离体蟾蜍心脏灌流实验数据处理与分析

实验四：蟾蜍心脏传导系分析两栖类循环系统解剖于路遥 121140072一．实验目的：1. 观察心脏传导系2. 循环系统比较解剖（3.心脏泵血的解剖生理要点）二．实验原理：三．动物与器材：实验动物：蟾蜍一到两只一组（每人一只）实验器械：手术器械（两把解剖剪刀/两把镊子/一把普通剪刀/六只图钉/一只锥子），解剖盘，棉线，蛙钉，秒表等四．方法与步骤：1：对蟾蜍进行双毁髓并用蛙钉将其固定在解剖盘上（仰卧固定）。

2：游离心脏（剪开胸骨）。

3：辨别心脏相连血管。

4：肝门静脉（生理功能）。

5：斯氏一结扎；斯氏二结扎。

对照：静脉窦，心房，心室。

6：计数方法：二十次所需秒数五．实验结果：1：观察到蟾蜍心脏如下（附图）：2：观察到蟾蜍肝门静脉结果如下（附图）：六．实验结论：无七．问题解答：1.问：蟾蜍心房、心室、动脉圆锥及静脉窦是什么样的？答：心脏位于体腔前端胸骨背面，被包在围心腔内，其后是红褐色的肝脏。

在心脏腹面用镊子夹起半透明的围心膜并剪开，心脏便暴露出来。

从腹面观察心脏的外形及其周围血管：【1】心房为心脏前部的2个薄壁有皱襞的囊状体，左右各1。

【2】心室 1个，连于心房之后的厚壁部分，圆锥形，心室尖向后。

在2心房和心室交界处有一明显的凹沟，称冠状沟，紧贴冠状沟有黄色脂肪体。

【3】动脉圆锥由心室腹面右上方发出的1条较粗的肌质管，色淡。

其后端稍膨大，与心室相通。

其前端分为2支，即左右动脉干。

用镊子轻轻提起心尖，将心脏翻向前方，观察心脏背面，可见静脉窦。

【4】静脉窦为心脏背面一暗红色三角形的薄壁囊。

在心房和静脉窦之间有1条白色半月形界线即窦房沟。

其左右2个前角分别连接左右前大静脉，后角连接后大静脉。

静脉窦开口于右心房。

在静脉窦的前缘左侧，有很细的肺静脉注人左心房。

2.问：蟾蜍肝门静脉是什么样的？答：肝门静脉将肝脏翻折向前，可见肝后面的肠系膜内有1条短而粗的血管入肝，此即肝门静脉。

仔细向后分离追踪，可见此血管是由来自胃和胰的胃静脉、来自肠和系膜的肠静脉和来自脾脏的脾静脉汇合而成的。

第1篇一、实验目的1. 观察离体蛙心的生理特性，了解心脏在离体条件下的收缩和舒张规律。

2. 探讨神经递质、激素等对离体蛙心功能的影响。

3. 掌握离体蛙心灌流实验的操作方法。

二、实验原理离体蛙心灌流实验是研究心脏生理学的重要方法之一。

在实验过程中，通过灌流装置向蛙心提供氧气和营养物质，同时可以观察心脏的收缩和舒张情况。

实验中，可以通过改变灌流液成分、温度、pH值等条件，观察心脏功能的改变，从而了解心脏生理特性及影响因素。

三、实验材料与仪器1. 实验材料：蟾蜍、蛙心套管、蛙心夹、蛙板、蛙类手术器械、二道仪、任氏液、氯化钙、肾上腺素、乙酰胆碱等。

2. 实验仪器：手术显微镜、蛙心灌流装置、注射器、秒表、滴管等。

四、实验方法与步骤1. 准备工作：将蟾蜍置于蛙板上，用手术剪剪开胸腔，暴露心脏。

用蛙心夹固定心脏，并连接灌流装置。

2. 灌流液准备：配制任氏液、氯化钙溶液、肾上腺素溶液、乙酰胆碱溶液等。

3. 实验分组：将实验分为对照组、氯化钙组、肾上腺素组、乙酰胆碱组。

4. 实验步骤：a. 对照组：灌流任氏液，观察心脏的收缩和舒张情况。

b. 氯化钙组：灌流氯化钙溶液，观察心脏功能的改变。

c. 肾上腺素组：灌流肾上腺素溶液，观察心脏功能的改变。

d. 乙酰胆碱组：灌流乙酰胆碱溶液，观察心脏功能的改变。

5. 记录数据：观察心脏的收缩和舒张频率、收缩幅度等，并记录数据。

五、实验结果与分析1. 对照组：心脏呈现规律的收缩和舒张，收缩幅度适中，频率约为60次/分钟。

2. 氯化钙组：心脏收缩幅度明显增大，频率加快，收缩时间延长，舒张时间缩短。

3. 肾上腺素组：心脏收缩幅度增大，频率加快，收缩时间延长，舒张时间缩短。

4. 乙酰胆碱组：心脏收缩幅度减小，频率减慢，收缩时间缩短，舒张时间延长。

六、实验结论1. 离体蛙心在灌流条件下可以维持一定时间的收缩和舒张功能。

2. 氯化钙和肾上腺素可以增强离体蛙心的收缩功能，使收缩幅度增大、频率加快。

离体蟾蜍心脏收缩能力和心率的实验研究实验报告实验报告课程名称：生理科学实验实验类型：动物实验实验项目名称：离体蟾蜍心脏收缩能力和心率的实验研究同组学生姓名：指导老师：实验12 离体蟾蜍心脏收缩能力和心率的实验研究（浙江大学医学院2010级临床医学专业1B班第5组，浙江，杭州，310058）【摘要】目的了解离体心脏灌流的方法，观察钾、钙离子浓度、肾上腺素、乙酰胆碱对离体蟾蜍心脏活动的影响并探讨作用机制。

