高效液相色谱法测定含量示例的方法再确证

2019 年第 6 卷第 89 期2019 Vol.6 No.89177临床医药文献电子杂志Electronic Journal of Clinical Medical Literature高效液相色谱法测定苦参子中苦参碱的含量殷 丹（通化市食品药品检验所抗生素室，吉林 通化 134100）【摘要】目的 为确保苦参子药材质量的稳定性、专属性及可控性，对苦参子中含有的有效成分苦参碱进行检测；方法 采用高效液相色谱法检测药材中苦参碱的含量，并进行方法学考察；结果 回归方程为Y=770.6655x-3436.2712，r=0.9999，苦参碱线性范围为26.0250～416.4000 ng ，平均回收率为94.63%，RSD=1.7%；结论:采用高效液相色谱法检测苦参子中苦参碱，该方法简便，准确，专属性强。

【关键词】高效液相色谱法；苦参子；苦参碱；方法学【中图分类号】R28 【文献标识码】A 【文章编号】ISSN.2095-8242.2019.89.177.021 方 法1.1 仪器与试药日本岛津LC-2010AHT 型高效液相色谱仪；苦参碱对照品（中国食品药品检定研究院）， 批号：110805-200508。

甲醇、乙腈、无水乙醇、磷酸为色谱纯，水为超纯水，其它试剂均为分析纯。

1.2 色谱条件色谱柱：迪马Platisil NH2（4.6×250 mm ，5 µm ）；以乙腈-无水乙醇-3%磷酸溶液（84：7：9）为流动相；检测波长为220 nm 。

1.3 对照试剂溶液的制备取苦参碱对照品适量，精密称定，加乙腈-无水乙醇（80:20）混合溶液制成每1 mL 含苦参碱10 µg 的溶液，即得。

1.4 供试品溶液的制备取本品粉末（过三号筛）0.3 g ，精密称定，置具塞锥形瓶中，加浓氨试液0.5 mL ，精密加入三氯甲烷20 mL ，密塞，称定重量，超声处理（功率250 W ，频率33 kHz ）30分钟，放冷，再称定重量，用三氯甲烷补足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液5 mL ，加在中性氧化铝柱（内径1 cm ，5 g ，100～200目）上，依次以三氯甲烷、三氯甲烷-甲醇（7：3）混合溶液各20 mL 洗脱，合并收集洗脱液，回收溶剂至干，残渣加无水乙醇适量使溶解，转移至10 mL 量瓶中，加无水乙醇至刻度，摇匀，即得[1]。

高效液相色谱法测定硫酸氢氯吡格雷的含量目的：建立硫酸氢氯吡格雷的含量测定方法。

方法：采用HPLC法，色谱柱Sino Chrom ODS-BP（4.6 mm×200 mm，5 μm），流动相：1%三乙胺（pH=4.0）-乙腈（25∶75），检测波长：225 nm，流速：1.0 ml/min。

结果：硫酸氢氯吡格雷进样量在0.48～0.72 μg范围内呈良好的线性关系(r=0.999 9)。

结论：本法简便、准确，重复性好，可用于该产品的质量控制。

[Abstract] Objective: To establish a method for determination the content of Clopidogrel hydrogen sulfate．Methods: Sino Chrom ODS-BP column (4.6 mm×200 mm，5 μm) was used，mobile phase was 1％triethylamine (pH=4.0)-acetontrile (25:75)，detection wavelength was 225 nm．Results: Clopidogrel hydrogen sulfate sample size located 0.48-0.72 μg，and favourable linear correlation (r=0．999 9) was showed．The flow rate was 1.0 ml/min. Conclusion: The method is convenient and accurate. Meanwhile, it also has good reproducibility, may be used to quality control of Clopidogrel hydrogen sulfate．[Key words] HPLC; Clopidogrel hydrogen sulfate; Content determination硫酸氢氯吡格雷（Clopidogrel）是一种血小板聚集抑制剂，临床上用于预防和治疗因血小板高聚集状态引起的心、脑及其他动脉的循环障碍疾病[1-3]。

精选全文完整版可编辑修改高效液相色谱法含量测定1检验方法高效液相色谱法2检验原理高效液相色谱法系采用高压输液泵，将规定的流动相泵入装有填充剂的色谱柱，对样品进行测定的色谱方法。

