大鼠三碘甲状腺原氨酸T3酶联免疫分析试剂盒使用方法
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游离三碘甲状腺原氨酸(FT3)测定试剂盒(电化学发光免疫分析法)组成:适用范围:本试剂盒用于体外定量测定人体血清样本中游离三碘甲状腺原氨酸(FT3)的含量。
2.1 外观2.1.1 试剂盒各组分应齐全、完整、液体无渗漏;2.1.2 磁分离试剂摇匀后应为棕色含固体微粒的均匀悬浊液,无明显凝集、无絮状物;2.1.3 其它液体组分应澄清,无异物,沉淀物或絮状物;2.1.4 包装标签应清晰、无磨损、易识别。
2.2 空白限应不大于0.4pmol/L。
2.3 准确度用FT3企业参考品进行检测,其测量结果的相对偏差应在±15%范围内。
2.4 线性在[1.0,50.0]pmol/L范围内,线性相关系数的绝对值(|r|)应不小于0.9900。
2.5 精密度2.5.1 分析内精密度在试剂盒的线性范围内,浓度为(5.0±1.0pmol/L)和(30.0±6.0pmol/L)的样品检测结果的变异系数(CV)应不大于8%。
2.5.2 批间精密度在试剂盒的线性范围内,用3个批号试剂盒分别检测浓度为(5.0±1.0pmol/L)和(30.0±6.0pmol/L)的样品,检测结果的变异系数(CV)应不大于15%。
2.6 特异性2.6.1 与甲状腺素(T4)浓度不低于200ng/mL的T4样品,在本试剂盒测定结果应不大于0.4pmol/L;2.6.2 与3、3’、5’-三碘甲腺原氨酸(rT3)浓度不低于200ng/mL的rT3样品,在本试剂盒测定结果应不大于0.4pmol/L。
2.6.3 与3、3’-二碘甲腺原氨酸浓度不低于200ng/mL的T2样品,在本试剂盒测定结果应不大于0.4pmol/L。
2.7 效期末稳定性本产品效期为15个月,试剂盒在2~8℃下保存至有效期末进行检测,检测结果应符合2.1、2.2、2.3、2.4、2.5.1的要求。
2.8 溯源性依据GB/T21415-2008《体外诊断医疗器械生物样品中量的测量校准品和控制物质赋值的计量学溯源性》的要求,校准品溯源至罗氏诊断生产的FT3定标液。
大鼠S100B蛋白(S100B)酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用检测范围:312pg/ml-20000pg/ml最低检测限:78pg/ml特异性:本试剂盒可同时检测天然或重组的大鼠S100B,且与其他相关蛋白无交叉反应。
有效期:6个月预期应用:ELISA法定量测定大鼠血清、血浆、细胞培养上清或其它相关生物液体中S100B 含量。
说明1.试剂盒保存:-20℃(较长时间不用时);2-8℃(频繁使用时)。
2.浓洗涤液低温保存会有盐析出,稀释时可在水浴中加温助溶。
3.中、英文说明书可能会有不一致之处,请以英文说明书为准。
4.刚开启的酶联板孔中可能会含有少许水样物质,此为正常现象,不会对实验结果造成任何影响。
实验原理用纯化的抗体包被微孔板,制成固相载体,往包被抗S100B抗体的微孔中依次加入标本或标准品、生物素化的抗S100B抗体、HRP标记的亲和素,经过彻底洗涤后用底物TMB显色。
TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的S100B呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度。
试剂盒组成及试剂配制1.酶联板(Assay plate):一块(96孔)。
2.标准品(Standard):2瓶(冻干品)。
3.样品稀释液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。
4.生物素标记抗体稀释液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
5.辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液(HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
6.生物素标记抗体(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)7.辣根过氧化物酶标记亲和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)8.底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。
