离体蟾蜍心脏的实验研究

第1篇一、实验目的1. 观察离体蛙心的生理特性，了解心脏在离体条件下的收缩和舒张规律。

2. 探讨神经递质、激素等对离体蛙心功能的影响。

3. 掌握离体蛙心灌流实验的操作方法。

二、实验原理离体蛙心灌流实验是研究心脏生理学的重要方法之一。

在实验过程中，通过灌流装置向蛙心提供氧气和营养物质，同时可以观察心脏的收缩和舒张情况。

实验中，可以通过改变灌流液成分、温度、pH值等条件，观察心脏功能的改变，从而了解心脏生理特性及影响因素。

三、实验材料与仪器1. 实验材料：蟾蜍、蛙心套管、蛙心夹、蛙板、蛙类手术器械、二道仪、任氏液、氯化钙、肾上腺素、乙酰胆碱等。

2. 实验仪器：手术显微镜、蛙心灌流装置、注射器、秒表、滴管等。

四、实验方法与步骤1. 准备工作：将蟾蜍置于蛙板上，用手术剪剪开胸腔，暴露心脏。

用蛙心夹固定心脏，并连接灌流装置。

2. 灌流液准备：配制任氏液、氯化钙溶液、肾上腺素溶液、乙酰胆碱溶液等。

3. 实验分组：将实验分为对照组、氯化钙组、肾上腺素组、乙酰胆碱组。

4. 实验步骤：a. 对照组：灌流任氏液，观察心脏的收缩和舒张情况。

b. 氯化钙组：灌流氯化钙溶液，观察心脏功能的改变。

c. 肾上腺素组：灌流肾上腺素溶液，观察心脏功能的改变。

d. 乙酰胆碱组：灌流乙酰胆碱溶液，观察心脏功能的改变。

5. 记录数据：观察心脏的收缩和舒张频率、收缩幅度等，并记录数据。

五、实验结果与分析1. 对照组：心脏呈现规律的收缩和舒张，收缩幅度适中，频率约为60次/分钟。

2. 氯化钙组：心脏收缩幅度明显增大，频率加快，收缩时间延长，舒张时间缩短。

3. 肾上腺素组：心脏收缩幅度增大，频率加快，收缩时间延长，舒张时间缩短。

4. 乙酰胆碱组：心脏收缩幅度减小，频率减慢，收缩时间缩短，舒张时间延长。

六、实验结论1. 离体蛙心在灌流条件下可以维持一定时间的收缩和舒张功能。

2. 氯化钙和肾上腺素可以增强离体蛙心的收缩功能，使收缩幅度增大、频率加快。

一、实验目的1. 掌握离体心脏灌流技术的操作方法。

2. 观察和分析不同理化因素对离体心脏活动的影响。

3. 理解心脏生理学的基本原理，如离子浓度、温度、酸碱度、激素等对心脏功能的影响。

二、实验原理心脏的正常节律性活动依赖于内环境的相对稳定。

改变离体心脏灌流液的理化成分，会影响心肌细胞的兴奋性、自律性、传导性和收缩性，从而影响心脏的舒缩活动。

本实验通过改变灌流液中的离子浓度、温度、酸碱度、激素等，观察对离体心脏活动的影响，进一步理解心脏生理学的基本原理。

三、实验材料与仪器1. 实验动物：蟾蜍2. 实验药品：任氏液、NaCl溶液、CaCl2溶液、KCl溶液、乙酰胆碱溶液、肾上腺素溶液、乳酸溶液、NaHCO3溶液3. 实验仪器：BL-420生物信号分析系统、张力换能器、铁支台、试管夹、蛙类手术器械、蛙心插管、滴管、大烧杯、棉线、双凹夹、滑轮四、实验步骤1. 暴露心脏：取蟾蜍一只，用蛙类手术器械暴露心脏。

2. 心脏插管：将蛙心插管插入心脏，用棉线固定。

3. 摘取心脏：用镊子将心脏从蟾蜍体内取出，置于装有任氏液的培养皿中。

4. 连接仪器：将张力换能器连接到心脏插管，并通过BL-420生物信号分析系统进行数据采集。

5. 实验分组：将实验分为以下几组：空白对照组：用任氏液灌流心脏。

Na+浓度改变组：用不同浓度的NaCl溶液灌流心脏。

K+浓度改变组：用不同浓度的KCl溶液灌流心脏。

Ca2+浓度改变组：用不同浓度的CaCl2溶液灌流心脏。

乙酰胆碱组：用乙酰胆碱溶液灌流心脏。

肾上腺素组：用肾上腺素溶液灌流心脏。

乳酸组：用乳酸溶液灌流心脏。

NaHCO3组：用NaHCO3溶液灌流心脏。

6. 数据采集：观察并记录每组心脏的舒缩节律、幅度和持续时间。

7. 结果分析：分析不同理化因素对离体心脏活动的影响。

五、实验结果1. Na+浓度改变组：随着Na+浓度的增加，心脏的舒缩幅度和持续时间逐渐增加，但超过一定浓度后，心脏活动减弱。

一、实验目的1. 学习离体器官（蛙心）灌流的方法。

2. 观察理化因素对蛙心活动的影响。

3. 掌握实验操作技巧，提高实验技能。

二、实验原理离体蛙心灌流实验是生理学实验中的一个重要实验，通过人工灌流的方法，使离体蛙心在适宜的生理条件下保持正常节律性收缩和舒张。

实验原理如下：1. 蛙心无营养性血管，离体后采用人工灌流的方法，仍可保持其新陈代谢，心脏仍能有节律的自动收缩、舒张，并维持较长时间。

2. 心肌的营养是通过心脏内膜液体的直接渗透而得。

3. 通过改变灌流液中的离子浓度、pH值等理化因素，可以观察蛙心活动的变化，了解理化因素对心脏活动的影响。

三、实验对象与用品1. 实验对象：蟾蜍2. 实验用品：斯氏蛙心套管、蛙心夹、蛙板、蛙类手术器械、二道仪、任氏液、长滴管、铁支架、生理盐水、KCl溶液、CaCl2溶液、肾上腺素、乙酰胆碱等。

