药物分析喹啉与青蒿素类抗疟药物的分析

喹啉类生物碱抗疟疾研究进展[摘要]喹啉类药物自被发现以来已成为全球主要的抗疟原虫药物，本文主要讨论了喹啉类化合物母环的形成及其抗疟的作用机制。

[关键词]喹啉类、疟疾、抗疟作用机制引言疟疾被WHO列为严重威胁人类健康的三大感染性疾病之一。

全球20多亿人生活在疟疾流行区,每年3亿~5亿人发病,死亡200多万人。

喹啉类生物碱被发现具有抗疟原虫的功效从而成为主要的抗疟药物。

正文喹啉类生物碱是以喹啉环为基本母核衍生而成，来源于邻氨基甲苯酸途径。

主要分布在芸香科、珙桐科、茜草科金鸡纳属等植物中，具有多种生物活性。

主要包括具有抗疟疾活性的奎宁类和具有抗肿瘤活性的喜树碱类。

奎宁类生物碱最初是从茜草科金鸡纳属植物中分离得到，又称为金鸡纳生物碱，如奎宁、辛可宁；喜树碱类生物碱是从喜树中分离得到的具有细胞毒活性的喹啉类成分，如喜树碱为DNA拓扑异构酶I的特异性抑制剂，其结构改造产物有许多已经成药，如依立替康用于治疗直肠癌已于1994年在美国上市，用于治疗结肠癌、胃癌、肝癌等消化系统肿瘤的羟喜树碱也已在我国上市。

另外，来源于茵芋叶中的茵芋碱及来源于白鲜根中的白鲜碱等均属于喹啉类生物碱。

1 喹啉类化合物母环的形成喹啉类药物的合成一般以喹诺酮环为基础，喹诺酮环合主要有 2 种方法，一是苯胺甲叉丙二酸二酯在加热或酸催化下发生 Gould-Jacobs 环化反应［1-2］; 二是2-( 2-卤代苯甲酰基) -3-氨基丙烯酸酯在碱作用下发生分子内亲核取代而环合，如图 1 所示。

1． 1 由取代芳胺为原料取代苯胺与甲叉基丙二酸二酯( EMME) 在 120 ～130 ℃反应得到取代苯胺基亚甲基丙二酸二乙酯，不经分离在高温下发生环合反应。

环合条件通常有 2 种，一种是在惰性高沸点溶剂中( 如二苯醚、石腊油、柴油等) 加热环合，另一种是在 Lewis 酸或 PPA、PPE、Ac2O-H2SO4、P2O5等中可完成环化反应［3-6］，生成的 4-氧代喹啉在氯化剂作用下得4-氯喹啉，4-氯喹啉可进一步衍生为不同的喹啉化合物，如图 2 所示。

青蒿素类抗疟药的作用机制及耐药机制研究进展青蒿素作为重要的抗疟药物，因其抗疟作用效率高、速度快、毒性低并且与大部分其他类别的抗疟药无交叉抗性等优点，成为目前全球抗疟的主要药物，虽然在泰柬边境地区已出现了青蒿素耐药性，但就目前全球各地使用青蒿素及其衍生物为基础的联合疗法（ACT）疗效来看仍能达到90%以上，因此必须对刚刚出现的青蒿素耐药性现象迅速采取遏制行动。

本文主要通过描述青蒿素的抗疟机制，讨论其耐药性机制，以及对青蒿素的发展前景作一综述。

标签：青蒿素；抗疟药；作用机制；耐药性机制疟疾（Malaria）是经按蚊叮咬感染疟原虫（plasmodium，spp）所引起的虫媒传染病，不同的疟原虫可分别引起间日疟、三日疟、恶性疟及卵圆疟。

恶性疟原虫是东南亚和非洲流行疟疾的主要病原体，是造成患者死亡的主要杀手，本病主要表现为周期性规律发作，全身发冷、发热、多汗，长期多次发作后，可引起贫血和脾肿大等危害人体健康。

由于在热带及亚热带地区常年温热潮湿，一年四季都可以发病，并且容易流行，因此有效的防治疟疾十分重要，不仅可以保护人民身体健康和生命安全，还可以为全球根除疟疾奠定基础。

