一个新药物的发现,必须两个系统的同时运转
一个系统是化学系统,一个系统是生物学系统农药生物测定与田间药效试验
西南大学植保学院
丁伟教授
联系电话:68250218
一、农药室内生物测定
1．生物测定（bioassay）
是由biological和assay组合而成，通常是指具有生理活性的物质对某种生物产生效应的一项测定技术。但是，从更广的范围来理解生物测定，则可概括为：“对生物的任何刺激所产生的效应的测定,包括来自物理、化学、生物、生理及心理等方面的刺激对生物活体产生的反应。”总之，生物测定是研究作用物、靶标生物和反应强度三者关系的一项专门技术。
2．生物测定的一般模式
3．农药生物测定（pesticidebioassay）
指在一定条件下利用靶标生物测定其对某些化合物的反应的量度，进而鉴别某种化合物生物活性的基本技术与方法。
靶标生物：通常指有害生物，包括昆虫、螨类、病菌、杂草、鼠类等。包括这些生物的整体或离体的组织、细胞等。
待测化合物：可以是已经成为农药的化合物，包括杀虫（杀螨）剂、除草剂、杀菌剂、杀鼠剂、杀线虫剂乃至卫生杀虫剂等；也可以是待筛选的化合物（已知物和未知物）。
生物反应：指靶标生物对杀虫、杀菌、除草等作用的反应，可以延伸为凡是干扰破坏有机体正常生长、发育、行为、代谢等效应的反应，如植物生长调节、昆虫生长调节、信息传递物质等。
生物反应用死亡率、抑制率、反应率等指标来表示。
量度：指反应的强度或者大小的指标。要运用特定的实验设计，以生物统计为工具，借助于数学的方法，来给生物反应以量化表达。
生物活性：指药物或某一个化合物对生物体产生的效应。如果有，则这个药物或化合物有生物活性，如果不产生效应，则这个药物或化合物就没有生物活性。
4．农药生物测定的知识体系
（1）供试对象的准备（包括靶标生物的饲养技术和待测化合物的选择）；
也包括组织培养、细胞培养、药剂配制、剂量计算等内容
（2）生物测定的操作技术与方法（包括室内生测、小区实验和田间药效实验三个方面）；（3）影响农药生物测定的因素分析；（药剂、生物体、环境、操作方法）
（4）农药生物测定结果的评价与表达。（数理统计的方法得到一个恰当的结果来描述一个效果。
5．室内生物测定试验设计的基本原则
(1)要控制影响因素
上面我们已经大致分析了影响农药生物测定的因素，由于这些因素很多，在不同的因素条件下会产生不同的效果。
设效果为y=a+b1x1+b2x2+b3x3+……．bnxn。这样是一个复杂的偏回归关系。这不是我们生物测定的目的，我们的目的是为了寻求生测效果与药剂剂量之间的关系，即y=a+bx 其中，y是死亡率的几率值，而x则为剂量对数。这样很清楚明了。如果不控制其它因素，便无法得到这一回归式。
不过目前,已经有人尝试寻求多元的回归关系,这样可能更切合实际一些。如死亡率与温度、时间等的关系。
（2）必须设立对照
设立对照的目的是为了消除自然因素而导致的试虫死亡。对照组有几种情况：
空白对照：即完全不处理或仅以清水处理
溶剂对照：即用不同有效成分的溶剂或乳化剂等作对照
标准药剂对照：标准药剂是指在生产中对某种目标昆虫常用的有效药剂可用之同待测农药相比。
试验时，要根据测定的需要，选择采用的对照。但一般情况下，如果选择标准药剂对照，则还需要选择溶剂对照和空白对照补充。
(3)必须设立重复
一个原因是生物测定本身不是针对某一个昆虫，而是对昆虫的群体而言，是指某一个待测群体的综合反应，单个处理不足以反映实际情况。
另一个原因：从生物统计理论上讲，增加重复次数，减少每个重复的生物个体是减少试验误差的一个方法。
第三：有一定的重复便于作精确的统计分析。
一般重复3次，每个处理20—50头试虫，田间试验的重复次数以3—5次为宜。
(4)供试的目标生物要统一一致：
尽量选用农作物病原、害虫和杂草。应在同一条件下饲养，或采自田间同一环境条件下，在生理、发育上应尽量一致。
一般有三个条件：一是易于采集、生产上常见；二是易于饲养，便于获得同一群体；三是繁殖力比较强，可提供大量供试对象。
（5）运用生物统计分析试验结果
6．毒力的表达
(1)毒力的概念：毒力是指药剂本身对不同生物发生直接作用的性质和程度。一般是在相对严格条件下，室内用标准生物测定的药剂对供试生物反应的量度。
(2)药效：是在田间或接近田间的条件下所测定的药剂对生物的作用效果。不同剂型、不同寄主植物、不同有害生物、不同的施药方法以及各种田间环境因素都会影响到药效的大小。
(3)反应率：包括所有出现症状的反应情况（前面介绍的几种情况）
一般都是用死亡率表示；
一般死亡率。
死亡率%=死虫数/试虫数×100%
死亡率从广义上应理解为虫口减退率。死亡率可以是正的，也可以是负的，比如处理后的虫口可以是增加的。
(4)校正死亡率
为了消除自然死亡因素的影响，精确的研究和正规的实验结果报告要采用校正死亡率来表示。校正死亡率的计算可采用生存率，也可采用死亡率，分别如下：
校正死亡率=×100%；（1）
X=对照组生存率；Y=处理组生存率；X-Y=虫口因药剂处理而导致的死亡率。
校正死亡率={（处理组死亡率—对照组死亡率）/（1-对照组死亡率）}×100%（2）
对于公式2来说，其适用范围是对照的自然死亡率在5%-20%之间；
5%以下时，可将处理组死亡率减去自然死亡率即可校正；
20%以上时；则表示该目标昆虫种群不宜供试验用，试验结果不可靠。
校正死亡率表示结果很明了，但是，不适宜室内毒力测定结果的分析，主要是不能表示在药剂处理下，目标昆虫个体间的差异而引起生理效应的变异性；也不能表示药剂毒力相差的程度，所以单纯用校正死亡率来比较毒力是很不够的。
(5)致死中量LD50或致死中浓度LC50等
致死中量（medianlethaldose）
杀死供试昆虫群体内50%的个体所需要的剂量，单位是μg/g：微克（药剂重量）/克（昆虫体重），记作LD50
致死中浓度（medianlethalconcentration）
杀死供试昆虫群体内50%的个体所需要的浓度；单位常用ppm；mg/L,mg/kg(现在一般发表用这个)，记作LC50
致死中时（LT50）或击倒中时（KT50）：在某种剂量或浓度下，杀死或击倒供试昆虫群体50%个体所需要的时间，单位是分钟(min)、或小时(h)、天（d）等。
(6)求LD50和LC50的方法
国内外目前大多采用机率值分析法求致死中量，根据求得的LD-P线（log剂量与校正死亡率的机率值所画出直线的简称）回归式的方法，可分为作图法和最小二乘法，但现在一般采用计算器和计算机编程的方法直接求得。
在毒力测定中需要表达的结果：
(1)求各剂量的对数值;
(2)求各剂量的死亡率所对应的机率值
(3)按一定方法求出回归方程Y=a+bx
(4)求LD50，坡度b值，相关系数r
(5)对回归方程进行卡方检验
(6)求LD50的标准误和95%的置信限。
7．杀虫剂生物测定
根据杀虫剂进入虫体的部位及途径的不同,杀虫剂毒杀作用的方式可分为：胃毒、触杀、熏蒸、内吸、忌避、拒食、抑制生长发育、不育等方式。
