二氧化硫吸入对小鼠脾细胞凋亡的诱导作用

2020届高考生物二轮复习常考题型大通关（全国卷）第30题动物生命活动的调节（2）1、瘦素是一种蛋白质类激素，可作用于下丘脑调节人体的食欲。

如图是有关于瘦素的调节示意图，请据图分析冋答：（1）据图甲可知，瘦素是在细胞中合成的，瘦素作用于靶细胞需要通过运输才能完成。

（2）人体中与图甲中a激素呈协同作用的激素是。

如果a激素合成与分泌量减少，最可能的原因是。

（3）据图中可得，瘦素作用的&器官是②下丘脑，其接受瘦素的信号后，经过反应和处理形成一定的刺激传至结构④大脑皮层，令其产生饱觉进而减少摄食行为，这属于调节。

（4）图乙是瘦素作用于下丘脑相关神经元，调节其摄食行为，图乙中共有条反射弧，若c神经元释放的神经递质引起突触后膜抑制，则突触后膜接受这种递质后的内膜电位是。

（5）某些肥胖患者是由于自身抗体攻击神经元细胞上的瘦素受体造成的，这种病在免疫学上称为。

这类肥胖病人能否通过注射瘦素治疗该病，请说明理由。

2、科学家研究发现，一种树突状细胞(DC细胞)在免疫反应中，有强大的摄取、处理和传递抗原的功能。

下图所示为DC细胞参与免疫的过程，请回答问题：(1)DC细胞能通过________方式将外来抗原摄入细胞内，将其分解；同时，免疫调节也可对付体内的异常细胞，这体现了免疫系统的________________功能。

(2)DC细胞处理抗原后，细胞外出现特定的物质能与T淋巴细胞外具有________作用的受体相结合，激活信号分子(S1、S2)从而激发T淋巴细胞出现免疫效应，此过程称为细胞间的________。

具有摄取、处理及传递抗原能力的细胞，除树突状细胞外，还有________等。

(3)T淋巴细胞发生免疫效应时，它产生的________可作用于已被少数抗原刺激的________细胞，并促进其增殖分化。

(4)DC细胞的研究成果已应用于对癌症患者的治疗，癌细胞是正常细胞中的相关基因在致癌因子的作用下发生突变产生的，其细胞膜上的糖蛋白分子会________，从而容易扩散和转移，给彻底治愈带来困难。