青蒿素（artemisinin）是我国科研人员1972年首次从一种菊科植物黄花蒿（Artemisia annua L.）叶中提取分离得到的有过氧基团的倍半萜内酯药物。

由于青蒿素结构特殊，具有抗疟作用效率高、速度快、毒性低并且与大部分其他类别的抗疟药无交叉抗性等优点，逐渐成为世界卫生组织推荐的新的抗疟疾药物，是抗疟药史上的又一重大突破，并且为抗疟药的研究与发展奠定了新的基础。

WHO 已经将青蒿素类药物的7 d疗程给药方案作为治疗恶性疟疾和体内敏感测定的标准方案[1-2]。

本文根据文献报道，对全球近年来有关于青蒿素类药物及其衍生物的抗疟作用的机制、耐药性的产生及该药的发展前景作一综述。

1 抗瘧作用的机制1.1 自由基的抗疟作用青蒿素类药物属于含有过氧桥的倍半萜内酯类新型抗疟药，对各种疟原虫有效。

药理学之抗疟药第六章药理学第三十六节抗疟药一、主要用于控制症状的抗疟药氯喹、青蒿素的药理作用及临床应用1.氯喹药理作用和临床应用(1)抗疟作用：氯喹对各种疟原虫的红细胞内期裂殖体均有较强的杀灭作用，能迅速有效地控制疟疾的临床发作;但对子孢子、休眠子和配子体均无效，不能用于病因预防以及控制远期复发和传播。

氯喹具有在红细胞内尤其是被疟原虫入侵的红细胞内浓集的特点，有利于杀灭疟原虫，具有起效快、疗效高、作用持久的特点。

氯喹也能预防性抑制疟疾症状发作，在进入疫区前1周和离开疫区后4周期间，每周服药一次即可。

(2)抗肠道外阿米巴病作用：由于其在肝脏中的浓度高，可用于治疗阿米巴肝脏肿。

(3)免疫抑制作用。

大剂量氯喹能抑制免疫反应，偶尔用于类风湿性关节炎、系统性红斑琅疮等免疫功能紊乱性疾病。

2.青蒿素药理作用和临床应用青蒿素对各种疟原虫红细胞内期裂殖体有快速的杀灭作用;对红细胞外期疟原虫无效。

主要用于治疗对耐氯喹或多药耐药的恶性疟。

因可透过血脑屏障，对脑性疟的抢救有较好效果。

二、主要用于控制远期(一)复发和传播的抗疟药伯氨喹是主要用于控制复发和传播的抗疟药。

(二)伯氨喹的药理作用、临床应用及不良反应1.药理作用和临床应用伯氨喹对间日疟和卵形疟肝脏中的休眠子有较强的杀灭作用，是防治疟疾远期复发的主要药物。

与红细胞内期抗疟药合用，能根治良性疟，减少耐药性的产生。

能杀灭各种疟原虫的配子体，阻止疟疾传播。

对红细胞内期的疟原虫无效。

伯氨喹抗疟原虫作用的机制可能是其损伤线拉体以及代谢产物6-羟衍生物促进氧自由基生成或阻碍疟原虫电子传递而发挥作用。

尽管有对伯氨喹感性下降的间日疟原虫株出现的报道，但对伯氨喹的耐药的发生是很罕见的。

2.不良反应治疗剂量的伯氨喹不良反应较少，可引起剂量依颇性的胃肠道反应，停药后可恢复。

大剂量(60~240mg/d)时，可致高铁血红蛋白血症伴有发绀。

红细胞内缺乏葡萄糖-6-磷酸脱氢酶的个体可发生急性溶血。

皖南医学院自命题考试科目药学综合（学术型）（703）考试大纲Ⅰ.考试性质皖南医学院硕士研究生药学综合（学术型）（703）科目考试是为学校面向全国招收药理学专业硕士研究生而设置的、具有选拔性质的全国统一入学考试科目，其目的是科学、公平、有效地测试考生是否具备继续攻读药理学专业硕士研究生所需要的基础知识，评价的标准是高等学校相关专业优秀本科毕业生能达到的及格或及格以上水平，以利于学校择优选拔，确保硕士研究生的招生质量。