内吸杀虫作用：凡是可以通过植物根茎叶以及种子等部位渗入植物内部组织，随着植物体液在植株内传导，不妨碍植物的生长发育，而对害虫具有很高毒效的化学物质，称为内吸杀虫剂。昆虫由于受内吸杀虫剂的毒杀作用而致死亡的过程，称之为内吸杀虫作用。
8．杀菌剂的生物测定
第一个测定系统直接毒力测定
测定系统仅包括病原菌和药剂，主要包括：对孢子萌发、菌丝生长的抑制，这种方法又叫杀菌剂的离体生物测定。
容易漏选一些化合物，因此，不能判断出一种杀菌药剂的实际应用价值。
第二个测定系统病原菌-药剂-植物
9．除草剂除草活性筛选的方法
（1）筛选的主要程序为：实验室初筛→盆栽实验→田间实验三个步骤。
（2）初筛的模子。以高粱法+萝卜子叶法+小球藻法（种子发芽+植株生长量+叶绿素合成量）三种办法连用可检测所有有除草活性的化合物。
标准浓度下的施药浓度为活性试验100ppm，3~4天后检查药效。盆栽实验中用药150g/亩，2~3周后检查药效。其指标有三种：株数防除率、鲜重减少率、株高抑制率。
生测试材包括单子叶植物-稗、小麦、高粱；
双子叶植物-油菜、黄瓜、亚麻、萝卜等。
二、田间药效试验
1．田间药效内容
（1）以药剂为主体的系统田间试验
田间药效筛选；田间药效评价；特定因子试验
（2）以防治对象为主体的试验
针对某种防治对象筛选最有效的农药品种，确定最佳剂量、最佳施药次数和最佳施药方法。田间药效试验：包括小区试验、大区试验和示范试验
田间药2、田间试验的基本要求
（1）试验地的选择
（2）试验小区设计（随机区组排列）
（3）注意影响因素
剂型、剂量、喷雾技术
防治对象
环境条件（要记录环境条件）效试
3．调查方法：
对角线法、大五点法、棋盘式法、平行线法、分行法、Z字形法等。
验
4．结果处理
虫：虫口减退率（校正）
病常以病情指数表达。
调查结果要统计分析
特别是要做方差分析
一般设4个重复，统计分析常采用邓肯氏多重比较检验法（DMRT法）
三、农药的使用技术要点
1．使用药物防治的前提
（1）只有在栽培管理措施无法有效控制病虫草害的时候才使用农药（包括生长调节剂）。（2）正确诊断，对症用药。为了最大的获益，最基本的是要清楚病害及其严重性，特别要明确病害的种类。
（3）使用经过登记、批准和推荐的农药来控制病虫草害，没有经过在保护作物上登记或者国家没有推荐使用的农药要禁止在该作物上使用。
（4）要严格遵守使用规则和指南，按照每一种农药的应用技术和使用说明进行操作。（5）对使用的农药要精确记录其有效成分、产品特性、施用量及施用日期。
（6）恰当运用农药的轮换和混配技术，以避免病虫对农药产生抗药性。
（7）明确每种药物的毒性特点，严格按照安全间隔期和推荐剂量、次数施药，时刻注意残留动态，必须将农药残留控制在规定的范围内。
2．正确掌握施药时期
害虫，应选择最易杀伤害虫，并能有效控制为害的阶段进行施药。对食叶害虫和刺吸式口器害虫一般应在低龄幼虫、若虫盛发期防治为好，如烟青虫的施药一定在卵孵化后到幼虫3龄之前施药；对钻蛀性害虫一般应在卵孵化盛期防治为好。
病害，对于病害来说，易感病的生育期都是防治适宜时期。但流行性病害的防治要注意在病害还没有大规模流行之前施药进行预防。病害控制一定要树立预防为主的思想，预防要结合
实际情况，并不是普防。
杂草，以种子繁殖的杂草，在幼芽或幼苗期对除草剂比较敏感。因此，这一时期就作为防除杂草的适期。
烟草，药剂对作物的安全性是确定施药适期的先决条件，一旦发生病虫害，使用药剂要在确保作物本身安全的前提下进行控制，不能造成药害。
根据病虫草种类和农药的性能选用适当的品种，做到对症下药，农药只有被正确使用时才能有助于控制病虫害。
病、虫、草害的种类很多，各地差异很大。在进行防治之前，要明确防治对象的特点，恰当用药。例如，烟草细菌性病害的防治，在北方一些烟区有效的药剂在南方不一定有效。
如黑胫病和青枯病都是烟草的根茎病害，如果没有分清是细菌性病害还是真菌性病害就来施药，结果肯定是不理想的。
4．浓度和用量要适当
严格按照推荐剂量。
因此要防止盲目加大药剂浓度和药量，防止定期普遍施药，避免配药时不称不量，随手倒药的不合理做法。如采用移栽灵预防黑胫病，每亩15ml就可以了，但一些农民觉得用药少了，效果就可能不好，于是每亩用了25ml，最后导致一些烟苗出现严重的药害。
5．充分利用防治阈值选择合适防治时期
防治阈值有时又叫经济阈值，是指防治成本与危害造成的损失相等的程度。
如果危害比防治成本高，就要进行防治，如果危害损失不及防治成本，就可以考虑不进行防治。
对病害来说，大多数情况下施药时期偏晚，往往在病害流行期后才被引起重视，此时开始施药大多数防病保产效果不理想。
6．均衡施药
药剂只有均匀周到的分布在植物或病虫表面，才能取得良好的防治效果，如果不均匀施药，一方面可能导致局部地方药量太多，容易造成药害；另一方面一些地方因为没有药剂而导致不能有效控制病虫草害。因此，施药时必须考虑病虫草害的生物学特性、为害规律和药剂的使用特性，确保病虫草全面接触药剂。
7．讲究防治方法和用药质量
在田间施药时，要细致周到，讲究质量。
根据病虫在作物上危害的部位，把农药用在要害处。不同的农药剂型，应采用不同的施药方法。一般说来乳剂、可湿性粉剂、水剂等以喷雾为主；颗粒剂以撒施或深层施药为主；粉剂以撒毒土为主；内吸性强的药剂，可采用喷雾、泼浇、撒毒土法等；触杀性药剂以喷雾为主。为害上部叶片的病虫，以喷雾为主；钻蛀性或为害作物基部的害虫，以撒毒土法或泼浇为主。凡夜出为害的害虫，以傍晚施药效果较好，如对小地老虎（土蚕）的防治，就不能在上午或者中午阳光很强的时候去施药。
8．合理轮换和混用农药
注意避免抗药性的产生。
一种病虫长期使用某一种农药防治，就会产生抗药性，如甲霜灵对烟草黑胫病。
如果轮换使用作用机制不同的农药品种，就会提高农药的防治效果。农药的合理混用不但可以提高防效，而且还可扩大防治对象，延缓病虫产生抗药性。
9．注意残留和安全间隔期
在使用农药时，要严格遵照安全使用规程，防止中毒事故，同时要注意农药残毒问题。防止农药残留的关键是要严格选用推荐品种，使用浓度、使用次数都在推荐使用的范围内。
安全间隔期是指农药安全使用标准所规定的农药在作物上最后一次使用距收获的天数。
