实验一 普通光学显微镜的结构与使用方法

实验一显微镜的构造和使用、植物细胞基本结构一、实验目的1、了解普通光学显微镜的构造和各部分性能，学习和掌握显微镜的使用方法。

2、学习生活细胞观察方法，掌握植物细胞基本结构。

3、掌握细胞主要后含物的种类及鉴别4、学习临时制片方法（斯取法、刮取法）、粉末装片法和生物绘图方法。

二、实验器具与试剂光学显微镜、载玻片、盖玻片、尖头镊子、解剖针、刀片、剪刀、吸水纸、擦镜纸、纱布块、吸水纸蒸馏水、稀碘液、苏丹Ⅲ、水合氯醛、稀甘油、20%蔗糖液。

三、实验材料洋葱鳞叶表皮细胞制片、马铃薯块茎、半夏粉末、大黄粉末、黄柏粉末、麻黄粉末。

四、实验内容（一）普通光学显微镜的构造显微镜是研究植物细胞结构、组织特征和器官构造的重要的和不可替代的仪器。

显微镜的种类繁多，可分为光学显微镜和电子显微镜两大类。

电子显微镜结构相对复杂，光学显微镜结构较为简单，基本结构均可分为机械部分和光学系统部分。

1．机械部分：显微镜机械部分是由精密而牢固的零件组成，主要包括镜座、镜臂、载物台、镜筒、物镜转换器和调焦装置等。

（1）镜座：是显微镜的基座，用以支持镜体平衡，其上装有反光镜或照明光源。

（2）镜柱：是镜座上面直立的短柱，连接、支持镜臂及以上的部分。

（3）镜臂：弯曲如臂，上接镜筒、下接镜柱，支持载物台、聚光器和调焦装置。

是取放显微镜时手握的部位。

直筒显微镜镜臂和镜柱连接处有活动关节，可使显微镜在一定范围内后倾，一般不超过30°。

（4）镜筒：一般长160 mm～170 mm。

其上端放置目镜，下端与物镜转换器相连。

双筒斜式的镜筒，两镜筒距离可以根据两眼距离及视力来调节。

（5）物镜转换器：是固着在镜筒下端的圆盘，其上装有不同倍数的物镜。

可以左右自由转动，便于更换物镜。

（6）载物台：放置切片的平台，中央有一个通光孔，旁边装有固定玻片的压夹或标本移动器。

有的显微镜载物台下装有聚光镜。

（7）调焦装置：镜臂两侧有粗、细调焦轮各一对，旋转时可使镜筒上升或下降，以便得到清晰物像，即调焦。

实验一普通光学显微镜的结构与使用方法一、光学显微镜的基本构造（一）机械部分1、镜筒：为安装在光镜最上方或镜臂前方的圆筒状结构，其上端装有目镜，下端与物镜转换器相连。

2、物镜转换器：是安装在镜筒下方的一圆盘状构造。

其上均匀分布有3～4个圆孔，用以装载不同放大倍数的物镜。

3、镜臂：为支持镜筒和镜台的弯曲状构造，是取用显微镜时握拿的部位。

在使用临时装片时，千万不要倾斜镜臂，以免液体或染液流出，污染显微镜。

4、粗/细准焦螺旋：为调节焦距的装置，位于镜臂的上端或下端。

粗准焦螺旋可使镜筒或载物台以较快速度或较大幅度的升降，能迅速调节好焦距使物像呈现在视野中，适于低倍镜观察时的调焦。

而细准焦螺旋只能使镜筒或载物台缓慢或较小幅度的升降（升或降的距离不易被肉眼观察到），适用于高倍镜观察，一般在粗调螺旋调焦的基础上再使用细调焦螺旋，精细调节焦距。

5、载物台：是放置被观察的玻片标本的地方。

平台的中央有一圆孔，称为通光孔，来自下方光线经此孔照射到标本上。

在载物台上通常装有标本移动器（也称标本推进器），移动器上安装的弹簧夹可用于固定玻片标本，另外，转动与移动器相连的两个螺旋可使玻片标本前后左右地移动，这样寻找物像时较为方便。