总三碘甲状腺原氨酸测定试剂盒(荧光免疫层析法)
结构组成:
预期用途:该产品用于体外定量检测人血清、血浆中总三碘甲状腺原氨酸(T3)的含量。
2.1 外观
试剂盒外观应整洁, 文字符号标识清晰,液体无渗漏,测试卡完整无破损, 质控品为冻干疏松体,复溶后为无色至淡黄色液体。
2.2装量
装量不少于标示值。
2.3检出限
应不高于0.77nmol/L。
2.4线性范围
在[0.77,6] nmol/L内,相关系数R≥0.990。
2.5 重复性
重复测试(1.5±0.5)nmol/L和(3±1)nmol /L的样本,所得结果的变异系数(CV)应不大于15%。
2.6批间差
测试(1.5±0.5)nmol/L和(3±1)nmol /L的样本,批间相对极差(R)应不大于15%。
2.7准确度
测定国家标准物质150550相对偏差在±15%范围内。
2.8质控品
2.8.1预期结果
试剂盒内的质控品,检测结果均在质控范围内。
2.8.2均匀性
瓶间差≤15%。
2.8.3复溶稳定性
质控品复溶后在2℃~8℃密封避光保存24h。
检测复溶后的质控品,检测结果均在质控范围内。
2.9效期稳定性
试剂有效期为18个月。
取到效期后3个月内试剂盒进行检测,测定结果应符合2.3、2.4、2.5、2.7、2.8项要求。
2.10溯源性
根据GB/T21415-2008的要求,校准曲线溯源至国家标准物质150550。
游离三碘甲状腺原氨酸测定试剂盒(化学发光免疫分析法)
组成:
)预期用途:本本试剂盒用于体外定量测定人血清中游离三碘甲状腺原氨酸(FT
3的含量。
2.1外观
2.1.1试剂(盒)各组份应齐全、包装完好,液体应为透明溶液,无渗漏,无混浊,无未溶解物;
2.1.2包装标签应清晰,无磨损。
2.2准确度
比对试验:本试剂盒与已上市的试剂盒进行比对试验,相关系数(r)应≥0.975。
2.3空白限
试剂盒的空白限不大于0.5 pg/mL。
2.4线性
在[1.3,13]pg/mL线性范围内,试剂盒的相关系数r应不小于0.990。
2.5重复性
测高、低浓度样本,批内变异系数(CV)应不大于15.0%。
2.6批间差
用三个批次产品测样本,批间变异系数(CV)应不大于20.0%。
2.7稳定性
2℃~8℃保存,有效期12个月。
取失效期的试剂盒检测其准确度、空白限、线性和重复性,应符合2.2~2.5的要求。
2.8 校准品溯源性
应根据GB/T 21415—2008《体外诊断医疗器械生物样品中量的测量校准品和控制物质赋值的计量学溯源性》及有关规定,提供所用企业产品校准品来源、赋值过程以及测量不确定度等内容,校准品溯源至企业工作校准品,工作校准品与已上市产品比对赋值。
大鼠甲状旁腺激素(PTH)酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用预期应用ELISA法定量测定大鼠血清、血浆或其它相关液体中甲状旁腺激素(PTH)含量。
实验原理用纯化的抗体包被微孔板,制成固相载体,往包被单抗的微孔中依次加入标本或标准品、生物素化的抗PTH抗体、HRP标记的亲和素,经过彻底洗涤后用底物TMB显色。
TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的PTH呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度。
试剂盒组成及试剂配制1.酶联板:一块(96孔)2.标准品(冻干品):2瓶,每瓶临用前以样品稀释液稀释至1ml,盖好后静置10分钟以上,然后反复颠倒/搓动以助溶解,其浓度为1,500pg/ml,做系列倍比稀释后,分别稀释1,500 pg/ml,750pg/ml,375pg/ml,187.5pg/ml,93.75pg/ml,46.88pg/ml,23.44pg/ml,样品稀释液直接作为标准浓度0pg/ml,临用前15分钟内配制。
如配制750pg/ml标准品:取0.5ml1,500pg/ml的上述标准品加入含有0.5ml样品稀释液的Eppendorf管中,混匀即可,其余浓度以此类推。
3.样品稀释液:1×20ml/瓶。
4.检测稀释液A:1×10ml/瓶。
5.检测稀释液B:1×10ml/瓶。
6.检测溶液A:1×120ul/瓶(1:100)临用前以检测稀释液A1:100稀释,稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总量配制(每孔100ul),实际配制时应多配制0.1-0.2ml。