农药生物测定复习题 名词解释 农药生物测定：是指运用特定的试验设计，利用生物的整体或离体的组织、细胞对农药（或某些化合物）的反应，并以生物统计为工具，分析供试对象在一定条件下的效应，来度量（判断或鉴别）某种农药的生物活性。 负温度系数的杀虫剂：在一定温度范围内，杀虫剂的毒效随温度的降低而升高，称为负温度系数的杀虫剂。如溴氰菊酯对伊蚊幼虫的毒力在10℃时比30℃时大7倍。 正温度系数的杀虫剂：在一定温度范围内，杀虫活性随温度升高而增强。如敌百虫。 标准目标昆虫：指被普遍采用的、具有一定代表性和经济意义以及抗药力稳定均匀的农药杀虫毒力和毒效指示试虫群体。 杀虫剂内吸毒力：药剂可通过植物根、茎、叶等部位吸收到植株内部，随着植物体液输导，当害虫取食植物或刺吸汁液时，药剂进入虫体并将之杀死。 熏蒸毒力：在适当气温下，利用有毒气体、液体或固体挥发产生的蒸气来毒杀害虫（或病菌）。熏蒸毒力测定：测定杀虫剂从昆虫气孔或气门进入呼吸系统而引起试虫中毒致死的熏杀毒力。化学保护：用药剂处理植物和植物环境，在病菌侵入寄主植物前发挥药效，保护植物不受病菌侵染的措施。 化学治疗：在病原菌侵入植物之后使用杀菌剂消灭病菌，使植物不再发病。将药剂内吸到植物内部起作用。 化学免疫：植物通过药剂的作用，使植物具有对病菌的抵抗能力，避免或减轻病菌的侵害。杀菌剂的离体活性测定：只包括病原菌和药剂而不包括寄主或寄主植物的培养皿内测定方法，通常根据病菌与药剂接触后的反应，如孢子不萌发、不长菌丝等来作为毒力评判的标准。 杀菌剂的活体活性测定：包括病原菌、药剂和寄主植物在内的活性测定，通常以寄主植物的发病情况（普遍程度、严重程度）来评判药剂的毒力。 致死中量(LD50)(medium lethal dosage)：指杀死供试昆虫群体内50%的个体所需要的药剂剂量。指一定条件下，可致供试生物半数死亡机会的药剂剂量，表示单位：mg/kg、μg/g或μg/头。 致死中浓度(LC50)(medium lathal concentration)：指杀死供试昆虫群体内50%的个体所需要的药剂浓度。 校正死亡率：采用Abbort(1975)校正死亡率公式，以去除自然死亡对结果的影响。校正死亡率（%）=（处理组死亡率—对照组死亡率）/（1—对照组死亡率）
田间试验批准证书号： 协议备案号： 试验样品封样编号： 农药田间药效试验报告 （［单击此处键入试验年度］） 农药类别：杀虫剂 试验名称： 委托单位： 承担单位： 试验地点： 总负责人：［签名] 技术负责人：［签名] 参加人员： 报告完成日期： 地址： 电话： 传真： 邮编： E-mail：
田间药效试验报告摘要 试验名称： 试验作物： 防治对象： 供试药剂： 施药方法及用水量（拌土量）： 试验结果： 适宜施药时期和用量： 使用方法： 安全性：
［单击此处键入试验名称］ 田间药效试验报告 1 试验目的 ［单击此处键入试验目的］ 2 试验条件 2.1 试验对象、作物和品种的选择 ［单击此处键入试验对象和拉丁名］ ［单击此处键入试验作物，品种名称］ 2.2 环境或设施栽培条件 ［单击此处键入小区耕作、环境条件或设施栽培条件］ 3 试验设计和安排 3.1 药剂 3.1.1 试验药剂 ［单击此处键入试验药剂通用名称、含量、剂型、生产厂家］ 3.1.2 对照药剂 ［单击此处键入对照药剂商品名、通用名称、含量、剂型、生产厂家］3.1.3 药剂用量与编号 3.2 小区安排 3.2.1 小区排列 ［单击此处键入小区排列方法（田间小区分布图或表）］ 3.2.2 小区面积和重复 小区面积或植株数：［单击此处键入小区面积或小区植株株数］ 重复次数：［单击此处键入重复次数］
3.3 施药方法 3.3.1 使用方法 ［单击此处键入详细使用方法，应与当地农业生产实践相适应］ 3.3.2 施药器械 ［单击此处键入施药器械类型、操作条件］ 3.3.3 施药时间和次数 ［单击此处键入施药次数、施药时期或作物生育期及虫害发生阶段］ 3.3.4 使用容量 ［单击此处键入实际公顷用药液量或用药倍数］ 3.3.5 防治其他病虫害的药剂资料 ［单击此处键入防治其它病虫害药剂施用准确数据］ 4 调查、记录和测量方法 4.1 气象及土壤资料 4.1.1 气象资料 ［单击此处键入施药当日及试验期间气象资料概要（详见气象资料表）］4.1.2 土壤资料 ［单击此处键入土壤资料］ 4.2 调查方法、时间和次数 4.2.1 调查时间和次数 ［单击此处键入调查时间和次数］ 4.2.2 调查方法 ［依据《准则》的调查方法，单击此处键入具体调查方法及分级标准］ 4.2.3 药效计算方法 ［依据《准则》，单击此处键入具体药效计算方法或公式］ 4.3 对作物的直接影响 ［单击此处键入是否有药害，如有记录药害类型和程度，或对作物有益影响］4.4产品的质量和产量 ［根据试验协议要求，键入调查方法及结果（每小区产量以kg/hm2表示）］4.5 对其他生物影响 4.5.1 对其他病虫害的影响 ［单击此处键入对其它病虫害有益或无益影响］ 4.5.2 对其他非靶标生物的影响 ［单击此处键入对非靶标生物的影响］ 5 结果与分析
一、蛋白质化学 蛋白质的特征性元素（N），主要元素：C、H、O、N、S，根据含氮量换算蛋白质含量：样品蛋白质含量=样品含氮量*6.25 （各种蛋白质的含氮量接近，平均值为16%）， 组成蛋白质的氨基酸的数量（20种），酸性氨基酸/带负电荷的R基氨基酸：天冬氨酸（D）、谷氨酸（E）； 碱性氨基酸/带正电荷的R基氨基酸：赖氨酸（K）、组氨酸（H）、精氨酸（R） 非极性脂肪族R基氨基酸：甘氨酸（G）、丙氨酸（A）、脯氨酸（P）、缬氨酸（V）、亮氨酸（L）、异亮氨酸（I）、甲硫氨酸（M）； 极性不带电荷R基氨基酸：丝氨酸（S）、苏氨酸（T）、半胱氨酸（C）、天冬酰胺（N）、谷氨酰胺（Q）； 芳香族R基氨基酸：苯丙氨酸（F）、络氨酸（Y）、色氨酸（W） 肽的基本特点 一级结构的定义：通常描述为蛋白质多肽链中氨基酸的连接顺序，简称氨基酸序列（由遗传信息决定）。维持稳定的化学键：肽键（主）、二硫键（可能存在）， 二级结构的种类：α螺旋、β折叠、β转角、无规卷曲、超二级结构， 四级结构的特点：肽键数≧2，肽链之间无共价键相连，可独立形成三级结构，是否具有生物活性取决于是否达到其最高级结构 蛋白质的一级结构与功能的关系：1、蛋白质的一级结构决定其构象 2、一级结构相似则其功能也相似3、改变蛋白质的一级结构可以直接影响其功能因基因突变造成蛋白质结构或合成量异常而导致的疾病称分子病，如镰状细胞贫血（溶血性贫血），疯牛病是二级结构改变 等电点（pI）的定义：在某一pH值条件下，蛋白质的净电荷为零，则该pH值为蛋白质的等电点（pI）。 蛋白质在不同pH条件下的带电情况（取决于该蛋白质所带酸碱基团的解离状态）：若溶液pH