方法取离体蟾蜍蛙心，分别用任氏液、无钙、高钙、高钾、乙酰胆碱、肾上腺素等灌流。

结果蟾蜍离体心脏在1ml任氏液加25ul任氏液灌流前后，终末舒张张力(g)分别为0.84±0.16，0.81±0.17，两者有显著差异；1ml任氏液加25ul任氏液灌流前后，终末收缩张力(g)分别为3.95±1.53，3.89±1.49，两者无显著差异；1ml任氏液加25ul任氏液灌流前后，心率（次/分）分别为49.00±6.09，48.90±6.81，两者无显著差异。

蟾蜍离体心脏在无钙任氏液灌流前后，终末舒张张力(g)分别为0.80±0.16，1.18±0.29，两者无显著差异；无钙任氏液灌流前后，终末收缩张力(g)分别为 3.83±1.38，1.58±0.42，两者有显著差异；无钙任氏液灌流前后，心率（次/分）分别为48.50±5.95，54.60±14.84，两者无显著差异。

蟾蜍离体心脏在22×10-4mol/L高钙溶液灌流前后，终末舒张张力(g)分别为0.61±0.23，0.53±0.23，两者有显著差异；22×10-4mol/L高钙溶液灌流前后，终末收缩张力(g)分别为3.74±1.17，5.39±1.62，两者有显著差异；22×10-4mol/L高钙溶液灌流前后，心率（次/分）分别为50.20±7.87，49.90±8.32，两者无显著差异。

离体蟾蜍心脏灌流实验数据处理与分析
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步骤二：在任氏液中加入1：100000肾上腺素溶液1-2滴，心搏曲线稳定后记录45s。

步骤三：用任氏液洗脱3次，加入1-2ml任氏液，待曲线稳定45s后，向灌流液中加5% NaCl溶液2-6滴，心搏曲线稳定后记录45s 。

步骤四：用任氏液洗脱数次，曲线基本恢复后，加入1-2ml任氏液，待曲线稳定45s后，在任氏液中加1% KCl溶液1-2滴，心搏曲线稳定后记录45s 。

步骤五：用任氏液洗脱数次，曲线基本恢复后，加入1-2ml任氏液，待曲线稳定45s后，在任氏
1-2滴，心搏曲线稳定后记录液中加2%CaCl
2
45s 。

步骤六：将上述溶液吸出，用新鲜任氏液换洗数次，加入1-2ml任氏液，待曲线稳定后记录45s ，在任氏液中加1:1000000 的 ACh溶液1-2滴，心搏曲线稳定后记录45s 。

一、实验目的1. 掌握离体心脏灌流技术的操作方法。

2. 观察和分析不同理化因素对离体心脏活动的影响。

3. 理解心脏生理学的基本原理，如离子浓度、温度、酸碱度、激素等对心脏功能的影响。

二、实验原理心脏的正常节律性活动依赖于内环境的相对稳定。

改变离体心脏灌流液的理化成分，会影响心肌细胞的兴奋性、自律性、传导性和收缩性，从而影响心脏的舒缩活动。

本实验通过改变灌流液中的离子浓度、温度、酸碱度、激素等，观察对离体心脏活动的影响，进一步理解心脏生理学的基本原理。

三、实验材料与仪器1. 实验动物：蟾蜍2. 实验药品：任氏液、NaCl溶液、CaCl2溶液、KCl溶液、乙酰胆碱溶液、肾上腺素溶液、乳酸溶液、NaHCO3溶液3. 实验仪器：BL-420生物信号分析系统、张力换能器、铁支台、试管夹、蛙类手术器械、蛙心插管、滴管、大烧杯、棉线、双凹夹、滑轮四、实验步骤1. 暴露心脏：取蟾蜍一只，用蛙类手术器械暴露心脏。