如1ul检测溶液A加99ul检测稀释液A的比例配制,轻轻混匀,在使用前一小时内配制。
7.检测溶液B:1×120ul/瓶(1:100)临用前以检测稀释液B1:100稀释。
稀释方法同检测溶液A。
8.底物溶液:1×10ml/瓶。
血清三碘甲状腺原氨酸【试剂名称】通用名称:血清三碘甲状腺原氨酸(T3)测定试剂盒(化学发光法)1. 用途本试剂用于定量测定人血清或血浆内三碘甲状腺原氨酸(T3)的含量。
本方法适用标本的浓度范围为0-10 ng/ml (0-15.5 nmol/l )。
该测试必须在MAGLUMI ® 1000 分析仪上进行。
2. 概述与说明- 健康人中,甲状腺每天大约分泌5-10μg 的T3。
然而,循环的T3最主要由外周脱碘作用产生,从而,每天总T3的分泌水平高达20μg (5)。
在血清中,甲状腺激素与载体蛋白结合,只有它们的游离部分是生理活性的。
- 定量测定T3在可疑甲状腺疾病中的临床意义主要在于诊断及评估甲状腺机能亢进(2,3)。
尤其在单独的T3型甲亢中, 观察到T3浓度升高,TBG 及T4水平正常。
在甲状腺外科手术切除及用I-131治疗后,T3与T4浓度可能保持一个很高的水平甚至还会升高(甲亢的复发)。
- 在大约50%与甲亢有关的自发性腺瘤病人中发现T3水平的偶尔升高。
这种升高也可出现在早期甲亢、与潜伏性甲亢有关的内分泌性眼疾、甲亢的治疗(甲状腺拮抗剂)过程中、甲状腺肿或非甲状腺肿性碘缺乏及Hashimoto 氏甲状腺炎中(代谢状态可能是正常的)。
3. 测试原理本试剂盒利用免疫发光竞争法的原理检测T3;采用抗T3单克隆抗体标记ABEI ,T3纯抗原标记FITC 。
标本,定标液,(质控液)与ABEI 标记的单抗,FITC 标记的纯抗原,包被有羊抗FITC 抗体的纳米免疫磁性微珠置37℃ 孵育形成免疫复合物,然后外加磁场沉淀,去掉上清液,用洗液循环清洗沉淀复合物1次,直接进入样品测量室,仪器自动泵入发光底物1和2,自动监测3秒钟内发出的相对光强度(RLU )。
T3浓度与RLU 成一定的比例关系,仪器自动拟合计算T3浓度。
4. 试剂4.1试剂组成4.2试剂的准备 在揭开密封纸之前,先轻轻地水平摇晃试剂盒(为了防止泡沫形成!)。
一、实验目的1. 了解甲状腺分泌的生理功能和调节机制;2. 掌握甲状腺激素的测定方法;3. 探讨甲状腺激素对生理功能的影响。
二、实验原理甲状腺是人体重要的内分泌腺,其主要功能是分泌甲状腺激素,包括甲状腺素(T4)和三碘甲状腺原氨酸(T3)。
甲状腺激素在人体内具有重要的生理作用,如调节新陈代谢、促进生长发育、维持神经系统正常功能等。
本实验通过测定甲状腺激素的分泌量,探讨甲状腺激素的生理功能和调节机制。
三、实验材料1. 实验动物:雄性大白鼠;2. 试剂与仪器:甲状腺激素测定试剂盒、电子天平、离心机、酶标仪等;3. 试剂:血清、肝素钠、生理盐水、盐酸、碘化钠等。
四、实验方法1. 实验动物处理:将雄性大白鼠随机分为实验组和对照组,每组10只。
实验组给予甲状腺激素,对照组给予等量生理盐水。
实验期间,观察动物的一般状态,记录体重变化。
2. 甲状腺激素测定:(1)采集血清:实验结束后,将动物处死,立即采集血清;(2)加样:按照试剂盒说明书,将血清加入酶标板孔中;(3)加入试剂:按照试剂盒说明书,加入相应试剂;(4)孵育:将酶标板放入酶标仪,在适当波长下孵育;(5)测定吸光度:酶标仪测定各孔吸光度值;(6)计算甲状腺激素含量:根据标准曲线,计算血清中甲状腺激素含量。
五、实验结果1. 实验组动物体重增长明显快于对照组,说明甲状腺激素对动物的生长发育具有促进作用;2. 实验组血清甲状腺激素含量明显高于对照组,说明甲状腺激素在实验动物体内分泌增加。
六、实验讨论1. 甲状腺激素在人体内具有重要的生理作用,如调节新陈代谢、促进生长发育、维持神经系统正常功能等。
本实验结果表明,甲状腺激素对动物的生长发育具有促进作用;2. 甲状腺激素的分泌受到下丘脑-垂体-甲状腺轴的调节。
实验过程中,给予甲状腺激素的实验组动物血清甲状腺激素含量明显增加,说明甲状腺激素的分泌受到下丘脑-垂体-甲状腺轴的调控;3. 本实验中,甲状腺激素的测定采用酶联免疫吸附法,具有较高的灵敏度和准确性。
规格:96T/48T,可提供定量与定性检测。
试剂盒保存:2-8℃(频繁使用时);-20℃(较长时间不用时).特异性:本试剂盒可同时检测天然或重组的,且与其他相关蛋白无交叉反应.T3,犬三碘甲状腺原氨酸(T3)ELISA试剂盒技术原理1. 间接法测抗体间接法是检测抗体常用的方法。
其原理为利用酶标记的抗抗体(二抗)以检测与固相抗原结合的受检抗体,故称为间接法。
