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细胞如何计数？(整理自网络)
方法一：血球计数盘
此物一般有二个chambers，分别刻有9 个1 mm²大正方形，4 个角落之正方形再细刻为16 个小格，深度均为0.1 mm。
当chamber 上方盖上盖玻片后，每个大正方形之体积为1 mm²×0.1 mm=0.1 mL。
计数每个大正方形内之细胞数目，乘以稀释倍数，再乘以10000，即为每mL 中之细胞数目。
操作步骤
1、取少许细胞悬液（约15 μL）自血球计数盘chamber 上方凹槽加入，盖上盖玻片，于100
倍倒立显微镜下观察；
2、计数四个大方格之细胞总数，再除4，乘以稀释倍数，最后乘以10000，即为每mL 中
细胞悬浮液之细胞数。
若细胞位于刻线上，只计上线与右线之细胞（下线与左线之细胞）。
计算公式为：4个大格细胞总数×稀释倍数×10000/4=细胞数/mL。
注：（1）计数板计数时，最适浓度为5～100000 细胞/mL，此范围外计数误差偏大。
高浓度细胞悬液，可取出部分作稀释或连续稀释后计数。
（2）吸管吸取细胞，让吸管在计数板一侧的凹槽处流出液体，至盖玻片被液体充满为止，不要溢出盖玻片，也不要过少或带气泡；（有人认为，10 uL 就可以被虹吸作用吸入且铺满计数板）。
（3）移液器（20 μL 的微量加样器）吸取20 μL 细胞悬液至计数板边缘，液体经虹吸作用进入凹槽。
（4）静置半分钟再于显微镜下观察。
方法二：粒子计数器自动计数。
细胞计数方法——-－-—细胞计数板法实验原理:当待测细胞悬液中细胞均匀分布时,通过测定一定体积悬液中得细胞得数目,即可换算出每毫升细胞悬液中细胞得细胞数目。
具体操作:１. 将计数板及盖片擦拭干净,并将盖片盖在计数板。
２、将细胞悬液吸出少许,滴加在盖片边缘,使悬液充满盖片与计数板之间,静置３miｎ,注意盖片下不要有气泡,也不能让悬液流入旁边槽中。
3。
计算板四大格细胞总数,压线细胞只计左侧与上方得。
然后按公式计算:细胞数/ｍL=四大格细胞总数/4×1０个／ml(注:当细胞很多时,可在四个格中选一定数目较平均得小格,由于每大格中有１6个小格,然后计左侧与上方得细胞数,求出每小格得细胞数,取平均值m,m×1６即每个格得平均值。
所以,细胞密度=m×1６×10个／ml)说明:公式中除以4,因为计数了４个大格得细胞数。
公式中乘以10因为计数板中每一个大格得体积为:１。
0mm(长)×1.0mm(宽)×０。
１mm(高)=0.1mm 而1ml=1０00ul＝１0０0ｍm (注意:镜下偶见有两个以上细胞组成得细胞团,应按单个细胞计算,若细胞团10%以上,说明分散不好,需重新制备细胞悬液。
)=========＝===============＝==＝=＝=＝＝===＝=＝＝====＝==细胞计数板得使用一、血球计数板-基本构造血球计数板就是一块特制得厚型载玻片,载玻片上有四个槽构成三个平台。
中间得平台较宽,其中间又被一短横槽分隔成两半,每个半边上面各刻有一小方格网,每个方格网共分九个大格,中央得一大格作为计数用,称为计数区。
计数区得刻度有两种:一种就是计数区分为１６个大方格(大方格用三线隔开),而每个大方格又分成２5个小方格;另一种就是一个计数区分成２5个大方格(大方格之间用双线分开),而每个大方格又分成1６个小方格。
但就是不管计数区就是哪一种构造,它们都有一个共同特点,即计数区都由400个小方格组成、计数区边长为１ｍｍ,则计数区得面积为1mm２,每个小方格得面积为1/400mm2。
细胞计数方法------细胞计数板法实验原理：当待测细胞悬液中细胞均匀分布时，通过测定一定体积悬液中的细胞的数目，即可换算出每毫升细胞悬液中细胞的细胞数目。