6、镜柱：为镜臂与镜座相连的短柱。

7、镜座：位于显微镜最底部的构造，为整个显微镜的基座，用于支持和稳定镜体。

（二）光学系统部分光镜的光学系统主要包括物镜、目镜和照明装置（反光镜、聚光器和光圈等）。

1、目镜：又称接目镜，安装在镜筒的上端，起着将物镜所放大的物像进一步放大的作用。

常见的有5×、10×和15×（×表示放大倍数）的目镜，可根据不同的需要选择使用，最常使用的是10×目镜。

目镜的长度与放大倍数成反比。

2、物镜：也称接物镜，安装在物镜转换器上。

常用物镜的放大倍数有10×、40×和100×等几种。

物镜的放大倍数与其工作距离成反比。

【高中生物】普通光学显微镜的使用方法（一）显微镜的主要构造普通光学显微镜的结构主要分为三部分：机械部分、照明部分和光学部分。

1.机械部分（1）显微镜的底座用于支撑整个镜体。

（2）镜柱：是镜座上面直立的部分，用以连接镜座和镜臂。

（3）镜臂：一端连接镜柱，另一端连接镜筒。

它是取放显微镜时的手持部件。

（4）镜筒：连在镜臂的前上方，镜筒上端装有目镜，下端装有物镜转换器。

（5）物镜转换器（旋转器）：连接在棱镜壳体下部，可自由旋转。

光盘上有3-4个圆孔，这些圆孔是安装物镜的部件。

旋转转换器，更换不同倍数的物镜。

只有在听到敲击声时才能进行观察。

此时，物镜的光轴刚好与光孔的中心对准，光路连接。

（6）镜台(载物台)：在镜筒下方，形状有方、圆两种，用以放置玻片标本，中央有一通光孔，我们所用的显微镜其镜台上装有玻片标本推进器(推片器)，推进器左侧有弹簧夹，用以夹持玻片标本，镜台下有推进器调节轮，可使玻片标本作左右、前后方向的移动。

（7）调节器：安装在镜柱上的两种尺寸的螺钉，用于在调整过程中使镜台上下移动。

①粗调节器(粗螺旋)：大螺旋称粗调节器，移动时可使镜台作快速和较大辐度的升降，所以能迅速调节物镜和标本之间的距离使物象呈现于视野中，通常在使用低倍镜时，先用粗调节器迅速找到物象。

② 精细调节器（精细螺丝）：小螺丝称为精细调节器，它可以使舞台在移动时缓慢上升和下降。

它主要用于使用大功率反射镜时，以获得更清晰的物体图像，并观察试样不同层次和深度的结构。

2．照明部分安装在镜台下，包括反射器和采光器。

（1）反光镜：装在镜座上面，可向任意方向转动，它有平、凹两面，其作用是将光源光线反射到聚光器上，再经通光孔照明标本，凹面镜聚光作用强，适于光线较弱的时候使用，平面镜聚光作用弱，适于光线较强时使用。

（2）集光器（集中器）位于镜台下方的集光器框架上，由聚光镜和光圈组成。

其功能是将光线集中在待观察的样本上。

①聚光镜：由一片或数片透镜组成，起汇聚光线的作用，加强对标本的照明，并使光线射入物镜内，镜柱旁有一调节螺旋，转动它可升降聚光器，以调节视野中光亮度的强弱。

实验一光学显微镜的结构、使用及保养一、目的了解光学显微镜的基本结构和各部分的作用，能正确、熟练地使用显微镜观察植物材料，掌握显微镜的保养措施。

二、用具和材料显微镜、擦镜纸或小绸布、二甲苯、任意一种植物切片或临时装片。

三、方法步骤（一）显微镜的结构：通常使用的生物显微镜，其结构分为机械部分和光学部分，现说明如下：1. 机械部分（1）镜座：即显微镜最下面的马蹄形部分，用以固定和支持镜体。