操作步骤如下:1)将特异性抗原与固相载体联结,形成固相抗原,洗涤除去未结合的抗原及杂质。
2)加稀释的样本,保温反应。
样本中的特异抗体与固相抗原结合,形成固相抗原抗体复合物。
经洗涤后,固相载体上只留下特异性抗体,样本中的其他成份在洗涤过程中被洗去。
3)加酶标抗抗体。
固相免疫复合物中的抗体与酶标抗抗体结合,从而间接地标记上酶。
洗涤后,固相载体上的酶量与样本中受检抗体的量正相关。
4)加底物显色。
T3,犬三碘甲状腺原氨酸(T3)ELISA试剂盒技术原理注意事项:◆标本宜在新鲜时检测。
如有细菌污染,菌体中可能含有内源性HRP,也会产生假阳性反应。
保存过久可发生聚合在ELISA 中可使本底加深。
◆冻结标本溶解后,蛋白质局部浓缩,分布不均,应充分混匀宜轻缓,避免气泡,可上下颠倒混合,不要在混匀器上强烈震荡。
◆浑浊或有沉淀的标本应先离心或过滤,澄清后再检测。
◆反复冻融会使蛋白效价降低,所以代测样本如需保存作多次检测,宜少量分装冰存。
ELISA实验标准曲线平直,一般有以下原因:标准曲线制备是否不当,洗孔不净,吸孔不充分,读数不准确或是吸量误差。
查找原因,即可找到相应解决方案。
T3,犬三碘甲状腺原氨酸(T3)ELISA试剂盒技术原理人KLK10,ELISAkit试剂盒人INH,ELISAkit试剂盒人ThGDosin α1,ELI SAkit试剂盒人BA,ELISAkit试剂盒人IFN-β/IFNB,ELISAkit试剂盒Podocin ELISA试剂盒,人nephrin,ELISAkit试剂盒人sCD38,ELISAkit试剂盒人CR2/sCD21,ELISAkit试剂盒人cmDNA,ELISAkit试剂盒人ACAST-DⅣ,ELISAkit试剂盒人NB-Ab,ELISAkit试剂盒人α1-MG,ELISAkit试剂盒人vaspin,ELISAkit试剂盒人PPAR-α,ELISAkit试剂盒人SLE,ELISAkit试剂盒人GM1,ELISAkit试剂盒人TI,ELISAkit试剂盒人ANGA,ELISAkit试剂盒人ANA,ELISAkit试剂盒人AGPA/PCA,ELISAkit试剂盒人AAA,ELISAkit试剂盒人anti-parotid duct Ab,ELISAkit试剂盒人AhCGAb,ELISAkit试剂盒人anti-chromosome Ab,ELISAkit试剂盒人ABAb,ELISAkit试剂盒人AGA,ELISAkit试剂盒人APSA,ELISAkit试剂盒人TA,ELISAkit试剂盒人ALA/LCA,ELISAkit试剂盒人RANA,ELISAkit试剂盒T3,犬三碘甲状腺原氨酸(T3)ELISA试剂盒技术原理(1). 抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。
总三碘甲状腺原氨酸(T3)测定试剂盒(磁微粒化学发光免疫分析法)适用范围:用于体外定量测定人血清中总三碘甲状腺原氨酸的含量。
1.1规格50测试/盒、100测试/盒、200测试/盒。
1.2主要组成成分表1 试剂盒装量及组成注:校准品及质控品浓度具有批特异性,具体浓度详见“信息单”。
2.1 外观2.1.1 试剂盒各组分应齐全、完整、液体无渗漏;2.1.2 磁分离试剂摇匀后为均匀悬浊液,无明显凝集;2.1.3 液体组分应澄清,无沉淀或絮状物;2.1.4 中文包装标签应清晰,无磨损。
2.2准确性试剂盒内校准品与相应浓度的国家标准品(标准物质编号:150550)同时进行分析测定,用四参数拟合,要求两条剂量-反应曲线不显著偏离平行(t检验);以国家标准品(标准物质编号:150550)为对照,试剂盒内校准品的实测值与标示值的效价比应在0.9~1.1之间。
2.3 最低检出限应不大于0.15ng/mL。
2.4线性在(0.15,8)ng/mL的测量范围内,用四参数拟合,剂量-反应曲线线性相关系数(r)不应低于0.99。
2.5精密度2.5.1 分析内精密度用质控品1、2作为样本各重复检测10次,其变异系数(CV%)应不大于8%。
2.5.2 分析间精密度在三次独立分析之间,质控品1、2测定结果的变异系数(CV%)应不大于10%。
2.5.3 批间精密度在三个批次的产品之间,质控品测定结果的变异系数(CV%)应不大于15%。
2.6质控品测值质控品的测定结果应在本试剂盒规定的范围内。
2.7校准品溯源性根据GB/T21415-2008及有关规定提供校准品的来源、赋值过程及测量不确定度等内容,溯源至欧盟推荐参考物质(IRMM-469)。
2.8特异性2.8.1 与总甲状腺素(T4)不低于浓度为500ng/mL的T4,在本试剂盒上测定的结果应不高于1.5ng/mL。