注入样品，由流动相带入柱内，各组分在柱内被分离，并依此进入检测器，由数据处理系统记录和处理色谱信号。

3检验试剂甲醇（色谱纯）、乙腈（色谱纯）、纯水（高纯水）、磷酸等。

4供试品溶液制备取要测试的供试品适量，参照《药典》及《制剂规范》，用规定的溶剂适宜的提取精制方法，配制成一定浓度的供试品溶液。

供试品溶液注入色谱柱前要经适宜的0.45nm的滤膜滤过。

5对照品溶液制备根据供试品所要测定的成分取相应的对照品，用适宜的溶剂配制成相应浓度的对照品溶液。

6流动相配制用高纯度的试剂配制流动相，水应为新鲜配制的高纯水。

配制好的流动相通过适宜的0.45nm 的滤膜滤过，用前脱气。

7操作7.1打开自动进样器、检测器、泵、柱温箱，进入工作站。

7.2自动进样器排气自动进样器排气用50%甲醇（用前脱气），点击自动进样器界面上的purge键，自动排气25分钟。

7.3泵排气分析界面中，设置方法参数，下载方法参数。

用流动相冲洗吸滤头，再把吸滤头浸入流动相中，逆时针旋转排气阀90-180度，点击purge键，排气3-4分钟，顺时针旋转排气阀90-180度，激活仪器。

7.4进样操作7.4.1.将对照品溶液和供试品溶液分别置于样品瓶中，盖上带有垫片的瓶盖，顺时针旋紧，7.4.2将样品瓶按顺序放置于样品瓶架上。

7.4.3设置方法参数，选择波长、柱温、流速、结束时间等，下载并保存方法文件，待色谱系统充分稳定，基线平直。

7.4.4设置批处理分析表。

分析界面主项目中，点击批处理分析，依次设置样品瓶号、样品瓶架号、样品名、方法文件、数据文件、进样体积，保存批处理分析表，点击批处理分析开始，开始数据采集。

7.4.5不同浓度的对照品溶液和同一浓度的供试品溶液应分别进样不少于5针。

高效液相色谱法测定大豆中游离氨基酸含量一、本文概述本文旨在探讨高效液相色谱法（HPLC）在大豆中游离氨基酸含量测定中的应用。

作为一种重要的植物蛋白来源，大豆中的氨基酸组成对于其营养价值及食品工业应用具有重要意义。

游离氨基酸作为大豆蛋白质水解的产物，其含量直接反映了大豆的蛋白质质量和营养价值。

因此，准确测定大豆中游离氨基酸的含量对于评估大豆品质及开发高附加值产品至关重要。

高效液相色谱法作为一种高效、准确的分离分析技术，在氨基酸分析领域具有广泛应用。

本文将详细介绍高效液相色谱法的基本原理、样品处理方法、色谱条件优化以及结果计算与分析等方面的内容，并通过实验验证该方法的可行性和准确性。

本文还将讨论高效液相色谱法在大豆游离氨基酸含量测定中的优势及局限性，以期为相关领域的研究和实践提供有益的参考。

二、实验材料与方法（1）大豆样品：选择新鲜、无病虫害、无杂质的大豆作为实验材料，经过清洗、烘干、破碎后备用。

（2）试剂：实验所需试剂包括高效液相色谱仪用流动相（如乙腈、甲醇等）、衍生化试剂（如OPA、FMOC等）、标准品氨基酸等，均为分析纯或更高纯度。

（3）仪器：高效液相色谱仪（配备紫外检测器或荧光检测器）、离心机、涡旋混合器、水浴锅、移液枪等。

（1）样品处理：称取适量大豆样品，加入适量的水或缓冲液，进行匀浆处理。

然后，将匀浆液进行离心，取上清液作为游离氨基酸提取液。

（2）衍生化处理：取一定体积的游离氨基酸提取液，加入适量的衍生化试剂，进行衍生化反应。

衍生化反应的目的是将氨基酸转化为易于检测的衍生物，提高检测灵敏度和准确性。

（3）高效液相色谱分析：将衍生化后的样品进行高效液相色谱分析。

选择合适的流动相和色谱柱，设置合适的检测波长或激发/发射波长，记录色谱图和峰面积。

（4）数据处理：根据标准品氨基酸的色谱图和峰面积，绘制标准曲线。

然后，根据样品的色谱图和峰面积，结合标准曲线，计算样品中游离氨基酸的含量。

本实验采用高效液相色谱法测定大豆中游离氨基酸的含量，通过样品处理、衍生化处理、高效液相色谱分析和数据处理等步骤，实现对大豆中游离氨基酸的快速、准确测定。

高效液相法测定尼莫地平片剂的含量目的通过HPLC方法测定尼莫地平片剂的含量。

方法在色谱条件：选择Diamonsil C18（200 mm×4.6 mm，5 μm）为色谱柱，流动相：甲醇∶水（68∶32），检测波长238 nm，进样量10 μl，1.0 ml/min流速，柱温为室温（25℃）条件下进行检测。

结果尼莫地平在11.07～55.35 μg/ml范围内线性关系良好，线性方程为：Y=6921.2X-4311.6（r=0.9994），平均回收率為100.97%，RSD=1.5%。

结论采用高效液相色谱方法，可有效评估尼莫地平片剂中尼莫地平的含量，本法简单、灵敏度高、结果准确。

标签：HPLC法；尼莫地平；含量尼莫地平（Nimodipine，NMD）为1，4双氢吡啶类钙通道拮抗剂，主要用于扩张脑血管及改善脑功能[1]，该药难溶于水，属脂溶性药物[2]。

