05-1生物碱类成分分析

龙葵果实生物碱成分的研究【摘要】通过80%乙醇回流提取和酸碱处理从龙葵果实中得到总生物碱，采用硅胶柱层析和重结晶等方法分离得到3个生物碱成分。

通过质谱和核磁共振等波谱学技术鉴定其结构分别为澳洲茄碱（1），澳洲茄边碱（2）、β2-solamargine（3）。

【关键词】龙葵；澳洲茄碱；澳洲茄边碱【中图分类号】r284.2 【文献标识码】a 【文章编号】1004-7484（2013）05-0150-01龙葵为茄科植物龙葵或少花龙葵的干燥全草，又名苦葵、天茄子、黑天天、天泡果、野辣椒、黑茄子、野葡萄等[1]。

龙葵具有清热解毒、活血、利尿、消肿的功效，现代药理研究表明其具有较好的抗肿瘤、抑菌、抗病毒、解热镇痛、抗炎、降压和保肝等药理作用[2]。

近年来由于其具有较好的抗肿瘤作用而受到广泛的关注。

龙葵生物碱在未成熟果实中含量较高，目前，从龙葵中分离得到的生物碱成分主要为澳洲茄碱、澳洲茄边碱等甾体苷类生物碱。

本研究采用醇提、酸碱处理等方法从龙葵未成熟果实中得到总生物碱，通过柱层析和重结晶方法分离得到澳洲茄碱（1），澳洲茄边碱（2）和β2-solamargine（3）。

化合物1-4的结构（structures of compounds 1- 4）1 仪器与材料bruker avance 600 核磁共振仪（瑞士bruker公司），lc-ms联用仪（英国varian公司），小型提取浓缩机组（天津大明制药设备厂）。

龙葵未成熟果实购于四川省成都市国际商贸城荷花池中药材市场，经西南科技大学生命科学与工程学院侯大斌教授鉴定；澳洲茄碱和澳洲茄边碱的对照品购于成都曼斯特生物科技有限公司，柱色谱硅胶（200-300目青岛海浪硅胶干燥剂生产厂），gi60（0.015-0.040 mm，德国merck公司），其他试剂均为国产分析纯。

2 方法2.1 总生物碱的提取将龙葵未成熟果实干燥后粉碎成粗粉，取粗粉10kg，用100l80%乙醇在65 ℃条件下进行回流提取，每次4小时，共提取2次，合并提取液，减压回收溶剂后得总浸膏1500g。

生物碱知识点总结一、生物碱的分类生物碱是一类具有碱性的有机化合物，通常可以根据其化学结构和来源进行分类。

1. 植物生物碱植物生物碱是植物体内含有的一类具有碱性的天然有机化合物，通常由植物通过生物合成途径合成。

植物生物碱的来源非常广泛，包括但不限于各类植物的根、茎、叶和果实等部位。

植物生物碱的种类非常丰富，包括吗啡类生物碱、喜树碱类生物碱、喜马拉雅星状体碱类生物碱、喍得卡碱类生物碱等。

2. 真菌生物碱真菌生物碱是真菌体内含有的一类具有碱性的天然有机化合物，通常由真菌通过生物合成途径合成。

真菌生物碱的来源主要包括但不限于霉菌、放线菌、酵母菌等。

真菌生物碱具有非常多样的化学结构和生物活性，包括但不限于环毛霉素、紫杉醇、青霉素、链霉素等。

3. 动物生物碱动物生物碱是动物体内含有的一类具有碱性的天然有机化合物，通常由动物通过生物合成途径合成。

动物生物碱的来源主要包括但不限于两栖动物、昆虫、海洋生物等。

动物生物碱具有非常多样的化学结构和生物活性，包括但不限于腺苷、肾上腺素、组胺、乙酰胆碱等。

二、生物碱的合成生物碱的合成是指通过化学合成或生物合成的方法获得生物碱化合物。

生物碱的合成途径主要包括天然合成、半合成和全合成。

1. 天然合成天然合成是指生物体内通过生物代谢途径合成生物碱化合物。

天然合成通常由生物体内的酶或酶系催化一系列化学反应生成生物碱化合物。

天然合成的生物碱通常具有高度的立体选择性、反应特异性和效率性。

2. 半合成半合成是指通过对天然生物碱进行结构改造和功能调整而获得新的生物碱化合物。

半合成通常通过化学合成和生物技术手段对天然生物碱进行修饰和改造，以获得更具有药物活性和生物效应的化合物。

3. 全合成全合成是指通过合成化学方法获得生物碱化合物。

全合成通常通过有机合成化学的手段构建生物碱的骨架结构，再通过适当的官能团化学修饰和官能团保护，最终获得目标生物碱化合物。

三、生物碱的生物活性生物碱具有多种生物活性，通常具有显著的药用价值和生物效应。

现阶段对于苦参的研究，已经初步从其内部分化出苦参碱、氧化苦参碱、槐果碱、黄酮类化合物苦参醇A,B,C、挥发油类以及氧化槐果碱等化合物，在其成分分析方法研究中则需涉及:定量薄层色谱扫描法、中和法、酸性染料比色法、高分离度液相色谱法以及高效毛细管电泳法等。