四、实验方法与步骤1. 实验准备：将蟾蜍仰卧固定于蛙板上，用剪刀剪开胸壁，暴露心脏。

用蛙心夹夹住蛙心尖部，固定在蛙板上。

2. 动脉插管：在主动脉分支下预埋一条棉线，结扎主动脉左支，剪一向心斜切口，插入斯氏蛙心套管，送入动脉球。

3. 连接实验装置：将蛙心套管与二道仪相连，记录蛙心活动。

4. 灌流液准备：配制正常灌流液（任氏液）和实验灌流液（分别含有不同离子浓度的生理盐水、KCl溶液、CaCl2溶液、肾上腺素、乙酰胆碱等）。

5. 实验操作：a. 将蛙心置于正常灌流液中，观察蛙心活动，记录心率、收缩幅度等指标。

b. 分别将蛙心置于不同实验灌流液中，观察蛙心活动的变化，记录心率、收缩幅度等指标。

c. 对比分析不同灌流液对蛙心活动的影响。

五、实验结果与分析1. 正常灌流液条件下，蛙心以正常节律收缩和舒张，心率适中，收缩幅度适中。

2. 在0.65%NaCl溶液替换任氏液后，蛙心收缩幅度稍微减小，收缩力稍微减弱。

分析原因：相当于细胞外环境中缺乏Ca2+，动作电位2期Ca2+内流减少，胞浆中Ca2+减少，心肌收缩力降低。

实验十夹竹桃对离体蟾蜍心脏的作用【实验目的】观察夹竹桃浸出液（含强心苷成份）对离体蟾蜍心脏的正性肌力作用和毒性作用。

【实验原理】强心苷能选择性地作用于心肌，加强心肌收缩力，并能减慢窦性频率。

强心苷是一类治疗指数较低的药物，一般治疗量已接近中毒量的60%，故较易发生过量中毒。

【实验动物】蟾蜍【药品与器材】任氏液、低钙任氏液、1%夹竹桃任氏液（每ml 相当于夹竹桃叶0.01g）蛙板×1、蛙足钉×4、探针、小剪刀、小无齿镊、蛙心套管、蛙心夹、铁支架、双凹夹×2、试管夹、生物机能实验系统、张力换能器、吸管×3、小烧杯×2。

【实验步骤】1．夹竹桃液的制备取夹竹桃25 g，漂洗后用纱布擦干，剪碎，置广口瓶内，加70%乙醇100 ml，室温浸泡48 小时，并经常振摇。

用棉花过滤，再用70%乙醇适量洗叶片，挤压干，得滤液，滤液在水浴锅上蒸干，得粗醇浸出液。

用适量任氏液溶解浸出物，用滤纸过滤，最后用任氏液加至250 ml，即成10%夹竹桃任氏液置冰箱保存备用。

（用时稀释10倍）2．手术取一只蟾蜍，双毁髓后背位置于蜡盘中，安上次实验方法暴露心脏仔细识别心脏周围的大血管。

在左主动脉下方穿一线，于动脉圆锥远端处结扎（动物个体小时，结扎位置可靠上些）。

再从左右两主动脉下方穿一线，并打一活结备用。

左手提起主动脉上的结扎线，右手用眼科剪在结扎线下方，沿向心方向将动脉上壁剪一斜口。

选择大小适宜的蛙心套管，然后将盛有少量（套管内2～3cm高度）任氏液（内加入一滴肝素溶液）的斯氏蛙心套管，又开口处插入动脉圆锥当套管尖端到达动脉圆锥基部时，应将套管稍稍后腿，使尖端向动脉圆锥的背部后下方及心尖方向推进，经主动脉瓣插入心室腔内（于心室收缩时插入，但不可插得过深，以免心室壁堵住套管下口）。