尼莫地平片剂测定多以紫外分光光度法为主，但因该法存在有关物质方面干扰，专属性较差[3]，本文由此出发考察高效液相法在其含量测定方面的应用效果。

1 资料与方法1.1仪器与试药岛津LC-2010CHT 型高效液相色谱仪；超声波清洗器；甲醇由霍尼韦尔贸易（上海）有限公司提供，为色谱醇；尼莫地平对照品（中国药品生物制品检定所，批号：160112-160223）；尼莫地平片（牡丹江灵泰药业股份有限公司，国药准字H23022380，规格：20 mg，批号：160123、160321、160628）。

1.2方法1.2.1高效液相色谱法1.2.1.1色谱条件①波长：选择以流动相做空白对照，于200～400 nm波长下对尼莫地平对照品溶液进行全波长扫描，结果显示在238 nm处尼莫地平有最大吸收；以空气为对照，对流动相进行全波段扫描显示，其在238 nm内基线平行，无干扰，故确定检测波长238 nm。

②色谱柱：选择Agilent C18（150 mm×4.6 mm，5 μm），流动相：甲醇∶水（68∶32），检测波长238 nm，进样量10 μl，1.0 ml/min流速，柱温为室温（25℃）。

高效液相色谱法测定含量示例的方法再确证目的：确证用反相高效液相色谱法测定头孢氨苄含量的方法有效性和准确性。

方法：以Diamonsil CLC-ODS（150mm x 6mm，10 lm）为色谱柱，水-甲醇- 3.89% 醋酸钠溶液- 4% 醋酸溶液（700：300：15：3）为流动相，检测波长为254 nm，外标法定量。

结果：头孢氨苄浓度线性范围为0.02～0.20mg / ml，相关系数r= 0.9991，方法重复性试验RSD为1.42%。

结论：该方法可简单高效地完成，结果准确性好、稳定可靠，确证高效液相色谱依然为头孢氨苄制剂的质量控制中有效可靠的方法。

标签：头孢氨苄高效液相色谱法头孢氨芐（Cefalexin，又译先锋霉素Ⅳ、头孢力新等）是一种半合成的第一代口服头孢霉素类类抗生素药物，化学名（6R，7R）-3-甲基-7-[（R）-2-氨基-2-苯乙酰氨基]-8-氧代-5-硫杂-1-氮杂双环[4.2.0]辛-2-烯-2-甲酸，化学式C16H17N3O4S，在临床上广为使用。

其含量测定在旧版的中国药典（1995年版）采用碘量法○1。

但此法不仅操作步骤繁多，费工费时，干扰因素多；然后人们发明采用高效液相色谱法内标法测定的方法，但内标物保留时间过长，依然存在问题。

最后人们又发现采用高效液相色谱法，用外标法测定其含量，方法操作简单方便、数据准确可靠，灵敏度较高，重复性好，最终获得了较为满意的结果○2。

现在本文对这个方法进行确证，以确定该方法的有效性和准确性。

1.仪器与试药分析天平（precisa instrument ltd switzer land xs 225a precisa ），高效液相色谱柱（diamonsic C18 250 * 46mm），检测器（UVD 170v），泵（P680 HPLC pump），头孢氨苄胶囊（广州白云山制药总厂批号：2110102）2. 色谱条件用十八烷基硅烷键和硅胶为填充剂：水-甲醇- 3.89% 醋酸钠溶液- 4% 醋酸溶液（700：300：15：3）为流动相；检测波长为254nm；理论塔板数按头孢氨苄峰计算不低于1500。

高效液相色谱法测定三七伤药片中人参皂苷Rg1的含量摘要】目的：利用高效液相色谱法测定三七伤药片中人参皂苷Rg1的含量。

方法：分别制备对照品溶液、供试品溶液和阴性样品溶液用于研究分析。

其中对照品溶液为人参皂苷Rg1的甲醇溶液，供试品溶液为三七伤药片去糖衣后的甲醇溶液，阴性样品溶液为不含三七的阴性样品制备的溶液，运用高效液相色谱法测定三七伤药片中的人参皂苷Rg1含量，并对该方法的精确度和回收率进行测定。

结果：经测定，供试品溶液中的人参皂苷Rg1含量约为每片1.68毫克，回收率高达97.8%。

结论：使用高效液相色谱法测定三七伤药片中的人参皂苷Rg1含量具有很高的准确率，较《中华药典》有一定的先进性。

【关键词】高效液相色谱法；三七伤药片；人参皂苷Rg1 三七伤药片是专治跌打损伤的中成药，具有消肿化瘀、散瘀止痛的功效，其主要成分为中药材三七，辅以草乌、接骨木等，在现行的检验标准中，主要对其含有的柚皮苷含量进行了规定，而人参皂苷Rg1的含量的测定并没有说明，本次研究，拟用高效液相色谱法对三七伤药片中的人参皂苷Rg1含量进行测量，观察其测量效果，现做如下报道： 1 资料与方法 1.1一般资料本次实验中，需要用到的仪器、材料和药品如下：高校液相色谱仪一台，电子天平一台，超声波仪一台，人参皂苷Rg1纯乙腈、纯化水等。

