,左下,右下4个中格(即100个小格)的酵母菌数.如果规格为25格×16格的计数板,除了取其4个对角方位外,还需再数中央的一个中格(即80个小方格)的酵母菌数.(6)当遇到位于大格线上的酵母菌,一般只计数大方格的上方和右方线上的酵母细胞(或只计数下方和左方线上的酵母细胞).(7)对每个样品计数三次,取其平均值,按下列公式计算每1ml菌液中所含的酵母菌个数.3.计算公式(1)16格×25格的血球计数板计算公式:酵母细胞数/ml=100小格内酵母细胞个数/100×400×104×稀释倍数(2)25格x16格的血球计数板计算公式:酵母细胞数/ml=80小格内酵母细胞个数/80×400×104×稀释倍数4.血球计数板的清洁血球汁数板使用后,用自来水冲洗,切勿用硬物洗刷,洗后自行晾干或用吹风机吹干,或用95%的乙醇,无水乙醇,丙酮等有机溶剂脱水使其干燥.通过镜检观察每小格内是否残留菌体或其他沉淀物.若不干净,则必须重复清洗直到干净为止.实验六微生物的显微直接计数法一、实验目的了解血球计数板的构造、计数原理和计数方法,掌握显微镜下直接计数的技能。
血球计数板-基本构造血球计数板是一块特制的厚型载玻片,载玻片上有四个槽构成三个平台。
中间的平台较宽,其中间又被一短横槽分隔成两半,每个半边上面各刻有一小方格网,每个方格网共分九个大格,中央的一大格作为计数用,称为计数区。
计数区的刻度有两种:一种是计数区分为16个大方格(大方格用三线隔开),而每个大方格又分成25个小方格;另一种是一个计数区分成25个大方格(大方格之间用双线分开),而每个大方格又分成16个小方格。
但是不管计数区是哪一种构造,它们都有一个共同特点,即计数区都由400个小方格组成。
计数区边长为1mm,则计数区的面积为1mm2,每个小方格的面积为1/400mm2。
盖上盖玻片后,计数区的高度为0.1mm,所以每个计数区的体积为0.1mm3,每个小方格的体积为1/4000mm3。
使用细胞计数板计数时,先要测定每个小方格中微生物的数量,再换算成每毫升菌液(或每克样品)中微生物细胞的数量。
细胞计数板-使用方法1.视待测菌悬液浓度,加无菌水适当稀释(斜面一般稀释100倍?),以每小格的菌数可数为度。
2.取洁净的细胞计数板一块,在计数区上盖上一块盖玻片。
3.将菌悬液摇匀,用滴管吸取少许,从计数板中间平台两侧的沟槽内沿盖玻片的下边缘滴入一小滴(不宜过多),让菌悬液利用液体的表面张力充满计数区,勿使气泡产生,并用吸水纸吸去沟槽中流出的多余菌悬液。
也可以将菌悬液直接滴加在计数区上(不要使计数区两边平台沾上菌悬液,以免加盖盖玻片后,造成计数区深度的升高),然后加盖盖玻片(勿使产生气泡)。
4.静置片刻,使细胞沉降到计数板上,不再随液体漂移。
将细胞计数板放置于显微镜的载物台上夹稳,先在低倍镜下找到计数区后,再转换高倍镜观察并计数。
血球计数板的原理血球计数板是一种用于血液细胞计数的实验室工具。
它是由一个方形的玻璃板构成,上面划有网格状的线条。
血球计数板的原理是通过在网格内计数血液细胞的数量来估算整个血液样本中细胞的浓度。
血球计数板的网格通常由九个大方格组成,每个大方格又被细分为小方格。
这种网格的设计使得在计数时能够更加准确地确定细胞的数量。
每个小方格的体积和深度都是已知的,因此可以根据计数结果来估算血液中细胞的浓度。
在使用血球计数板进行计数时,首先需要将血液样本稀释至一定的浓度。
然后,取一定体积的稀释后的血液样本,将其放置在血球计数板的特定区域内。
通过显微镜观察,将细胞数目记录在相应的区域内。
为了准确计数细胞的数量,通常需要计数多个小方格。
计数时,可以选择不同的区域进行计数,以增加统计的准确性。