（2）镜柱：直立于镜座上的短柱，与镜臂相连。

（3）镜臂：取放或移动显微镜时手握的部位，一般呈弓形，也称执手。

（4）倾斜关节：镜柱与镜臂相连的关节，用于调节显微镜的倾斜度，以便于观察。

观察临时装片时，不要倾斜，以防玻片上的水流出，一般观察时，倾斜度不宜超过30°，以免显微镜因倾斜跌倒。

（5）载物台：位于显微镜中部，载标本制片的方形或圆形平台。

中央有一圆孔，既通光孔，光线即由此孔通过，台上两侧有用以固定制片的推进器。

（6）镜筒：为一金属圆筒，连接在镜臂上，下接转换盘。

（7）物镜转换盘：可以任意转动，上面安装有3—4个物镜，使用时根据需要可更换放大倍数不同的接物镜。

（8）焦螺旋：装在镜臂上部两旁，通过转动，调节焦距，有大小两对，大的叫粗准焦螺旋，转动一周可使镜筒升降10mm，小的是细准焦螺旋，每转动一周可使镜筒升降1mm。

2. 光学部分（1）目镜：装于镜筒上端，上面刻有号码，表示放大的倍数。

“5×、16×”可根据需要选择使用。

（2）物镜：安装在转换盘的螺旋孔上，一般有三个物镜：即低倍镜（10×）、高倍镜（40×）、油镜（100×，）物镜下端的镜孔越小，放大的倍数越大。

（3）聚光器：在载物台下，由透镜组成，可以聚集反光镜反射来的光线，照明玻片标本，聚光器下装有光圈，推动其上的小柄可使光圈任意开大或任意缩小，以调节光线强弱。

（4）反光镜：在聚光器下，安在镜臂下端可前后左右随意移动的一个镜片，通过它把光线反射到聚光器上面，凹面反射的光较强。

实验一普通光学显微镜的构造和使用一、目的要求1.掌握普通光学显微镜的基本构造、使用方法、保护要点。

2.掌握普通光学显微镜油浸系的原理。

3.使用油镜观察几种细菌的基本形态。

二、显微镜的基本构造显微镜由机械装置和光学系统两大部分组成（图1-1）。

光学显微镜的构造(图1-1)1. 物镜转换器2. 接物镜3.游标卡尺4.载物台5.聚光器6. 彩虹光阑7.光源8. 镜座9. 电源开关 10. 光源滑动变阻器 11. 粗调螺旋 12. 微调螺旋 13.镜臂 14.镜筒 15.目镜 16.标本移动螺旋1．机械装置镜座（base）和镜臂（arm）镜座位于显微镜底部，呈马蹄形，它支持全镜。

镜臂有固定式和活动式两种，活动式的镜臂可改变角度。

镜臂支持镜筒。

镜筒（body tube）是由金属制成的圆筒，上接目镜，下接转换器。

镜筒有单筒和双筒两种，单筒又可分为直立式和后倾式两种。

而双筒则都是倾斜式的，倾斜式镜筒倾斜45°。

双筒中的一个目镜有屈光度调节装置，以备在两眼视力不同的情况下调节使用。

转换器（no sepiece）为两个金属碟所合成的一个转盘，其上装3—4个物镜，可使每个物镜通过镜筒与目镜构成一个放大系统。

载物台（stage）又称镜台，为方形或圆形的盘，用以载放被检物体，中心有一个通光孔。

在载物台上有的装有两个金属压夹称标本夹，用以固定标本；有的装有标本推动器，将标本固定后，能向前后左右推动。

有的推动器上还有刻度，能确定标本的位置，便于找到变换的视野。

调焦装置是调节物镜和标本间距离的机件，有粗动螺旋（coarse adjustment）即粗调节器和微动螺旋（fine adjustment）即细调节器，利用它们使镜筒或镜台上下移动，当物体在物镜和目镜焦点上时，则得到清晰的图像。