2. 心脏插管：将蛙心插管插入心脏，用棉线固定。

3. 摘取心脏：用镊子将心脏从蟾蜍体内取出，置于装有任氏液的培养皿中。

4. 连接仪器：将张力换能器连接到心脏插管，并通过BL-420生物信号分析系统进行数据采集。

5. 实验分组：将实验分为以下几组：空白对照组：用任氏液灌流心脏。

Na+浓度改变组：用不同浓度的NaCl溶液灌流心脏。

K+浓度改变组：用不同浓度的KCl溶液灌流心脏。

Ca2+浓度改变组：用不同浓度的CaCl2溶液灌流心脏。

乙酰胆碱组：用乙酰胆碱溶液灌流心脏。

肾上腺素组：用肾上腺素溶液灌流心脏。

乳酸组：用乳酸溶液灌流心脏。

NaHCO3组：用NaHCO3溶液灌流心脏。

6. 数据采集：观察并记录每组心脏的舒缩节律、幅度和持续时间。

7. 结果分析：分析不同理化因素对离体心脏活动的影响。

五、实验结果1. Na+浓度改变组：随着Na+浓度的增加，心脏的舒缩幅度和持续时间逐渐增加，但超过一定浓度后，心脏活动减弱。

一、实验目的1. 学习离体蛙心灌流的方法。

2. 观察理化因素对蛙心活动的影响，如离子浓度、药物等。

3. 掌握实验记录和分析方法。

二、实验原理蛙心灌流实验是生理学中常用的一种实验方法，通过将蛙心置于人工灌流系统中，模拟心脏在体内的生理环境，研究各种因素对心脏活动的影响。

蛙心无营养性血管，离体后采用人工灌流的方法，仍可保持其新陈代谢，心脏仍能有节律的自动收缩、舒张，并维持较长时间。

三、实验材料1. 实验动物：蟾蜍2. 实验器材：蛙心夹、常用手术器械、蛙板（或蜡盘）、蛙心夹、计算机采集系统、张力传感器、支架、双凹夹、双针形露丝刺激电极、滴管、培养皿（或小烧杯）、棉线、任氏液、0.65%NaCl、2%CaCl2、1%KCl、1:10000肾上腺素、1:10000乙酰胆碱、3%乳酸。

四、实验方法与步骤1. 蛙心制备：- 使用手术刀将蛙麻醉，然后破坏蛙的中枢神经系统。

- 暴露心脏，固定蛙心，将动脉圆锥下方穿一线，用于连接灌流装置。

- 游离心脏，将心脏的主动脉和肺动脉分别插入蛙心夹。

2. 连接实验装置：- 将蛙心夹固定在支架上，连接张力传感器。

- 将灌流液（任氏液）置于培养皿中，通过滴管控制灌流液的流速。

- 将灌流液通过动脉圆锥下方的线，连接到蛙心夹的主动脉。

3. 观察记录：- 观察蛙心的收缩和舒张情况，记录心脏跳动频率和幅度。

- 分别进行以下实验：- 以0.65%NaCl溶液替换任氏液，观察心脏跳动频率和幅度变化。

- 在灌流液中加入2%CaCl2（50ul）溶液，观察心脏跳动频率和幅度变化。

- 在灌流液中加入1%KCl（50ul）溶液，观察心脏跳动频率和幅度变化。

- 在灌流液中加入1:10000肾上腺素（50ul）溶液，观察心脏跳动频率和幅度变化。

- 在灌流液中加入1:10000乙酰胆碱（50ul）溶液，观察心脏跳动频率和幅度变化。

4. 数据分析：- 对实验数据进行统计分析，比较不同处理组之间的差异。

五、实验结果与分析1. 正常蛙心收缩活动：- 在任氏液中，蛙心以正常节律收缩和舒张，跳动频率和幅度适中。

蛙类离体心脏灌流一、【目的要求】1、学习离体蛙心灌流法。

2、观察Na+,K+,Ca2+及肾上腺素(Adr),乙酰胆碱(ACh),乳酸对离体心脏活动的影响。

二、【原理】将离体蛙心（失去神经支配的蛙心）保持在适宜的环境中，在一定的时间内仍然能够保持节律性收缩，心脏正常的节律性活动需要一个适宜的理化环境，离体心脏也是如此，离体心脏脱离了机体的神经支配和全身体液因素的直接影响，可以通过改变灌流液的某些成分，观察其对心脏活动的作用。

心肌细胞的自律性、兴奋性、传导性及收缩性，都与钠、钾及钙等离子有关。

外源性给予去甲肾上腺素或乙酰胆碱可产生类似心交感神经或迷走神经兴奋时对心脏的作用。

三、【实验仪器】青蛙、常用手术器械、蛙板(或蜡盘)、蛙心夹、计算机采集系统、张力传感器、支架、双凹夹、双针形露丝刺激电极、滴管、培养皿(或小烧杯)、棉线、任氏液。

套管夹、0．65％NaCl、2％CaCl2、1％KCl、1：10000肾上腺素、1：10000乙酰肌碱、3%乳酸。

四、【方法与步骤】1、斯氏蛙心插管法（1）一只青蛙，双毁髓后背位置于蜡盘中，按前面的方法暴露心脏。

仔细识别心脏周围的大血管(见右图)。

在左主动脉下方穿一线，于动脉圆锥处结扎(动物个体小时，结扎位置可靠上些)。

再从左右两主动脉下方穿一线，并打一活结备用。

左手提起主动脉上的结扎线，右手用眼科剪在结扎线下方、沿向心方向将动脉上壁剪一斜口。

选择大小适宜的蛙心套管，然后将盛有少量(套管内2～3 cm高度)任氏液(内加入一滴肝素溶液)的斯氏蛙心套管，山开口处插入动脉圆锥(见右图)。

当套管尖端到达动脉圆锥基部时，应将套管稍稍后退，使尖端向动脉圆锥的背部后下方及心尖方向推进，经主动脉瓣插入心室腔内(于心室收缩时插入，但不可插得过深，以免心室壁堵住套管下口)。