SO2和BaP复合暴露诱导小鼠肺线粒体损伤的分子机制秦国华;武美琼;桑楠【摘要】采用C57BL6小鼠作为模型,SO2(7mg/m3)动式吸入染毒28d,每天染毒6h；SO2熏气开始后的第1~5d,腹腔注射BaP(40mg/kg b.w.),一天一次.吸入染毒结束后,采用分光光度计法检测小鼠肺线粒体膜电位(MMP)以及细胞色素C氧化酶(COX)的活性；采用荧光定量PCR技术,检测肺细胞中细胞色素C氧化酶亚基CO4以及核转录因子PGC1-α、NRF1、mtTFA的mRNA水平；并采用Western blot技术检测上述三种线粒体调控基因的蛋白表达.结果发现,在SO2和BaP复合暴露后,小鼠肺线粒体膜电位下降,氧化磷酸化复合体COX活性和亚基CO4的mRNA表达水平显著降低,调控基因NRF1和mtTFA的mRNA和蛋白水平也显著下调.提示小鼠在SO2和BaP复合暴露后,可能通过降低肺中NRF1表达,影响其对mtTFA的调控,进一步抑制相关基因组的转录和翻译,最终可能导致小鼠肺线粒体的氧化磷酸化功能受损,线粒体膜电位下降进而引发肺部疾病.%C57BL6 male mice were exposed to SO2 (7mg/m3) for 28days, 6hours per day. In the first 5days of SO2 inhalation, mice were injected intraperitoneally with BaP (40mg/kg b. w.), which was dissolved in oil. The mitochondrial membrane potential (MMP) and activity of cytochrome C oxidase (COX) were detected by spectrophotometer. The mRNA levels of one subunit of COX (CO4) and three mitochondrial transcript factors (PGC1-α, NRF1, mtTFA) were analyzed by real-time RT-PCR after exposure. And the protein levels of the above three mitochondrial transcript factors were detected by Western blot. The results demonstrated that the co-exposure of SO2 and BaP statistically reduced the MMP and activity of COX. The mRNAexpression of CO4 was decreased after co-exposure of SO2 and BaP, combined with the depressions of NRF1 and mtTFA mRNA and protein levels. It is indicated that conjunction of SO2 and BaP regulated the expression of NRF1, which then inhibited the transcription and translation of related genomes and resulted in mitochondria damage in mouse lung.【期刊名称】《中国环境科学》【年(卷),期】2015(000)011【总页数】6页(P3496-3501)【关键词】SO2;BaP;线粒体;细胞色素C氧化酶;线粒体膜电位;CO4;NRF1;mtTFA 【作者】秦国华;武美琼;桑楠【作者单位】山西大学环境与资源学院，山西太原 030006;山西大学环境与资源学院，山西太原 030006;山西大学环境与资源学院，山西太原 030006【正文语种】中文【中图分类】X18;R994.6SO2与PAHs都是典型煤烟型大气污染物中重要的组成成分，由于排放源与传输模式相似，在大气中往往同时存在.本实验室研究发现，SO2是一种全身性毒物［1］，可引起小鼠肺超微结构不同程度改变，其中以线粒体受损伤最严重［2］.线粒体是氧化磷酸化的主要场所，而亚硫酸盐的毒性与线粒体氧化磷酸化功能受损有关［3］.苯并［a］芘（BaP）是一种典型的PAHs，可诱发动物发生肿瘤，与人类肺癌的发生也密切相关.线粒体也是 BaP的靶器官，研究表明BaP可以诱导线粒体损伤和凋亡.细胞色素 C是核呼吸因子（NRF1）的靶基因［3］.最新研究报道，对人支气管上皮细胞进行BaP暴露后，NRF1和线粒体转录因子A（mtTFA）的表达下调［4-5］.SO2与BaP均可诱导线粒体损伤，但前期研究大多是单独暴露后的分子机制探讨，关于二者复合污染诱导线粒体损伤的分子机制尚未见报道.因此，本实验通过检测线粒体膜电位（MMP）、细胞色素C氧化酶（COX）的活性、COX亚基CO4的mRNA水平及线粒体氧化磷酸化调控基因PGC1-α、NRF1、和mtTFA的mRNA和蛋白表达，对SO2和BaP复合暴露诱导小鼠肺线粒体损伤的分子机制进行了简单的探讨.1.1 实验动物处理C57BL6品系雄性小鼠（体重18～20g）24只，购自北京维通利华实验动物技术有限公司，随机分成4组，每组6只，分别为对照组、SO2组、BaP组、SO2+BaP组.小鼠于不锈钢笼中，12h昼夜循环，保证外界温度为（24±2）℃，湿度为50%±5%.其中SO2组和SO2+BaP组在1m3的玻璃熏气箱中进行 SO2（7mg/m3）动式吸入染毒［6］，每天6h，共28d.对照组和BaP组接受过滤的新鲜空气.