2．光学系统物镜（objective）物镜安装在镜筒下端的转换器上，因接近被观察的物体，故又称接物镜。

其作用是将物体作第一次放大，是决定成像质量和分辨能力的重要部件。

生物学：普通光学显微镜的使用方法普通光学显微镜的构造主要分为三部分：机械部分、照明部分和光学部分。

机械部分镜座：是显微镜的底座，用以支持整个镜体。

镜柱：是镜座上面直立的部分，用以连接镜座和镜臂。

镜臂：一端连于镜柱，一端连于镜筒，是取放显微镜时手握部位。

镜筒：连在镜臂的前上方，镜筒上端装有目镜，下端装有物镜转换器。

物镜转换器(旋转器)：接于棱镜壳的下方，可自由转动，盘上有3-4个圆孔，是安装物镜部位，转动转换器，可以调换不同倍数的物镜，当听到碰叩声时，方可进行观察，此时物镜光轴恰好对准通光孔中心，光路接通。

镜台(载物台)：在镜筒下方，形状有方、圆两种，用以放置玻片标本，中央有一通光孔，我们所用的显微镜其镜台上装有玻片标本推进器(推片器)，推进器左侧有弹簧夹，用以夹持玻片标本，镜台下有推进器调节轮，可使玻片标本作左右、前后方向的移动。

调节器：是装在镜柱上的大小两种螺旋，调节时使镜台作上下方向的移动。

粗调节器(粗螺旋)：大螺旋称粗调节器，移动时可使镜台作快速和较大辐度的升降，所以能迅速调节物镜和标本之间的距离使物象呈现于视野中，通常在使用低倍镜时，先用粗调节器迅速找到物象。

照明部分装在镜台下方，包括反光镜，集光器。

反光镜：装在镜座上面，可向任意方向转动，它有平、凹两面，其作用是将光源光线反射到聚光器上，再经通光孔照明标本，凹面镜聚光作用强，适于光线较弱的时候使用，平面镜聚光作用弱，适于光线较强时使用。

集光器(聚光器)位于镜台下方的集光器架上，由聚光镜和光圈组成，其作用是把光线集中到所要观察的标本上。

聚光镜：由一片或数片透镜组成，起汇聚光线的作用，加强对标本的照明，并使光线射入物镜内，镜柱旁有一调节螺旋，转动它可升降聚光器，以调节视野中光亮度的强弱。

光学部分目镜：装在镜筒的上端，通常备有2-3个，上面刻有5*、10*或15*符号以表示其放大倍数，一般装的是10*的目镜。

物镜：装在镜筒下端的旋转器上，一般有3-4个物镜，其中最短的刻有“10*”符号的为低倍镜，较长的刻有“40*”符号的为高倍镜，最长的刻有“100*”符号的为油镜，此外，在高倍镜和油镜上还常加有一圈不同颜色的线，以示区别。