此时可见套管中血液冲人套管，并使液面随心脏搏动而亡下移动，表明操作成功(否则需退回并重新插入)。

用滴管吸去套管中的血液，更换新鲜任氏液。

一、实验目的1. 熟悉离体心脏灌流技术的基本操作。

2. 观察和分析不同生理、病理因素对离体心脏功能的影响。

3. 掌握记录和分析心脏功能指标的方法。

二、实验原理离体心脏灌流实验是生理学研究中常用的一种方法，通过将心脏从机体中取出，在体外模拟生理环境条件下进行灌流，观察和分析心脏功能的变化。

实验中，通过改变灌流液的成分、温度、pH值等条件，可以研究不同因素对心脏功能的影响。

三、实验材料与仪器1. 实验材料：青蛙、蛙心夹、蛙板、蛙类手术器械、二道仪、任氏液、长滴管、铁支架、玻璃管、量筒、秒表等。

2. 实验仪器：显微镜、电子天平、恒温器、恒温水浴箱、高压消毒锅等。

四、实验方法与步骤1. 实验准备（1）取一只青蛙，用蛙类手术器械进行解剖，暴露心脏。

（2）将心脏夹在蛙心夹上，用线固定在蛙板上。

（3）在心脏主动脉下方穿一线，结扎并留出一段备用。

（4）将心脏主动脉左支结扎，于动脉圆锥处剪一向心斜切口，插入灌流管。

2. 灌流实验（1）将灌流管一端插入恒温器中的任氏液中，另一端与心脏主动脉相连。

（2）调整恒温器，使任氏液温度保持恒定。

（3）开启灌流泵，使任氏液以恒定速度灌流心脏。

（4）观察心脏收缩情况，记录心率、收缩幅度等指标。

（5）依次改变灌流液的成分、温度、pH值等条件，观察心脏功能的变化。

3. 实验数据记录与分析（1）记录不同灌流条件下心脏的心率、收缩幅度等指标。

（2）分析不同生理、病理因素对离体心脏功能的影响。

（3）绘制心脏功能曲线，分析实验结果。

五、实验结果与分析1. 灌流液中加入肾上腺素后，离体心脏心率加快，收缩幅度增强。

2. 灌流液中加入乙酰胆碱后，离体心脏心率减慢，收缩幅度减弱。

3. 降低灌流液温度后，离体心脏心率减慢，收缩幅度减弱。

4. 提高灌流液pH值后，离体心脏心率加快，收缩幅度增强。

六、实验结论1. 肾上腺素和乙酰胆碱对离体心脏功能具有调节作用，肾上腺素使心脏兴奋，乙酰胆碱使心脏抑制。

2. 温度和pH值对离体心脏功能有显著影响，低温和碱性环境有利于心脏功能的维持。

一、实验目的1. 熟悉离体蟾蜍心脏灌流实验的操作方法。

2. 通过观察灌流液中离子浓度的改变，了解相应受体的激动剂和阻断剂对心脏收缩活动的影响。

3. 掌握离体心脏标本的制备方法。

二、实验原理蟾蜍心脏离体后，若使用与其内环境相似的任氏液进行灌流，在一定时间内，心脏仍能维持节律性收缩和舒张。

通过改变任氏液的组成成分，如Na、K、Ca2+的浓度和pH值等，可以观察到心脏跳动频率和幅度的变化。

三、实验材料1. 实验动物：蟾蜍一只2. 实验器材：解剖盘、剪刀、镊子、针筒、灌流管、任氏液、生理盐水、CaCl2溶液、KCl溶液、滴管、记录仪等3. 实验试剂：任氏液、生理盐水、CaCl2溶液、KCl溶液四、实验步骤1. 蟾蜍心脏标本的制备（1）取蟾蜍一只，破坏脑和脊髓。

（2）打开胸腔，暴露心脏。

（3）用镊子轻轻提起心脏，用剪刀剪断心包膜，游离心脏。

（4）将心脏放入任氏液中，以保持其活性。

2. 动脉插管（1）在A圆锥和左主A根部剪一小口。

（2）将灌流管插入心室内，直至血液涌入灌流管，并随心跳上下波动。

3. 灌流实验（1）将灌流管固定在灌流装置上，确保灌流液顺畅流入心脏。

（2）开始灌流，观察心脏跳动频率和幅度。

（3）依次进行以下实验：a. 以0.65%NaCl溶液替换任氏液，观察心脏跳动频率和幅度变化。

b. 在灌流液中加入2%CaCl2溶液（50μl），观察心脏跳动频率和幅度变化。

c. 在灌流液中加入1%KCl溶液（50μl），观察心脏跳动频率和幅度变化。

d. 向离体蟾蜍心脏的灌流液中滴加1% KCl溶液2-3滴，观察心脏跳动情况。

4. 实验结果记录与分析（1）记录每次实验前后的心脏跳动频率和幅度。

（2）分析不同实验条件下心脏跳动频率和幅度的变化，探讨离子浓度对心脏收缩活动的影响。

五、实验结果1. 以0.65%NaCl溶液替换任氏液后，心脏跳动频率和幅度稍微减小。

2. 在灌流液中加入2%CaCl2溶液后，心脏跳动频率和幅度稍微加大。

蟾蜍离体心脏灌流一：实验目的1、掌握两栖类动物离体心脏灌流的方法，掌握斯氏插管法2、了解心肌的生理特性，证明心脏具有自动节律性收缩的能力+ K+ C a2+ 对心脏活动的影响。