为此本文对此类质检分析方式进行明确说明。

一、苦参成分分析（1）生物碱类：苦参中含有大量生物碱，通过将其从苦参中提取研究，现已被证实已有30余种生物碱。

其主要生物碱成分为：苦参碱和氧化苦参碱，此外还含有羟基苦参碱、N-甲基金雀花碱、安娜吉碱、巴普叶碱和去氢苦参碱（羽扇豆碱）等。

在苦参生物碱中苦参碱、氧化苦参碱、氧化槐果碱、槐定碱、安那吉碱等，则多数作为作为苦参质量控制的指标成分[1]。

（2）黄酮类：苦参中黄酮类化合物是其重要组成部分，苦参中被分离的黄酮类在其种类区分上可为50余种，且其中多数化合物于A环上均存有异戊烯基侧链。

同时还可区分为二羟四氢黄酮和二羟基黄酮类，还有少部分的黄酮类：黄腐醇、异黄腐醇、5-三羟-7-甲氧-8-异戊烯基黄酮、8-异戊烯基山柰酚等[2]。

例如黄酮醇类的异去氢淫羊藿素、苦参醇C、苦参醇等;二氢黄酮类的异黄腐醇、苦参醇、降苦参醇、槐属二氢黄酮B、苦参醇A-B、苦参醇E-F、苦参醇H-N、5-甲氧基-7等;异黄酮类的芒柄花素、毛蕊异黄酮、7-甲氧基-4'-羟基异黄酮等;查尔酮类的黄腐醇、苦参啶醇，多环系黄酮类的三叶豆紫檀苷、高丽槐素等[3]。

（3）挥发油及脂肪酸类：在人类日常活动中，脂肪酸作为其日常维系营养机能的必需品，据相关研究报道，脂肪酸能够对部分病症的预防和改善有着积极作用。

其中亚麻酸可以降低体循环的动脉血压，降血脂，加强智力，提升记忆力，保护视力，改善睡觉。

临床上常用于医治睡觉深度，高体循环的动脉血压，防止心肌堵塞，脑堵塞，脑出血性卒中[4]。

苦参中活性成分除了生物碱类、黄酮类外，在强酸型阳离子交换树脂柱层析下还存有一定含量游离氨基酸，如丙氨酸、天冬氨酸、谷氨酸、甘氨酸、组氨酸、异亮氨酸，其中脯氨酸和天冬氨酸是其特征氨基酸[5]。

[训练]钓鱼窝料的绝密配方钓鱼窝料的绝密配方钓鱼窝料的绝密配方看版主给不给精再告诉大家一个钓鱼窝料绝密配方看了说好的一定给我来个精华贴撒还没搞过精华了大家听过甜菜碱吗它是一种水产诱食剂对鲫鱼鲤鱼有特效窝料里加百分之一到百分之五能增加鱼的咬钩2-3倍为了有一个精华贴我掏血本了甜菜碱自己上网查就知道什么东西了在你查的过程当中你也就能了解它的作用了一斤小米【药酒二两】【我的自制窝饵不谈是祖传但也是我钓鱼20年的经验各位大侠请给点意见请看贴】复合维生素B片 5-10片糖二两把维生素B片糖放在药酒里泡开加到小米里然后加甜菜碱百分之五【【甜菜碱用开水泡匀加进去】捂两天就可以打窝了我看看这贴能不能加精如果不行的话我也再不用发贴了水产诱食剂在不同水产动物饲料中添加不同诱食成分即诱食剂，用来提高饲料产品的诱食作用是当前水产饲料生产中面临的主要问题之一。

目前人们将诱食剂定义为具有使水产动物趋向饲料周围的化学物质;而具有促进摄食、持续和吞入等一系列摄饵行为的化学物质叫做促摄饵物质。

对于鱼来说具有引诱和促进两种性质的活性物质较多，所以可统称为诱食剂。

研究发现，水产动物诱食剂的类型与水产动物食性有关。

一般来说，肉食和杂食性水产类动物对碱性和中性物质较敏感，而草食性水产动物则对酸性物质较敏感。

诱食剂的作用机理:诱食剂主要由具有一定挥发性的天然物质(如从植物的根、茎、叶、花、果等提取的浓缩物)和人工合成香味原料(如醛、酮、醇、酸、酯、醚等化合物)配制而成。

诱食剂是一种色、香、味统一的结合体。

诱食剂的特点是:一般具有鲜艳的色彩，能刺激视觉，引起食欲;散发浓郁的香气，感染周围的环境，通过刺激嗅觉，诱导动物采食;具有良好的适口性，能刺激味觉，促进动物采食。