在实验前，需要先制备实验所需的各种溶液，包括对照品溶液、供试品溶液和阴性样品溶液。

对照品溶液是纯人参皂苷Rg1的甲醇溶液，供试品溶液是去掉糖衣的三七伤药片研磨后的甲醇水溶液。

阴性样品溶液是去掉三七成分的三七伤药片研磨后的甲醇水溶液。

1.2试验方法 1.2.1专属性实验专属性的实验目的是为了验证三七伤药片中的其他中药成分是否对人参皂苷Rg1的含量测定具有干扰作用，具体方法是取对照品溶液、供试品溶液和阴性样品溶液各10微升，在一定的色谱条件下，借助高效液相色谱仪进行检定。

经过测定可知，高效液相色谱法测量三七伤药片中的人参皂苷Rg1含量不受其他成分的影响[1]。

高效液相法进行含量测定的实施计划
目标：建立并验证高效液相色谱法（HPLC）用于测定样品中特定成分含量的分析方法。

步骤：
1. 方法开发
选择合适的流动相、色谱柱和检测波长。

优化色谱分离条件，包括流速、梯度洗脱和柱温。

2. 方法验证
线性度：绘制已知浓度样品的峰面积与浓度的关系图，评估方法的线性范围。

精密度：重复分析相同样品，计算峰面积的相对标准偏差（RSD）。

准确度：分析已知浓度的样品，计算测定值与真实值的偏差。

选择性：评估方法是否能区分目标成分和样品中的其他成分。

稳定性：在不同的时间点分析同一批样品，评估方法的稳定性。

3. 样品制备
根据样品基质，选择合适的样品前处理方法，如萃取、过滤或衍生化。

优化样品制备条件，以最大程度地提取目标成分并减少基质干扰。

4. 仪器校准
使用已知浓度的标准溶液校准HPLC系统。

定期验证校准曲线，以确保方法的准确性。

5. 样品分析
根据验证后的方法，分析样品并计算目标成分的含量。

使用适当的定量方法，如峰面积法或外标法。

6. 数据分析
处理HPLC数据，包括峰积分、定量计算和统计分析。

根据验证结果，评估分析结果的可靠性和有效性。

7. 报告
生成分析报告，包括样品信息、分析条件、结果和任何相关的观察结果。

报告应符合相关法规和指南。

持续改进
定期审查和更新方法，以提高性能和适应新的发现。

接受持续的培训，以保持对HPLC技术的最新了解。

高效液相色谱法测定氟康唑的含量高效液相色谱法测定氟康唑的含量摘要：目的：测定氟康唑的含量；方法：采用HPLC法。

色谱柱为Kromasil C18（4.6mm×250mm，5μm）、流动相为pH7.0磷酸盐缓冲液-甲醇（54：45）、检测波长260nm、柱温为室温，结果氟康唑（r=0.9998）在100-300μg/ml范围内线性关系良好，平均回收率为100.15%；结论：所建立的测定方法操作简便、准确、重现性良好。

关键词：氟康唑 HPLC 含量测定氟康唑（Fluconazole）为新型的氟化三唑类广谱抗真菌药，对隐球菌、念珠菌和皮肤真菌具有良好的抗菌作用，其作用比酮康唑强10～20倍，是目前临床用于深、浅部真菌感染理想的药物。

本文探讨了用高效液相色谱法测定氟康唑的含量。

该法简便、准确，重现性好。

一、仪器与试剂1.日本岛津LC-10ATVP高效液相色谱仪HW-2000色谱工作站2.试剂：磷酸二氢钾（分析纯）、氢氧化钠（分析纯）、甲醇（色谱纯）、纯化水、氟康唑对照品（中国食品药品检定研究院，批号：100314-0101，含量100.0%）、氟康唑（民生药业集团绍光医药有限公司）二、方法与结果1.色谱条件色谱柱为迪马公司生产的Kromasil C18（4.6mm×250mm，5μm）；流动相为pH7.0磷酸盐缓冲液（取磷酸二氢钾6.8g，加水适量溶解，加0.1mol/L氢氧化钠溶液约291ml，调节pH至7.0，用水稀释至1000ml，混匀，即得）-甲醇（55：45）为流动相；检测波长260nm；流速为1.0ml/min；超声脱气20min；柱温为室温；进样量20μl。

2.对照品溶液的制备精密称取氟康唑对照品20.02mg，置100ml量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，摇匀。