3、观察Na4、理解内环境各种理化因素的相对恒定对于细胞进行正常生命活动的重要意义。

二：实验原理1、正常蛙心能按静脉窦的节律性自动产生兴奋，心脏的自动节律性活动需要有一个合适的理化环境。

蟾蜍心脏离体后，用任氏液灌流，在一定时间内仍能保持节律性兴奋和收缩活动。

由于心脏的正常活动还要依赖于内环境因素的相对稳定，改变灌流液的成分可引起心脏活动的改变。

心肌细胞外离子浓度的变化和因体内生物活性物质（如激素）引起的细胞膜离子通透性的改变，对心肌细胞的生物电活动和生理特性必然会产生明显的影响。

2、影响心肌细胞电生理特征的原因：（1）心肌的自动节律性：①最大复极电位与阈电位的差异；② 4 期自动除极速度（2）心肌的兴奋性：①静息电位的水+浓度②Na+通道的性状（3）心肌的传导性：主要平：依赖于细胞外的K取决于动作电位0 期除极速度和幅度（4）心肌的收缩性：依赖于细胞外钙离子的浓度+3、涉及到的几种离子对心脏活动的影响：①钾离子：K 参与心肌细胞的复极化+和自律细胞的 4 期自动去极化过程，其改变不仅取决于细胞内外K浓度梯度，+通透性有关，因此其影响是多方面的；②钙离子：Ca2+对Na+ 还与细胞膜对K内流存在竞争抑制作用，称作膜屏障作用，对静息电位无影响。

其浓度升高可使心肌细胞的兴奋性降低，传导减慢，收缩力增强。

三：实验器材动物：蟾蜍（尽量选择体型大的蟾蜍）试剂：5% NaCl、2%CaCl2、1%KCl 溶液，任氏液器材：常用手术器械，张力换能器，蛙心套管，套管夹，滑轮，双凹夹，支架，烧杯四：实验方法与步骤1、离体蛙心的制备取一只蟾蜍，进行双毁髓，按照上次实验的方法进行暴露心脏并仔细识别心脏周围的大血管。

在左主动脉的下方穿一线，于动脉圆锥处结扎（动物个体小时，结扎位置可靠上些）。

实验五离体蛙心灌流实验一实验目的1、了解蟾蜍离体心脏的灌流的方法。

2、观察细胞外液钾离子、钙离子浓度变化对心脏活动的影响。

二实验原理心脏离体后，如用人工灌流的方法，保持其新陈代谢的顺利进行，则心脏仍能有节律的自动收缩和舒张，并可维持较长的时间。

离体心脏所需的条件应与动物内环境的理化性质基本相近，因此改变灌流液的理化因素，则可引起心脏活动的变化。

1、任氏液：正常对照含有NaCl、CaCl2、KCl、NaH2PO4、 Na2HPO4和蒸馏水，其电解质、晶体渗透压、pH值与蛙的组织液相近。

2、0.65%NaCl灌流：3、2%CaCl2灌流4、 1%KCl灌流5、1:10000 E 灌流6、1:10000 Ach灌流7、心得安β1受体阻断剂，抑制肾上腺素与β1受体结合，使E不能发挥作用。

8.、阿托品M受体阻断剂，抑制Ach减慢心率，加速房室传导，增加心房收缩力。

三实验器材微机生物信号处理系统， physiology系统，学校服务器系统，蟾蜍离体蛙心，任氏液，1%KCl，3%CaCl2，65%NaCl，1/10000 E，心得安+1/10000,1/10000 Ach，阿托品+1/10000 Ach。

四实验步骤1、标本制备（观看视频）2、仪器及标本的连接3、具体软件操作：1）离子试剂：任氏液→0.65%NaCl溶液→任氏液清洗→1%KCl溶液→任溶液→任氏液清洗氏液清洗→2%CaCl22）药物试剂：肾上腺素（E）→任氏液清洗→心得安→任氏液清洗→Ach，任氏液清洗→阿托品→任氏液清洗。

五实验结果图1 离体蛙心灌流表1 离体蛙心灌流数据记录六结果分析此实验说明心脏具有自律性，兴奋性，传导性，收缩性，离体心脏静脉窦还能产生兴奋并传导到心房和心室，引起心脏有节律的兴奋和收缩。

体内细胞所直接生存的环境较为稳定，内环境的稳态是细胞、器官维持正常生存和活动的必要条件，所以改变灌流的溶液，会引起心脏收缩的改变。

实验报告课程名称：生理科学实验实验类型：动物实验实验项目名称：离体蟾蜍心脏收缩能力和心率的实验研究同组学生姓名：指导老师：实验12 离体蟾蜍心脏收缩能力和心率的实验研究（浙江大学医学院2010级临床医学专业1B班第5组，浙江，杭州，310058）【摘要】目的了解离体心脏灌流的方法，观察钾、钙离子浓度、肾上腺素、乙酰胆碱对离体蟾蜍心脏活动的影响并探讨作用机制。

方法取离体蟾蜍蛙心，分别用任氏液、无钙、高钙、高钾、乙酰胆碱、肾上腺素等灌流。

结果蟾蜍离体心脏在1ml任氏液加25ul任氏液灌流前后，终末舒张张力(g)分别为0.84±0.16，0.81±0.17，两者有显著差异；1ml任氏液加25ul任氏液灌流前后，终末收缩张力(g)分别为3.95±1.53， 3.89±1.49，两者无显著差异；1ml任氏液加25ul任氏液灌流前后，心率（次/分）分别为49.00±6.09，48.90±6.81，两者无显著差异。