箱顶的电动搅拌扇可以保证箱内气体浓度均匀一致，箱内SO2浓度采用盐酸副玫瑰苯胺分光光度法分析测定，每30min测定一次.动物染毒期间禁食禁水，其余时间自由进食和饮水（自来水）.SO2熏气开始后的前 5d，BaP组和SO2+BaP组进行腹腔注射溶于橄榄油的BaP（40mg/kg b.w.）［7］；而对照组和SO2组只注射橄榄油.熏气结束禁食 18h后将动物脱颈处死，取肺，一部分用于线粒体提取，一部分放入液氮中速冻后，转入-80℃冰箱中保存.1.2 线粒体提取取新鲜的肺组织40mg于Buffer A（胰酶，需要现配现用，浓度为0.25mg/mL，用1x Buffer B定容）中匀浆，600×g离心5min，取上清，11000×g离心10min后，加1mL Buffer B （10mmol/L Hepes，200mmol/L mannitol，70mmol/L sucrose，1mmol/L EGTA）重悬沉淀.重复上述离心一次，加Buffer C （10mmol/L Hepes， 0.25mmol/L sucrose， 1mmol/L ATP， 0.08mmol/L ADP， 5mmol/L sodium succinate 2mmol/L K2HPO4， 1mmol/L DTT）.重悬线粒体.采用考马斯亮蓝法测定线粒体蛋白.1.3 JC-1测定线粒体膜电位亲脂性阳离子探针JC-1测定肺线粒体膜电位（MMP）.使用分析 Buffer（20mmol/L MOPS，110mmol/L KCl，10mmol/L ATP，10mmol/L MgCl2，10mmol/L sodium succinate，1mmol/L EGTA）将JC-1稀释至0.2μg/mL，37℃孵育20min，490nm激发光，590nm发射光检测荧光强度.MMP用荧光单位（FLU）/mg pro来表示.1.4 细胞色素C氧化酶活性检测比色法测定样品中细胞色素C氧化酶活性，使用细胞色素 C氧化酶检测盒来分析测定（Sigma-Aldrich， St. Louis， MO）.1.5 mRNA的提取与荧光定量PCR取60mg的肺组织，用Trizol提取总RNA，采用 PrimeScriptTM反转试剂盒合成 cDNA.使用Analytik Jena荧光定量PCR仪进行扩增，扩增所需引物均采用Primer Premier 5.0软件设计，引物序列见表 1.PCR体系为20 μL，其中含有1μL cDNA，10μL SYBR Premix Ex Taq，上下游引物各1μL和 7μL H2O.反应条件为：95℃预变性 3min；95℃变性20s，55℃退火20s，72℃延伸20s，45个循环；最后在 60～72℃获得溶解曲线.由标准曲线获得样品目的基因的浓度，结果以目的基因与β-actin基因表达的比值来表示.1.6 蛋白提取与Western blot取40mg肺组织，加1mL蛋白工作液匀浆，蛋白工作液成分为：1% NonidetP40， 1mmol/L EDTA， 125mmol/L sodium fluoride， 0.5mmol/L sodiumvanadate，2.5μg/mL aprotinin，5μg/mL pepstatin，50μg/mL leupeptin，25μmol/L PMSF，25μg/mL trypsin inhibitor. 4℃放置20min，13000r/min，离心 15min，取上清，考马斯亮蓝法测蛋白浓度.采用Western blot方法检测目的基因的蛋白表达情况.以50μg的蛋白上样，使用聚丙烯酰氨凝胶电泳（SDS-PAGE）法分离蛋白，将目的蛋白电转PVDF膜上，封闭，一抗过夜孵育，荧光二抗孵育之后使用Odyssey红外扫描仪进行扫描.1.7 数据处理用SPSS统计软件分析数据，用origin 8.0作图.结果以均值±标准误（mean±SE）来表示，用One-way ANOVA法检验染毒组与对照组的显著性差异.2.1 SO2和BaP复合暴露对小鼠肺线粒体膜电位的影响图1所示为SO2和BaP复合暴露后小鼠肺线粒体膜电位的变化，与对照组相比，SO2和BaP复合暴露显著降低了 JC-1的荧光信号，是对照组的0.82倍；而SO2和BaP单独作用组没有显著变化.2.2 SO2和BaP复合暴露对小鼠肺细胞色素C氧化酶活性的影响如图2所示，对小鼠进行SO2和BaP复合暴露，发现 BaP组和 SO2+BaP组与对照组相比，COX活性显著下降，而SO2组没有显著变化.2.3 SO2和BaP复合暴露对小鼠肺线粒体细胞色素C氧化酶（COX）亚基CO4 mRNA表达水平的影响CO4是细胞色素C氧化酶（COX）的一个亚基.与对照组比较，SO2和 BaP复合暴露使 CO4 mRNA表达水平显著下调，而污染物单独作用并没有显著变化（图3）.2.4 SO2和BaP复合暴露对小鼠心脏线粒体氧化磷酸化过程中调控基因mRNA表达水平的影响SO2和 BaP复合暴露组与对照组相比，线粒体调控基因PGC1-α的mRNA表达水平无显著性差异，但 NRF1和 mtTFA显著降低.而SO2和BaP单独组3个调控基因均无显著变化（图4）.2.5 SO2和BaP复合暴露对小鼠肺线粒体氧化磷酸化过程中调控基因蛋白表达水平的影响如图5所示，SO2单独作用与对照组相比，并没有产生损伤PGC1-α的蛋白表达，但NRF1和mtTFA的表达显著下调，是对照组的 0.30、0.34 倍.小鼠暴露于BaP 后，3个调控基因蛋白水平均显著下降，分别为对照组的 0.51、0.31、0.53倍.NRF1和mtTFA的蛋白表达在SO2+BaP组，与对照组相比有统计学意义上的显著性差异，分别为对照组的0.51、0.38倍；而PGC1-α的表达无显著性变化.