血型鉴定、不规则抗体筛查及交叉配血步骤
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交叉配血工作制度一、受血者配血试验的血标本必须是输血3天以内的血标本,标本无溶血、无霉菌和细菌生长。
二、严格执行查对:对姓名、科室、床号、血型。
三、逐项核对输血申请单受血者和供血者血样,复查受血者和供血者ABO血型(必须正反定型),并常规检查患者RH(D)血型,正确无误时方可进行交叉配血。
做到输血申请单、受血者和供血者血样三者不分离。
四、ABO血型和RH血型的鉴定必须用两种方法鉴定,注意观察抗A、抗B试剂反应时间,严守标本从左到右的顺序排列,作好标记。
注意血清、血球比例适度,反定型时配制的2~5%红细胞悬液不能溶血。
五、交叉配血时必须严格遵守正规操作程序,认真观察结果、反复确认,如果病人同时输多个血,必须将多个献血员作交叉配血,发现不相合时要查找献血员之间的配合情况。
六、观察合血结果后认真填写报告单,并再次核对输血申请单,受血者和供血者血样,报告单要求字迹工整、记录完整、准确无误。
七、如遇有下列情况必须按《全国临床检验操作规程》有关规定作不规则抗体检查:1、交叉配血不合时;对有输血史、妊娠史或短期内需要接受多次输血者。
八、严格核对制度,两人值班时,交叉配血试验由两人互相核对,一人值班时,操作完毕后自己复核,并填写配血试验结果,登记签字。
整个交叉配血试验必须做到3项逐项核对,即合血前核对、合血时核对、合好血填单子时再次核对。
九、配血者标本及合血管保留7天后才能处理。
特殊病例分离血球、血清冰冻保存。
输血科工作制度1、输血科工作人员必须了解并贯彻执行《中华人民共和国献血法》、《临床输血技术规范》、《医疗机械临床用血管理办法(试行)》等有关法律法规,以及我院《输血管理规定》和补充规定。
2、输血科工作人员应在输血管理委员会和输血科科主任的领导下进行工作。
必须遵守劳动纪律,坚守工作岗位,如有特殊情况需要暂时离开,必须向有关人员交待,说明去向、事由、时间并按时返回。
3、一般输血,医生预先填写输血申请单并逐项填写清楚。
输血科疑难交叉配血试验标准操作规程1.目的为规范疑难交叉配血试验操作,保证临床输血安全有效,依据《输血实验室管理程序》4.1.7(2)条款的要求制定本规程。
2.适用范围适用于医疗机构输血科对临床疑难交叉配血受血者,主要是对红细胞ABO血型鉴定困难、红细胞不规则抗体筛选阳性及自身免疫性溶血性贫血(AlHA)患者的交叉配血试验。
3.职责医疗机构输血科技术人员负责疑难交叉配血试验。
4.原理本规程中疑难交叉配血是指受血者ABO血型鉴定困难、红细胞不规则抗体筛选阳性或受血者是自身免疫性溶血性贫血患者等情况下的交叉配血试验。
配血前需确定受血者的ABO血型或红细胞不规则抗体的特异性,选择ABO血型相容的红细胞或红细胞不规则抗体对应抗原阴性的红细胞进行交叉配血试验。
5.所需设备和试剂普通离心机,血型血清学专用离心机,水浴震荡仪,普通显微镜等。
6.检测环境条件室温应控制在18-27°C,湿度应保持30%-70%°7.步骤与方法7.1交叉配血前受血者ABO血型鉴定不确定者执行《ABO疑难血型鉴定标准操作规程》,确定ABO血型后,再选择ABO血型相同或相容的献血者血液进行交叉配血试验。
7.2红细胞不规则抗体筛选阳性时7.2.1随机与库存血中多袋血液进行交叉配血试验,选择交叉配血相合的血液输注。
7.2.2我院库存血中无相合的血液时,应立即联系临床医生说明情况:①上述实际情况;②应送市血液中心进行“疑难配血”,会产生费用,存在配血不成功的可能:③详细告知家属,决定是否送市血液中心。
7.2.3家属同意后,由医生填写“免疫学申请单”,并抽取血样EDTA抗凝血5-10ml,送输血科。
7.2.4输血科联系血液中心,并送血样。
7.3冷型自身抗体或冷型AIHA患者交叉配血试验:执行7.2.2-7.2.4程序8.交叉配血结果判定主侧、次侧交叉配血均无溶血、无凝集,表示配血相合。
对于AlHA患者,已经排除同种抗体的存在,而所有交叉配血又都不相和时,可选择凝集强度弱于自身凝集的血液输注。