具体操作：1. 将计数板及盖片擦拭干净，并将盖片盖在计数板。
2. 将细胞悬液吸出少许，滴加在盖片边缘，使悬液充满盖片和计数板之间，静置3min，注意盖片下不要有气泡，也不能让悬液流入旁边槽中。
3. 计算板四大格细胞总数，压线细胞只计左侧和上方的。
然后按公式计算：细胞数/mL=四大格细胞总数/4×104个/ml(注：当细胞很多时，可在四个格中选一定数目较平均的小格，由于每大格中有16个小格，然后计左侧和上方的细胞数，求出每小格的细胞数，取平均值m，m×16即每个格的平均值。
所以，细胞密度=m×16×104个/ml)说明：公式中除以4，因为计数了4个大格的细胞数。
公式中乘以104因为计数板中每一个大格的体积为：1.0mm（长）×1.0mm（宽）×0.1mm（高）=0.1mm3而1ml=1000ul=1000mm3（注意：镜下偶见有两个以上细胞组成的细胞团，应按单个细胞计算，若细胞团10%以上，说明分散不好，需重新制备细胞悬液。
）================================================细胞计数板的使用一、血球计数板-基本构造血球计数板是一块特制的厚型载玻片，载玻片上有四个槽构成三个平台。
中间的平台较宽，其中间又被一短横槽分隔成两半，每个半边上面各刻有一小方格网，每个方格网共分九个大格，中央的一大格作为计数用，称为计数区。
计数区的刻度有两种：一种是计数区分为16个大方格（大方格用三线隔开），而每个大方格又分成25个小方格；另一种是一个计数区分成25个大方格（大方格之间用双线分开），而每个大方格又分成16个小方格。
但是不管计数区是哪一种构造，它们都有一个共同特点，即计数区都由400个小方格组成。
血球计数板-基本构造血球计数板是一块特制的厚型载玻片，载玻片上有四个槽构成三个平台。
中间的平台较宽，其中间又被一短横槽分隔成两半，每个半边上面各刻有一小方格网，每个方格网共分九个大格，中央的一大格作为计数用，称为计数区。
计数区的刻度有两种：一种是计数区分为16个大方格（大方格用三线隔开），而每个大方格又分成25个小方格；另一种是一个计数区分成25个大方格（大方格之间用双线分开），而每个大方格又分成16个小方格。
但是不管计数区是哪一种构造，它们都有一个共同特点，即计数区都由400个小方格组成。
计数区边长为1mm，则计数区的面积为1mm2，每个小方格的面积为1/400mm2。
盖上盖玻片后，计数区的高度为0.1mm，所以每个计数区的体积为0.1mm3，每个小方格的体积为1/4000mm3。
使用细胞计数板计数时，先要测定每个小方格中微生物的数量，再换算成每毫升菌液（或每克样品）中微生物细胞的数量。
细胞计数板-使用方法1．视待测菌悬液浓度，加无菌水适当稀释（斜面一般稀释100倍？），以每小格的菌数可数为度。
2．取洁净的细胞计数板一块，在计数区上盖上一块盖玻片。
3．将菌悬液摇匀，用滴管吸取少许，从计数板中间平台两侧的沟槽内沿盖玻片的下边缘滴入一小滴（不宜过多），让菌悬液利用液体的表面张力充满计数区，勿使气泡产生，并用吸水纸吸去沟槽中流出的多余菌悬液。
也可以将菌悬液直接滴加在计数区上（不要使计数区两边平台沾上菌悬液，以免加盖盖玻片后，造成计数区深度的升高），然后加盖盖玻片（勿使产生气泡）。
4．静置片刻，使细胞沉降到计数板上，不再随液体漂移。
将细胞计数板放置于显微镜的载物台上夹稳，先在低倍镜下找到计数区后，再转换高倍镜观察并计数。
细胞计数方法------细胞计数板法汇总细胞计数方法------细胞计数板法实验原理:当待测细胞悬液中细胞均匀分布时，通过测定一定体积悬液中的细胞的数目，即可换算出每毫升细胞悬液中细胞的细胞数目。
具体操作:1. 将计数板及盖片擦拭干净，并将盖片盖在计数板。