名词解释 农药残留：由于农药的应用而残存于生物体、农产品和环境中的农药亲体及其具有毒理学意义的杂质、代谢转化产物和反应物等所有衍生物的总称。(P1) 农药残留毒性：因摄入或长时间重复暴露农药残留而对人、畜以及有益生物产生急性或慢性中毒。(P2) 可提取残留：可提取残留是农药残留分析的对象。(P1) 残留半衰期：农药初始残留量至消失降解一半所需的时间。(P2) 固相萃取（SPE）：指液体样品中的分析物通过吸着作用被保留在吸着剂上，然后用一定的溶剂洗脱的过程。(P27) 衍生化：一种利用化学变换把化合物转化成类似化学结构的物质。 最大残留限制(MRLs)：指由食品营养标准委员会推荐的，食品或动物饲料中允许的农药残留物的最大浓度（mg/kg）(P3) 可接受的日摄入量(ADI)：指在一生中，对消费者健康没有可感知危险的日摄入量。单位为：mg/kg/day。溶剂萃取：根据溶解性差异，选用对残留农药溶解度大的溶剂，将分析物从样品基质中提取出来的方法。（P23） 净化（纯化）：是指通过物理的或化学的方法除去提取物中对测定有干扰作用的杂质的过程。（P38） 实验室样品：从群体采集的送达残留分析实验室的样品材料 测定：把通过参照比较农药标准品的量（外标法和内标法）测算出试样中农药残留的量(P5) 结合残留：农药亲体或代谢产物与土壤中的腐殖质、植物的木质素、纤维素通过化学键或物理结合作用，牢固结合形成的残留物。(P2) 检测样品：实验室样品经过缩分减量或经过精制后的样品。 固相微萃取法：它实际是利用固相提取的方式实现对样品的分离和净化，但所用的固相材料及其分离机制不同。（P44） 单残留方法：是定量测定样品中一种农药的残留量的方法。 农药残留动态：农药残留动态是多方面因素综合作用的表现：农药本身物理化学性质，使用方法，施药时期，作物、土壤的类型和性质及环境条件.(P10) 多残留方法：是在一次分析中同时测定一种以上农药残留的方法。 浓缩：通过减少样品溶液中的溶剂或水分而使组分的浓度升高。 富集：利用液-固萃取的方法浓缩某种组分。 填空 1、气相色谱的特点：分析速度快、分离效率高、选择性高、适用范围广 2、固相萃取的操作程序：活化吸附剂、上样（吸附）、洗涤（去除杂质）、洗脱和收集
农药生物测定绪论 一、农药生物测定的含义 ?广义的生物测定为：来自物理、化学、生理或心理的刺激，对生物整体（living organism）和活体组织（tissue）产生效力大小的度量（如：机械刺激、电刺激、各种射线的照射等）。?即：生物测定是研究作用物、靶标生物和反应强度三者关系的一项专门技术。 ?狭义的生物测定为：以生物的整体或离体的组织、细胞，对某些化合物的反应，作为评价这些化合物生物活性的量度，运用特定的实验设计，以生物统计为工具，测定供试对象在一定条件下效应，即为生物测定。 农药生物测定：运用特定的试验设计，利用生物整体或离体的组织、细胞对农药（或某些化合物）的反应并以生物统计为工具，分析供试对象在一定条件下的效应，来度量某种农药的生物活性。 二、农药生物测定的简史 第一时期： 19世纪末~1920至1923年间 ?事件：法国学者埃利希（R. C. Ehrlich）研究出测定白喉抗毒素含量的标准方法–特点：都是用单个动物体作直接的效力测定，将待测的药剂与标准药剂相比较来估计其相对药效。 –缺点：由于生物个体从受药到中毒死亡需要一个过程，因而以生物中毒死亡为反应标准测出的致死剂量总比实际反应所需剂量大。 第二时期：20世纪30年代至20世纪70年代 ?事件： –1937年欧文（J.O.Irvin）首先提出了系统的生物测定方法报告； –1947年芬尼（D.J.Finney）出版了系统的生物测定统计方法； –1950年芬尼及古德温（L.G.Goodwin）出版《生物测定标准化》一书； –1957年布斯维纳（J.R.Busvine）出版《杀虫剂生物测定评述》； –1959年张宗炳在其《昆虫毒理学》一书中，以专章对杀虫剂生物测定及统计分析作了系统的论述； –1963年张泽薄等出版《杀虫剂及杀菌剂的生物测定》； ?特点：研究出以生物群体为反应基础的生物测定方法，提高了测定的准确度。 第三时期：20世纪70年代至今 ?特点：因具有各种特殊生理活性的化合物不断出现，生测方法也在发展。 ?事例： –1.研究利用昆虫神经电生理法检测化合物对昆虫的拒食活性取得进展。 –2.杀菌剂也由以传统的病原菌离体试验方法为主，转变为寄主植物上的活体试验为主。 –3.20世纪80年代以来介于活体与离体之间的植物组织培养生物测定方法受到了广泛的重视，如适用于细菌性病害筛选的块根法；适用于大麦白粉病筛选的芽鞘表皮法等。 三、生物测定的内容 ?可以概括为活性筛选的常规测定、田间药效试验、残留分析。也可以归纳为：–1.比较农药对昆虫、病菌或植物的药效或药害； –2.比较农药不同方法、加工质量、物理性状对供试生物的药效； –3.测定两种或两种以上农药混用的效力大小； –4.新研制化合物或农药对供试生物的药效、药害的筛选和评价； –5.研究供试生物内在因素和环境因素对药剂效力的关系； –6.鉴定生物体对农药的抗药性； –7.测定农药在生物体内外、土壤或环境中的残留量。 生物测定的发展趋势 ?植物细胞培养与生物测定相结合
1997生物化学 考试科目:生物化学 适用专业:生物化学、植物学、动物学、遗传学、细胞遗传学植物生理学、农药学、分子生物学 研究方向:以上专业各方向 说明:一至四题所有专业考生必作，五、六题非生物化专业考生作，七、八题生化专业考生作。 一、填空题（每空1分，共20分） 1、动物和人体对糖类的降解有两种方式，一种需水为，另一种不需水为。 2、肽分子中α-羟基的PK2a比相应游离的氨其酸α-羟基的PK-a值，肽中α-氨基的PK-a 比相应的游离氨基酸基的PK-a值。 3、在一般蛋白质中很存在，主要存在于胶原中的氨基酸是。 4、在葡萄糖的分解代中，β-磷酸甘油醛氧化产生的NADH，在酒精发酵中以为 受氢体，在酵解中以为受氢体，在有氧存在时以为受氢体。 5、在对小牛胸腺DNA进行的酸碱滴定时，在PH6~?之间PH变化很快，表明无可滴定的基因，在这个围应该是解离围，说明在DNA分子中它参与了的形成。 6、在双股DNA中，被转录的链叫不被转录的链叫。遗传信息贮存在链中。 7、焦磷硫胺素（TPP）是酶和酶的辅酶。 8、在中性PH下，影响DNATM的值的因素是。 9、肉质网脂肪酸延长过程与胞浆脂肪酸合成的差别之一是以代替为脂酰载体。 10、乙醛循环步酶促反应构成，其中3种酶与TCA循环中的酶相同，其它两种专一性反应是由和催化的。 二、单项选择题（从4个备选答案中选出1个正确答案，并将其编号填入括号，每小题1分，共10分） 1、维系蛋白质二级结构的化学键是（） 1）肽键；2）二硫键；3）氢键；4）疏水作用。 2、下列脂质中，在生物膜中含量最多的是（） 1）磷脂；2）胆固醇；3）糖脂；4）三酰甘油。
（生物科技行业）生物化学及普通生物学
1997生物化学 考试科目:生物化学 适用专业:生物化学、植物学、动物学、遗传学、细胞遗传学植物生理学、农药学、分子生物学 研究方向:以上专业各方向 说明:一至四题所有专业考生必作，五、六题非生物化专业考生作，七、八题生化专业考生作。 一、填空题（每空1分，共20分） 1、动物和人体对糖类的降解有两种方式，一种需水为，另一种不需水为。 2、肽分子中α-羟基的PK2a比相应游离的氨其酸α-羟基的PK-a值，肽中α-氨基的PK-a比相应的游离氨基酸基的PK-a值。 3、在一般蛋白质中很存在，主要存在于胶原中的氨基酸是。 4、在葡萄糖的分解代谢中，β-磷酸甘油醛氧化产生的NADH，在酒精发酵中以为 受氢体，在酵解中以为受氢体，在有氧存在时以为受氢体。 5、在对小牛胸腺DNA进行的酸碱滴定时，在PH6~?之间PH变化很快，表明无可滴定的基因，在这个范围内应该是解离范围，说明在DNA分子中它参与了的形成。 6、在双股DNA中，被转录的链叫不被转录的链叫。遗传信息贮存在链中。 7、焦磷硫胺素（TPP）是酶和酶的辅酶。 8、在中性PH下，影响DNATM的值的因素是。 9、肉质网脂肪酸延长过程与胞浆脂肪酸合成的差别之一是以代替为脂酰载体。 10、乙醛循环步酶促反应构成，其中3种酶与TCA循环中的酶相同，其它两种专一性反应是由和催化的。 二、单项选择题（从4个备选答案中选出1个正确答案，并将其编号填入括号内，每小题1分，共10分）