色、香、味协同作用，构成饲料诱食剂的基本特征。

水产用诱食剂一般都是根据鱼类最喜食的动植物提取物中所含的化学成分，配成人工合成提取物，通过因子除去试验而逐渐确定下来的。

它往往含有二种以上的化合物，这些化合物对鱼的摄食刺激有协同作用。

中药分析第一章1、中药分析学：以中医理论基础为指导，运用现代科学理论和技术，研究中药质量评价与控制的一门学科。

2、中药分析的任务：运用现代分析技术，研究适合中药（药材饮片提取物及成品）质量控制和质量评价的分析方法，测定有效成分、有毒有害成分、制定质量标准、分析体内过程、评价质量优劣，保证中药的有效性和安全性。

3、中药分析的内容：①中药质量评价研究②中药质量控制体系研究③体内中药分析研究④中药分析新技术和新方法研究⑤中药标准物质研究4、中药分析的特点：①以中医药理论为指导原则，评价中药质量②中药化学成分的多样性和复杂性③中药质量的差异性和不稳定性④中药杂质来源的多样性⑤有效成分的非单一性（要知道每个小点下面的具体内容）5、中药分析的发展趋势：①建立能控制中药有效性的分析体系②中药分析方法向微量化、快速化发展③有害有毒成分的检测④个体化质量标准研究⑤中药物质基础及标准物质研究⑥整体特征指标研究（中药指纹图谱）6、药品的质量特性包括真实性、有效性、安全性、稳定性、均一性和经济性。

药品标准包括国家药品标准（中国药典、部颁标准）地方药品标准、其他药品标准（不具有法律的约束力）。

（了解一下国外药典）7、国家药品标准：《中国药典》已经出了十版，从2005年版开始分为三部（第一部为中药，第二部为化药，第三部为生药），2015年版分为四部，第四部为通则和药用辅料。

《中国药典》的基本结构：凡例、正文、索引和通则四部分；凡例：解释和正确使用《中国药典》进行药品质量检定的基本原则；正文：分为药材和饮片•、植物油脂和提取物、成方制剂和单位制剂三部分，品名、来源、处方、制法、形状、鉴别、检查、浸出物、特征图谱或指纹图谱、含量测定、炮制、性味与归经、功能与主治、用法用量、注意、规格、贮藏、制剂、附注等19项内容；索引：中文、汉语拼音、拉丁名和拉丁学名索引；通则：制剂通则、通用检测方法和指导原则。

（知道每部分包含什么内容就好）8、温度：水浴温度：98~100℃、热水：70~80℃、微温或温水：40飞0℃、室温：10~30℃、冷水2~10℃、冰水指0C。

长春花(Catharanthus roseus)又名雁来红、日日新、四时春、三万花，是夹竹桃科植物长春花的全草，它主要生长在热带及亚热带，在我国广东、广西颇见生长，苏南地区也有栽培，目前武汉亦有引种。

长春花中含有长春碱(Vinblastine)、长春新碱(Vincristine)、长春质碱(Catharanthine)、文多灵(Vindoline)4种重要的吲哚类生物碱[1]。

其中长春碱和长春新碱是目前世界上应用广泛的抗肿瘤药物，长春质碱、文多灵是合成长春碱的前体[2],长春质碱有一定的降血糖作用，文多灵有镇痛和利尿的功效，但这些生物碱的含量都比较低，均在万分之几甚至几万分之几，因此寻找新的高效、节能、环保的提取和分离长春花中生物碱的生产工艺变得极为重要[3]。

国内外已有一些学者对长春花中生物碱的生产方法进行了研究。

Karola和Szasz等[4]用碱水浸润生药，后用甲苯提取，但碱水浸取生药就将一些中等强度生物碱乃至强生物碱都变成游离碱被提取出来,造成总生物碱所含杂质增多。

后来改进方法，采用含少量水的甲醇浸提1OO kg原料，将浓缩后含水的浸膏用硫酸酸化，用有机溶剂如苯或氯仿将非生物碱的有机物除去，碱化后再用氯仿将生物碱萃取出来，得20g～100g总生物碱，虽然甲醇比甲苯和氯仿的价格要便宜，且毒性较小，但由于极性大，提出的杂质也相对多，选择性不高。

Bashir等[5]将干草粉碎后用乙醇浸取，浸取液酸化后用氯仿萃取，然后用磷酸缓冲溶液再次萃取，萃取物浓缩干燥后溶于氯仿，再经石油醚沉淀部分杂质，后又溶于乙酸乙酯，再用磷酸缓冲液萃取，碱化后所得总生物碱虽然含量比较高，但提取步骤过于复杂，经过多次萃取，浓缩，耗用大量溶剂，不适合大规模工业化生产。

目前对长春花生物碱的提取方法有：溶剂提取法、超临界萃取法[6]、超声波提取法[7]。

纯化方法有：制备型薄层色谱法、柱色谱法、制备型 HPLC 法和高效逆流色谱 (CPC)法等。