2. 将细胞悬液吸出少许，滴加在盖片边缘，使悬液充满盖片和计数板之间，静置3min，注意盖片下不要有气泡，也不能让悬液流入旁边槽中。
3. 计算板四大格细胞总数，压线细胞只计左侧和上方的。
然后按公式计算:4细胞数/mL=四大格细胞总数/4×10个/ml(注:当细胞很多时，可在四个格中选一定数目较平均的小格，由于每大格中有16个小格，然后计左侧和上方的细胞数，求出每小格的细胞数，取平均值m，m 4×16即每个格的平均值。
所以，细胞密度=m×16×10个/ml) 说明:公式中除以4，因为计数了4个大格的细胞数。
4公式中乘以10因为计数板中每一个大格的体积为:331.0mm(长)×1.0mm(宽)×0.1mm(高)=0.1mm 而 1ml=1000ul=1000mm(注意:镜下偶见有两个以上细胞组成的细胞团，应按单个细胞计算，若细胞团10%以上，说明分散不好，需重新制备细胞悬液。
)================================================细胞计数板的使用一、血球计数板-基本构造血球计数板是一块特制的厚型载玻片，载玻片上有四个槽构成三个平台。
中间的平台较宽，其中间又被一短横槽分隔成两半，每个半边上面各刻有一小方格网，每个方格网共分九个大格，中央的一大格作为计数用，称为计数区。
计数区的刻度有两种:一种是计数区分为16个大方格(大方格用三线隔开)，而每个大方格又分成25个小方格;另一种是一个计数区分成25个大方格(大方格之间用双线分开)，而每个大方格又分成16个小方格。
细胞计数方法--—--—细胞计数板法实验原理：当待测细胞悬液中细胞均匀分布时，通过测定一定体积悬液中得细胞得数目,即可换算出每毫升细胞悬液中细胞得细胞数目。
具体操作:1、将计数板及盖片擦拭干净,并将盖片盖在计数板．2、将细胞悬液吸出少许,滴加在盖片边缘,使悬液充满盖片与计数板之间,静置3min,注意盖片下不要有气泡，也不能让悬液流入旁边槽中。
3、计算板四大格细胞总数,压线细胞只计左侧与上方得。
然后按公式计算:细胞数/mL=四大格细胞总数/4×１0个/ml（注：当细胞很多时,可在四个格中选一定数目较平均得小格,由于每大格中有16个小格,然后计左侧与上方得细胞数,求出每小格得细胞数，取平均值m,ｍ×16即每个格得平均值。
所以,细胞密度=m×１6×10个/mｌ)说明:公式中除以4,因为计数了4个大格得细胞数。
公式中乘以10因为计数板中每一个大格得体积为：1、0mm(长）×1、0mｍ(宽）×0、1mｍ(高)=0、1mm 而1ml＝1000ｕl=1０００ｍm(注意:镜下偶见有两个以上细胞组成得细胞团,应按单个细胞计算,若细胞团10%以上,说明分散不好,需重新制备细胞悬液。
)========＝==＝＝=====＝===＝=＝＝＝=====＝======＝====＝===细胞计数板得使用一、血球计数板-基本构造血球计数板就是一块特制得厚型载玻片,载玻片上有四个槽构成三个平台。
中间得平台较宽,其中间又被一短横槽分隔成两半,每个半边上面各刻有一小方格网,每个方格网共分九个大格,中央得一大格作为计数用,称为计数区.计数区得刻度有两种：一种就是计数区分为16个大方格（大方格用三线隔开）,而每个大方格又分成2５个小方格;另一种就是一个计数区分成25个大方格(大方格之间用双线分开),而每个大方格又分成16个小方格。
但就是不管计数区就是哪一种构造,它们都有一个共同特点，即计数区都由400个小方格组成。
细胞计数板的计数公式细胞计数板是咱们在生物学研究和实验中经常会用到的一个小工具，它能帮咱们搞清楚细胞的数量。
要说这细胞计数板的计数公式，那可得好好说道说道。
先来说说细胞计数板长啥样。
它就像一个小小的方格世界，被划分成了好多小格子。
这些格子可不是随便划分的，那都是有讲究的。