1）肽键；2）二硫键；3）氢键；4）疏水作用。 2、下列脂质中，在生物膜中含量最多的是（） 1）磷脂；2）胆固醇；3）糖脂；4）三酰甘油。 3、碘乙酸可抑制糖酵解中哪种酶的活性？（） 1）已糖微酶；2）3-磷酸甘油醛脱氢酶；3）烯醇化酶；4）丙酮酸激酶。 4、细胞内含量最多的RNA是（） 1）mRNA；2）tRNA;3)rRNA;4)HnRNA. 5、由两分子丙酮酸转变成1分子葡萄糖所消耗的高能键数是（） 1）3；2）4；3）64）8。 6、下列维生素中哪一种参与核苷酸的合成代谢？（） 1）B1；2）B23）泛酸；4）叶酸 7、下述基因除何者外，都属于多栲贝基因？ 1）tRNA基因；2）rRNA;3）胰岛基因；4）组蛋白基因。 8、下列催化多底物反应酶中，哪一种酶催化的反应属于有序机制？（） 1）苹果玻脱氢酶；2）谷丙转氨酶；3）肌酸激酶；4）醛缩酶 9、在抗生物素蛋白存在下，下述哪种酶活性将受影响？（） 1）苹果玻脱氢酶；2）谷丙转氨酶；3）肌酸激酶；4）丙酮酸羟化酶 10、下列各三肽混合物，用阳离子交换树脂，PH梯度洗脱，哪一个最先被洗下来？（）1）Met-Asp-Gln；2）Glu-Asp-Val；3）Glu-Val-Asp；4）Met-Glu-Asp 三、多项选择题（从备选答案中选出2至3个正确答案，将其编号填入括号的，漏填或错填，本小题0分，每小题1分，共10分）
第一章 三、简答题 1、写出a-氨基酸的结构通式，并根据其结构通式说明其结构上的共同特点。 组成蛋白质的氨基酸共有20种，除甘氨酸（无手性C原子）外都是L型氨基酸，就是都有一个不对称C原子，具有旋光性。羧基和氨基连在同一个C原子上，另外两个键分别连一个H和R基团。脯氨酸是亚氨基酸。 2、在PH6.0时，对Gly,Ala,Glu,Lys,Leu和His混合电泳，哪些氨基酸移向正极？哪些移向负极？哪些不移动或接近原点？ 3、什么是蛋白质的空间结构？蛋白质的空间结构与其生物功能有何关系？ 答：RNASE是一种水解RNA的酶，由124个氨基酸残基组成的单肽链蛋白质，其中含有4个链二硫键。整个分子折叠成球形的天然构象。高浓度脲会破坏肽链中的次级键。巯基乙醇可还原二硫键。因此用脲和巯基乙醇处理RNaSe；蛋白质三维构象破坏，肽链去折叠成松散肽链，活性丧失。淡一级结构并未变化。除去脲和巯基乙醇，并经氧化形成二硫键。RNaSe重新折叠，活性逐渐恢复。由此看来，在一级结构未改变的状况下，其生物功能仍旧发生变化，说明是蛋白质的高级结构决定了蛋白质的功能。 （1）一级结构的变异与分子病蛋白质中的氨基酸序列与生物功能密切相关，一级结构的变化往往导致蛋白质生物功能的变化。如镰刀型细胞贫血症，其病因是血红蛋白基因中的一个核苷酸的突变导致该蛋白分子中β-链第6位谷氨酸被缬氨酸取代。这个一级结构上的细微差别使患者的血红蛋白分子容易发生凝聚，导致红细胞变成镰刀状，容易破裂引起贫血，即血红蛋白的功能发生了变化。 （2）一级结构与生物进化同源蛋白质中有许多位置的氨基酸是相同的，而其它氨基酸差异较大。如比较不同生物的细胞色素C的一级结构，发现与人类亲缘关系接近，其氨基酸组成的差异越小，亲缘关系越远差异越大。 4、以细胞色素C为例简述蛋白质一级结构与生物进化的关系。 一级结构与生物进化同源蛋白质中有许多位置的氨基酸是相同的，而其它氨基酸差异较大。如比较不同生物的细胞色素C的一级结构，发现与人类亲缘关系接近，其氨基酸组成的差异越小，亲缘关系越远差异越大。 5、试述维系蛋白质空间结构的作用力。 6、血红蛋白有什么功能？它的四级结构是什么样的?肌红蛋白有四级结构吗？简述其三级
生物农药的分类 农化新世纪编辑视点 译者按:近年见到一些文章,内容涉及生物农药与化学农药的界定,观点不一. 窃以为国际上已取得的共识,应该作为我们的供鉴. 故将手头一本联合国亚太地区经济和社会委员会编印书籍有关内容节译出供参阅. 其内容略显陈旧,但基本概念 不会大变. 生物农药是天然存在的或者经过基因修饰的药剂, 它们与常规农药的区别在于独特的作用方式, 低使用剂 它们可以区分为两个主要类量和靶标种类的专一性. 别:生物化学农药,如激素和生长调节剂;微生物农药, 如细菌制剂,病毒制剂和真菌制剂. 1 生物化学农药 生物化学农药必须符合下面两个标准, 也必须符合这类化合物的性能要求. 其一, 该类杀虫剂品种必须显示出与对靶标生物直接毒杀不同的作用方式（如 生长调节,觅偶干扰）. 植物源杀虫剂和烟碱和除虫菊素能毒杀靶标生物, 所以不被 认为属于生物化学农药. 其二, 生物化学农药必须是天然存在的, 或者如果它是由人工合成,则在化学结 构上必须与天然存在的化合物完全相同.这里的"完全相同", 意指合成化合物成分的分子结构必须与天然存在的模式化合物分子结构 样. 有时出现不能确定的情况.例如, 假使该天然存在化合物的确切分子结构是未知的, 或者假使其对靶标生物与非靶标生物的作用方式是不同的, 某个国家的管理
机构应该根据各种情况规定 , 或者将这样的化合物归类 为常规农药 . 生物化学农药按照一般生物学机制分为四类 . 1,1 行为.包括外激素 (pheromones), 异源外激素 (allomones) 和种问外激素 (kairomones). 外激素是一种群中个体释放的化学物质 , 它能改变 同一种群中其他个体的行为 . 甚至在非常低的浓度下 , 这些化学信息素导致聚集 , 帮助觅偶, 形成报警信号或 者 引导至食物源 . 最常见的外激素是由雌虫腹腺分泌的 诱素诱使雄虫前来交配 ; 还有 聚集外激素 , 它由一个昆 虫种群中一种性别或两种性别昆虫所产生 , 它能促使两 种 性别昆虫聚集在一起进行取食或繁殖 . 性外激素在蛾 类和蝶类中常见 ,聚集外激素 则在甲虫类中常见 . 异源外激素是由一种昆虫释放的化学物质 , 它能改 变另种昆虫 的行为而对释放外激素的昆虫有利 . 多种植 物产生的次生物质能驱避昆虫和阻止它 们取食, 这些物 圃 质也被归类为异源外激素 . 人们长期以来利用香茅 (Citronellagrass) 油作为 一种昆虫驱避剂涂抹在皮肤 上. 种问外激素是由一种动物释放的化学物质 , 它能改 变另种动物个体的行为 , 对 释放外激素的动物无益 , 而 对受纳物种有利 . 例如, 动物寄生昆虫可以由它导向找 到寄主. 种问外激素与外激素一样 , 能用以把昆虫引至 诱阱以达到虫情测报或 捕获 它们的目的 . 1,2 激素 激素是生物化学物质 , 其在生物体的一个部位被合 成并输导到另一部位 , 在那 里它们具有控制 ,调节或改 变行为的效能 . 昆虫激素可区分为以下两个主要类别 . 其一,蜕皮激素(moltinghormones 或 ecdystetoids). 它们是由昆虫体内一组化学结构上彼此十分相近的水 溶性甾族化合物所组成 , 在植物体内也找到其中几种活 性类似物.到本文为止 ,无论用天然的蜕皮激素或者 用 植物中产生的蜕皮激素类似物 , 通过饲喂或局部施药 , 都不能有效地防治昆虫 . 另外, 因为它们的合成十分昂 贵,蜕皮激素的商品化产品仍然处于研究阶段 . 其二, 保幼激为生物化学农药 , 或者归类 化学信息素 这是植物或动物释放的化合物 , 它们能改变相同种 类或不同种类受纳生物体的