此时可见套管中血液冲入套管，并使液面随心脏搏动而上下移动，表明操作成功（否则需退回并重新插入）。

用滴管吸去套管中的血液，更换新鲜任氏液。

第1篇一、实验目的1. 观察蟾蜍心脏的兴奋传导过程。

2. 研究心脏兴奋在心房和心室之间的传导特点。

3. 了解心脏兴奋传导在心脏搏动中的作用。

二、实验材料与仪器1. 实验材料：蟾蜍、生理盐水、手术器械、电极、放大器、示波器、记录仪等。

2. 实验仪器：解剖显微镜、手术显微镜、电生理记录系统、电脑等。

三、实验方法1. 蟾蜍麻醉后，在显微镜下解剖心脏，暴露心房和心室。

2. 将电极插入心房和心室，记录心房和心室的电活动。

3. 通过电生理记录系统，观察心房和心室兴奋传导的过程。

4. 分析心房和心室兴奋传导的特点，包括传导速度、传导途径等。

四、实验结果1. 心房和心室在兴奋传导过程中存在明显的差异。

2. 心房兴奋传导速度较快，传导途径相对简单。

3. 心室兴奋传导速度较慢，传导途径较为复杂。

4. 心房兴奋传导主要经过房室结，然后传递到心室。

5. 心室兴奋传导经过左右束支和浦肯野纤维，最终导致心室收缩。

五、实验结论1. 心脏兴奋传导在心脏搏动中起着至关重要的作用。

2. 心房兴奋传导速度快，途径简单，有利于心脏快速充满血液。

3. 心室兴奋传导速度慢，途径复杂，有利于心脏有效射血。

4. 房室结是心房和心室兴奋传导的关键结构，其功能异常可能导致心律失常。

5. 通过本实验，我们了解了蟾蜍心脏兴奋传导的机制，为研究心脏疾病提供了理论依据。

六、实验讨论1. 本实验通过观察蟾蜍心脏兴奋传导过程，揭示了心脏搏动的生理机制。

2. 实验结果显示，心房和心室兴奋传导存在明显的差异，这与心脏功能相适应。

3. 房室结在心房和心室兴奋传导中起着关键作用，其功能异常可能导致心律失常。

4. 本实验为研究心脏疾病提供了理论依据，有助于进一步探讨心脏疾病的发病机制和治疗方法。

七、实验展望1. 未来可以进一步研究心脏兴奋传导的分子机制，揭示兴奋传导过程中相关蛋白的功能。

2. 可以通过动物实验，观察心脏兴奋传导在不同生理和病理状态下的变化。

3. 可以结合临床研究，探讨心脏疾病与兴奋传导之间的关系，为临床诊断和治疗提供新思路。

一、实验目的1. 观察蟾蜍心脏的结构特点。

2. 学习心脏生理实验的基本操作技能。

3. 了解蟾蜍心脏的起搏点、传导系统和心跳节律。

4. 掌握记录和分析心跳数据的方法。

二、实验原理蟾蜍的心脏属于两心房一心室结构，由静脉窦、心房、心室和传导系统组成。

静脉窦是心脏的起搏点，心脏的跳动节律由静脉窦控制，并通过传导系统传递到心房和心室。

通过观察蟾蜍心脏的结构和功能，可以了解心脏的基本生理机制。

三、实验材料与仪器1. 实验动物：蟾蜍一只2. 仪器设备：蛙板、手术剪、镊子、探针、任氏液、生理盐水、张力传感器、支架、双凹夹、秒表、滴管、培养皿（或小烧杯）、纱布、棉线、记录仪、计算机等。

四、实验步骤1. 准备实验材料：将蟾蜍置于蛙板上，用手术剪剪开胸壁，暴露心脏。

2. 暴露心脏：用镊子提起心脏，用探针分离心脏与周围组织，暴露心脏各部分。

3. 连接仪器：将张力传感器固定在心脏上，通过支架连接到记录仪和计算机。

4. 调整环境：将实验环境调整为恒温、低光照条件，保持蟾蜍安静。

5. 观察心脏结构：仔细观察心脏各部分结构，记录心房、心室、静脉窦等部位的位置和形态。

6. 记录心跳数据：打开记录仪，观察心跳节律，记录心跳次数、心跳间隔等数据。

7. 分析数据：根据记录的数据，分析蟾蜍心脏的起搏点、传导系统和心跳节律。

五、实验结果与分析1. 心脏结构：蟾蜍心脏由静脉窦、心房、心室和传导系统组成。

静脉窦位于心脏前端，是心脏的起搏点；心房和心室分别位于静脉窦后端，心房位于心室上方。

2. 心跳节律：蟾蜍心脏的跳动节律由静脉窦控制，心房和心室的跳动顺序为静脉窦、心房、心室。

3. 心跳数据：根据记录的数据，蟾蜍的心跳次数约为每分钟120次，心跳间隔约为0.5秒。

六、实验结论1. 蟾蜍心脏的结构和功能与哺乳动物的心脏相似，具有一定的代表性。

2. 静脉窦是蟾蜍心脏的起搏点，控制着心跳节律。

3. 心脏传导系统将起搏信号传递到心房和心室，使心脏有规律地跳动。

实验报告课程名称：生理科学实验实验类型：动物实验实验项目名称：离体蟾蜍心脏收缩能力和心率的实验研究同组学生姓名：指导老师：实验12 离体蟾蜍心脏收缩能力和心率的实验研究（浙江大学医学院2010级临床医学专业1B班第5组，浙江，杭州，310058）【摘要】目的了解离体心脏灌流的方法，观察钾、钙离子浓度、肾上腺素、乙酰胆碱对离体蟾蜍心脏活动的影响并探讨作用机制。

方法取离体蟾蜍蛙心，分别用任氏液、无钙、高钙、高钾、乙酰胆碱、肾上腺素等灌流。

结果蟾蜍离体心脏在1ml任氏液加25ul任氏液灌流前后，终末舒张张力(g)分别为0.84±0.16，0.81±0.17，两者有显著差异；1ml任氏液加25ul任氏液灌流前后，终末收缩张力(g)分别为3.95±1.53， 3.89±1.49，两者无显著差异；1ml任氏液加25ul任氏液灌流前后，心率（次/分）分别为49.00±6.09，48.90±6.81，两者无显著差异。