咱们用细胞计数板的时候，得先把细胞悬液滴在上面，然后在显微镜下观察。
这时候问题就来了，怎么数这些细胞呢？这就得靠咱们的计数公式啦。
公式是这样的：细胞数/mL = （四个大格子细胞总数/4）× 10^4 ×稀释倍数。
我给您举个例子啊，有一次我带学生们做实验，用的就是细胞计数板。
那时候，有个学生特别较真儿，非要弄明白这个公式是咋来的。
我就跟他细细地解释。
咱们先看那四个大格子，为啥除以 4 呢？因为要取个平均值嘛，这样更准确。
然后乘以 10^4 ，这是因为细胞计数板上每个大格子的体积是固定的，乘以这个数就是把细胞数换算成每毫升的数量。
还有那个稀释倍数，要是咱们之前对细胞悬液做了稀释，那就得把这个考虑进去，才能得到原来细胞悬液中的真实细胞数量。
这个学生听完，恍然大悟，然后自己认认真真地数细胞，算结果。
看着他那股认真劲儿，我心里特别欣慰。
再来说说在使用这个公式的时候要注意的地方。
首先，数细胞的时候得细心，可别多数或者少数了。
还有啊，细胞悬液得均匀，不然数出来的结果可就不准啦。
总之，细胞计数板的计数公式虽然看起来有点复杂，但只要咱们明白了其中的道理，多练习几次，就能熟练掌握，为咱们的生物学研究和实验提供准确的数据支持。
就像咱们做任何事情一样，只要用心去琢磨，就没有搞不定的！希望大家都能跟细胞计数板成为好朋友，让它为咱们的科学探索之路助力！。
细胞计数板的使⽤⽅法⾎球计数板-基本构造⾎球计数板是⼀块特制的厚型载玻⽚，载玻⽚上有四个槽构成三个平台。
中间的平台较宽，其中间⼜被⼀短横槽分隔成两半，每个半边上⾯各刻有⼀⼩⽅格⽹，每个⽅格⽹共分九个⼤格，中央的⼀⼤格作为计数⽤，称为计数区。
计数区的刻度有两种：⼀种是计数区分为16个⼤⽅格（⼤⽅格⽤三线隔开），⽽每个⼤⽅格⼜分成25个⼩⽅格；另⼀种是⼀个计数区分成25个⼤⽅格（⼤⽅格之间⽤双线分开），⽽每个⼤⽅格⼜分成16个⼩⽅格。
但是不管计数区是哪⼀种构造，它们都有⼀个共同特点，即计数区都由400个⼩⽅格组成。
计数区边长为1mm，则计数区的⾯积为1mm2，每个⼩⽅格的⾯积为1/400mm2。
盖上盖玻⽚后，计数区的⾼度为0.1mm，所以每个计数区的体积为0.1mm3，每个⼩⽅格的体积为1/4000mm3。
使⽤细胞计数板计数时，先要测定每个⼩⽅格中微⽣物的数量，再换算成每毫升菌液（或每克样品）中微⽣物细胞的数量。
细胞计数板-使⽤⽅法1．视待测菌悬液浓度，加⽆菌⽔适当稀释（斜⾯⼀般稀释100倍），以每⼩格的菌数可数为度。
2．取洁净的细胞计数板⼀块，在计数区上盖上⼀块盖玻⽚。
3．将菌悬液摇匀，⽤滴管吸取少许，从计数板中间平台两侧的沟槽内沿盖玻⽚的下边缘滴⼊⼀⼩滴（不宜过多），让菌悬液利⽤液体的表⾯张⼒充满计数区，勿使⽓泡产⽣，并⽤吸⽔纸吸去沟槽中流出的多余菌悬液。
也可以将菌悬液直接滴加在计数区上（不要使计数区两边平台沾上菌悬液，以免加盖盖玻⽚后，造成计数区深度的升⾼），然后加盖盖玻⽚（勿使产⽣⽓泡）。
4．静置⽚刻，使细胞沉降到计数板上，不再随液体漂移。
将细胞计数板放置于显微镜的载物台上夹稳，先在低倍镜下找到计数区后，再转换⾼倍镜观察并计数。
由于⽣活细胞的折光率和⽔的折光率相近，观察时应减弱光照的强度。
5．计数时若计数区是由16个⼤⽅格组成，按对⾓线⽅位，数左上、左下、右上、右下的4个⼤⽅格（即100⼩格）的菌数。
一、目的细胞计数法是细胞学实验中进行细胞计数的基本方法，通过细胞计数，能够保证实验的准确性、稳定性和可重复性。
二、范围适用于中国国家流感中心的所有技术人员进行细胞计数的操作。
三、定义细胞计数法是用来计数细胞悬液中细胞数量的一种方法。
一般利用计数板（红细胞计数板）进行。
即可用于分离（散）细胞培养接种前计数所制备的细胞悬液中的细胞数量，也可用于对培养物的细胞数量进行计数。
