P4对双氧水诱导SH―SY5Y细胞凋亡的保护作用
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P4对双氧水诱导SH―SY5Y细胞凋亡的保护
作用
【摘要】目的研究P4对双氧水诱导SH-SY5Y细胞凋亡
的影响。方法体外培养SH-SY5Y细胞,建立双氧水诱导
SH-SY5Y细胞凋亡的模型,给予P4进行十预。应用Hoechst
染色,测定细胞凋亡率。结果lOuM的双氧水24h可以使
SH-SY5Y细胞凋亡率达到(56.33+13.17)%。然而,给予P4
后,SH-SY5Y细胞的凋亡率明显减低,P4加双氧水组与双氧
水组对比差异有统计学意义(P0.05);用10uM的双氧水处
理SH-SY5Y细胞24h,凋亡率达到(56.33+13.17)%,与正
常对照组差异有统计学意义(CF=5.950,P=0.03770.05)。
所以,P4对双氧水诱导SH-SY5Y细胞凋亡有保护作用,且是
通过增加BDNF释放来起到保护作用的。
3 讨论
中枢神经系统退行性疾病一直被认为是顽固而难治
的“三不”(病因不明,疗效不好,预后不良)性疾病。研
究证明,神经细胞死亡的形式有:凋亡,坏死,自身吞噬,
细胞质增生。过氧化氢(H2O2)是体内氧化代谢的中间产物,
属于非白南基活性氧,易穿透细胞膜,与细胞内的还原型铁
离子通过Fenton反应生成高度毒性的羟自由基,对多种细
胞(特别是脑组织神经元细胞)造成毒性,引起细胞死亡。
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所以,本研究以H2O2作用于体外培养的SH-SY5Y细胞,造
成氧化损伤模型。
本实验首先应用Hoechst33258荧光染色对H2O2诱导
SH-SY5Y细胞的浓度进行检测,结果表明,lOuMH2O2处理细
胞24h后,凋亡率达到(58.33±13.17)%,5uM的双氧水处
理细胞24h后,凋亡率与正常对照组无统计学差异。所以选
用10uMH2O2诱导SH-SY5Y细胞凋亡。给予H2O2之前,分别
加入BDNF,DMSO预处理液,DMSO预处理液+Y1036,P4预处
理液,P4预处理液+Y1036。结果表明加入P4预处理液的细
胞比加入DMSO预处理液的细胞,凋亡率明显减少。加入Y1036
组比没加Y1036组细胞凋亡率有所增加。该实验证明,P4通
过增加BDNF的释放对H2O2诱导SH-SY5Y细胞凋亡起到保护
作用。下一步研究P4对小鼠海马损伤是否有保护作用,该
研究可能有益于中枢神经系统退行性疾病的治疗。