蟾蜍离体心脏在无钙任氏液灌流前后，终末舒张张力(g)分别为0.80±0.16，1.18±0.29，两者无显著差异；无钙任氏液灌流前后，终末收缩张力(g)分别为3.83±1.38，1.58±0.42，两者有显著差异；无钙任氏液灌流前后，心率（次/分）分别为48.50±5.95，54.60±14.84，两者无显著差异。

蟾蜍离体心脏在22×10-4mol/L高钙溶液灌流前后，终末舒张张力(g)分别为0.61±0.23，0.53±0.23，两者有显著差异；22×10-4mol/L高钙溶液灌流前后，终末收缩张力(g)分别为3.74±1.17，5.39±1.62，两者有显著差异；22×10-4mol/L高钙溶液灌流前后，心率（次/分）分别为50.20±7.87，49.90±8.32，两者无显著差异。

实验七蛙类离体心脏灌流一．目的要求：1．学习掌握离体蛙心灌流法；2．观察Na+、K+、Ca+及肾上腺素、乙酰胆碱等对离体心脏活动的影响。

二．基本原理：心肌具有自动节律性收缩活动的特性，可用人工灌流的方法研究心脏活动的规律及其特点，还可通过改变灌流液的成分或加入某些药物来观察其对心脏活动的影响。

三．动物、器材和试剂：1．动物：蟾蜍2．器材：常有手术器械、蛙心夹、蛙心插管、张力换能器、滑轮、蛙盘、滴管、烧杯。

3．试剂：任氏液、5％NaCl溶液、2％CaCl2溶液、1％KCl溶液、1:100000肾上腺素溶液、1:100000乙酰胆碱溶液、300u/ml肝素溶液。

四．方法与步骤：1．双毁髓，将蟾蜍固定于蜡盘；2．暴露心脏，分离心脏周围的大血管。

在左主动脉下方穿一线，距动脉圆锥2~3mm 处结扎。

再从左、右两主动脉下方穿一线，打一活结备用。

在前、后腔静脉下穿一线，结扎，保留静脉窦。

用眼科剪在动脉圆锥前端，沿向心方向剪一斜口，然后将盛有少量任氏液－肝素溶液的蛙心插管由此开口处插入动脉圆锥。

当插管尖端到达动脉圆锥基部时，应稍稍后退，使尖端向动脉圆锥的背部后方及心尖方向推进，经主动脉瓣插入心室腔内（可用另一只手轻轻捏住心室，感觉插入位置，不可插得过深，以免心壁堵住插管尖端）。

3．用滴管吸去套管中的血液，更换新的任氏液。

提起打活结的备用线，将左右主动脉连同插入的插管扎紧，再将连线固定于插管的小钩上。

剪断结扎线以外的血管及所有牵连的组织，将心脏离体。

用任氏液反复冲洗心室内余血，使灌流液不再有血液，至心室发白。

加入一定高度的任氏液，标记。

4．用蛙心夹夹住心室尖，接滑轮，固定于张力感受器。

5．连接仪器，调整初长度，开始实验。

在任氏液中加入几滴5％NaCl溶液，观察曲线变化，当曲线出现明显变化时，立即吸去灌洗液，用任氏液反复冲洗，至曲线恢复正常。

加任氏液至标记高度。

同法做CaCl2、KCl、肾上腺素、乙酰胆碱，记录。

五．注意事项：1．插入时应注意方向，不能用力过大，也不可强硬插入；2．插管时要防止凝血，需互相配合；3．扎插管时应扎紧，防止实验时滑出；4．液面高度应保持一致；5． 加药时应有前后对照；6． KCl 、乙酰胆碱的影响较剧烈，应注意快速清除。

一、实验目的1. 了解蟾蜍心脏的解剖结构。

2. 观察蟾蜍心脏的搏动规律。

3. 分析蟾蜍心脏的起搏点及心搏曲线。

4. 掌握蟾蜍心脏生理实验的基本操作。

二、实验原理蟾蜍属于两栖动物，其心脏结构相对简单，由两心房和一心室组成。

心脏的起搏点位于静脉窦，节律最高，心房次之，心室最低。

正常情况下，心脏活动节律服从静脉窦的节律，其活动顺序为：静脉窦、心房、心室。

这种有节律的活动可以通过传感器或计算机采集系统记录下来，称为心搏曲线。

三、实验工具1. 常用手术器械2. 蟾蜍一只3. 蛙板4. 蛙心夹5. 计算机采集系统6. 张力传感器7. 支架8. 双凹夹9. 秒表10. 滴管11. 培养皿（或小烧杯）12. 纱布13. 棉线14. 任氏液四、实验步骤1. 暴露蟾蜍心脏取蟾蜍一只，用剪刀剪断蟾蜍的头部，暴露出脊髓。

将蟾蜍背部朝上置于蛙板上，用手术镊提起胸骨后方的皮肤，用金冠剪剪开一个小口，然后将剪刀由开口处伸入皮下，向左、右两侧下顿角方向剪开皮肤。

将皮肤掀向头端，再用手术镊提起胸骨后方的腹肌，在腹肌上剪一口，将金冠剪紧贴体壁向前伸入（勿伤及心脏和血管），并沿皮肤切口方向剪开体壁，剪断左右乌喙骨和锁骨，使创口呈一倒三角形。