计数完成后,可以根据计数的小方格数量、稀释倍数和体积来计算细胞的浓度。
血球计数板的使用需要一定的技巧和经验。
首先,操作人员需要熟悉血球计数板的结构和使用方法。
其次,操作人员需要具备良好的显微镜观察和计数技巧,以确保计数的准确性和可靠性。
此外,操作过程中需要注意保持血液样本的稳定和避免气泡的干扰。
血球计数板在临床医学和科研领域具有重要的应用价值。
通过血球计数板可以对血液细胞的数量和浓度进行准确的测量和估算。
这对于疾病的诊断和监测以及药物研发和评价都具有重要意义。
血球计数板是一种用于血液细胞计数的实验室工具,通过在网格内计数细胞的数量来估算血液样本中细胞的浓度。
其使用需要一定的技巧和经验,可以应用于临床医学和科研领域。
血球计数板在血液细胞计数中扮演着重要的角色,为疾病的诊断和治疗提供了重要的依据。
血球计数板原理
血球计数板是一种用于进行血球计数的常见实验室仪器,它采用了一种特殊的设计原理。
血球计数板由一个方形的平坦玻璃板组成,上面有许多小格子。
这些小格子被分为九个大区域,每个大区域内含有一个九宫格。
在使用血球计数板时,首先需要将一小部分稀释好的血液样本放置在计数板上。
通常,我们使用稀释液将血液样本稀释到适当的浓度。
然后,通过使用显微镜来观察放置在计数板上的血液样本。
当观察血球计数板时,我们可以看到许多小格子内部的血细胞。
散落在每个小格子内的血细胞被称为计数单元。
这些计数单元有助于我们估计整个血液样本中的血细胞数目。
使用显微镜观察时,我们可以注意到每个计数单元中的血细胞。
我们可以区分红血细胞和白血细胞,数出它们的数量,并通过乘以适当的修正因子,得出整个血液样本中的血细胞数目。
血球计数板的九宫格设计可以有助于我们进行更准确的计数,因为每个计数单元中的血细胞数量是已知的,计算起来更容易。
总之,血球计数板通过将血液样本放置在九宫格的小格子中,并使用显微镜观察和计数每个小格子内的血细胞,以估计整个血液样本中的血细胞数量。
这种计数方法可以提供血细胞计数的快速和可靠的结果,对于疾病诊断和监测非常有用。
血球计数板的计数原理
血球计数板是临床实验室中常用的一种设备,用于进行血液细胞计数。
它可以帮助医生和实验室技术人员快速、准确地获取患者的血液细胞计数数据,从而为临床诊断和治疗提供重要参考依据。
那么,血球计数板的计数原理是什么呢?
首先,血球计数板是由一块透明的玻璃板和一定数量的小方格组成的。
每个小方格中有9个小格子,这些小格子的数量和大小是经过精确设计的。
在进行血细胞计数时,将稀释后的血液样本放在计数板上,通过显微镜观察血液细胞在小格子中的分布情况,从而进行计数。
其次,血球计数板的计数原理是基于显微镜的视野计数。
具体来说,将稀释后的血液样本放在计数板上后,通过显微镜调节到适当的放大倍数,然后在显微镜视野中观察小格子中的血细胞数量。
通常情况下,我们会选择几个小格子进行计数,然后根据计数的结果和计算公式,就可以得出血细胞的浓度。
此外,血球计数板的计数原理还涉及到了稀释因子的计算。
在进行血液细胞计数时,由于血样本的浓度较高,需要进行适当的稀
释,以便减少计数时的误差。
因此,计数原理中还包括了对稀释因子的计算和使用。
总的来说,血球计数板的计数原理是基于显微镜视野计数和稀释因子计算的。
通过精确设计的小格子和显微镜的帮助,我们可以快速、准确地获取血细胞计数的数据,为临床诊断和治疗提供重要的支持。
血球计数板在临床实验室中扮演着重要的角色,它的计数原理也是我们进行血细胞计数时需要了解和掌握的重要知识之一。
环工综合实验血球计数板计数实验实验报告环境科学与工程学院实验中心使用血球计数板计数时,先要测定每个小方格中微生物的数量,再换算成每毫升菌液(或每克样品)中微生物细胞的数量。