2.8.2 与反三碘甲状腺原氨酸(rT3)不低于浓度为50ng/mL的rT3,在本试剂盒上测定的结果应不高于0.5ng/mL。
大鼠三碘甲状腺原氨酸(T3)酶联免疫分析试剂盒使用方法
检测范围:96T
4 ng/ml -120 ng/ml
使用目的:
本试剂盒用于测定大鼠血清、血浆及相关液体样本中三碘甲状腺原氨酸(T3)含量。
实验原理
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠三碘甲状腺原氨酸(T3)水平。
用纯化的大鼠三碘甲状腺原氨酸(T3)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入三碘甲状腺原氨酸(T3),再与HRP标记的三碘甲状腺原氨酸(T3)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的三碘甲状腺原氨酸(T3)呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中大鼠三碘甲状腺原氨酸(T3)浓度。
试剂盒组成
1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。
若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融
2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
操作步骤
1.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀
2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、
待测样品孔。
在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。
加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4.配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用
5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此
重复5次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
7.温育:操作同3。
8.洗涤:操作同5。
9.显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色
15分钟.
10.终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
11.测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。
测定应在加终止
液后15分钟以内进行。
操作程序总结:
计算
以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。
注意事项
1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。
2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。
3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。
一次加样时间最好
控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。
4.请每次测定的同时做标准曲线,最好做复孔。
如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔第一孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请最后乘以总稀释倍数(×n×5)。
5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6.底物请避光保存。
7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9.本试剂不同批号组分不得混用。
10. 如与英文说明书有异,以英文说明书为准。
保存条件及有效期
1.试剂盒保存:;2-8℃。
2.有效期:6个月。