不论计数的对象如何，均须制备分散的细胞悬液。
四、程序（一）生物安全要求实验室生物安全级别：BSL-2（二）材料1．生长成片的MDCK 细胞2．血细胞计数板3．1mL 、10mL 无菌移液管4．台盼蓝（0.4% PBS 溶液）建议：经常检查试剂使用的有效期（三）实验步骤1．消化细胞（方法见MDCK 细胞培养标准操作规程）。
2．用血细胞计数板来计算细胞悬液中的细胞数，需要充分分散细胞。
3．在18μL 台盼蓝（0.4% PBS 溶液）中加入2μL 细胞悬液，混匀，成10倍标准操作规程（SOP稀释。
死细胞被染成蓝色。
4．将以上细胞悬液加入到血球计数板的载玻片与盖玻片之间的计数室中，在显微镜下计数。
5．计算计数室四个角上三线包围的正方形中的活细胞，压线的细胞计数遵循计数原则，数上不数下，数左不数右。
如果观察到成片或者成团的细胞，应重新悬浮细胞液，重新计数。
用以下公式计算每毫升悬液中活细胞的数量。
C=4个角正方形内的活细胞总数/4×104×10C：每毫升活细胞数；五、参考文件《流行性感冒诊断标准》。
细胞计数板使用方法实验原理：当待测细胞悬液中细胞均匀分布时，通过测定一定体积悬液中的细胞的数目，即可换算出每毫升细胞悬液中细胞的细胞数目。
具体操作：1. 将计数板及盖片擦拭干净，并将盖片盖在计数板。
2. 将细胞悬液吸出少许，滴加在盖片边缘，使悬液充满盖片和计数板之间，静置3min，注意盖片下不要有气泡，也不能让悬液流入旁边槽中。
3. 计算板四大格细胞总数，压线细胞只计左侧和上方的。
然后按公式计算：细胞数/mL=四大格细胞总数/4×104说明：公式中除以4，因为计数了4个大格的细胞数。
公式中乘以104因为计数板中每一个大格的体积为：1.0mm（长）×1.0mm（宽）×0.1mm（高）=0.1mm3 而1ml=1000mm3（注意：镜下偶见有两个以上细胞组成的细胞团，应按单个细胞计算，若细胞团10%以上，说明分散不好，需重新制备细胞悬液）细胞计数板的使用血球计数板-基本构造血球计数板是一块特制的厚型载玻片，载玻片上有四个槽构成三个平台。
中间的平台较宽，其中间又被一短横槽分隔成两半，每个半边上面各刻有一小方格网，每个方格网共分九个大格，中央的一大格作为计数用，称为计数区。
计数区的刻度有两种：一种是计数区分为16个大方格（大方格用三线隔开），而每个大方格又分成25个小方格；另一种是一个计数区分成25个大方格（大方格之间用双线分开），而每个大方格又分成16个小方格。
但是不管计数区是哪一种构造，它们都有一个共同特点，即计数区都由400个小方格组成。
计数区边长为1mm，则计数区的面积为1mm2，每个小方格的面积为1/400mm2。
盖上盖玻片后，计数区的高度为0.1mm，所以每个计数区的体积为0.1mm3，每个小方格的体积为1/4000mm3。
使用细胞计数板计数时，先要测定每个小方格中微生物的数量，再换算成每毫升菌液（或每克样品）中微生物细胞的数量。
细胞计数板-使用方法1．视待测菌悬液浓度，加无菌水适当稀释（斜面一般稀释100倍），以每小格的菌数可数为度。
细胞计数板的计数方法16格细胞计数板是一种常用的实验室设备，用于细胞计数和细胞浓度的测定。
它通常由一块具有16个小方格的玻片和一份计数盖玻片组成。
下面我将详细介绍细胞计数板的计数方法。
首先，准备工作很重要。
首先，我们需要将细胞样品制备好，使其悬浮在一种适当的缓冲液中。
然后，取出细胞计数板和计数盖玻片，并将它们清洗干净。
一般来说，我们可以用无酒精清洗剂清洗，并用去离子水漂洗干净。
然后，将细胞悬浮液使用吸管或移液器转移到计数板的特定区域。
计数盖玻片会自动吸附悬浮液，并形成一层薄膜。
请注意，在充满16个小方格之前，我们需要提前进行稀释，以确保在每个小方格中有足够的细胞数量。