Ⅱ.考查目标药学综合（学术型）（703）科目考试范围为基础药学中的药物化学、药物分析学和药剂学。

要求考生理解和掌握上述学科中的基础知识和基本理论，能够运用所学的基本原理和方法来分析、判断和解决有关实际问题。

Ⅲ.考试形式和试卷结构一、试卷满分及考试时间本试卷满分为300分，考试时间为180分钟。

二、答题方式答题方式为闭卷、笔试。

三、试卷内容结构药物化学100分，药物分析学100分，药剂学100分。

四、试卷题型结构题型主要涉及名词解释、填空、选择（包括单选和多选）、问答（包括简答、计算、论述等）。

Ⅳ.考查内容一、药物化学（一）绪论1.药物化学的基本定义和主要研究任务；药物化学的发展史。

2.评定药物质量的标准；药物的名称。

（二）新药研究的基本原理与方法1.药物的化学结构与生物活性的关系。

2．先导化合物的概念、发现方法和途径；先导化合物优化的方法。

（三）药物代谢反应1.药物代谢的概念、分类及涉及的酶系。

2.第Ⅰ相的生物转化的概念、反应类型。

3.第Ⅱ相的生物转化的概念、反应类型。

4.药物代谢在新药研究中的作用。

（四）中枢神经系统药物1.镇静催眠药的主要类型及作用特点；苯二氮卓类药物的结构特点、构效关系；巴比妥类药物的性质、代谢与作用的关系；地西泮、苯巴比妥的结构、性质及用途。

2.抗癫痫药的分类及各类药物的临床应用；苯妥英钠的结构、性质、作用特点及用途。

3.抗精神病药按母核的分类；吩噻嗪类药物的构效关系；盐酸氯丙嗪的结构、性质、作用特点及用途。

XXX0906 药学综合入学考试大纲江苏海洋大学药学专业硕士研究生入学考试《药学综合》大纲第一部分考试讲明一、考试性质重点检查考生对药物化学、药物分析和药剂学基本概念、基础理论、基本实验技能及其应用等知识的掌握事情，要求考生掌握药物的性质与作用、制剂类型及其分析办法，并且考查学生对这三门课程基础理论、基本知识和基本技能的综合应用能力。

二、考试形式与试卷结构（一）答卷方式：闭卷，笔试（二）答题时刻：180分钟（三）考试总分与各课程分数考试总分300分。

其中药物化学100分、药物分析100分和药剂学100分。

（四）考试题型及分数名词解释10％简答题50％设计及论述40％（五）参考书目1.《药物化学》，尤启冬主编，人民卫生出版社，第八版，20XX年《药物化学》，尤启冬主编，化学工业出版社，第三版，20XX年。

2.《药物分析》，杭太俊主编，人民卫生出版社，第八版，20XX年。

3.《药剂学》，方亮主编，人民卫生出版社，第八版，20XX年。

第二部分考查要点一、《药物化学》考查要点《药物化学》考查内容要紧有以下五个方面：（1）化学药物的化学结构、要紧理化性质、结构类型、临床应用；（2）化学药物的制备办法；（3）典型化学药物的构-效关系、作用机理、体内代谢、进展过程；（4）药物的化学结构与生物活性的关系、药物设计的基本原理和办法；（5）实验部分：阿司匹林、扑热息痛、苯乐来、磺胺醋酰钠、羟甲香豆素的合成、分离精制。

1.绪论重点：药物、药物化学概念。

2. 新药研究的基本原理与办法重点：新化学实体、先导化合物的发觉、先导化合物的优化、先导化合物、物电子等排体、前药、药物埋伏化、载体前药、生物体前药、硬药、软药、定量构效关系等基本概念；新药发觉的的四个时期；先导化合物发觉的途径和办法；前药设计的目的和应用。

3. 中枢神经系统药物重点：XXX、苯妥英钠、氯丙嗪、氟哌啶醇、丙米嗪、吗啡、哌替啶、左旋多巴的化学结构及用途；XXX、氯丙嗪、丙米嗪的合成路线；苯二氮?类药物、吩噻嗪类药物、吗啡类药物的构效关系；镇静催眠药、镇痛药结构类型和作用机制。