实验一光学显微镜构造及使用光学显微镜是一种利用光的折射，放大观察微观物体的仪器。

它由物镜、目镜、光源、载玻片夹、焦距调节装置等组成。

光学显微镜的构造分为三部分：光学部分、机械部分和照明部分。

光学部分由物镜、目镜以及准直镜等组成。

物镜是显微镜的主镜头，它位于载物台下方。

目镜是用于观察显微镜的辅助镜头，位于物镜上方。

准直镜用来调整光源的光线，使之呈现平行光。

机械部分由支架、调焦机构、载物台等组成。

支架是显微镜的骨架，起支撑作用。

调焦机构用来调节物镜与载物台的距离，以获得清晰的像。

载物台是放置待观察物体的平台。

照明部分由光源及其控制装置组成。

光源是用来提供光源的设备，可以是电子光源或者自然光源。

控制装置用来调节光源的亮度和颜色，保证适宜的观察环境。

使用光学显微镜的步骤如下：1.将待观察的物体放置在载物台上，用载玻片夹固定。

2.打开光源，调节光源的亮度和颜色，使之适宜。

3.转动调焦机构，将物镜与载物台距离调节至最近，然后慢慢向上调节，直到观察到清晰的像。

4.可以通过转动目镜对焦调节，或者通过动物镜或微调透镜来调整清晰度。

5.使用准直镜来调整光源的光线，让光线呈现平行光。

使用光学显微镜时需要注意以下几点：1.使用前检查显微镜的清洁度，保证物镜和目镜的光学表面清洁。

2.注意调节物镜与载物台的距离，保持适当的焦距。

3.调节光源亮度时，避免过亮或过暗，以免损坏样品或减低观察效果。

4.使用时避免碰撞或摔落，保持显微镜的稳定性和耐用性。

光学显微镜在生物学、医学、材料科学和研究等领域起到了重要的作用。

通过光学显微镜的观察，我们能够观察到微小物体的结构和特征，为科学研究和应用提供了重要的工具。

实验一普通光学显微镜普通光学显微镜是一种精密的光学仪器。

以往最简单的显微镜仅由几块透镜组成，而当前使用的显微镜由一套透镜组成。

普通光学显微镜通常能将物体放大1500—2000倍。

（一）显微镜的构造普通光学显微镜的构造可分为两大部分：一为机械装置，一为光学系统，这两部分很好的配合，才能发挥显微镜的作用。

1、显微镜的机械装置显微镜的机械装置包括镜座、镜筒、物镜转换器、载物台、推动器、粗动螺旋、微动螺旋等部件（1）镜座镜座是显微镜的基本支架，它由底座和镜臂两部分组成。

在它上面连接有载物台和镜筒，它是用来安装光学放大系统部件的基础。

（2）镜筒镜筒上接接目镜，下接转换器，形成接目镜与接物镜（装在转换器下）间的暗室。

从物镜的后缘到镜筒尾端的距离称为机械筒长。

因为物镜的放大率是对一定的镜筒长度而言的。

镜筒长度的变化，不仅放大倍率随之变化，而且成像质量也受到影响。

因此，使用显微镜时，不能任意改变镜筒长度。

国际上将显微镜的标准筒长定为160mm，此数字标在物镜的外壳上。

（3）物镜转换器物镜转换器上可安装3—4个接物镜，一般是三个接物镜（低倍、高倍、油镜）。

Nikon显微镜装有四个物镜。

转动转换器，可以按需要将其中的任何一个接物镜和镜筒接通，与镜筒上面的接目镜构成一个放大系统。

（4）载物台载物台中央有一孔，为光线通路。

在台上装有弹簧标本夹和推动器，其作用为固定或移动标本的位置，使得镜检对象恰好位于视野中心。

（5）推动器是移动标本的机械装置，它是由一横一纵两个推进齿轴的金属架构成的，好的显微镜在纵横架杆上刻有刻度标尺，构成很精密的平面座标系。

如果我们须重复观察已检查标本的某一部分，在第一次检查时，可记下纵横标尺的数值，以后按数值移动推动器，就可以找到原来标本的位置。

（6）粗动螺旋粗动螺旋是移动镜筒调节接物镜和标本间距离的机件，老式显微镜粗螺旋向前扭，镜头下降接近标本。

新近出产的显微镜（如Nikon显微镜）镜检时，右手向前扭载物台上升，让标本接近物镜，反之则下降，标本脱离物镜。

显微镜的结构及使用方法（1）普通光学显微镜的构造（2）各部分的作用镜座：稳定镜身。

镜柱：支持镜柱以上的部件。

镜臂：握镜的部位。

载物台：放置玻片标本的地方。

中央有通光孔，两旁各有一个压片夹。

镜筒：上端安装目镜，下端有转换器。

转换器：可以转动的圆盘，上面安装物镜。

粗准焦螺旋：转动时可以大幅度升降镜筒。

细准焦螺旋：转动时，镜筒升降幅度较小，可以使物像更清晰。

目镜：接近眼睛的镜头。

物镜：接近物体的镜头。

遮光器：上面有大小不等的圆孔叫做光圈。

不同的光圈可以调节光线的强弱。

（大光圈光线弱时使用）反光镜：一面是平面镜（光线强时使用），一面是凹面镜（光线弱时使用）。

转动反光镜可以使光线经过通光孔反射上来。

（小光圈光线强时使用）（3）注意：在移动标本时，像总是朝相反的方向移动；从目镜内看到的物象是倒像；目镜与物镜放大倍数的乘积就是所成像的放大倍数。

（高倍显微镜下，所见的细胞数目少）（低倍显微镜下，所见的细胞数目多）实验一用显微镜观察永久装片（一）实验操作技能1．安放显微镜取镜：右手握镜臂，左手托镜座（1分）安放：放在靠左手边，离桌边7cm左右（1分）2．显微镜对光遮光器：选用合适的光圈（光线好用小光圈，光线不好用大光圈）（1）物镜、目镜的使用：选用低倍镜观察，转动转换器，不能用手扳动物镜（1）反光镜对光：光线好用平面镜，光线不好用凹面镜。