线粒体是氧化磷酸化的主要场所，正常的线粒体膜电位（MMP）是维持线粒体进行氧化磷酸化、产生三磷酸腺苷的先决条件.当某些病因导致呼吸链电子传递过程障碍时，就会导致 MMP耗散，进而引起通透性转换孔（MTP）开放等一系列调亡级联反应.MMP的耗散和细胞色素C的释放是引起细胞凋亡的上游事件，同时也是线粒体损伤的标志［8］.其中细胞色素 C氧化酶（COX）是线粒体呼吸链电子传递的终末复合酶，CO4是细胞色素C氧化酶的一个亚基.当呼吸链蛋白表达发生改变时，必然引起呼吸链电子传递过程障碍并最终发生氧化磷酸化功能下降、MMP耗散、细胞凋亡等一系列反应［9］.SO2和BaP复合暴露后，与对照组比较，小鼠肺线粒体中不仅MMP和COX活性显著性下降；同时我们也观察到COX的亚基CO4mRNA表达显著下调（图1、图2、图3）.而且在诱导MMP下降上，SO2和 BaP有一定的协同作用（图 1）. Yang［10］对人胎儿肺成纤维细胞进行BaP不同时间和剂量染毒，实验结果揭示，BaP首先刺激ROS的大量产生，进而引起线粒体的去极化，如MMP的降低以及细胞色素C的释放.在对小鼠肝癌细胞的研究中也证实，BaP可诱导线粒体膜通透性转运通道的开放，引起膜电位的下降和细胞色素C的释放［11］.COX活性在SO2慢性暴露下不受影响，而在BaP组和复合暴露组下降，提示活性氧产生量在BaP及SO2与BaP复合暴露组可能要比SO2单独暴露组更多，从而对线粒体呼吸链蛋白的影响也更为严重.有报道证明，亚硫酸盐可增加BPDE的致突变性，使BPDE与核DNA的结合增加［12-14］.SO2和BaP复合暴露可诱导由nDNA编码的亚基CO4mRNA表达显著下调，但BaP单独作用并无明显变化（图3）.说明SO2和BaP在长期共同作用下，对nDNA编码的线粒体亚基也造成了损伤，SO2可增加BaP对线粒体的损伤.而本研究对小鼠进行SO2吸入染毒28d后，发现 PGC-1α mRNA和蛋白水平没变化；但是NRF1和mtTFA在mRNA水平上无显著下降，在蛋白水平有统计学意义上的差异（图4、图5）.这揭示 SO2极有可能在转录后或翻译水平调控NRF1和mtTFA的表达.在对人支气管上皮细胞的研究中发现，NRF1是BaP诱导的线粒体损伤的关键原因，并与mtTFA的蛋白表达相关，伴随着MPT的开放和ROS的大量产生［4］.图4和图5显示，BaP在转录后和翻译水平调控PGC-1α，NRF1和mtTFA的表达；而SO2和BaP复合暴露后，小鼠肺线粒体调控基因NRF1和mtTFA在mRNA和蛋白水平均显著下调，相较于单独作用组只在蛋白水平的下调，复合暴露组显然对线粒体损伤更严重.这提示，活性氧产生量在SO2+BaP组可能要比SO2或BaP单独暴露组更多，从而对线粒体呼吸链蛋白的影响也更为严重.NRF1和mtTFA进而调控线粒体亚基CO4和COX的活性，引起MMP的下降，进而导致MPT开放和细胞色素C的释放.SO2和BaP刺激引起这些核转录因子下调的上游机制可能涉及到细胞因子的释放，如TNF-α和TGF-β，而细胞因子的释放进一步启动炎症反应通路，如 AMPK等.有报道指出，TNF-α可以通过降低体外培养的脂肪细胞及肌细胞的PGC-1α、NRF1和TFAM的mRNA水平而减少线粒体的生物合成［15］.在A549细胞里，观察到TGF-β的诱导［16］能够降低PGC-1α及下游靶基因的 mRNA表达水平.而下游炎性通路中AMPK，ROS，Ca2+的活化，是激活PGC-1α的必要因素［17］.因此，推测SO2和BaP复合暴露可能通过诱导小鼠肺细胞因子的释放，启动炎症反应通路，通过NRF1-mtTFA调控途径来抑制线粒体的生物合成.其具体的上游调控机制还有待进一步的研究.4.1 SO2和 BaP复合暴露可引起小鼠肺线粒体膜电位和细胞色素C氧化酶（COX）活性显著下降.4.2 SO2和BaP复合暴露，后肺线粒体COX亚基CO4mRNA水平显著降低，核转录因子NRF1 和mtTFA的mRNA和蛋白水平也显著下调.4.3 SO2和 BaP复合暴露可能通过诱导小鼠肺细胞因子的释放，启动炎症反应通路，通过NRF1-mtTFA调控途径来抑制线粒体的生物合成.孟紫强，张波，秦国华，等.二氧化硫对小鼠不同脏器DNA的损伤作用［J］. 中国环境科学， 2005，25（4）：424-427.Meng Z Q， Liu Y X. Cell morphological ultrastructural changes in various organs from mice exposed by inhalation to sulfur dioxide ［J］. Inhalation Toxicology， 2007，19（6/7）：543-551.Hadler H I， Cook G L. The mitochondrial activation of sulfate and arsenate and their role in carcinogenesis ［J］. Journal of Environmental Pathology and Toxicology， 1979，2（3）：601-612.Zhang L J， Bao Y， Li J. Nuclear respiratory factor-1is involved in mitochondrial dysfunction induced by benzo（a）pyrene in humanbronchial epithelial cells ［J］. Basic and Clinical Pharmacology and Toxicology， 2011，109（2）：115-122.Zhang L J， Bao Y， Liu Y， et al. Downregulation of nuclear respiratory