血型交叉配型_血型鉴定和交叉配血技术的进展 医学界在输血治疗手段出现之初,曾发生过无数血的教训。1492年,首例输血由于使用的方法很原始,没有成功病人死亡;1667年法国国王御医Jean用羊血治疗精神病患者,偿试将动物血输给人导致死亡,这一严重事故使以后150多年没人再敢尝试输血治疗。1818年,英国产科医生JameBlundell首次用人血输治患者,取得一定效果。1900年奥地利维也纳大学科学家KarlLandteiner发现ABO血型及Rh血型系统,增加了人类对血型系统的认识。直到1907年,Hektoen建议通过献血者和受血者之间的交叉配血才提高了输血的安全性,ReubenOttenberg完成了首例使用血型和交叉配血的输血实验,开启了现代输血医学的新纪元职称。
输血前试验包括血型鉴定、抗体筛选和交叉配血,其中交叉配血是关键[1]。交叉配血是在血型鉴定的基础上,进一步证实血型测定是否有误,以及受血者和供血者之间是否存在血型不合的抗原抗体反应,以保证受血者的输血安全。这一试验对于未进行红细胞血型抗体筛选的患者尤为重要,红细胞血型抗体有完全抗体和不完全抗体。完全抗体为分子量较大的IgM抗体,可在盐水介质的交叉配血中与相应的红细胞发生凝集反应;不完全抗体指ABO系统以外的其他血型抗体,为分子量较小的IgG抗体,在盐水介质中虽然能够结合红细胞上的抗原,但不能使红细胞凝集,必须通过特定的方法使致敏红细胞发生凝集。根据红细胞血型抗体的特性,血型鉴定和交叉配血方法在不断产生,其检测技术也在不断发展。
1盐水交叉配血法 盐水法配血时,用生理盐水配制红细胞悬液,红细胞膜上由于唾液酸中的羧基离子而带负电,此负电荷形成的排斥力(Zeta电位)使单个红细胞之间保持一定的距离,当其与血清相配合时,血清中的大分子完全抗体,能在相应红细胞之间搭桥,使其发生凝集,通过观察凝集或溶血来判断配血结果。盐水法是交叉配血的必做项目,能简便快速的检测IgM型抗体,发现血型是否错误或判断是否发生溶血,但不能检出不完全IgG型抗体[2,3],不能有效的防止免疫性溶血性和非溶血性输血反应的发生,因此单用盐水法配血存在一定的危险性。
稀有血型、不规则抗体阳性及配血不相符等情况的报告程序
为保证临床安全用血、合理用血,制定稀有血型、不规则抗体阳性及配血不相符等情况的报告程序,输血科人员在进行交叉配血实验时,如发生此类情况,应按照以下程序报告。
一、输血科人员在进行交叉配合实验时,应严格按照操作规程,认真完成配血实验,在多人值班时,应由另一人进行复核,确保无误后,方可签字发出血液。
二、对稀有血型的输血,输血科应立即通知用血临床科室,在血液无充足储备情况下,应暂停手术。
输血科人员应上报输血科主任,立刻与市中心血站取得联系,保证血液的供应,对紧急的稀有血型输血,输血科人员应立即上报输血科主任,输血科主任应立即与血站联系,确保急症抢救用血并上报医务科。
三、对不规则抗体阳性及配血不相合等情况,输血科人员应重新做不规则抗体及交叉配合实验并复查血型,必要时更换试剂,重做试验。
如仍然不相符,应上报输血科主任,输血科主任应上报医务科和主管院长。
上述工作制服规范了不规则抗体阳性及配血不相合等情况的报告程序,输血科人员应认真学习掌握,确保临床安全、有效、合理用血。
交叉配血标准操作规程(一)检验目的检测供血者与受血者之间的输血相容性,包括主侧配血与次侧配血,确保输血安全。
(二)检验原理1.凝聚胺法利用多聚季胺盐类——凝聚胺携带很多正电荷,中和红细胞表面的负电荷,使红细胞之间距离减少,引起正常红细胞可逆性凝集。
无抗体致敏的红细胞被凝聚胺凝集,当加入中和液后,则凝集消散,而抗体致敏的红细胞被凝聚胺凝集,则不能消散,以此来判断供、受者间血液的相容性。
2.微柱凝胶法微柱凝胶卡的微管中装填有葡聚糖凝胶颗粒和抗人球蛋白试剂,红细胞表面抗原与其对应的IgG抗体结合以后,在离心力的作用下不断向管底沉降,并与抗人球蛋白结合形成红细胞凝集,凝胶颗粒具有分子筛的作用,可以阻滞凝集的红细胞在离心力的作用下通过凝胶颗粒,使其悬浮在凝胶上端,未凝集的红细胞则可以通过凝胶颗粒到达微管底部。