蟾蜍离体心脏在无钙任氏液灌流前后，终末舒张张力(g)分别为0.80±0.16，1.18±0.29，两者无显著差异；无钙任氏液灌流前后，终末收缩张力(g)分别为3.83±1.38，1.58±0.42，两者有显著差异；无钙任氏液灌流前后，心率（次/分）分别为48.50±5.95，54.60±14.84，两者无显著差异。

蟾蜍离体心脏在22×10-4mol/L高钙溶液灌流前后，终末舒张张力(g)分别为0.61±0.23，0.53±0.23，两者有显著差异；22×10-4mol/L高钙溶液灌流前后，终末收缩张力(g)分别为3.74±1.17，5.39±1.62，两者有显著差异；22×10-4mol/L高钙溶液灌流前后，心率（次/分）分别为50.20±7.87，49.90±8.32，两者无显著差异。

一、实验目的1. 学习离体蛙心灌流的方法。

2. 观察理化因素对蛙心活动的影响。

3. 掌握心脏生理学基本知识，提高实验操作技能。

二、实验原理蛙心灌流实验是一种常用的生物学实验方法，通过将蛙心取离体后，采用人工灌流的方法，模拟心脏在体内的血液供应，观察灌流液中理化因素对心脏活动的影响。

蛙心灌流实验中，常用的灌流液为任氏液，其中含有与心脏内环境相似的离子成分，如Na+、K+、Ca2+等。

改变灌流液中这些离子的浓度，可以观察到心脏活动的变化。

三、实验材料与方法1. 实验材料：蟾蜍、任氏液、生理盐水、CaCl2、KCl、注射器、灌流管、蛙心夹、显微镜等。

2. 实验方法：（1）将蟾蜍处死，剥皮，暴露心脏，用蛙心夹固定心脏。

（2）将心脏的动脉插管，连接灌流管，并调整灌流速度。

（3）用生理盐水冲洗灌流管，使灌流液充满管内。

（4）观察心脏在任氏液中的正常活动，记录心率、振幅等指标。

（5）分别改变灌流液中Na+、K+、Ca2+的浓度，观察心脏活动的变化，记录心率、振幅等指标。

（6）对实验结果进行分析和讨论。

四、实验结果与分析1. 正常蛙心在任氏液中的活动：心率适中，振幅适中，处于与内环境相似的任氏液中，蛙心以正常节律收缩和舒张。

2. 改变灌流液中Na+浓度：当灌流液中Na+浓度降低时，心率减慢，振幅减小；当灌流液中Na+浓度升高时，心率加快，振幅增大。

3. 改变灌流液中K+浓度：当灌流液中K+浓度升高时，心率加快，振幅增大；当灌流液中K+浓度降低时，心率减慢，振幅减小。

4. 改变灌流液中Ca2+浓度：当灌流液中Ca2+浓度升高时，心率加快，振幅增大；当灌流液中Ca2+浓度降低时，心率减慢，振幅减小。

五、结论与展望1. 结论：通过本实验，我们掌握了离体蛙心灌流的方法，观察到理化因素对蛙心活动的影响，进一步了解了心脏生理学的基本知识。

2. 展望：本实验为后续心脏生理学实验奠定了基础。

在今后的实验中，我们可以进一步研究其他因素对心脏活动的影响，如pH值、温度等，以深入了解心脏生理学的基本原理。

一、实验目的1. 了解蟾蜍心脏的解剖结构和生理功能；2. 掌握蟾蜍心脏的实验操作技术；3. 观察蟾蜍心脏的起搏点和传导系统；4. 分析蟾蜍心脏的生理特点。

二、实验原理蟾蜍心脏为两心房一心室，心脏的起搏点是静脉窦。

静脉窦的节律最高，心房次之，心室最低。

正常情况下，心脏的活动节律服从静脉窦的节律，其活动顺序为：静脉窦、心房、心室。

这种有节律的活动可以通过传感器或计算机采集系统记录下来，称为心搏曲线。

三、实验材料与仪器1. 实验材料：蟾蜍、任氏液、手术器械、蛙板、蛙心夹、计算机采集系统、张力传感器、支架、双凹夹、秒表、滴管、培养皿（或小烧杯）、纱布、棉线；2. 实验仪器：手术显微镜、解剖显微镜、生理信号采集系统。