349药学综合一、考试性质《药学综合》（349）为我校招收工业药学、临床药学和管理药学和药学（非全日制）专业型硕士研究生而自命题的考试科目。

其目的是科学、公平、有效地测试考生是否具备继续攻读药学硕士研究生所需要的有关学科的基础知识和基础技能，评价的标准为考察考生是否全面掌握药理学、药物化学、药剂学、药物分析学或临床药理学中任选四门课程的核心内容。

二、考察目标《药学综合》（349）考试范围为《药理学》、《药物化学》、《药剂学》、《药物分析学》或《临床药理学》中任选四门，要求考生系统掌握上述学科中的基本理论、基本知识和基本技能，能够运用所学的基本理论、基本知识和基本技能综合分析、判断和解决有关理论问题和实际问题。

三、考试比例及题型结构试卷满分为300分。

试卷组成分为《药理学》、《药物化学》、《药剂学》、《药物分析学》或《临床药理学》中任选四门课程，各自占75分、占比25%。

题型结构：每部分包括名词解释3题，每题5分（可4选3），简答题3题，每题10分（可4选3），问答题2题，每题15分（可3选2）四、考察内容范围《药物化学》（一）药物化学绪论掌握药物化学的研究内容、熟悉药物化学的研究对象与分类、熟悉新药的开发与研究、掌握药物的命名。

（二）新药研究的基本原理与方法掌握药物作用靶点、掌握先导化合物的发现、掌握先导化合物的优化（生物电子等排体、前药、软硬药）。

（三）药物代谢反应掌握I相/II相反应、掌握药物代谢在药物研究中的作用、熟悉药物代谢的酶、了解药物在体内的代谢。

（四）中枢神经系统药物掌握中枢神经系统药物（镇静催眠药、抗癫痫药、抗精神病药、抗抑郁药、镇痛药、神经退行性基本治疗药物）的结构特点与命名、分类、理化/药代动力学性质、合成方法、构效关系、作用机制、用途等。

（五）外周神经系统药物掌握外周神经系统药物（拟胆碱药、抗胆碱药、肾上腺素受体激动剂、组胺H1受体拮抗剂、局部麻醉药）的结构特点与命名、分类、理化/药代动力学性质、合成方法、构效关系、作用机制、用途等。