3.玻璃珠微柱法微柱卡的每一个微管中装填有直径均一的玻璃微珠和抗人球蛋白试剂(抗-IgG和抗补体C3),红细胞表面抗原与其对应的IgG抗体结合以后,在离心力的作用下不断向管底沉降,并与抗人球蛋白结合形成红细胞凝集,玻璃微珠具有分子筛的作用,可以阻滞凝集的红细胞在离心力的作用下通过玻璃微珠,使其悬浮在玻璃微珠层的上端,未凝集的红细胞则可以通过玻璃微珠之间的微小空隙到达微管底部。
(三)适用范围适用于手工凝聚胺法、全自动微柱凝胶法、全自动玻璃珠微柱法交叉配血试验。
(四)设备性能参数各种交叉配血检测系统性能指标参见相应检测系统说明书。
(五)器材与试剂1.器材KA-2200血清学专用离心机、B600-A型低速离心机、WADiana全自动血型配血系统、SWING-SAXO血型配血系统、Techno全自动血型配血系统、Othro Au-toVuelnnova全自动血型及配血系统、阅片灯箱、光学显微镜、塑料软试管、塑料硬质试管(100m m×l2mm和75m m ×l2mm)、试管架、一次性塑料滴管、记号笔。
月亮县 中医院 项 目 文件编号:YCXZYYJYK_SOP_10
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检验科 血库日常操作SOP手册 版本:第3版,第1次修订 生效日期:20180101
编写者:张三三 审核者:李四四 批准者:李四四 时 间:20180101 时 间:20180101 时 间:20180101
SOP_10-3 交叉配血试验标准操作程序 一、目的:确保输血安全,严格检验质量标准,为临床提供及时、可靠的结果报告。 二、适用范围:交叉配血试验。 三、操作人员:检验科授权工作人员 四、操作步骤: 随着临床输血实践的增多,输血一方面在临床治疗中特别是在对失血性患者的救治发挥了前所未有的作用;另一方面也出现了不少不良反应和致命的事故。这对输血技术的进一步发展提出新的挑战,输血医学出现了奇迹般的创新。血型学、血液免疫学和输血相关病毒学的深入发展,使输血置于更加安全的轨道。 1. 原理:交叉配血试验也称配合性试验,是保证安全输血。此试验是检查不配合性,使献血员与受血者(病人)的血液间没有可测的不相配合的抗原-抗体成分。配血试验阴性,输血后患者的血清(红细胞)不会与献血员的红细胞(血清)发生反应。即使已知患者和献血员的ABO及Rh(D)血型相同,配合性试验也是必要的。因为除了ABO、Rh(D)外还有其他红细胞血型系统存在。 2. 试剂和材料: (1)受血者血清与3%红细胞悬液 (2)供血者血清与3%红细胞悬液 3. 操作方法: 3.1 受血者配血试验的血标本必须是输血前3天之内的。 3.2 逐项核对输血申请单、受血者和供血者血样,复查受血者和供血者ABO血型(正、反定型),并常规检查患者Rh(D)血型(急诊抢救患者紧急输血时Rh(D)检查可除外)。 3.3 凡输注全血、浓缩红细胞、红细胞悬液、洗涤红细胞、冰冻红细胞、浓缩白细胞、手工 分离浓缩血小板等患者,应进行交叉配血试验。机器单采浓缩血小板应ABO血型同型输注。 3.4 交叉配血不合时;有输血史、妊娠史或短期内需要接收多次输血者必须作抗体筛选试验。 3.5.交叉配血试验包括: (1)受血者血清对供血者红细胞的主侧配血。 (2)受血者的红细胞对供血者血清的次侧配血。 (3)受血者的红细胞对受血者血清的自身对照。 3.6 盐水介质配血法 本法是目前最常用的配血方法,可以发现临床上最重要的ABO不配合性。当受血者和供血者细胞经混合并离心后,如有ABO不配合问题,就会很快显示出来,所以常称为“立即离心”(immediate spin)配血试验。 1.抽取受血者静脉血3~4ml,待凝固后分离血清,并将红细胞配成3%盐水悬液。 月亮县 中医院 项 目 文件编号:YCXZYYJYK_SOP_10
血型鉴定、交叉配血和抗体筛查的质量控制在医学实践中,血型鉴定、交叉配血和抗体筛查是不可或缺的检验项目。
这些项目在确保输血安全、治疗效果和疾病诊断中发挥着关键作用。
然而,这些检验仍然面临着诸多质量控制挑战。
本文将重点讨论血型鉴定、交叉配血和抗体筛查的质量控制措施,旨在提高这些检验项目的准确性和可靠性。
血型鉴定的质量控制血型鉴定是指确定个体红细胞表面的抗原类型,通常分为ABO血型系统和Rh 血型系统。
为确保鉴定结果的准确性,每个实验室都应建立严格的质量控制程序。