农药田间药效试验准则 杀菌剂防治柑橘炭疽病 Pesticide- Guidelines for the field efficacy trials- Fungicides against anthracnose of citurs 前言 田间药效试验是农药登记管理工作重要内容之一，是制定农药产品标签的重要技术依据，而标签是安全、合理使用农药的唯一指南。为了规范农药田间试验方法和内容，使试验更趋科学与统一，并与国际准则接轨，农业农村部农药检定所制定了我国田间药效试验准则国家标准，但是杀菌剂防治柑橘炭疽病却缺乏相关的国家标准，故此根据我省实际情况并经过大量田间药效试验验证而制定本标准。 柑橘炭疽病是我省柑橘的主要病害之一，生产上经常需用杀菌剂进行防治。为确定防治柑橘炭疽病药剂的最佳使用剂量，测试药剂对柑橘及非靶标有益生物的影响，为杀菌剂登记的药效评价和安全、合理使用技术提供依据，特制定本标准。 本标准由江西省农业厅提出。 本标准起草单位：江西省植保植检局（农药管理局）。 本标准的主要起草人：钟玲、王希、洪豹元、舒宽义、黄向阳、何益民、王旭明、曾敬富、张晓阳、孔学梅、徐小明。 本标准由江西省植保植检局（农药管理局）负责解释。 1 范围 本标准规定了杀菌剂防治柑橘炭疽病(Colletotrichum gloeosporioides)田间药效小区试验的方法和基本要求。 本标准适用于杀菌剂防治柑橘炭疽病田间药效小区试验及药效评价，其他田间药效试验参照本标准执行。 2 试验条件 2.1 试验对象、作物和品种的选择 试验对象为炭疽病。 试验作物为柑橘，选用敏感品种，记录品种名称及树龄。 2.2 环境条件
名词解释： 1.农药残留：是指由于农药的应用而残存于生物体、农产品和环境中的农药亲体及其具有毒理学意义的杂质、代谢转化产物和反应物等所有衍生物的总称。 2.初始残留量：在农药施用结束或暴露停止时发生的农药残留程度称为初始残留量。 3.残留半衰期：即农药初始残留量至降解一半所需的时间来表示。 4.农药残留毒性：因摄入或长时间重复暴露农药残留而对人、畜以及有益生物产生急性中毒或慢性毒害。 5.最大残留限量：最大残留限量是指农畜产品中农药残留的法定最大允许量，其单位是mg／kg。 6.提取：指通过溶解、吸着或挥发等方式将样品中的残留农药分离出来的操作步骤，也常称为萃取。 7.超临界流体的定义：物质处于其临界温度和临界压力以上状态时，向该状态气体加压，气体不会液化，只是密度增大，具有类似液态性质，同时，还保留气体性能，这种状态的流体称为超临界流体。 8.净化：是指通过物理的或化学的方法除去提取物中对测定有干扰作用的杂质的过程。 9.标准物质：具有一种或多种足够均匀和很好确定了的特性值，用以校准设备，评价测量方法或给材料赋值的材料或物 质。 10.有证标准物质：附有证书的标准物质。标准物质一般分为两级：一级标准物质、二级标准物质。 11.农药纯品：是指目前对农药提纯和鉴定技术最高水平所能达到的条件下，纯化出的能够真正反映农药化合物本身特性的高纯度物质。 12.吸附容量：指单位质量吸附剂所能吸附有机化合物的总质量。 13.穿透体积：指在固相提取时化合物随样品溶液的加入而不被自行洗脱下来所能流过的最大液样体积。 14.分配系数K：分配系数是在一定温度和压力下组分在固定相和流动相之间分配达到平衡时的浓度之比值。 15.分配比k：分配比又称容量因子，指在一定温度和压力下，组分在两相间分配达平衡时，固定相和流动相中的组分的质量比。 16.检测限：检测器能产生2倍于噪声的信号时，组分随载气进入检测器的量为检测器的检测限。 17.全扫描离子检测：对在离子源室产生的在记录槛值以上的离子检测的一种方式。适用于定性分析 18.选择离子检测：选择离子检测技术是对混合物进行定量分析的一种常用方法。选择能够表征该成分的一个或几个质谱峰进行检测。这种方法的灵敏度高于常规方法，相当于气相色谱的选择性检测器，多用于痕量成分的测定 19.酶联免疫吸附测定法的原理：在测定过程中，样品提取液中的农药与已知数量的酶联剂竞争有限数量的抗体吸附位点。 20.抗体：动物机体某些活性细胞在某些物质(抗原)刺激下产生，并能与这些物质特异性结合的一类活性物质。 21.生物传感器：指由一种生物敏感部件与转换器紧密配合，对特定种类物质或生物活性物质具有选择性和可逆响应的分析装置。 22.每日允许摄入量：是根据对一种化合物已有数据的评价，消费者一生之中每天摄入这种化合物不会对身体健廉造成可见风险的量。 23.再残留限量：是指一些残留持久性农药过去曾经在农业上使用，现已禁用，但已构成了对环境的污染。来自环境中累积的这些持久性农药残留物，再次造成对农产品的污染，在农产品和饲料中形成的残留。 24.活体生物测定法：利用指示动、植物来测定基质中农药残留量的方法。 25.风险性评价的构成：危害鉴定、剂量一反应评价、人群暴露评价、风险性特征 填空： 1.农药残留分析方法：单残留方法和多残留方法。 2.多残留方法：选择性多残留方法和多类多残留方法。 3.农药残留的分类（根据使用有机溶剂和常规提取方法能否从基质中提取出来）：可提取残留和不可提取残留。 4.不可提取残留：结合残留和轭合残留。 5.农药残留的来源：直接来源、间接来源 6.气相色谱法的特点：分析速度快、分离效率高、灵敏度高、选择性高、适用范围广。 7.残留农药常用的提取方法：溶剂提取法、固相提取法及强制挥发提取法 8.高效液相色谱法的特点：高效、高速、高灵敏度、高度自动化。