3.线性关系考察精密称取氟康唑对照品适量，至50ml量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，再分别精密量取适量，用水配制成100、150、200、250、300μg/ml的标准溶液，分别进样20μl。

高效液相色谱法测定对乙酰氨基酚片的含量作者：吴卫涛来源：《中国医药导报》2009年第15期[摘要] 目的：建立对乙酰氨基酚片含量的高效液相色谱测定法。

方法：色谱柱为依利特C18柱（4.6 mm×250 mm，5 μm），流动相为磷酸盐缓冲液（pH4.5）-甲醇(80∶20)，流速为1.0 ml/min，检测波长为254 nm，柱温为30℃。

结果：对乙酰氨基酚在0.05～0.30 mg/ml浓度范围内呈良好线性关系（r=0.999 9），平均加样回收率为100.5%（n=5），RSD为1.2%。

结论：该方法准确、可靠，与标准法比较，结果较为满意，可用于对乙酰氨基酚片的含量测定。

[关键词] 高效液相色谱法；含量测定；对乙酰氨基酚片[中图分类号]R927.2 [文献标识码]B [文章编号]1673-7210（2009）05（c）-052-02Content determination of Paracetamol Tablets by HPLCWU Weitao(Anyang Institute for Food and Drug Control，Anyang 455000, China)[Abstract] Objective: To establish a HPLC method for determination of Paracetamol Tablets. Methods: Elite C18 column(4.6 mm×250 mm, 5 μm) was used with a mobile phase composed of phosphate buffering solution（pH4.5）-methanol(80∶20) at the flow rate of 1.0 ml/min, the detection wavelength was 254 nm and the temperature of the column was 30℃. Results: The calibration curve of paracetamol was linear in the range of 0.05-0.30 mg/ml，r=0.999 9, the average recovery rate was 100.5% with a RSD of 1.2%(n=5). Conclusion: This method is accurate, realiable and can be used for the determination of Paracetamol Tablets.[Key words] HPLC; Content determination; Paracetamol Tablets对乙酰氨基酚片是目前临床中常用的一种解热镇痛药，《中国药典》2005版采用紫外分光光度法测定其含量，该方法影响因素较多。

高效液相色谱法测定盐酸溴己新注射液的含量目的:建立高效液相色谱法测定盐酸溴己新注射液的含量。

方法:采用Kromasil C18色谱柱(4.6 mm×200 mm,5 μm),流动相为水-甲醇-三乙胺(含5 mmol庚烷磺酸钠,用磷酸调pH至 3.5)(30∶70∶0.3),检测波长249 nm,流速为 1.0 ml/min。

结果:盐酸溴己新浓度在4.0～80.0 μg/ml范围内与峰面积有良好的线性关系,高、中、低3种浓度的平均加样回收率为99.1%(RSD=0.33%,n=6)。

结论:高效液相色谱法方法简便,结果可靠,专属性强,可用于盐酸溴己新注射液的质量控制。

标签：高效液相色谱法;盐酸溴己新;含量测定盐酸溴己新注射液的现行质量标准用紫外分光光度法测定含量,专属性不强,易受辅料干扰[1-3]。

笔者改用高效液相色谱法测定含量,研究结果报道如下:1 仪器与试药SP 8810高效液相色谱仪,包括SP 100紫外检测器,N 2010色谱工作站;盐酸溴己新对照品(批号:100427-200301,中国药品生物制品检定所);盐酸溴己新注射液(泗水希尔康制药有限公司,批号:090107,090201,081208);甲醇,色谱纯;磷酸、三乙胺、庚烷磺酸钠,分析纯;水,重蒸馏水。

2 实验方法学考察2.1 色谱条件色谱柱:Kromasil C18(4.6 mm×200 mm, 5 μm);流动相:水-甲醇-三乙胺(含5 mmol庚烷磺酸钠,用磷酸调pH至3.5)(30∶70∶0.3);流速:1.0 ml/min;柱温:室温;检测波长:249 nm;进样体积为20 μl;理论塔板数以盐酸溴己新计不低于5 000。

2.2溶液制备[4-5]精密称取对照品20.00 mg,置100 ml容量瓶中,加流动相溶解并稀释至刻度,摇匀,作为贮备液;精密量取储备溶液5 ml,置50 ml容量瓶中,加流动相稀释至刻度,摇匀,作为对照品溶液;精密量取供试品溶液适量,用流动相稀释成每毫升含盐酸溴己新20 μg的溶液,作为供试品溶液。