factor-1contributes to mitochondrial events induced by benzo（a）pyrene［J］. Environmental Toxicology， 2014，29（7）：780-787.Meng Z Q， Qin G H， Zhang B. DNA damage in mice treated with sulfur dioxide by inhalation ［J］. Environmental and Molecular Mutagenesis，2005，46：150-155.Grova N， Schroeder H， Farinelle S， et al. Sub-acute administration of benzo［a］pyrene （B［a］P） reduces anxiety-related behaviour in adult mice and modulates regional expression of N-methyl-D-aspartate （NMDA）receptors genes in relevant brain regions ［J］. Chemosphere，2008，73：S295-302.Zoratti M，Szabò I. The mitochondrial permeability transition ［J］. Biochimica et Biophysica Acta.， 1995，1241（2）：139-176.Eskandari M R， Mashayekhi V， Aslani M， et al. Toxicity of thallium on isolated rat liver mitochondria： The role of oxidative stress and MPTpore opening ［J］. Environmental Toxicology，2015，30（2）：232-241.Yang G， Jiang Y， Rao K， et al. Mitochondrial dysfunction and transactivation of p53-dependent apoptotic genes in BaP-treated human fetal lung fibroblasts ［J］. Human and Experimental Toxicology， 2011，30（12）：1904-1913.Ko C B， Kim S J， Park C， et al. Benzo （a） pyrene-induced apoptotic death of mouse hepatoma Hepa1c1c7 cells via activation of intrinsic caspase cascade and mitochondrial dysfunction ［J］. Toxicology， 2004，199（1）：35-46.Pauluhn J， Thyssen J， Althoff J， et al. Long-term inhalation study withbenzo［a］pyrene and SO2in Syrian golden hamsters ［J］. Experimental Pathology， 1985，28（1）：31.Green J L， Jones B C， Reed G A. Effects of sulfite on the uptake and binding of benzo［a］pyrene diol epoxide in cultured murine respiratory epithelial cells ［J］. Environmental Health Perspectives，1994，102（2）：216-220.Reed G A， Jones B C. Enhancement of benzo［a］pyrene diol epoxide mutagenicity by sulfite in a mammalian test system ［J］. Carcinogenesis，1996，17（5）：1063-1068.Valerio A， Cardile A， Cozzi V， et al. TNF-α downregulates eNOS expression and mitochondrial biogenesis in fat and muscle of obese rodents ［J］. Journal of Clinical Investigation， 2006，116（10）：2791-2798.Sohn E J， Kim J， Hwang Y， et al. TGF-β suppresses the expression of genes related to mitochondrial function in lung A549cells ［J］. Cellular and Molecular Biology （Noisy-le-Grand， France），2012，58：OL1763-1767.Palikaras K， Tavernarakis N. Mitochondrial homeostasis： The interplay between mitophagy and mitochondrial biogenesis ［J］. Experimental Gerontology， 2014，56：182-188.China Environmental Science， 2015，35（11）：3496～3501。