镜面对着光源（1）3．观察永久装片装片放置：将要观察的目标放在载物台上，并用压片夹压好（1）使用低倍镜，下降镜筒：镜筒用粗准焦螺旋下降至物镜与装片相离2cm左右（1）调焦：用左眼观察，同时慢转粗准焦螺旋，直至看到目标后转用低准焦螺旋（1）4．说出装片的显著特征（1）血细胞涂片：红细胞较多，没有细胞核。

（若看到白细胞，要说明白细胞比红细胞大，有细胞核）叶片结构：叶片属于植物的营养器官。

叶肉属基本组织，看到一层表皮细胞排列整齐紧密，表皮属于保护组织，看到大的叶脉，叶脉属于疏导组织。

（二）实验常规和实验习惯（1）显微镜收放：将压片夹转至后方，取走装片，将物镜转离通光孔，下降镜筒至最低，将反光镜转到与镜座垂直的位置，用右手握镜臂，左手托镜座，将显微镜放入镜箱。

普通光学生物显微镜的结构及使用一、光学显微镜的构造显普通生物学光学显微镜种类繁多，但基本构造相同，主要分为三部分：机械装置和光学系统（光源部分和光学部分）。

如图1.1.1-1所示（一）机械部分镜体包括镜座，镜柱及镜臂、镜筒、物镜转换器、载物台及推进器、粗细调节器等。

1.镜座：即显微镜的底座，用以支持稳定镜体；2.镜柱及镜臂：连接镜座的直立部分，称镜柱，与镜柱相连接的曲部，另一端连于镜筒，称为镜臂，是取放显微镜时手握位置。

3.镜筒：连接在镜臂前方，镜筒上端装有双目镜（10倍固定），下端装有物镜转换器。

4.物镜转换器：接于棱镜壳下方，圆盘状，盘上有4个圆孔，是安装物镜头部位，可自由转动，调换不同倍数的物镜。

5.载物台（镜台）：在镜筒物镜头下方，中央有一通光孔，用以放置玻片标本。

镜台上装有玻片标本推进器，推进器有弹簧夹，用以夹持玻片标本，在其一侧，装有推进器调节轮，可使被观察标本作前后、左右方向移动。

6.粗细调节器：即装置在镜柱两侧上的大小两种螺旋钮，能使镜台作上下移动。

分为：粗调节器（大螺旋）和细调节器（小螺旋）。

粗调节器即大螺旋，移动时，可使镜台较大幅度的升降，迅速调节物镜和标本之间的距离，使物象呈现于视野中，通常在使用低倍镜，先用大螺旋找到物像。

细调节器即小螺旋，可使镜台微幅缓慢升降，使得标本更清晰，并可观察到标本的不同层次和不同深度的结构，这个操作叫调焦。

（二）光源部分光学显微镜的光源装置：主要包括反射镜，卤素灯电光源、聚光器，广义说也包括照明光源和滤光器等。

1.是使用反光镜，采集自然光或人工光源。

2.是由灯泡（卤素灯泡或led灯泡）发射的电光源，这里主要介绍电光源显微镜。

聚光器，也叫集光器，位于载物台中孔下方，由聚光镜和可变光阑组成，其作用是把光线集中到所要观察的标本上。

可变光阑聚光镜下方，也叫光圈，旋转光阑环，可以调节其开孔的大小，以调节光量，使聚光镜的镜口率适应于物镜的镜口率；光阑环上有刻有物镜倍率（4×倍，10×倍，40×倍，100×倍），观察时将与使用物镜相对应的倍率放到正面。