通常，我们将在悬浮液中稀释后的细胞数与稀释液的体积进行比例计算，以得出稀释倍数。
接下来，使用光学显微镜观察和计数细胞。
在使用显微镜之前，我们需要确保显微镜的聚焦和放大倍数设置正确。
在观察时，选择一个方便的小方格作为起始点，并沿着方格的边线进行计数，直到计数完所有的小方格。
每个小方格的边长是0.1mm，在厚盖玻片中高度为0.1mm。
因此，每个小方格的体积为0.01nl。
当我们观察细胞时，我们需要学会正确区分不同类型的细胞。
有时，我们需要染色来帮助我们观察和计数细胞。
一般来说，我们可以使用胚胎生长的染色剂，如Trypan蓝。
在计数细胞时，我们需要注意一些规则和技巧。
首先，我们应该保持计数计划连续而有序，以避免重复或遗漏某些细胞。
其次，我们需要识别并计数那些“接触”线上的细胞。
这些细胞通常只在其中一个小方格中出现，我们应该记住并进行计数。
此外，我们应该尽力避免计数那些出现在计数框线上的细胞，因为它们可能在其他计数方格内。
最后，我们需要根据细胞计数板的数值进行计算。
给定计数板的体积为0.01nl，我们可以使用以下公式来计算细胞密度：浓度（cells/mL）= 细胞数/ （体积（mL）x 稀释倍数）细胞计数板是一种非常实用的工具，广泛应用于生物学、生物医学和临床实验室。
9孔的细胞计数板计算公式的理解
细胞悬液细胞数/ml＝4个大格细胞总数/4×10,000。
如计数前已稀释，可再乘稀释倍数。
计数时，只计数完整的细胞，若聚成一团的细胞则按一个细胞进行计数。
在一个大方格中，如果有细胞位于线上，一般计下线细胞不计上线细胞，计左线细胞不计右线细胞。
二次重复计数误差不应超过±5％。
镜下观察，凡折光性强而不着色者为活细胞，染上蓝色者为死细胞。
细胞计数板计算公式：L=N×5×10。
细胞计数板是一种常用的细胞计数工具，医学上常用来计数红细胞、白细胞等而得名，也常用于计算一些细菌、真菌、酵母等微生物的数量，是一种常见的生物学工具。
细胞（英文名：cell）并没有统一的定义，比较普遍的提法是：细胞是生物体基本的结构和功能单位。
已知除病毒之外的所有生物均由细胞所组成，但病毒生命活动也必须在细胞中才能体现。
1。
血球计数板-基本构造血球计数板是一块特制的厚型载玻片， 载玻片上有四个槽构成三个平台。
中间的 平台较宽，其中间又被一短横槽分隔成两半，每个半边上面各刻有一小方格网， 每个方格网共分九个大格，中央的一大格作为计数用，称为计数区。
计数区的刻 度有两种：一种是计数区分为16个大方格（大方格用三线隔开），而每个大方 格 又分成25个小方格；另一种是一个计数区分成25个大方格（大方格之间用双线 分开），而每个大方格又分成16个小方格。
但是不管计数区是哪一种构造，它 们 都有一个共同特点，即计数区都由400个小方格组成。
计数区边长为1mm 则计数区的面积为1mA ，每个小方格的面积为1/400口吊。
盖 上盖玻片后，计数区的高度为0.1mm 所以每个计数区的体积为0.1mA,每个小 方格的体积为1/4000mm 。
使用细胞计数板计数时，先要测定每个小方格中微生物的数量， 再换算成每毫升 菌液（或每克样品）中微生物细胞的数量细胞计数板-使用方法1 •视待测菌悬液浓度，加无菌水适当稀释（斜面一般稀释100倍），以每小格的菌数可数为度2•取洁净的细胞计数板一块，在计数区上盖上一块盖玻片3•将菌悬液摇匀，用滴管吸取少许， 从计数板中间平台两侧的沟槽内沿盖玻片的下边缘滴入“！抽囂耳 Hil4k #* il Vi - h 屮■ If r 破板霁觸鈕一小滴（不宜过多），让菌悬液利用液体的表面张力充满计数区, 勿使气泡产生，并用吸水纸吸去沟槽中流出的多余菌悬液。
也可以将菌悬液直接滴加在计数区上（不要使计数区两边平台沾上菌悬液，以免加盖盖玻片后，造成计数区深度的升高），然后加盖盖玻片（勿使产生气泡）。