SO_2对小鼠多脏器脂质过氧化作用的研究孟紫强;白伟【期刊名称】《中国公共卫生》【年(卷),期】2003(19)10【摘要】目的探索二氧化硫 (SO2 )对小鼠不同脏器脂质过氧化作用的影响 ,进一步了解SO2 的毒作用机制。

方法采用SO2 动态染毒实验技术 ,使小鼠吸入不同浓度的SO2 气体后 ,用荧光分光光度法测定小鼠不同脏器中脂质过氧化产物丙二醛 (MDA)含量。

结果 (1)随SO2 浓度的增加 ,小鼠多个脏器氧化损伤加剧 ,呈明显的剂量 -效应关系 ;(2 )在低浓度SO2 (2 2± 2 )mg/m3 吸入情况下 ,对不同脏器引起的氧化损伤不同 ,有器官差异性 ;但随SO2 浓度升高 ,器官间的差异减小 ;(3 )SO2 对雌雄小鼠造成的氧化损伤作用 ,在不同脏器间存在性别差异。

结论SO2 可引起多种脏器氧化损伤 ,是一个全身性毒物 ;SO2 通过活性氧自由基引起组织器官损伤 ,可能是SO2 毒理作用的主要机制之一。

【总页数】3页(P1213-1215)【关键词】二氧化硫;脂质过氧化;小鼠;脏器【作者】孟紫强;白伟【作者单位】山西大学环境医学与毒理学研究所【正文语种】中文【中图分类】R114;O613.51【相关文献】1.大枣对高脂血症小鼠血脂和脂质过氧化作用研究 [J], 康文艺;李晓梅2.镉对小鼠脏器脂质过氧化作用的影响 [J], 陈敏;吕伟中3.铅对小鼠睾丸组织脂质过氧化作用及杭白菊对其保护作用的研究 [J], 范广勤;朱建华;冯昶;刘延芳;李伟4.五种螯合剂对镉致小鼠脏器脂质过氧化作用的影响 [J], 陈敏;谢吉民;荆俊杰5.铅对小鼠脏器脂质过氧化作用的影响 [J], 陈敏;谢吉民;高晓饮;荆俊杰因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

SO2致小鼠组织蛋白质氧化和DNA-蛋白质交联作用研究的开题报告题目：SO2致小鼠组织蛋白质氧化和DNA-蛋白质交联作用研究研究背景：SO2是一种常见的空气污染物，长期暴露于SO2环境中会导致多种人体健康问题，并且对动物生殖、生长和免疫系统等方面的影响也已经得到证实。

目前，已有一系列研究探讨了SO2对细胞及生物体内基因表达的影响，但SO2对组织蛋白质氧化及DNA-蛋白质交联的影响还未得到充分认识。

因此，本研究将从这些方面入手，探究SO2对小鼠组织蛋白质氧化及DNA-蛋白质交联的影响及其机制。

研究内容：本研究主要分为两个部分：实验和分析。

实验部分将以小鼠脑、肝和肾脏为对象，通过SO2暴露实验，探究SO2对组织蛋白质氧化和DNA-蛋白质交联作用的影响。

具体实验流程如下：1. 筛选小鼠：在同一环境下、以同一饲料为主食的条件下，选出同一品系、同一年龄、近亲血缘关系较小的小鼠进行实验。

2. SO2暴露实验：对实验组小鼠进行SO2暴露，在暴露时间（1、3、6、12、24、48 h）和剂量（2、4、6 ppm）两个维度上进行实验设计，每组设置5只小鼠。

在实验过程中，对照组小鼠在同等的环境条件下进行养殖，但不进行SO2暴露。

3. 取样：实验结束后，对各组小鼠进行活体标本取样，分别取小鼠脑、肝和肾脏组织，用于后续的分析实验。

4. 分析实验：对样本进行蛋白质氧化状态和DNA-蛋白质交联的测定。

具体实验包括：（1）蛋白质氧化状态的测定：应用Western blot等方法检测脑、肝和肾脏组织中的氧化蛋白质含量和氧化程度。

（2）DNA-蛋白质交联的测定：运用电泳等技术检测脑、肝和肾脏组织中的DNA-蛋白质交联水平，包括单链和双链的交联程度和交联类型等。

分析部分将对实验得到的数据进行统计学分析，并探究SO2对小鼠组织蛋白质氧化和DNA-蛋白质交联的作用机制和可能的影响途径。

研究意义：本研究将探究SO2对小鼠组织蛋白质氧化和DNA-蛋白质交联的影响，为研究空气污染对人体健康的影响提供参考，并为空气污染防治提供理论支持。