四、实验步骤1. 实验动物准备：取一只蟾蜍，用剪刀剪断蟾蜍的头部，取出心脏。

2. 解剖心脏：用解剖显微镜观察蟾蜍心脏的解剖结构，辨认心房、心室、静脉窦、房室沟等部位。

3. 暴露心脏：用手术刀在心脏表面切开一个小口，暴露心脏的内部结构。

4. 连接实验仪器：将蛙心夹夹住心脏的心尖部肌肉，用棉线将蛙心夹的系线与张力传感器的应变梁相连，并将应变梁与生理信号采集系统相连。

5. 实验操作：启动生理信号采集系统，观察蟾蜍心脏的搏动情况。

6. 记录数据：记录蟾蜍心脏的心搏曲线，分析心脏的起搏点和传导系统。

7. 实验结束：关闭生理信号采集系统，将蟾蜍心脏放回培养皿中，用任氏液冲洗。

五、实验结果与分析1. 蟾蜍心脏的解剖结构：蟾蜍心脏由两个心房和一个心室组成，心房和心室之间有房室沟分隔。

心房内分布有静脉窦，是心脏的起搏点。

2. 蟾蜍心脏的生理特点：蟾蜍心脏的起搏点是静脉窦，其节律最高，心房次之，心室最低。

正常情况下，心脏的活动节律服从静脉窦的节律，其活动顺序为：静脉窦、心房、心室。

3. 心搏曲线：通过生理信号采集系统记录的蟾蜍心脏心搏曲线显示，心搏曲线呈现周期性变化，心搏顺序为：静脉窦、心房、心室。

4. 起搏点和传导系统：观察实验结果，发现蟾蜍心脏的起搏点是静脉窦，传导系统包括窦房结、房室结和房室束。

离体蛙心灌流及药物对心脏的影响离体蛙心灌流及药物对心脏的影响一、实验目的：1、学习蛙心灌流方法。

2、了解离体心脏的自律性与环境中各因素变化的关系，观察理化因素对蛙心活动的影响。

二、实验对象：蟾蜍三、实验方法：1、标本制备：取蟾蜍→破坏CNS→固定→剪皮→打开胸腔（暴露胸骨柄，用镊子把胸骨柄捏起来，用粗剪刀剪断，沿胸骨将锁骨剪断，去除多余的骨头，注意勿将心脏剪破）→用眼科剪小心剪开心包膜→暴露心脏→在主动脉叉下方穿一根丝线备用→用蛙心夹在心舒张期夹住心尖部→在左侧主动脉分叉处2-3mm处剪一剪口→将盛有一定量任氏液的蛙心插管插入到主动脉球→将插入到主动脉球的套管稍向后退，再向左下逆时针旋转90°，插入心室→结扎固定→剪断血管和背面静脉窦以下组织，游离标本2、连接装置：蛙心管内保持2ml灌流液，用木夹夹住蛙心套管，蛙心夹的线与张力换能器相连，换能器与电脑的相应通道相连。

3、运行电脑：打开电脑→Medlab→实验/常用生理实验→离体蛙心灌流四、实验结果：分别观察正常心脏活动曲线及加入不同溶液后的心脏活动曲线的变化。

曲线规律：心脏节律；曲线疏密：心率曲线幅度：心室收缩强度；曲线顶点：心室收缩最大强度；曲线基线：心室舒张最大程度顺序观察项目药量心肌(率、力)变化正常任氏液灌流正常1 0.65%NaCl 灌流1~2d2 2% CaCl23 1%KCl 1~2d4 1:10000 NA 1~2d5 1:100000 ACh 1~2d6 3% LH 1~2d2.5% NaHCO3 2~4d7 1:100000 Isop 1ml +任氏液1ml8 1:1000 prop 0.2ml+任氏液1.8ml出现效应后，抽出一半液体后立即加入Isop1ml五、实验讨论：心肌细胞兴奋时，通过兴奋-收缩耦联机制，触发心肌细胞收缩。

心肌收缩的特点是：1.对细胞外Ca2+浓度的依赖性高；2.“全或无”式收缩1、 0.65%NaCl灌流与正常任氏液相比[Ca2+]↓→ Ca2+内流↓→兴奋-收缩耦联↓→收缩力↓（1～2滴）→[Ca2+]↑→Ca2+内流↑→兴奋-收缩耦联↑→收缩力↑2、2%CaCl2舒张期Ca2+与肌钙蛋白不完全解离，产生Ca2+强直，基线上移。

离体蛙心灌流实验报告
实验目的，通过离体蛙心灌流实验，观察心脏在不同药物作用下的生理变化，
为心脏药理学研究提供实验数据。

实验材料与方法，取新鲜的蛙心，进行离体灌流实验。

首先，将蛙心置于离体
心脏灌流装置中，通过主动脉插管进行心脏灌流。

然后，分别加入不同药物溶液，如肾上腺素、乙酰胆碱等，观察心脏的生理变化。

实验过程中，记录心脏的心率、收缩力、舒张力等指标，并进行统计分析。

实验结果，在加入肾上腺素后，观察到蛙心的心率明显增加，心脏收缩力增强，舒张力减弱；而在加入乙酰胆碱后，心率明显减慢，心脏收缩力减弱，舒张力增强。

这些结果表明，肾上腺素具有增强心脏收缩力和加快心率的作用，而乙酰胆碱则具有减慢心率和减弱心脏收缩力的作用。

实验讨论，离体蛙心灌流实验是一种常用的心脏药理学研究方法，通过模拟体
内环境，观察心脏在不同药物作用下的生理变化。

本实验结果与心脏药理学理论相符，说明离体蛙心灌流实验是一种可靠的实验方法，能够为心脏药理学研究提供重要数据。

结论，通过离体蛙心灌流实验，我们观察到了心脏在不同药物作用下的生理变化，验证了心脏药理学理论。

这为心脏药物的研发和临床应用提供了重要参考，也为心脏疾病的治疗提供了新的思路和方法。

在今后的研究中，我们将进一步探索心脏药物的作用机制，寻找更多有效的心
脏药物，并将离体蛙心灌流实验应用于心脏药理学研究的更多领域，为心脏疾病的治疗和预防做出更大的贡献。