2. 暴露心脏一手持眼科镊，提起心包膜，另一手用眼科剪剪开心包膜，暴露心脏。

3. 连接仪器将蛙心夹夹住少许心尖部肌肉，将蛙心夹的系线与张力传感器的应变梁相连，并将张力传感器的输出端与计算机采集系统相连。

4. 观察心脏搏动开启计算机采集系统，观察蟾蜍心脏的搏动规律，记录心搏曲线。

5. 分析心脏起搏点通过观察心搏曲线，分析蟾蜍心脏的起搏点。

6. 观察期外收缩与代偿间歇在实验过程中，观察并记录蟾蜍心脏的期外收缩与代偿间歇现象。

五、实验结果与分析1. 心脏搏动规律观察到蟾蜍心脏搏动规律为：静脉窦、心房、心室。

心搏曲线呈规律性波动，表明心脏搏动规律稳定。

2. 起搏点分析通过观察心搏曲线，发现蟾蜍心脏的起搏点位于静脉窦。

一、实验目的1. 了解蟾蜍心脏的结构与功能。

2. 学习使用生理学实验仪器测量蟾蜍心跳。

3. 掌握蟾蜍心跳的生理变化规律。

二、实验原理蟾蜍心脏由心房、心室和心耳组成，通过心脏的收缩和舒张，将血液泵送到全身。

本实验通过测量蟾蜍的心跳次数，了解蟾蜍心脏的生理功能。

三、实验材料与仪器1. 实验材料：蟾蜍一只，生理盐水，玻璃注射器，手术剪，镊子，解剖显微镜，电子计时器等。

2. 实验仪器：生理盐水，实验台，手术器械，显微镜，电子计时器等。

四、实验步骤1. 准备实验材料，将蟾蜍放在实验台上。

2. 将蟾蜍的头部固定在实验台上，用手术剪剪开蟾蜍的腹部，暴露心脏。

3. 将心脏放入装有生理盐水的培养皿中，用生理盐水保持心脏湿润。

4. 用镊子轻轻取出心脏，放在解剖显微镜下观察。

5. 使用电子计时器，记录蟾蜍心跳次数。

6. 分别在正常情况下、心跳受到刺激、心跳停止后等情况，重复测量心跳次数。

五、实验结果与分析1. 正常情况下，蟾蜍的心跳次数为每分钟约60次。

2. 当心跳受到刺激时，心跳次数明显增加，可达每分钟120次以上。

3. 当心跳停止后，心跳次数逐渐恢复至正常水平。

通过实验结果分析，可以得出以下结论：1. 蟾蜍心脏的结构与功能与其他动物的心脏相似，通过心脏的收缩和舒张，将血液泵送到全身。

2. 心跳受到刺激时，蟾蜍的心脏会加快跳动，以满足身体对氧气和营养物质的需求。

3. 心跳停止后，蟾蜍的心脏会逐渐恢复跳动，表明蟾蜍具有心脏自主调节能力。

六、实验讨论1. 实验过程中，要注意蟾蜍的生理状态，避免因操作不当导致蟾蜍死亡。

2. 实验过程中，要保持心脏湿润，避免心脏干燥导致实验结果不准确。

3. 实验结果受多种因素影响，如温度、湿度、蟾蜍的生理状态等，实验结果可能存在一定误差。

七、实验总结本次实验通过对蟾蜍心跳的测量，了解了蟾蜍心脏的结构与功能，掌握了使用生理学实验仪器测量蟾蜍心跳的方法。

通过实验结果分析，了解了蟾蜍心跳的生理变化规律。

一、实验目的1. 熟悉离体蟾蜍心脏灌流实验的操作方法。

2. 通过观察灌流液中离子浓度的改变，了解相应受体的激动剂和阻断剂对心脏收缩活动的影响。

3. 掌握离体心脏标本的制备方法。

二、实验原理蟾蜍心脏离体后，若使用与其内环境相似的任氏液进行灌流，在一定时间内，心脏仍能维持节律性收缩和舒张。

通过改变任氏液的组成成分，如Na、K、Ca2+的浓度和pH值等，可以观察到心脏跳动频率和幅度的变化。

三、实验材料1. 实验动物：蟾蜍一只2. 实验器材：解剖盘、剪刀、镊子、针筒、灌流管、任氏液、生理盐水、CaCl2溶液、KCl溶液、滴管、记录仪等3. 实验试剂：任氏液、生理盐水、CaCl2溶液、KCl溶液四、实验步骤1. 蟾蜍心脏标本的制备（1）取蟾蜍一只，破坏脑和脊髓。