第六章芳酸类非甾体抗炎药一、理化性质：酸性、水解性、紫外吸收特征、基团或元素特性。

二、鉴别1.水杨酸稀溶液在中性或弱酸性溶液中与三氯化铁反应生成紫堇色配合物（水杨酸类药物专属鉴别）。

2.酚羟基与三氯化铁反应呈蓝紫色。

（对乙酰氨基酚鉴别反应，另，吡罗昔康和美洛昔康噻嗪环上有烯醇式结构具有酚羟基特性）3.酮洛芬具有二苯甲酮结构，可在乙醇溶液中与二硝基苯肼加热反应生成橙色沉淀。

4.芳伯氨基可在酸性溶液中和亚硫酸钠发生重氮化反应，再加入碱性β-萘酚发生偶合反应先橙色到猩红色沉淀（含芳伯氨基及反应可产生芳伯氨基的药物的专属鉴别）。

5.甲芬那酸溶于硫酸与重铬酸钾反应先深蓝色，随即变为棕绿色。

6.吲哚美辛溶液在硫酸存在下与重铬酸钾溶液共热显紫色；在盐酸溶液中与亚硝酸钠反应显绿色，放置变为黄色。

7.水杨酸类药物与碳酸钠溶液共热水解产生水杨酸和醋酸的钠盐，再加过量稀硫酸产生水杨酸白色沉淀和醋酸的臭气。

8.此类药物多含氯或硫元素，经相应有机破坏后可发生氯化物或硫酸盐的鉴别反应。

四、含量测定阿司匹林原料药含量测定：水解后剩余滴定法。

阿司匹林制剂含量测定：两步滴定法、UV、HPLC。

第七章苯乙胺类拟肾上腺素药物一、基本机构R1-CH(OH)-CH(R3)-NH-R2·HX二、理化性质：弱碱性、旋光性、紫外吸收特性。

具有酚羟基的药物可与甲醛在硫酸中反应生成有色醌类化合物。

肾上腺素与甲醛-硫酸反应显红色。

重酒石酸去甲肾上腺素显淡红色。

盐酸去氧肾上腺素显玫瑰红色，随即变为橙红色，最后变为深棕红。

具有酚羟基的本类药物可被碘、过氧化氢等氧化剂氧化显色。

肾上腺素在酸性条件下被过氧化氢氧化显红色，放置变为棕色。

盐酸异丙肾上腺素在偏酸性条件下被碘氧化，再用硫代硫酸钠还原剩余的碘，溶液显淡红色。

芳环上具有氨基醇结构的本类药物可发生双缩脲反应。

盐酸麻黄碱加硫酸铜试液2滴，加20％氢氧化钠溶液显蓝紫色，加乙醚振摇，乙醚层显紫红色。

羟氯喹与青蒿素的体外抑菌实验及其对治疗系统性红斑狼疮的猜想摘要】目的：检测治疗系统性红斑狼疮药物羟氯喹和青蒿素的体外抑菌作用。

方法：以头孢呋辛酯作为头孢呋辛酯组，硫酸羟氯喹为硫酸羟氯喹组，青蒿素作为青蒿素组，另取消防水组作对照。

采用微生物抑制实验检测各组中的细菌生长情况。

结果：在细菌培养的第3、4、5天检测菌落数，头孢呋辛酯和羟氯喹培养基中的菌落数均为0cfu；青蒿素培养基中的菌落数为2cfu,3cfu,3cfu低于消防水培养基中的菌落数为25cfu,56cfu,249cfu。

结论：羟氯喹与青蒿素在体外有类似于抗生素的抑菌作用，可能为治疗系统性红斑狼疮提供新的方法。

【关键词】羟氯喹；青蒿素；体外抑菌实验；系统性红斑狼疮；发病机制；病因学治疗【中图分类号】R593.24+1 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2019）32-0107-02抗疟药用于治疗系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,SLE)已有100多年的历史[1]，其中羟氯喹是一种喹诺酮类抗疟药，其主要成分是4-氨基喹啉，羟氯喹可通过抑制抗原呈递、阻断Toll样受体的活性等发挥免疫抑制作用，同时还有光保护作用，减少紫外线照射后皮肤中白细胞介素6, 白细胞介素1β和肿瘤坏死因子α的mRNA的产生，从而抑制皮肤炎症介质的产生, 该药是目前治疗SLE 的基础药物[2,3]。

而同样作为抗疟药的青蒿素对SLE也有治疗作用，近期屠呦呦科研团队提出双氢青蒿素片增加SLE适应症的新药申请，并通过国家食品药品监督管理总局审批，获得药物临床试验批件[4]。

本研究选取羟氯喹和青蒿素做微生物抑制实验，探讨其在体外的抑菌作用，为临床应用提供实验依据。

1.资料与方法1.1 一般资料1.1.1药物试剂头孢呋辛酯片（0.25g/片）；硫酸羟氯喹片（0.1g/片)；98%青蒿素纯品。

1.1.2微生物含有多种混合细菌生长的消防水。

第二章药物的鉴别试验设计题1.已知普鲁卡因的结构式如下，请根据药物的结构设计三种鉴别方法。

第三章药物的杂质检查计算题1.维生素C中重金属的检查：取本品1.0g，加水溶解成25ml，要求重金属的含量不超过百万分之十，应量取标准铅（0.01mgPb/ml）多少毫升？2.富马酸亚铁中砷盐的检查：去本品0.50g，加无水碳酸钠0.5g，混匀，加溴试液4ml，置水浴上蒸干后，在500~600℃炽灼2小时，放冷，残渣加溴-盐酸溶液10ml与水15ml溶解，移至蒸馏瓶中，加酸性氯化亚锡试液1ml，蒸馏，流出液导入贮有水5ml的接收器中，至蒸馏瓶中约剩5ml时，停止蒸馏，馏出液加水适量成28ml，按古蔡氏法检查砷盐。