通过本次实验，我们对离体蛙心灌流实验有了更深入的了解，并对心脏药理学
研究有了更加清晰的认识。

希望本实验能为相关领域的研究工作提供一定的参考和帮助。

一、实验目的1. 了解蟾蜍水肿灌流实验的基本原理和操作步骤。

2. 观察蟾蜍心脏在不同灌流条件下的变化，分析水肿对心脏功能的影响。

3. 掌握蟾蜍心脏灌流实验的技术和方法。

二、实验材料1. 实验动物：蟾蜍1只2. 实验仪器：解剖显微镜、灌流装置、注射器、剪刀、镊子、针筒、生理盐水、酚红指示剂、蒸馏水、酒精、甘油、碘酒、酒精灯等。

三、实验方法1. 实验动物处死：将蟾蜍放入装有酒精的容器中，使其失去意识后处死。

2. 剖取心脏：打开蟾蜍胸腔，取出心脏，置于解剖显微镜下观察。

3. 灌流实验：（1）准备工作：将灌流装置固定好，连接好注射器和灌流管道，确保无泄漏。

（2）灌流：将酚红指示剂加入生理盐水中，使溶液呈粉红色。

用注射器将溶液注入灌流装置，打开灌流开关，使溶液通过心脏。

（3）观察：在解剖显微镜下观察心脏在不同灌流条件下的变化，如心脏搏动、颜色、形态等。

（4）实验分组：a. 对照组：正常灌流条件下观察心脏变化。

b. 水肿组：在正常灌流条件下，加入甘油，使溶液浓度为0.5%，观察心脏变化。

c. 酚红组：在正常灌流条件下，加入酚红指示剂，观察心脏变化。

四、实验结果1. 对照组：心脏搏动有力，颜色鲜红，形态正常。

2. 水肿组：心脏搏动减弱，颜色暗红，形态增大，出现水肿现象。

3. 酚红组：心脏搏动无明显变化，颜色呈粉红色，酚红指示剂通过心脏。

五、实验分析1. 通过观察心脏在不同灌流条件下的变化，发现水肿对心脏功能有显著影响。

水肿组心脏搏动减弱，颜色暗红，形态增大，说明水肿导致心脏负担加重，影响心脏功能。

2. 酚红组心脏搏动无明显变化，说明酚红指示剂对心脏功能无显著影响。

3. 本实验结果表明，蟾蜍水肿灌流实验是一种有效的研究水肿对心脏功能影响的实验方法。

六、实验结论1. 水肿对蟾蜍心脏功能有显著影响，导致心脏负担加重，影响心脏搏动和形态。

2. 蟾蜍水肿灌流实验是一种有效的研究水肿对心脏功能影响的实验方法。

七、实验讨论1. 本实验结果表明，水肿对蟾蜍心脏功能有显著影响，这与临床实际情况相符。

蟾蜍水肿灌流实验报告1. 实验目的本实验旨在探究蟾蜍水肿灌流实验方法对于研究脑细胞水肿机制的有效性，并进一步验证该方法对于药物筛选的可行性。

2. 实验原理及方法2.1 实验原理脑细胞水肿是神经系统疾病中的一个重要病理特征，通过模拟水肿状态进行实验，有助于深入研究水肿发生机制，并寻找治疗药物。

蟾蜍大脑灌流法是一种常用的脑组织模型，通过向蟾蜍的大脑室或静脉注入实验溶液，引起脑血管扩张、脑脊液产量增加等反应，从而导致脑细胞水肿。

2.2 实验方法1. 实验动物：选用健康成年蟾蜍作为实验对象。

2. 麻醉：使用适量的氯化物使蟾蜍处于麻醉状态。

3. 手术准备：将蟾蜍固定在手术台上，消毒处理，并取出钳子准备开颅。

4. 开颅：用小锯子将蟾蜍颅骨锯开，暴露出大脑室。

5. 灌流：使用细胞生理盐水或其他实验溶液，通过微注射泵将溶液注入大脑室或静脉。

控制流速和注射量。

6. 监测：记录注射前后蟾蜍的生理参数变化，包括心率、血压等。

7. 实验结束：结束后恢复蟾蜍的颅骨，维持其生命体征，等待进一步观察。

3. 实验结果与分析在实验过程中，我们成功地通过蟾蜍水肿灌流的方法引发了脑细胞水肿。

实验中观察到蟾蜍在注射实验溶液后，出现明显的脑血管扩张、颅内压增加等现象。

此外，我们还记录了蟾蜍的生理参数变化，包括心率和血压。

实验结果显示，在注射实验溶液后，蟾蜍的心率明显加快，而血压则有所降低。

通过上述实验结果分析，我们可以得出以下结论：1. 蟾蜍水肿灌流实验方法是一种有效的模拟脑细胞水肿的方法。

通过注射实验溶液，可以引发脑血管扩张、颅内压增加等反应，模拟真实的水肿状态。

2. 实验结果显示，蟾蜍在注射实验溶液后生理参数发生了明显变化，表明实验方法成功地模拟了脑细胞水肿的病理生理过程。

3. 通过蟾蜍水肿灌流实验，我们可以进一步研究脑细胞水肿发生的机制，并进行药物筛选实验，以寻找潜在的治疗药物。

4. 实验结论蟾蜍水肿灌流实验方法是一种有效的研究脑细胞水肿机制的方法，实验过程中可以模拟脑血管扩张、颅内压增加等病理生理变化。