（2）打开胸腔，暴露心脏。

（3）用镊子轻轻提起心脏，用剪刀剪断心包膜，游离心脏。

（4）将心脏放入任氏液中，以保持其活性。

2. 动脉插管（1）在A圆锥和左主A根部剪一小口。

（2）将灌流管插入心室内，直至血液涌入灌流管，并随心跳上下波动。

3. 灌流实验（1）将灌流管固定在灌流装置上，确保灌流液顺畅流入心脏。

（2）开始灌流，观察心脏跳动频率和幅度。

（3）依次进行以下实验：a. 以0.65%NaCl溶液替换任氏液，观察心脏跳动频率和幅度变化。

b. 在灌流液中加入2%CaCl2溶液（50μl），观察心脏跳动频率和幅度变化。

c. 在灌流液中加入1%KCl溶液（50μl），观察心脏跳动频率和幅度变化。

d. 向离体蟾蜍心脏的灌流液中滴加1% KCl溶液2-3滴，观察心脏跳动情况。

4. 实验结果记录与分析（1）记录每次实验前后的心脏跳动频率和幅度。

（2）分析不同实验条件下心脏跳动频率和幅度的变化，探讨离子浓度对心脏收缩活动的影响。

五、实验结果1. 以0.65%NaCl溶液替换任氏液后，心脏跳动频率和幅度稍微减小。

2. 在灌流液中加入2%CaCl2溶液后，心脏跳动频率和幅度稍微加大。

一、实验目的1. 了解蟾蜍心脏生理学的基本知识；2. 掌握蟾蜍心脏生理学实验方法；3. 观察蟾蜍心律失常现象，分析其发生原因及影响因素。

二、实验原理蟾蜍心脏生理学实验是研究心脏生理学的重要方法之一。

通过观察蟾蜍心脏在正常和异常条件下的电生理变化，了解心脏的生理功能和调节机制。

心律失常是指心脏节律的异常，表现为心率、节律、起搏点等异常。

本实验通过观察蟾蜍心脏在给予不同刺激条件下的心律失常现象，分析其发生原因及影响因素。

三、实验材料与仪器1. 实验材料：蟾蜍、生理盐水、氯化钾、氯化钠、钙离子载体A23187、ATP、肾上腺素、普萘洛尔等；2. 实验仪器：生理显微镜、心电记录仪、手术显微镜、手术器械、电刺激器、加热器、恒温水浴箱等。

四、实验方法1. 蟾蜍心脏的解剖与暴露：将蟾蜍麻醉后，打开胸腔，暴露心脏。

在心脏表面涂上生理盐水，以保持湿润。

2. 心电记录：将心电记录仪连接到蟾蜍心脏，记录正常条件下的心脏电生理变化。

3. 给药实验：分别给予不同药物刺激蟾蜍心脏，观察心律失常现象。

具体药物及剂量如下：a. 氯化钾：0.1mmol/L，0.2mmol/L，0.3mmol/L；b. 氯化钠：0.1mmol/L，0.2mmol/L，0.3mmol/L；c. 钙离子载体A23187：1μmol/L，2μmol/L，3μmol/L；d. ATP：10μmol/L，20μmol/L，30μmol/L；e. 肾上腺素：1×10^-6mol/L，2×10^-6mol/L，3×10^-6mol/L；f. 普萘洛尔：1×10^-6mol/L，2×10^-6mol/L，3×10^-6mol/L。

4. 观察与分析：观察给药后蟾蜍心脏的电生理变化，记录心律失常现象，分析其发生原因及影响因素。

五、实验结果1. 正常条件下，蟾蜍心脏节律规整，心率约为100-150次/分钟。

2. 给予氯化钾后，随着浓度增加，蟾蜍心脏心率逐渐减慢，出现心律失常现象，如室性心动过速、心室颤动等。

离体蟾蜍心脏收缩能力和心率的实验研究实验报告实验报告课程名称：生理科学实验实验类型：动物实验实验项目名称：离体蟾蜍心脏收缩能力和心率的实验研究同组学生姓名：指导老师：实验12 离体蟾蜍心脏收缩能力和心率的实验研究（浙江大学医学院2010级临床医学专业1B班第5组，浙江，杭州，310058）【摘要】目的了解离体心脏灌流的方法，观察钾、钙离子浓度、肾上腺素、乙酰胆碱对离体蟾蜍心脏活动的影响并探讨作用机制。

方法取离体蟾蜍蛙心，分别用任氏液、无钙、高钙、高钾、乙酰胆碱、肾上腺素等灌流。

结果蟾蜍离体心脏在1ml任氏液加25ul任氏液灌流前后，终末舒张张力(g)分别为0.84±0.16，0.81±0.17，两者有显著差异；1ml任氏液加25ul任氏液灌流前后，终末收缩张力(g)分别为3.95±1.53，3.89±1.49，两者无显著差异；1ml任氏液加25ul任氏液灌流前后，心率（次/分）分别为49.00±6.09，48.90±6.81，两者无显著差异。

蟾蜍离体心脏在无钙任氏液灌流前后，终末舒张张力(g)分别为0.80±0.16，1.18±0.29，两者无显著差异；无钙任氏液灌流前后，终末收缩张力(g)分别为 3.83±1.38，1.58±0.42，两者有显著差异；无钙任氏液灌流前后，心率（次/分）分别为48.50±5.95，54.60±14.84，两者无显著差异。

蟾蜍离体心脏在22×10-4mol/L高钙溶液灌流前后，终末舒张张力(g)分别为0.61±0.23，0.53±0.23，两者有显著差异；22×10-4mol/L高钙溶液灌流前后，终末收缩张力(g)分别为3.74±1.17，5.39±1.62，两者有显著差异；22×10-4mol/L高钙溶液灌流前后，心率（次/分）分别为50.20±7.87，49.90±8.32，两者无显著差异。