[实验原理]本实验采用HPLC法测定饮料中咖啡因的含量。实验材料包括饮料 样品、色谱纯甲醇、超纯水、咖啡因标准品等。实验步骤如下：
1、准备饮料样品，将其中的咖 啡因提取出来。
2、使用甲醇和水混合液进行稀 释，制备标准系列。
3、用HPLC仪进行色谱分析，测 定咖啡因的含量。
4、通过对标准系列进行色谱分析，确定咖啡因的保留时间和峰高。 5、根据样品溶液的峰高和标准系列的峰高，计算饮料中咖啡因的含量。
高效液相色谱法测定中药复方制剂中有 效成分含量的研究
01 引言
03 实验原理 05 实验步骤
目录
02 实验方法 04 实验材料 06 数据处理方法
07 实验结果
09 结论
目录
08 实验分析 010 参考内容
引言
随着中医药学的不断发展，中药复方制剂在临床上的应用日益广泛。为了确保 中药复方制剂的质量和疗效，准确测定其中有效成分的含量至关重要。高效液 相色谱法（HPLC）具有高分辨率、高灵敏度、快速分析等特点，为中药复方制 剂中有效成分含量的测定提供了有效手段。
展望未来，高效液相色谱法在中药复方制剂研究中的应用仍有广阔的发展空间。 未来研究可以进一步优化实验条件，提高分析方法的系统性和灵敏度。可以结 合其他现代分析技术，如质谱联用、核磁共振等手段，对中药复方制剂中的有 效成分进行深入研究和探讨。这将有助于更好地理解中药复方制剂的药效物质 基础及其作用机制，为中药复方制剂的质量控制和临床应用提供有力支持。
[实验结果分析]通过对10种不同品牌和类型的饮料进行测定，实验结果表明， 其中7种饮料中检测到咖啡因，含量范围为50-200mg/L，另外3种饮料中未检 测到咖啡因。实验数据的表格和图形如下：
（请在此处插入表格和图形）

Βιβλιοθήκη 高效液相色谱测定饮料中的苯甲酸
一. 实验目的：
1. 学习高效液相色谱法的测定原理； 2.掌握高效液相色谱仪（HP1100）的定性、定量 分析方法。
二。实验原理： 高效液相色谱法是重要的色谱方法，是在经典液相色谱法 和气相色谱的基础上发展起来的，（经典液相色谱法使用粗粒 多孔固定相，装填在大口径、长玻璃管柱内，流动相仅靠重力 流经色谱柱，溶质在固定相的传质、扩散速度极其缓慢，柱入 口压力低，仅有低的柱效，分析时间长；气相色谱原理类似， 流动相为气体，只能分离小分子量、低沸点的有机化合物，配 合程序升温可分析高沸点的有机化合物。）弥补了经典液相色 谱法和气相色谱的缺点。它使用了多孔微粒固定相，装填在小 口径短的不锈钢柱内，流动相通过高压输液泵进入高压的色谱 柱，溶质在其中的传质、扩散速度大大加快，从而在短时间内 获得高的分离能力。可分析低分子量、低沸点的有机化合物， 更多适用于分析中、高分子量、高沸点及热稳定性差的有机化 合物。
4．进样阀从装载转向进样位，同时按进样按扭，工作站 开始记录并出图11。 5．苯甲酸的色谱峰出完后，按照4-5步骤连续操作四次， 获得从最低浓度到最高浓度的标准试液的五张色谱图，分 别为11，12，13，14，15（15为流动相进样，设浓度为0 mg/ml）。 6．按照4-5步骤取25微升的未知样品，进样，出谱图W1。
四．实验步骤：（ESTD法） 1． 标准储备液的配置：准确量取0.144克苯甲酸钠试剂 ， 用 纯 水 或 去 离 子 水 溶 解 ， 定 容 到 100 毫 升 ， 浓 度 为 1.44mg/ml. 分别取此标准液5 ml，2.5 ml，1 ml, 0.5 ml稀 释为10 ml，则浓度分别为0.72 mg/ml，0.36 mg/ml，0.144 mg/ml，0.072 mg/ml。 2． 打开计算机，开仪器，稳定后，打开桌面的ONLINE 工作站。 设定方法：设置泵的流速为1ml/min，柱温为室温（ 40度左右），停止时间为4min，流动相比例（甲醇：水 =60；40），当流动相通过色谱柱约5-10min，记录仪上基 线稳定后，开始进样。 3． 进样：进样阀放在装载的位置上，用注射器取25微升 浓度最低的标准样（比进样阀上的定量环多5-10微升以上 ），注入进样阀中。

高效液相色谱法测定设备淋洗液中氨苄西林残留含量摘要：目的测定设备淋洗液中氨苄西林残留量。

方法采用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以12%醋酸溶液-0.2mol/l磷酸二氢钾溶液-乙腈-水（0.5：50：50：900）为流动相a，以12%醋酸溶液-0.2mol/l磷酸二氢钾溶液-乙腈-水（0.5：50：400：550）为流动相b，流动相a-流动相b（85：15），检测波长254nm，流速1.0ml/min，柱温40℃，进样量20?l，结果氨苄西林在0.005106mg/ml～0.01191mg/ml 范围有良好的线性关系（r为0.9995），检测限为5.106×10-5 mg/ml，平均回收率为98.5%；rsd 为0.69%。

