磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶检测试剂盒(PEP微板法)

体外诊断试剂产品分类分类目录按医疗器械受理和审评的体外诊断试剂一、临床血液学和体液学检验试剂 1.1 血液学检验试剂(盒)1.1.1血液一般检验试剂(盒) 1.1.2溶血试验试剂(盒)1.1.3血栓与止血检验试剂(盒) 1.2 组织配型类试剂(盒)1.3尿液检验试剂(盒)、试纸1.4 粪便检验试剂(盒)、试纸 1.5其他体液及排泄物检验试剂(盒)二、临床化学检验试剂2.1无机离子检验试剂(盒)2.2蛋白质检验试剂(盒)2.3 糖类检验试剂(盒)、试纸 2.4 酶类检验试剂(盒)2.4.1 肝脏疾病诊断试剂(盒) 2.4.2 肾脏疾病诊断试剂(盒) 2.4.3 心肌疾病诊断试剂(盒) 2.4.4 体液和其他酶测定试剂(盒) 2.5 非蛋白含氮类化合物检测试剂(盒) 2.6 脂类检验试剂(盒)2.7血气与电解质分析试剂(盒) 2.8内分泌检验试剂(盒)2.8.1 下丘脑垂体激素测定试剂(盒) 2.8.2 甲状腺激素测定试剂(盒) 2.8.3 肾上腺激素测定试剂(盒) 2.8.4 性腺激素测定试剂(盒) 2.8.5 胰腺和肠胃激素测定试剂(盒)2.8.6 其他激素测定试剂(盒)2.9维生素和药物及代谢物类检验试剂(盒) 2.9.1维生素测定类试剂(盒)2.9.2药物和药物代谢物检测试剂(盒)三、临床免疫学检验试剂3.1 传染病免疫学诊断检验试剂(盒) 3.1.1 肝炎病毒血清学标志物检验试剂(盒) 3.1.2 其他病毒血清学标志物检验试剂(盒) 3.1.3 细菌血清学检验试剂(盒)3.1.4其他微生物血清学检验试剂(盒) 3.2肿瘤标志物类试剂(盒)3.3细胞免疫检验测定试剂(盒)四、微生物学检验试剂4.1 培养基4.2微生物学检验类试剂(盒)4.3微生物抗原、抗体及核酸检测类试剂(盒) 4.4药敏试剂4.5生化鉴定培养基4.6染色液五、组织细胞学检验试剂5.1 细胞、组织化学染色剂类试剂5.2 免疫组化与人体组织细胞类试剂(盒)六、变态反应、自身免疫诊断检验试剂(盒)七、遗传性疾病检验试剂八、分子生物学检验试剂8.1分子诊断试剂(盒)8.1.1 分子杂交诊断试剂(盒)8.1.2 PCR试剂(盒)8.2人类基因检测类试剂(盒)8.3 生物芯片类试剂(盒)8.3.1 基因芯片类检测试剂(盒)8.3.2 蛋白质芯片类检测试剂(盒) 8.3.3 其他生物芯片类检测试剂(盒)九、其它检验试剂(盒)按药品受理和审评的体外诊断试剂*1.ABO血型定型试剂(盒)*2.乙型肝炎表面抗原(HBsAg)试剂(盒) *3.丙型肝炎病毒(HCV)抗体试剂(盒) *4.人类免疫缺陷病毒HIV(1，2型)抗体试剂(盒)人类免疫缺陷病毒抗原/抗体诊断试剂(盒) *5.梅毒螺旋体抗体试剂(盒) *6.放免试剂(盒)注:以上带*号的五个品种，预期用途为血源筛查时按药品受理和审评，为临床诊断时，按第三类医疗器械进行管理。

湖北大学发酵工程与设备课程设计题目色氨酸发酵工艺专业年级 08生物工程学生姓名赵雄峰学号 ****************指导老师李亚东2011 年 6 月 4 日目录1前言------------------------------------------------32发酵机制--------------------------------------------63发酵工艺及特点--------------------------------------74菌种的制备及种子的扩大培养--------------------------95培养基的组成及制备----------------------------------12 6无菌空气制备系统-----------------------------------137部分工艺计算----------------------------------------15 8三废处理--------------------------------------------17 9参考文献---------------------------------------------18一. 前言L-色氨酸是种重要的氨基酸,广泛应用于医药、食品和饲料等行业。

近年来,各行业对L-色氨酸的需求量日益增加,而现有产量远不能满足国内外市场的需求。

因此,开发微生物酶法生产L-色氨酸的工艺路线具有广阔的应用前景。

目前我国市场上销售的[色氨酸主要依靠进口，我国国务院已于2004、 2007年将I 色氨酸生产列入"鼓励外商投资产业目录"之中。

直接发酵法生产[色氨酸的研究，对发展我国氨基酸发酵工业具有重大的意义。

本文对发酵液中色氨酸的快速测定、出发菌株的生理特征和产酸特性、I色氨酸高产菌株的选育及发酵条件的优化进行了重点研究。

1.1色氨酸的理化性质色氨酸属于中性芳香族氨基酸，结构中含有吲哚基，在生物体中，色氨酸以结图1-1色氨酸的结构式合态或游离态存在。

二氧化碳测定剂盒（酶法）标准操作程序1.摘要本试剂盒供医疗机构用于体外定量测定人血清或血浆中的二氧化碳的浓度。

2.适用范围程序适用于日立7600自动生化分析仪检测人血清或血浆中的总蛋白含量。

3.职责使用日立7600自动生化分析仪进行测定总蛋白浓度的工作人员要严格按照本SOP程序进行，室负责人监督管理；本SOP的改动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经生化室负责人、科主任签字批准生效。