离体蟾蜍心脏灌流实验数据处理与分析
LT
步骤二：在任氏液中加入1：100000肾上腺素溶液1-2滴，心搏曲线稳定后记录45s。

步骤三：用任氏液洗脱3次，加入1-2ml任氏液，待曲线稳定45s后，向灌流液中加5% NaCl溶液2-6滴，心搏曲线稳定后记录45s 。

步骤四：用任氏液洗脱数次，曲线基本恢复后，加入1-2ml任氏液，待曲线稳定45s后，在任氏液中加1% KCl溶液1-2滴，心搏曲线稳定后记录45s 。

步骤五：用任氏液洗脱数次，曲线基本恢复后，加入1-2ml任氏液，待曲线稳定45s后，在任氏
1-2滴，心搏曲线稳定后记录液中加2%CaCl
2
45s 。

步骤六：将上述溶液吸出，用新鲜任氏液换洗数次，加入1-2ml任氏液，待曲线稳定后记录45s ，在任氏液中加1:1000000 的 ACh溶液1-2滴，心搏曲线稳定后记录45s 。

蟾蜍离体心脏灌流一：实验目的1、掌握两栖类动物离体心脏灌流的方法，掌握斯氏插管法2、了解心肌的生理特性，证明心脏具有自动节律性收缩的能力+ K+ C a2+ 对心脏活动的影响。

3、观察Na4、理解内环境各种理化因素的相对恒定对于细胞进行正常生命活动的重要意义。

二：实验原理1、正常蛙心能按静脉窦的节律性自动产生兴奋，心脏的自动节律性活动需要有一个合适的理化环境。

蟾蜍心脏离体后，用任氏液灌流，在一定时间内仍能保持节律性兴奋和收缩活动。

由于心脏的正常活动还要依赖于内环境因素的相对稳定，改变灌流液的成分可引起心脏活动的改变。

心肌细胞外离子浓度的变化和因体内生物活性物质（如激素）引起的细胞膜离子通透性的改变，对心肌细胞的生物电活动和生理特性必然会产生明显的影响。

2、影响心肌细胞电生理特征的原因：（1）心肌的自动节律性：①最大复极电位与阈电位的差异；② 4 期自动除极速度（2）心肌的兴奋性：①静息电位的水+浓度②Na+通道的性状（3）心肌的传导性：主要平：依赖于细胞外的K取决于动作电位0 期除极速度和幅度（4）心肌的收缩性：依赖于细胞外钙离子的浓度+3、涉及到的几种离子对心脏活动的影响：①钾离子：K 参与心肌细胞的复极化+和自律细胞的 4 期自动去极化过程，其改变不仅取决于细胞内外K浓度梯度，+通透性有关，因此其影响是多方面的；②钙离子：Ca2+对Na+ 还与细胞膜对K内流存在竞争抑制作用，称作膜屏障作用，对静息电位无影响。

其浓度升高可使心肌细胞的兴奋性降低，传导减慢，收缩力增强。

三：实验器材动物：蟾蜍（尽量选择体型大的蟾蜍）试剂：5% NaCl、2%CaCl2、1%KCl 溶液，任氏液器材：常用手术器械，张力换能器，蛙心套管，套管夹，滑轮，双凹夹，支架，烧杯四：实验方法与步骤1、离体蛙心的制备取一只蟾蜍，进行双毁髓，按照上次实验的方法进行暴露心脏并仔细识别心脏周围的大血管。

在左主动脉的下方穿一线，于动脉圆锥处结扎（动物个体小时，结扎位置可靠上些）。

实验五离体蛙心灌流实验一实验目的1、了解蟾蜍离体心脏的灌流的方法。

2、观察细胞外液钾离子、钙离子浓度变化对心脏活动的影响。

二实验原理心脏离体后，如用人工灌流的方法，保持其新陈代谢的顺利进行，则心脏仍能有节律的自动收缩和舒张，并可维持较长的时间。

离体心脏所需的条件应与动物内环境的理化性质基本相近，因此改变灌流液的理化因素，则可引起心脏活动的变化。

1、任氏液：正常对照含有NaCl、CaCl2、KCl、NaH2PO4、 Na2HPO4和蒸馏水，其电解质、晶体渗透压、pH值与蛙的组织液相近。

2、0.65%NaCl灌流：3、2%CaCl2灌流4、 1%KCl灌流5、1:10000 E 灌流6、1:10000 Ach灌流7、心得安β1受体阻断剂，抑制肾上腺素与β1受体结合，使E不能发挥作用。

8.、阿托品M受体阻断剂，抑制Ach减慢心率，加速房室传导，增加心房收缩力。

三实验器材微机生物信号处理系统， physiology系统，学校服务器系统，蟾蜍离体蛙心，任氏液，1%KCl，3%CaCl2，65%NaCl，1/10000 E，心得安+1/10000,1/10000 Ach，阿托品+1/10000 Ach。

四实验步骤1、标本制备（观看视频）2、仪器及标本的连接3、具体软件操作：1）离子试剂：任氏液→0.65%NaCl溶液→任氏液清洗→1%KCl溶液→任溶液→任氏液清洗氏液清洗→2%CaCl22）药物试剂：肾上腺素（E）→任氏液清洗→心得安→任氏液清洗→Ach，任氏液清洗→阿托品→任氏液清洗。

五实验结果图1 离体蛙心灌流表1 离体蛙心灌流数据记录六结果分析此实验说明心脏具有自律性，兴奋性，传导性，收缩性，离体心脏静脉窦还能产生兴奋并传导到心房和心室，引起心脏有节律的兴奋和收缩。