结论该方法简便，重现性好，专属性强，为检测设备淋洗液中氨苄西林残留含量提供了可靠的方法。

关键词：氨苄西林；设备淋洗液；残留含量；高效液相色谱法在药品生产的每道工序完成后，对制药设备进行清洗是防止药品污染和交叉污染的必要手段。

产品生产后，总会残留若干原辅料和微生物。

微生物在适当的温湿度下以残留物中的有机物为营养可大量繁殖，产生各种代谢物，从而大大增加残留物的复杂性和危害程度。

显然，如果这些残留的原辅料、微生物和其代谢产物进人下批生产过程，必然对下批产品产生不良影响。

因此，必须通过清洗将这些污染源从药品生产的循环中除去。

严格地讲，绝对意义上的、不含任何残留物的清洁状态是不存在的。

在制药工业中，清洁的概念就是指设备中各种残留物（包括微生物及其代谢产物）的总量低至不影响下批产品的规定的疗效、质量和安全性的状态。

通过有效的清洗，可将上批生产残留在生产设备中的物质减少到不会影响下批产品疗效、质量和安全性的程度。

清洁验证就是通过科学的方法采集足够的数据，以证明按规定方法清洁后的设备，能始终如一地达到预定的清洁标准。

如何确定残留物限度是个相当复杂的问题，但却是验证方案无法回避，必须解决的问题。

doi ：4. 3969/j. Rsc. 406 - 493 0 202 0 03. 04高效液相色谱法同时测定党参中3种指标性成分含量**基金项目：陕西省重点研发计划［2015SF-258］；陕西省中医药研究院科研课题［2013 - 07］ ;2018年中医药公共卫生服务补助资 金资助项目［财社〔203〕43号］。

第一作者：陈娟，女，博士研究生，助理研究员，研究方向为药物制剂的质量标准与活性成分，(电子信箱)chenjuan 』007jie@ 47. com 。

△通信作者：张红，女，博士研究生，研究员，研究方向为中药药效物质基础与质量控制，(电子信箱)zhabghoog9393@ 。

陈 娟,陈瑞明，孟 雪,杨智峰，王娣，鲁文静,蒙麦侠，张红人(陕西省中医药研究院，陕西西安7(0061)摘要：目的 建立同时测定党参中紫丁香苷、党参块苷和苍术内酯川含量的高效液相色谱法。

方法 色谱柱为Kromasil Ci3柱(250 mm X 40 mm, 5 pm ),流动相为 乙腈(A) - 0. 1%磷酸水溶液(B),梯度洗脱(0-20 min 时 4%A,22〜30 min 时 4% A 〜30%A, 30〜50 min 时30%A -YO/A ),流速为0. 8 mL/mic,柱温为32 C ，检测波长为220 cm,进样量为4 pL 。

结果 紫丁香苷、党参块苷和苍术内酯川在各自的质量浓度范围内线性关系良好(厂M 0.998 9, n=6),平均回收率分别为4098% ,40 87% ,9905% , RSD 分别为0. 70% ,0. 54%,O 20%(n=6)o 结论 该方法分离效果和重复性均良好，回收率高，可用于党参药材的质量控制。

关键词：党参；高效液相色谱法;紫丁香苷；党参块苷;苍术内酯川；含量测定中图分类号：R932;R284 1;R286・0 文献标志码：A 文章编号：1006 -4931(2021)05 -0069-04Simultaneaus Determination of Three Iodeacs Componeats in Codonopsic Pilosula by HPLCCHEN Juan, CHEN RuUmg , MENG Xa, YANG Zhtfeng, WANG Di, LU Wenjing. MENG Maixin, ZHANG Hong(Shaanxi Academy of Traainonal Chines p Memcine , XC aa, SSaaaxi , China 712061)Abstract : Objective Ta estab/sh a high - performance /quid chromamgraphy(HPLC) method far the simuOaneons determiqatioo of syringing, todetyoOn, atracmenoCUv 皿 in Co P opop s p pilosula. Methods The chromamgraphP column was Kromasil C o coCmc (250 mm X4. 2 mm , 3 pm), the moCilo phase was acemoiRile (A) - 0. 1 % phosphoric acid apueons soluXoo(B) with grapienl eCXon((1 - 20 min ,4%A ；20 -30 min 10%A - 30%A ；30 - 50 min,30% A - 70% A, , the iow rate was 0. 8 mL/min,thv column temperature was 30 C ,the demcXon wavelength was 220 cm , a np the injecUon volume was 4 pL. Respite The syringing , to Oem o On , atracmCnoOdo 皿 showedgood /near reCtmoships within their own range G M 0098 9, n=6), the averapo recoveries were 40 98% , 40 87% anp 99.65%with RSDo of 0. 90% , 0. 84% and 0 20% ( n = 6). Conclusion The method has a good separation eUect , repeatabUUy anp high recov ­ery ,which can be used far the quality control of Codonopsp pilosula.Key word ：: Codoaopsis pilosula ; HPLC ; syringin ; ChemoCn ; atracmCnoOdo 皿;content determinatioo党参为桔梗科植物党参CoPonopsppilosulo (Franch. 5Nannf.、素花党参 CoPonopsp pilosulo Nannf . var. modesta(Nannf. ) L. T. Sken 或川党参 CoPonopsp iangsUen Oliv .的干燥根，具有补中益气、健脾益肺功效4］。