4.检测方法上海科华生物工程股份有限公司生产的二氧化碳试剂盒采用的是酶法。

5.原理血清（浆）中的碳酸氢根在磷酸烯醇式丙酮酸羟化酶(PEPC)的催化作用下和磷酸烯醇式丙酮酸（PEP）反应，生成草酰乙酸和磷酸盐，草酰乙酸在苹果酸脱氢酶的作用下生成苹果酸，同时将NADH氧化为NAD+，在340nm波长处反应液吸光度的降低与样品中二氧化碳含量成正比。

+ +--+−−→−+++−−→−+NADHNADHPO HCOHMDH PEPC苹果酸草酰乙酸草酰乙酸磷酸烯醇式丙酮酸42326.仪器日立7600自动生化分析仪7.试剂7.1试剂来源：上海科华生物工程股份有限公司提供7.2试剂瓶内主要成分：R：GOOD’S缓冲液、磷酸烯醇式丙酮酸、NADH类似物、苹果酸脱氢酶、磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶、防腐剂校准品：碳酸氢钠（含量见瓶签）7.3试剂稳定性：未打开试剂在2-8℃避光保存，有效期为一年。

试剂开瓶后存放在生化分析仪试剂仓中可稳定4周。

校准后校准曲线可稳定3周，但如果更换试剂批号、检测条件发生改变、质控品检测结果超出范围则需要重新校准。

8.标准品和质量控制8.1校准程序：使用某某公司的校准品对自动分析仪进行校准。

按照公司标准品使用要求，并以9g/L氯化钠溶液或去离子水为空白，经校准测定，仪器自动对标准品通过合适的数学模型绘制校准曲线。

8.2质控品：某某公司提供的生化复合定值质控血清作为室内质控品。

每日在测定前做一次质控。

该质控品为干粉包装，在2-8℃冰箱可稳定到失效期，使用前用5ml去离子水复溶，待质控物充分溶解（大约30分钟）后使用。

名词解释1、等电点（PI）：在某一pH的溶液中，氨基酸或蛋白质解离成阳离子和阴离子的趋势或程度相等，成为兼性离子，呈电中性，此时溶液的pH称为该氨基酸或蛋白质的等电点。

2、模体(序)（motif）：在蛋白质分子中，有两个或三个具有二级结构的肽段在空间上相互接近，形成一个具有特殊功能的空间结构，称为motif3、结构域(domain)：在多肽链上相邻的模序结构紧密联系，形成二个或多个在空间上可以明显区别的局部区域，各自行使其功能。

4、DNA变性：在一定理化因素作用下，DNA双螺旋的空间构象破坏解体，但其一级结构仍完整的现象称变性。

5、DNA复性：变性DNA经过一定处理重新形成双螺旋DNA的过程称复性。

6、Tm值：融解温度，在DNA发生热变性时，紫外光吸收值达到最大值50%时的温度称为融解温度（Tm值）。

在Tm值时，DNA分子内50%的双螺旋结构被解开。

7、Km：米氏常数，单底物反应中酶与底物可逆地生成中间产物和中间产物转化为产物这三个反应的速度常数的综合，是酶的特征性常数之一，其值等于反应速度为最大速度一半时的底物浓度。

8、酶的竞争性抑制作用：有些抑制剂与酶的底物结构相似，可与酶的底物竞争酶的活性中心，从而阻断酶与底物结合形成中间产物。

由于抑制剂与酶的结合是可逆的，抑制程度取决于抑制剂与酶的相对亲和力和与底物浓度的相对比例，这种作用称为竞争性抑制。

9、同工酶(Isoenzyme)：具有相同催化作用，但酶分子结构，理化性质和免疫学性质不同的一类酶。

10、糖酵解（glycolysis）：在缺氧状况下，葡萄糖或糖原分解为乳酸的过程称为糖酵解。

11、乳酸循环（Cori cycle）：在肌肉中葡萄糖经酵解生成乳酸，乳酸经血循环运到肝脏，肝脏又将乳酸异生成葡萄糖，葡萄糖释放释入血液后又被肌肉摄取，这种代谢循环途径称为乳酸循环。

12、三羧酸循环（tricarboxylic acid cycle）：由活性二碳化合物（乙酰CoA）与草酰乙酸缩合成柠檬酸开始，以四次脱氢、二次脱羧再生成草酰乙酸完成循环反应过程，成为三羧酸循环，又称kerb 循环和柠檬酸循环。