4•静置片刻，使细胞沉降到计数板上，不再随液体漂移。
将细胞计数板放置于显微镜的载物台上夹稳，先在低倍镜下找到计数区后，再转换高倍镜观察并计数。
由于生活细胞的折光率和水的折光率相近，观察时应减弱光照的强度。
5.计数时若计数区是由16个大方格组成，按对角线方位，数左上、左下、右上、右下的4个大方格（即100小格）的菌数。
细胞计数方法——细胞计数板法实验原理：当待测细胞悬液中细胞均匀分布时，通过测定一定体积悬液中的细胞的数目，即可换算出每毫升细胞悬液中细胞的细胞数目。
具体操作：1. 将计数板及盖片擦拭干净，并将盖片盖在计数板。
2. 吸出稀释好一定倍数的均匀密度的细胞悬液少许，滴加在盖片边缘，使悬液充满盖片和计数板之间，静置3min，注意盖片下不要有气泡，不能让悬液流入旁边槽中。
3. 记录板四角大方格细胞总数，压线细胞只计左侧和上方的。
然后按公式计算：细胞悬液密度=（四大方格细胞总数/4）×104×稀释倍数个/ml=每大方格数目/1×104 ×稀释倍数个/ml(注意：在细胞计数板上，每大格有16个小方格。
当细胞很多时，可在四个方大格中选定不同区域的组合方格，或单独小方格记数，或四个小方格组合的区域来记数。
已知每个小方格的体积为1/16×10-4ml，然后记数选定小方格计左侧和上方压线细胞数和小方格区域内的细胞数，记录出每小方格的细胞数，然后取平均值m，m×16即每个大方格的平均值。
所以，细胞密度=m×16×104×稀释倍数个/ml)说明：公式中除以4，因为计数了4个大方格的细胞数。
公式中乘以104因为计数板中每一个大方格的体积为：1.0mm（长）×1.0mm（宽）×0.1mm（高）=0.1mm3而 1ml=1000ul=1000mm3（注意：镜下偶见有两个以上细胞组成的细胞团，应按单个细胞计算，若细胞团10%以上，说明分散不好，需重新制备细胞悬液。
）================================================细胞计数板的使用一、血球计数板-基本构造血球计数板是一块特制的厚型载玻片，载玻片上有四个槽构成三个平台。
中间的平台较宽，其中间又被一短横槽分隔成两半，每个半边上面各刻有一小方格网，每个方格网共分九个大格，中央的一大格作为计数用，称为计数区。
细胞计数板使用方法
细胞计数板是一种常用的实验室工具，用于快速而准确地计算细胞数量。
以下是详细的使用方法：
1. 准备细胞计数板及相关材料：细胞计数板、细胞悬液、显微镜、移液器、吸头、生理盐水或细胞培养基。
2. 从细胞培养物中取出适量悬浮细胞，使用移液器将细胞悬液滴在细胞计数板的数格中。
3. 注意避免气泡，确保细胞悬液充分填满数格。
可以稍微轻轻摇晃细胞计数板，使细胞均匀分布在数格内。
4. 将细胞计数板放在显微镜下，使用10倍或20倍的物镜放大倍数。
调整焦距以清晰地观察数格中的细胞。
5. 在显微镜下，以一个正方形的数格为单元，计数该数格中的细胞数量。
遵循计数板上线计数规则，即计数板的四条边（上下左右）的数格细胞只计算该边上线格的细胞，而中央任意一格线格的细胞都要计数。
6. 将所计数的细胞数除以该数格的体积（通常为0.1或0.2 mm³），得到细胞的浓度。
7. 选取不同的数格进行计数，通常建议计数至少3个数格，以提高数据的准确性。
将多个数格的计数结果求平均，得到最终的细胞浓度。
8. 根据实验需要，可以根据细胞计数得到的浓度调整细胞悬液的体积，以达到所需的细胞数目。
9. 清洗细胞计数板，用生理盐水或细胞培养基反复冲洗数格，确保细胞悬液完全清除。
细胞计数板是一种简单而实用的细胞计数方法，但需要注意的是，在操作过程中要严格遵守无菌和安全操作规范，以确保实验结果的准确性和可靠性。