高效液相色谱法测定多种物质含量高效液相色谱法是一种常用的分离和分析方法，其在医药、化工、生物和环境分析等领域都有广泛的应用。

本文将介绍高效液相色谱法测定多种物质含量的原理、方法和应用。

一、高效液相色谱法的原理和方法高效液相色谱法是一种基于样品在移动相中的溶解度和分配系数的分离方法。

其主要分离原理是根据不同物质在移动相中的溶解度和相对亲疏水性进行分离。

在实验中，需要用高效液相色谱仪进行检测，其主要包括进样器、流动相泵、色谱柱、检测器和数据处理系统等几个部分，每个部分都有着不同的作用。

在实验中，样品首先通过进样器装入色谱柱，流动相通过柱子将样品分离出来，随着柱子的分离，样品中不同成分逐渐分离，到达检测器后进行检测，检测器检测后将数据传输到电脑，最后通过软件进行数据处理。

二、高效液相色谱法的应用高效液相色谱法在生物、化工、环境等领域都有着广泛的应用。

特别是在制药领域，高效液相色谱法被广泛应用于药物研究、开发和质量控制等方面。

在制药领域中，高效液相色谱法的应用主要包括以下几个方面：1.药物分析高效液相色谱法能够分离、检测和定量药物和其代谢产物，在药物的分析、研究和质量控制等方面都有广泛的使用。

2.原料药检测原料药是制药的重要组成部分，高效液相色谱法能够准确地检测出原料药中的杂质，保证药品的质量和安全性。

3.无菌药物测定无菌药物对于疾病的治疗有着重要的作用，高效液相色谱法能够对无菌药物中的各种成分进行分离和定量，提高药物的质量和效力。

4.天然药物分析天然药物源源不断地被开发出来，这些药物中包含了许多有效成分和杂质，高效液相色谱法能够对这些药物进行分离和检测，准确地提取优质的成分，发现新的药物引物。

三、高效液相色谱法的优缺点高效液相色谱法作为一种主要的分离和分析方法，有着优异的性能，但在使用时也存在一些缺点。

其主要的优点包括：1.高效：高效液相色谱法能够快速地分离和检测各种物质成分，在时间和效率上有着显著的优势。

高效液相色谱法测定药物含量的方法学研究嘿，咱今儿就来唠唠高效液相色谱法测定药物含量的方法学研究这档子事儿！你说这高效液相色谱法啊，就像是一位超级侦探，能把药物里的各种成分给扒拉得清清楚楚。

它能精确地测定药物的含量，这可太重要啦！就好比你要去一个陌生的地方，得有张靠谱的地图一样。

要进行这个方法学研究呢，首先得把各种条件都给摆弄好。

柱子得选对，流动相也得搭配得当，不然那结果可就没准咯。

这就好像做饭，盐放多了咸，放少了没味，得恰到好处才行。

然后呢，样品的处理也不能马虎。

得把药物弄碎了、溶解了，让它乖乖地进入色谱仪里去接受检验。

这就跟给小朋友洗澡似的，得轻轻柔柔地，不能把人家给弄疼了。

再说说这检测的过程，那仪器就像个精密的机器人大脑，一点点地分析着药物的成分和含量。

咱可得瞪大眼睛看着，稍有不对就得赶紧调整。

这方法学研究可不只是做一次就行咯，得反复试验，就像打磨一块宝石，要不断地精细雕琢。

每次试验都得认真记录数据，这可都是宝贝啊，能让咱发现问题，找到更好的办法。

你想想看，要是没有高效液相色谱法，那咱怎么能知道药物里到底有多少有效成分呢？那不是两眼一抹黑嘛！它就像一盏明灯，照亮了咱研究药物的道路。

而且啊，这方法学研究还能不断改进和优化呢。

随着科技的发展，肯定会有更厉害的技术出现，咱就得跟着时代的步伐，让这高效液相色谱法变得越来越牛。

咱可不能小瞧了这测定药物含量的事儿，这关系到人们的健康呢！要是不准确，那后果可不堪设想。

所以啊，咱得好好研究，把这个高效液相色谱法玩得团团转，让它为咱服务，为大家的健康保驾护航！你说是不是这么个理儿？咱可不能在这上面含糊啊！得加油干，让高效液相色谱法在药物研究领域发挥更大的作用！。