丙戊酸钠HPLC检测方法
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安捷伦1260
丙戊酸钠母液配制：精密量取丙戊酸钠10 mg，加5 ml 甲醇溶解制得2mg/ml的丙戊酸钠储备溶液。
内标溶液：精密称取环己烷羧酸10mg至10ml溶量瓶中，用0.5mol/L氨水溶液稀释至刻度即得。
(10mg 环己烷羧酸+ 10ml 0.2mol/L氨水，去5ml用0.2mol/L氨水稀释至25ml，至0.2mg/ml。
)
衍生化试剂：50mg 2溴苯乙酮+5ml乙腈溶解，得10mg/ml衍生化试剂。
血浆样品处理：取血浆1 ml，置具塞试管中，加1mg/ml入内标环己烷羧酸100μl，3mol/L硫酸0.5ml，混匀后，再加入正己烷6ml，涡旋混合5min，离心
5min(4000r/min)。
精密吸取上层有机相5ml，加2-溴苯乙酮100μl，三乙胺100μl ，置55-60℃水浴中衍生化反应15min，氮气吹干有机相。
用1ml甲醇溶解残余物，取20μl进样。
岛津：
丙戊酸钠标准溶液：准确称取丙戊酸钠对照品37.6mg，置于50 mL容量瓶中，用0.2 mol·L－1氨水稀释至刻度，摇匀，作为丙戊酸钠标准溶液（含丙戊酸钠0.752 mg·mL-1）。
内标溶液：准确称取环己烷羧酸50.0 mg，置于50 mL容量瓶中，用0.2 mol·L-1氨水溶解并稀释至刻度，再精密量取该溶液5 mL，置于25 mL容量瓶中，加0.2 mol·-1氨水稀释至刻度，摇匀，作为内标溶液（含环己烷羧酸0.2 mg·mL-1）。
衍生化试液：准确称取2-溴苯乙酮125.0 mg，置于25mL容量瓶中，用乙腈溶解并稀释至刻度，摇匀，作为衍生化试液（含2-溴苯乙酮5.0 mg·mL-1），放置于冰箱中保存。
血样的制备：取血浆200 μL，置空白采血管中，加入内标溶液30 μL 和丙戊酸钠标准溶液20 μL，再加入1 mol·L-1硫酸溶液200 μL，振摇混匀，然后加入正己烷4 mL振摇萃取3 min，静置5 min使之充分分层，分离出上清液2 mL于另一试管中，加入衍生化试液40 μL 和三乙胺20 μL，涡旋混匀，于61～65 ℃水浴衍生化适当时间，然后在空气/氮气流下蒸发至干，立即取出，用甲醇0.3 mL涡旋溶解，作为血清样品溶液。
Water
500mg· L-1丙戊酸储备液：精密称取丙戊酸对照品25mg 加水溶解并定容至50mL 即得;
内标液：精密称取环己烷羧酸12. 8mg ,加0. 5mol· L- 1氨水溶解并定容至100m L；衍生化试剂：精密称取α-溴苯乙酮100mg，用乙腈溶解并定容至10mL。
供试品配制后置4℃冰箱保存。
血清样品处理：取0. 25mL血清样品，分别加入内标溶液和1mol· L-1硫酸各0. 25mL 混匀，用4mL 正戊烷涡旋振荡萃取5min 后离心( 4000r·min- 1 ) 5min，吸取上清液并加入三乙胺和衍生化试剂各20μL，置50～55℃水浴衍生化反应10min后氮气流吹干，用100μL甲醇溶解后取15μL进样分析。
安捷伦1260
丙戊酸钠储备液：精密称取丙戊酸钠106.5 mg至50 mL 容量瓶中，加甲醇至刻度，制得2.134 mg /mL 的丙戊酸钠储备溶液。
利用制备的丙戊酸钠储备液加入甲醇配制得1.607 mg /mL、1.067mg /mL、0.803 mg /mL、0.534 mg /mL、0.267 mg /mL、0.133 mg /mL的丙戊酸钠各浓度标准品溶液。
内标物：称取环己烷羧酸50 mg 至100 mL容量瓶中，加0.2 mol /L 的氨水稀释至刻度，再精密吸取该溶液7.5mL 至25 mL 容量瓶中，加0.5 mol /L 的氨水甲醇稀释至刻度，得到150 μg /mL 的环己烷羧酸内标液。
衍生化试剂：精密称取2-溴苯乙酮1.0 g置于25 mL 棕色容量瓶中，加乙腈定容，得40 mg /mL 的2-溴苯乙酮乙腈溶液。
氨水与酸化试剂：0.2 mol /L 氨水配制：取浓氨水1.5 mL 至100 mL 的容量瓶中，加水至刻度。
0.5 mol /L 氨水甲醇配制：取浓氨水3.87 mL 至100mL 容量瓶中，加甲醇至刻度，即得。
1 mol /L 硫酸配制：精密称取浓硫酸9.81 g，置于100 mL 容量瓶中，加水稀释至刻度，即得。
以上各试剂制备后置于4℃冰箱中保存。
血样处理：血液样品经3800 r /min 离心5 min，取血清100 μl 于离心管中，加环己烷羧酸内标液50 μL、硫酸50 μL，混匀1 min，加正己烷500μL 振荡混匀2 min，然后以5000 r /min 离心5 min，取上清液有机相于干净的离心管中，下层液再加
500 μL 正己烷振荡混匀2 min，再次以5000 r /min离心5 min，合并两次上清有机相，加2-溴苯乙酮10μL、三乙胺20 μL，振荡混匀2 min，于55℃水浴15min 后通氮气并继续水浴直至挥干溶剂，用甲醇100μL 溶解残渣，振荡混匀2 min，再以10 000 r / min 离心5 min，取上清10 μL 进样。