其中,以下几点是至关重要的:样本采集和标识正确的样本采集和标识是确保血型鉴定准确性的首要步骤。
采集的血液样本必须标记清晰,并确保与患者身份一致。
在采集和标识过程中,应遵循严格的规范和标准操作程序。
样本保存和处理血液样本的保存和处理也对血型鉴定结果的准确性至关重要。
样本应储存在适当的温度和湿度条件下,避免冻结或受热。
在进行血型鉴定之前,必须检查样本的可用性和有效性。
设备校准和维护所使用的血型鉴定设备必须经过定期校准和维护。
定期检查设备的准确性和灵敏度,确保其能够稳定可靠地进行血型鉴定。
质控样本的使用质量控制样本的使用是评估实验室血型鉴定准确性的关键手段。
通过定期使用质控样本进行验证和比对,可以及时发现潜在问题并进行纠正。
交叉配血的质量控制交叉配血是在输血前,检测供血者血液与受血者血液的相容性。
为确保交叉配血结果的准确性和安全性,下面是一些质量控制的关键要点:杂交细胞法杂交细胞法是一种常用的交叉配血方法,通过将供血者的红细胞与受血者的血清混合,观察是否会发生凝集反应来确定相容性。
在进行杂交细胞法时,应确保操作规范,避免外部因素干扰结果。
质控记录对交叉配血的每一步操作都应进行详细记录,包括样本信息、试剂配制、操作步骤等。
及时记录和归档这些信息有助于验证结果的准确性和追溯问题的根源。
质控样本验证定期使用质控样本验证交叉配血结果的准确性。
质控样本应涵盖常见的血型抗原和抗体组合,以确保实验室能够准确识别和判断不同的交叉配血情况。
血型鉴定、不规则抗体筛查及交叉配血步骤
一.血型鉴定
1.排管并标记患者红细胞悬液管、患者血浆管、患者ABO正定型试管、患者ABO反定型试
管、患者RhD定型试管。
2.标本准备分离患者的血浆,取一滴压积红细胞,三次洗涤,制备患者2%-5%红细胞悬液。
3.加样
ABO正定型:1滴(50ul)抗A、抗B试剂加1滴(50ul)患者红细胞悬液。
ABO反定型:1滴(50ul)患者血清加1滴(50ul)反定型试剂红细胞。
RhD定型:1滴(50ul)抗D血清加1滴(50ul)患者红细胞悬液。
4. 结果判断
离心(2档):轻摇试管,肉眼观察有无凝集,记录ABO、RhD血型结果。
二.不规则抗体筛查(生理盐水法+凝聚胺法)
1.排管标记01、02、03及自身对照管
2.加样各试管分别加入相应的患者血清2滴(100ul)及筛选细胞1滴(50ul)。
3.结果观察
离心(2档),观察结果
先看上清液有无溶血,轻轻混匀,肉眼观察有无凝集,结果判断并记录。
各试管分别加入低离子介质,轻轻混匀(参照试剂说明书)
各试管再分别加凝聚胺溶液2滴(100ul)混匀,离心
先观察上清液有无溶血
弃去上清液,留约,轻轻混匀
肉眼观察有无凝集(凝者继续试验,否则查找原因并重复试验)
各试管分别加入重悬液2滴(100ul),轻轻混匀
肉眼观察凝集是否在1min内消失
显微镜检查
三.交叉配血试验(生理盐水法+凝聚胺法)
1.标本准备
分离供血者血浆与红细胞
三次洗涤,制备供血者2%-5%红细胞悬液
2.排管标记
排管,主侧、次侧及自身对照管
3.加样
各试管分别加入相应的备检血清2滴(100ul)及2%-5%备检红细胞悬液1滴(50ul)4. 结果观察
离心(2档),观察结果
先看上清液有无溶血
轻轻混匀,肉眼观察有无凝集
结果判断并记录
各试管分别加入低离子介质,轻轻混匀(参照试剂说明书)
各试管再分别加凝聚胺溶液2滴(100ul)混匀,离心
先观察上清液有无溶血
弃去上清液,留,轻轻混匀
肉眼观察有无凝集(凝者继续试验,否则查找原因并重复试验)
各试管分别加入重悬液2滴(100ul),轻轻混匀
肉眼观察凝集是否在1min内消失
肉眼观察阴性者,显微镜检查
记录交叉配血结果
A、B、O试验红细胞悬液的制备
1. 分别采取已知A、B、O三种血型的红细胞,经盐水洗涤3次,以压紧红细胞配成不同浓度的红细胞悬液(见表格)
红细胞悬液的配置
悬液浓度(%)压实红细胞(滴)盐水(滴)
2 1 (40)
5 1 (16)
10 1 (8)
20 1 (4)
2. 为了防止红细胞悬液敏感性不一致,可随机采取3个以上健康成人血液,按A、B、O 型分别混合后,按上法制备。