1.1994年O.T.Avery等通过什么实验证明DNA是遗传物质的？ 答：肺炎球菌转化实验证明DNA是遗传物质。 2.核酸分为哪些类？它们的分布和功能是什么？ 答：（1）核酸分为两大类，即：核糖核酸（RNA）、脱氧核糖核酸（DNA） （2）核酸的分布： ① DNA的分布：真核生物，98%在核染色体中，核外的线粒体中存在mDNA，叶绿体中存在ctDNA。 原核生物，存在于拟核和核外的质粒中。 病毒：DNA病毒 ②RNA的分布：分布于细胞质中。有mRNA、rRNA、tRNA （3）功能：①的DNA是主要遗传物质 ②RNA主要参与蛋白质的生物合成。 tRNA：转运氨基酸TrRNA：核糖体的骨架 mRNA：合成蛋白质的模板 ③RNA的功能多样性。 参与基因表达的调控；催化作用；遗传信息的加工；病毒RNA是遗传信息的载体。 3.说明Watson－Crick建立的DNA双螺旋结构的特点。 答：（1）DNA分子有两条反向平行的多核苷酸链相互盘绕形成双螺旋结构。两条链围绕同一个“中心轴”形成右手螺旋，双螺旋的直径为2nm。 （2）由脱氧核糖和磷酸间隔相连而形成的亲水骨架在双螺旋的外侧，而疏水的碱基对则在双螺旋的内部，碱基平面与中心轴垂直，螺旋旋转一周约为10个碱基对（bp），螺距为3.4nm，这样相邻碱基平面间隔为0.34nm，并有一个36o的夹角，糖环平面则于中心轴平行。 （3）两条DNA链借助彼此碱基之间形成的氢键而结合在一起。根据碱基结构的特征，只能形成嘌呤与嘧啶配对。既A与T配对，G与C配对，A－T间有2个氢键，G－C间有3个氢键。 （4）在DNA双螺旋结构中，两条链配对偏向一侧，形成一条大沟和一条小沟。这两条沟特别是大沟对蛋白质识别DNA双螺旋结构上的特定信息非常重要，只有沟内蛋白质才能识别到不同碱基顺序。
农药残留复习题 1.农药残留：是指由于农药的应用而残存于生物体、农产品和环境中的农药亲 体及其具有毒理学意义的杂质、代谢转化产物和反应物等所有衍生物的总称。 2.初始残留量：在农药施用结束或暴露停止时发生的农药残留程度称为初始残 留量。 3.残留半衰期：即农药初始残留量至降解一半所需的时间来表示。 4.农药残留毒性：因摄入或长时间重复暴露农药残留而对人、畜以及有益生物 产生急性中毒或慢性毒害。 5.最大残留限量：最大残留限量是指农畜产品中农药残留的法定最大允许量， 其单位是mg／kg。 6.提取：指通过溶解、吸着或挥发等方式将样品中的残留农药分离出来的操作 步骤，也常称为萃取。 7.超临界流体的定义：物质处于其临界温度和临界压力以上状态时，向该状态 气体加压，气体不会液化，只是密度增大，具有类似液态性质，同时，还保留 气体性能，这种状态的流体称为超临界流体。 8.净化：是指通过物理的或化学的方法除去提取物中对测定有干扰作用的杂质 的过程。 9.标准物质：具有一种或多种足够均匀和很好确定了的特性值，用以校准设备，评价测量方法或给材料赋值的材料或物质。 10.有证标准物质：附有证书的标准物质。标准物质一般分为两级：一级标准物质、二级标准物质。 11.农药纯品：是指目前对农药提纯和鉴定技术最高水平所能达到的条件下，纯化出的能够真正反映农药化合物本身特性的高纯度物质。 12.吸附容量：指单位质量吸附剂所能吸附有机化合物的总质量。 13.穿透体积：指在固相提取时化合物随样品溶液的加入而不被自行洗脱下来所能流过的最大液样体积。 14.分配系数K：分配系数是在一定温度和压力下组分在固定相和流动相之间分 配达到平衡时的浓度之比值。 15.分配比k：分配比又称容量因子，指在一定温度和压力下，组分在两相间分 配达平衡时，固定相和流动相中的组分的质量比。 16.检测限：检测器能产生2倍于噪声的信号时，组分随载气进入检测器的量为检测器的检测限。
《农药生物测定》课程教学大纲 课程编号：02037 英文名称：Bioassay of Pesticide 一、课程说明 1. 课程类别 专业课程 2. 适应专业及课程性质 制药工程专业选修 3. 课程目的 （1）掌握杀虫剂的室内毒力测定原理、触杀毒力、胃毒毒力、内吸毒力、熏蒸毒力、拒食活性等生物活性测定的方法 （2）掌握杀菌剂室内孢子萌发法，含毒介质培养法及盆栽试验等的测定方法 （3）掌握除草剂生物测定原理及种子发育、植株生长量、生理生化指标的测定方法 （4）掌握各类农药生物测定结果的评判和统计分析方法 （5）掌握大田药效试验的设计原理、统计分析方法和基本技能 4. 学分与学时 学分为2.学时为40 5. 建议先修课程 《农药学导论》、《农业昆虫学》、《农业病理学》、《杂草学》、《田间试验和统计方法》、《植物生物学》等专业及专业基础课以及《普通化学》、《有机化学》、《仪器分析》等学科基础课程。 6. 推荐教材或参考书目 推荐教材： （1）农药生物测定.江志利主编.西北农林科技大学出版社(校内教材).2005年 （2）农药生物测定技术.陈年春主编.北京农业大学出版社.1991年 参考书目： （1）农药试验技术与评价方法.黄国洋主编.中国农业出版社.2000年 （2）植物化学保护研究方法.慕立义主编.中国农业出版社.1994年 （3）西北地区农作物病虫草害药剂防治技术指南.张兴主编.陕西科技出版社.1992年 （4）农药使用技术原理.屠予钦.上海科学技术出版社.1986年 （5）植物化学保护实验技术导论.吴文君.陕西科学技术出版社.1988年 （6）杀虫药剂的毒力测定.张宗炳.科学技术出版社.1988年 （7）农药药效试验的设计与分析.宋哲和.科学技术出版社.1975年 7. 教学方法与手段 （1）本课程采用课堂教学与实验教学相结合的方法，结合课堂讨论的形式开展教学。 （2）“农药生物测定”是一门实践性很强的应用科学。随科学技术的飞速发展，有关的新理从论、新成就、新技术层出不穷，因此，必须将最新的研究成果和最新动态讲授给学生。 （3）引导学生广泛收集和阅读有关文献资料，提倡自学，对于活跃学术思想、开阔思路、掌握新理论、新技术有重要的作用。 （4）加强实验教学环节和基本技能培养，通过实验课的积极参与，将课堂理论知识与实际操作相结合，熟练掌握各种农药生物测定技术的基本方法和技能。 8. 考核及成绩评定
农药学（090403） 一、学科简介 农药学是植物保护学科下的二级学科，是一门化学与生物学、环境科学、农学等相结合的交叉学科。我校农药学学科是在老一辈科技工作者开创的研究实体——农药学研究所的基础上逐渐发展起来的农学学科，多年来，针对农业生产上存在的重大问题，积极开展农药毒理与使用技术、生物农药研究与应用、农药分析与新农药分子设计等相关研究工作，为我国植物保护工作做出了重要贡献。 我校农药学学科于1998年获硕士学位授权点，2006年获博士学位授权点，为湖南农业大学“十五” 、“十一五”重点建设学科，并在在“十一五”校级重点学科验收中荣获优秀。本学科现有教师15人，其中教授5人、兼职教授2人、副教授3人和讲师5人。博士生导师6人，其中“教育部新世纪优秀人才支持计划”1人，湖南农业大学“神农学者”特聘教授3人。 主要承担国家自然科学基金委、科技部、农业部、湖南省科技攻关项目、湖南省自然科学基金委以及企业委托项目，开展农药的应用、开发、创制以及相关的教学和科研工作。