2.血球计数板计算微生物数量的优缺点是什么?血球计数板与平板稀释法对细菌个数进行测定,结果往往差别很大。
分析原因。
答:⑴将细菌(或其他微生物)以染料(例如结晶紫)染色后,直接以显微镜观察的方式计数,再推算回细菌数,所得即为总菌数,即死菌、活菌一并计算。
优点:简单、快速、重复性高。
不足:不能区分死细胞和活细胞,应用范围较窄;一些小的细胞在显微镜下很难看到;样品中菌液浓度不能低于106个/mL;不能用于菌丝体或呈链状而不分散的微生物测定⑵血球计数板计量时所得到的结果为死菌与活菌的总数,而平板稀释法培养得到的为活菌数目,因此结果差异较大。
四、实验步骤1.稀释:取接种酵母菌的斜面一支,加入5ml无菌水,摇晃试管一分钟,使形成菌液;将菌液倒入洁净的150ml锥形瓶中,加结晶紫三滴,摇晃2分钟,再加入无菌水至50ml。
2.镜检计数室:在加样前,先对计数板的计数室进行镜检。
若有污物,则需清洗后才能进行计数。
2.加样品:将清洁干燥的血球计数板盖上盖玻片,再用无菌的细口滴管将稀释的酿酒酵母菌液由盖玻片边缘滴一小滴(不宜过多),让菌液沿缝隙靠毛细渗透作用自行进入计数室,一般计数室均能充满菌液。
注意不可有气泡产生。
4.显微镜计数:静止5分钟后,将血球计数板置于显微镜载物台上,先用低倍镜找到计数室所在位置,然后换成高倍镜进行计数。
在计数前若发现菌液太浓或太稀,需重新调节稀释度后再计数。
一般样品稀释度要求每小格内约有5—10个菌体为宜。
每个计数室选5个中格(可选4个角和中央的中格)中的菌体进行计数。
位于格线上的菌体一般只数上方和右边线上的。
如遇酵母出芽,芽体大小达到母细胞的一半时,即作两个菌体计数。
计数一个样品要从两个计数室中计得的值来计算样品的含菌量。
血球计数板的构造和使用
血球计数板是由一块比普通载玻片厚的特制玻片制成的.玻片中有四条下凹的槽,构成三个平台.中间的平台较宽,其中间又被一短横槽隔为两半,每半边上面,刻有一个方格网.方格网上刻有9个大方格,其中只有中间的一个大方格为计数室,供微生物计数用.这一大方格的长和宽各为1mm,深度为0.1mm,其体积为0.1mm3.
计数室通常有两种规格.一种是大方格内分为16中格,每一中格又分为25小格;另一种是大方格内分为25中格,每一中格又分为16小格.但是不管计数室是哪一种构造;它们都有一个共同的特点,即每一大方格都是由16×25=25×16=400个小方格组成,见图.
血球计数板的使用
以计数酵母菌为例
(1)用血球计数板计数酵母菌悬液的酵母菌个数.
(2)样品稀释的目的是便于酵母菌悬液的计数,以每小方格内含有4-5个酵母细胞为宜,一般稀释10倍即可.
(3)将血球计数板用擦镜纸擦净,在中央的计数室上加盖专用的厚玻片.
(4)将稀释后的酵母菌悬液,用吸管吸取一滴置于盖玻片的边缘,使菌液缓缓渗入,多余的菌液用吸水纸吸取,捎待片刻,使酵母菌全部沉降到血球计数室内.
(5)计数时,如果使用16格×25格规格的计数室,要按对角线位,取左上,右上,左下,右下4个中格(即100个小格)的酵母菌数.如果规格为25格×16格的计数板,除了取其4个对角方位外,还需再数中央的一个中格(即80个小方格)的酵母菌数.
(6)当遇到位于大格线上的酵母菌,一般只计数大方格的上方和右方线上的酵母细胞(或只计数下方和左方线上的酵母细胞).
(7)对每个样品计数三次,取其平均值,按下列公式计算每1ml菌液中所含的酵母菌个数.
3.计算公式
(1)16格×25格的血球计数板计算公式:
酵母细胞数/ml=100小格内酵母细胞个数/100×400×104×稀释倍数
(2)25格x16格的血球计数板计算公式:
酵母细胞数/ml=80小格内酵母细胞个数/80×400×104×稀释倍数。