（1）加入无水碳酸钠的作用是什么？（2）加入酸性氯化亚锡的作用是什么？（3）加入浓度为1ugAs/ml的标准砷溶液2ml，在该测定条件下，砷盐的限量是多少？3．氨苯砜中检查“有关物质”采用TLC法：取本品，精密称定，加甲醇适量制成10mg/ml的溶液，作为供试品溶液。

取供试品溶液适量加甲醇稀释制成20ug/ml的溶液，作为对照溶液。

取上述两种溶液各10ul点于同一块薄层板上，展开。

供试品溶液如显杂质斑点，与对照溶液的主斑点比较，颜色不得更深。

请计算样品中“有关物质”的限量。

第四章药物的含量测定方法与验证1.用溴酸钾法测定异烟肼的含量时，反应式如下：3C6H7N30+2KBrO3→3C6H5NO2+3N2↑+2KBr+3H2O计算：溴酸钾滴定液（0.01667mol/L）对异烟肼[M(C6H7N3O)=137.14]的滴定度。

2.司可巴比妥钠的含量测定方法如下：取本品约0.1g，精密称定，置250ml碘瓶中，加水10ml，振摇使溶解，精密加溴滴定液（0.05mol/L）25ml，再加盐酸5ml，立即密塞并振摇一分钟，在暗处放置15分钟后，注意微开瓶塞，加碘化钾试液10ml，立即密塞，摇匀后，用硫代硫酸钠滴定液（0.1mol/L）滴定，至近终点时，加淀粉指示液，继续滴定至蓝色消失，并将滴定的结果用空白实验校正。

青蒿素类抗疟药作用机理研究述评本文综述了自1972年青蒿素问世以来，研究者们在青蒿素类抗疟药的作用机理方面所做的研究工作，包括采用电子显微镜技术的超微结构病理学研究、采用生化药理学方法研究青蒿素对疟原虫代谢和疟色素凝集的影响，并对氧化损伤及铁离子作用机理的国内外研究情况进行了梗概的讨论。

标签：青蒿素；疟疾；抗疟药；作用机理；述评青蒿素类化合物是一化学结构新颖的新型抗疟药，是分子中含有一个过氧桥的倍半萜化合物。

由于结构独特，所以它的抗疟作用机理也与已知抗疟药迥然不同。

1 青蒿素类化合物对疟原虫超微结构的作用自20世纪70年代发现青蒿素的抗疟活性之后，学者们除了对青蒿素类化合物的药效学作用进行了深入广泛的研究之外，还对其抗疟作用机理开展了初步的研究。

如采用电子显微镜技术观察了青蒿素对伯氏鼠疟原虫超微结构的影响，小鼠口服给药青蒿素剂量为100 mg/kg和800 mg/kg时，青蒿素主要作用于疟原虫的膜系结构，如质膜、食物泡膜、线粒体膜、核膜。

其损伤表现为双层膜增宽、成泡状、出现螺纹膜等；内质网呈线状排列，或呈空泡状，或出现瓦解，也见到自噬泡的产生；核膜肿胀，核染色质集聚[1]。

1976年和1977年美国学者成功地建立了人体恶性疟连续体外培养方法[2-3]，供他人进行相应的研究工作。

叶氏等[4]采用电子显微镜技术，在观察体外培养人恶性疟原虫正常超微结构的基础上，进一步比较研究了青蒿素和氯喹对疟原虫超微结构的影响[5-6]：疟原虫在青蒿素体外抗疟有效浓度为10-7 mol/L和5×10-7 mol/L作用2 h，其形态学就发生了病理变化，包括细胞膜、线粒体膜及核膜的膜间隙增宽，内质网的肿胀及膜变形等，同时观察到自噬泡的形成，但自噬泡中并未含有富铁的色素团块，而氯喹在作用30 min时便出现大量的自噬泡，而且其中含有大量的色素团块，这是青蒿素和氯喹对疟原虫超微结构影响的最大不同。

江氏[7-8]在美国Aikawa 领导的实验室用线粒体结构较为明显的P.inui猴疟及体外培养的恶性疟进行电镜观察，进一步证实了青蒿素主要作用于疟原虫的线粒体。