“十二五”期间，新增国家级项目共计18项，其中国家自然科学基金6项，新增省部级项目22项，新增教育厅等其它项目61项，到位科研经费2000万元；获中国植物保护学会科学技术一等奖2项、国家科技进步二等奖1项、湖南省科技进步奖8多项、出版专著4部，在Pesticide Biochemistry and Physiology、Journal of Integrative Agriculture、Journal of The Chinese Chemcal Society、Analytical Methods、Scientific reports、Chemical biology & drug design、Chemistry central journal、International journal of molecular sciences、Journal of pest science等杂志上发表论文180多篇，其中SCI收录论文21篇；申请发明专利26项，其中授权专利23项。开发了5个高效低毒的农药新产品，已被企业产业化，累计推广8000多万亩。 二、培养目标 1.掌握马克思主义基本原理、中国特色社会主义理论、科学发展观；热爱祖国，拥护党的领导，遵纪守法，品德优良，具有正确的世界观、人生观和价值观，培育和践行社会主义核心价值观，具有严谨的治学态度，恪守学术道德行为规范，积极为社会主义现代化建设服务。 2.在业务上，要求全面了解农药学学科的发展方向、国际学术研究前沿和动
农药登记药效资料要求 （室内生物活性及田间药效的试验要求） 农药是植物保护的重要手段，从整个农业病、虫、草、鼠害等的防治来说，应当发挥各种防治方法的积极作用，提倡预防为主综合防治的植保方针，但今后或更长的时间里化学防治仍是起主导作用，据有关专家的估计，目前在防治有害生物的过程中，农药所起的作用的达70%—80%，而其它方法所起的作用占20%—30%，如不使用农药，就很难达到高产、稳产的要求。所以要不断研制新农药、新剂型，探索科学使用农药的新方法，新途径，克服农药使用中的缺点，以最大限度发挥农药的作用。一种农药是否可以用于生产，防治病、虫、草、鼠害，必须在一定的环境条件下，经过室内生物活性测定及田间小区试验，得到科学的试验数据才能确定。这部分资料必须由经农业部农药检定所认证考核合格的单位和人员来完成。试验方法及内容必须按照已经颁布国家有关标准进行。如：GB/T17980.1—17980.50-2000《农药田间药效试验准则（一）》。暂时没有标准的要按照有关规定或常规方法进行。 一、室内生物活性测定资料要求 在申请临时登记时必须要提交室内生物活性测定资料，这部分资料包括药剂 对靶标生物的作用机理及致死中量LD 50（致死中浓度LC 50 ）或抑制中量ED 50 （抑 制中浓度EC 50 ）。这个数值是经过常规的生物测定试验后对数据进行生物统计得到的（生物统计可使用具有统计功能的计算器完成）。 LD 50（LC 50 ）：药剂使靶标生物死亡一半所使用的计量（或浓度）。 ED 50（EC 50 ）：药剂使靶标生物抑制一半所使用的计量（或浓度）。 室内生物测定时杀虫剂一般可采用点滴法、浸渍法和喷雾法等；杀菌剂可采用孢子萌发试验法，生长速率测定法和扩散法等；除草剂可采用小杯法和盆栽法等。 二、田间药效的试验要求 田间小区试验是在自然条件下，通过植物种类、有害生物、有益生物等多种因素综合作用研究农药在应用上的各种效应，鉴别农药防治病、虫、草、鼠害的效果，对作物的安全性，对有益生物的影响及对环境的影响，是综合评价农药的使用与推广价值所必须的步骤，是新农药室内试验过度到大田实际应用的中间纽带。为了正确评价一种农药，使药效资料符合农药登记的要求，试验结果有一定的可比性，并要与国际上的试验方法取得一致，以便交流,田间药效试验应按着统一的试验程序，严格的科学性和准确性，内容力求全面。试验单位和地点应由农业部农药检定所统一安排。 1）每一个新研制的农药、新剂型应在我国不同气候条件，具有代表性的耕作区完成两年以上的田间小区药效试验。 2）试验地选择：试验地是田间小区药效试验的最基本条件，选择当地有代表性的试验地，要求地势平坦，土壤类型、肥力基本一致，作物种植和管理水平一致，排灌方便的田块，并应记录灌溉的方法，时间及水量。不要将试验地选在树林、房屋、河流、池塘及大路边的田块。否则会影响试验的代表性。 3）试验作物和防治对象的选择：一般来说，新农药、新剂型在进入田间小区试验之前，基本掌握了它的试验作物和防治对象，为了获得理想结果，应选择敏感品系作物进行试验，创造和提供有利于防治对象发生的条件。也
第一章绪论 一、生物化学的概念 生物化学是从分子水平研究生物体中各种化学变化规律的科学。因此生物化学又称为生命的化学（简称：生化），是研究生命分子基础的学科。生物化学是一门医学基础理论课。 二、生物化学的主要内容 1．研究生物体的物质组织、结构、特性及功能。蛋白质、核酸2．研究物质代谢、能量代谢、代谢调节。研究糖、脂、蛋白质、核酸等物质代谢、代谢调节等规律，是本课程的主要内容。 3．遗传信息的贮存、传递和表达，研究遗传信息的贮存、传递及表达、基因工程等，是当代生命科学发展的主流，是现代生化研究的重点。 三、生物化学的发展史 四、生物化学与健康的关系 生化是医学的基础，并在医、药、卫生各学科中都有广泛的应用。 本课程不仅是基础医学如生理学、药理学、微生物学、免疫学及组织学等的必要基础课，而且也是医学检验、护理等各医学专业的必修课程。 五、学好生物化学的几点建议 1．加强复习有关的基础学科课程，前、后期课程有机结合，融会贯通、熟练应用。 2．仔细阅读、理解本课程的“绪论”，了解本课程重要性，激发起学习生物化学的兴趣和求知欲望。 3．每次学习时，首先必须了解教学大纲的具体要求，预读教材，带着问题进入学习。 4．学习后及时做好复习，整理好笔记。 5．学生应充分利用所提供的相关网站，从因特网上查找学习资料，提高课外学习和主动学习的能力。 6．实验实训课是完成本课程的重要环节。亲自动手，认真、仔细完成每步操作过程，观察各步反应的现象，详细、科学、实事求是地记录并分析实验结果，独立完成实验报告。 第一章蛋白质的化学 一、蛋白质的分子组成 （一）蛋白质的元素组成 蛋白质分子主要元素组成：C、H、O、N、S。 特征元素：N元素（含量比较恒定约为16%） 故所测样品中若含1克N，即可折算成6.25克蛋白质。（实例应用） （二）组成蛋白质的基本单位——氨基酸（AA） （一）编码氨基酸的概念和种类：蛋白质合成时受遗传密码控制的氨基酸，共有20种（二）氨基酸的结构通式：L-α-氨基酸（甘氨酸除外） （三）氨基酸根据R基团所含的基团，可分为酸性氨基酸（羧基）、碱性氨基酸（氨基及其衍生基团）和极性的中性氨基酸（羟基、巯基和酚羟基）。 二、蛋白质的结构与功能 （一）蛋白质的基本结构 1．肽键和肽 （1）肽键：一个氨基酸的α-羧基与另一氨基酸的α-氨基脱水缩合而成的共价键称肽键，肽键是蛋白质分子中氨基酸之间相互连接的主键。 （2）肽：氨基酸通过肽键而成的化合物称肽。