体内细胞所直接生存的环境较为稳定，内环境的稳态是细胞、器官维持正常生存和活动的必要条件，所以改变灌流的溶液，会引起心脏收缩的改变。

实验四：蟾蜍心脏传导系分析两栖类循环系统解剖于路遥 121140072一．实验目的：1. 观察心脏传导系2. 循环系统比较解剖（3.心脏泵血的解剖生理要点）二．实验原理：三．动物与器材：实验动物：蟾蜍一到两只一组（每人一只）实验器械：手术器械（两把解剖剪刀/两把镊子/一把普通剪刀/六只图钉/一只锥子），解剖盘，棉线，蛙钉，秒表等四．方法与步骤：1：对蟾蜍进行双毁髓并用蛙钉将其固定在解剖盘上（仰卧固定）。

2：游离心脏（剪开胸骨）。

3：辨别心脏相连血管。

4：肝门静脉（生理功能）。

5：斯氏一结扎；斯氏二结扎。

对照：静脉窦，心房，心室。

6：计数方法：二十次所需秒数五．实验结果：1：观察到蟾蜍心脏如下（附图）：2：观察到蟾蜍肝门静脉结果如下（附图）：六．实验结论：无七．问题解答：1.问：蟾蜍心房、心室、动脉圆锥及静脉窦是什么样的？答：心脏位于体腔前端胸骨背面，被包在围心腔内，其后是红褐色的肝脏。

在心脏腹面用镊子夹起半透明的围心膜并剪开，心脏便暴露出来。

从腹面观察心脏的外形及其周围血管：【1】心房为心脏前部的2个薄壁有皱襞的囊状体，左右各1。

【2】心室 1个，连于心房之后的厚壁部分，圆锥形，心室尖向后。

在2心房和心室交界处有一明显的凹沟，称冠状沟，紧贴冠状沟有黄色脂肪体。

【3】动脉圆锥由心室腹面右上方发出的1条较粗的肌质管，色淡。

其后端稍膨大，与心室相通。

其前端分为2支，即左右动脉干。

用镊子轻轻提起心尖，将心脏翻向前方，观察心脏背面，可见静脉窦。

【4】静脉窦为心脏背面一暗红色三角形的薄壁囊。

在心房和静脉窦之间有1条白色半月形界线即窦房沟。

其左右2个前角分别连接左右前大静脉，后角连接后大静脉。

静脉窦开口于右心房。

在静脉窦的前缘左侧，有很细的肺静脉注人左心房。

2.问：蟾蜍肝门静脉是什么样的？答：肝门静脉将肝脏翻折向前，可见肝后面的肠系膜内有1条短而粗的血管入肝，此即肝门静脉。

仔细向后分离追踪，可见此血管是由来自胃和胰的胃静脉、来自肠和系膜的肠静脉和来自脾脏的脾静脉汇合而成的。

实验目的1. 学习暴露蟾蜍心脏的方法，熟悉心脏的结构。

2. 观察心脏各部分自律性活动的时相和频率特点，掌握在体蛙类心脏活动的描记方法。

3. 观察额外刺激对心脏收缩的影响，了解其产生机理。

实验原理蟾蜍的心脏结构为两心房一心室，心脏的起搏点位于静脉窦，此处的自动节律性最高，心房次之，心室最低。

正常情况下，心脏的活动节律以静脉窦的节律为主，其活动顺序为：静脉窦、心房、心室。

这种有节律的活动可以通过张力传感器在生理信号采集系统中记录下来，形成心搏曲线。

当来自自动节律性高的细胞的兴奋传播途径被阻断时，自律性较低的细胞的节律性将表现出来，引起心脏搏动。

心肌每兴奋一次，其兴奋性就发生一次周期性的变化。

心肌属于横纹肌，但因其的有效不应期特别长，几乎占据了整个收缩期和舒张早期，在此期间任何刺激均不能引起心肌的收缩，因此心肌不会产生强直收缩，心脏总是有节律的舒缩。

在心室舒张中、后期给以单个阈上刺激，则产生一次正常节律以外的收缩反应，即期前收缩（期外收缩）。

当静脉窦传来的节律性兴奋恰好落在期外收缩的收缩期时，心室不再发生反应，需待静脉窦传来下一次兴奋才会收缩。

因此在期外收缩之后，就会出现一个代偿间歇。

实验材料与仪器1. 实验材料：蟾蜍、生理盐水、手术器械、生理信号采集系统、张力传感器、剪刀、镊子等。

2. 实验仪器：解剖显微镜、手术台、生理盐水浴槽、支架、电极等。

实验步骤1. 杀死蟾蜍，打开胸腔，暴露心脏。

2. 将心脏置于生理盐水浴槽中，连接张力传感器。

3. 使用生理信号采集系统记录心脏活动曲线。

4. 观察心脏自律性活动的时相和频率特点。

5. 给予心脏额外刺激，观察其对心脏收缩的影响。

6. 分析实验结果，总结实验现象。

实验结果1. 心脏自律性活动的时相和频率特点：正常情况下，蟾蜍心脏的自律性活动顺序为静脉窦、心房、心室。

心搏曲线表现为规律性的收缩和舒张。

2. 额外刺激对心脏收缩的影响：给予心脏额外刺激后，出现期前收缩和代偿间歇。