北师大版 高中生物《动物细胞工程(第三课时)》精品课件

第四页，共46页。
二、植物体细胞杂交(zájiāo)与动物细胞融合 的比较
植物体细胞杂交
细胞 融合 原理
细胞膜的流动性、细胞 的全能性
动物细胞融合 细胞膜的流动性
细胞 用纤维素酶、果胶酶去 用胰蛋白酶或胶原蛋白
融合 除细胞壁后诱导原生质 酶使细胞分散后，诱导
方法
体融合
细胞融合
第五页，共46页。
植物体细胞杂交 动物细胞融合
上表中还需进行(jìnxíng)的操作是 ____________。 ③培养一段时间后，取4组装置中的等量培养 液，分别添加到4份备用的淋巴细胞培养液中 继续培养。 ④一段时间后取淋巴细胞分别染色、制片。在 显微镜下观察________，并对比分析。若丙组 淋巴细胞出现异常，而甲组的淋巴细胞正常， 则说明_______________________。
第二十一页，共46页。
病毒表面的A蛋白为主要抗原，因此可用A蛋 白制备疫苗，刺激机体产生抗体。对于病毒的 检测可采用与已知病毒进行核酸序列比较的方 法，也可根据抗原与抗体发生特异性结合 (jiéhé)的特点，用抗A蛋白的单克隆抗体进行 检测。
第二十二页，共46页。
【答案】 (1)逆(反)转录 (2)限制性核酸内切 酶(限制性内切酶、限制酶) DNA连接酶(注： 两空顺序可颠倒) (3)细胞(xìbāo)融合 杂交 瘤细胞(xìbāo) (4)A蛋白 核酸(基因)序列 抗A蛋白的单克隆抗体
第二十五页，共46页。
其碳源为蔗糖，在组织培养的脱分化阶段必 须在黑暗条件下进行，而再分化过程需要一 定的光照条件；动物细胞培养就是细胞的增 殖，不能体现细胞的全能性，而植物(zhíwù) 组织培养体现了植物(zhíwù)细胞的全能性。 【答案】 C

2.将表达载体导入植物细胞的方法 (1)花粉管通道法 ①概念:在授粉后向植物子房中注射含有目的基因的DNA溶液,利用植物 在开花、受精过程中形成的花粉管通道,将外源DNA导入受精卵细胞,并 进一步整合到受体细胞的基因组中,受精卵最终发育成为带有目的基因的 新个体。 ②具体操作方法有微注射法、柱头滴加法、花粉粒携带法、子房注入法 等。
【变式训练】 (不定项选择题)图Z3-3-6是将人生长激素基因导入细菌B制造“工程菌”的 示意图。已知细菌B细胞内不含质粒A,也不含质粒A上的基因。下列说法 正确的是( )。
图Z3-3-6
A.将重组质粒导入细菌B常用的方法是显微注射法 B.将完成导入过程后的细菌涂布在含有氨苄青霉素的培养基上,能生长的 包括导入了重组质粒的细菌和导入了质粒A的细菌 C.将完成导入过程后的细菌涂布在含有四环素的培养基上,能生长的只是 导入了质粒A的细菌 D.该过程选用的受体细胞可以是含质粒A的细菌 答案:BC
(4)第四步检测 如果目的基因的表达产物具有明显的表型性状,还要根据目标性状的有无 来判断目的基因是否表达。 2.受体细胞为原核细胞时的检测 (1)表达载体导入受体细胞后,表达载体独立于DNA分子之外,检测时只需 提取质粒直接进行限制性内切核酸酶酶切,测序即可。 (2)检测目的基因是否转录、翻译出目的蛋白时,只需从受体细胞或培养液 中提取蛋白质,进行电泳分离,然后再利用相应抗体进行检测。
2.当受体细胞是真核生物细胞时,目的基因的表达及产物的检测鉴定,主要 从哪些方面进行? 提示:(1)检测目的基因是否整合到了受体细胞的基因组上,经常采用的方 法是PCR检测或分子杂交检测。 (2)检测目的基因是否转录出mRNA,通常进行PCR或RNA的分子杂交检测。 (3)检测目的基因最终能否翻译出有功能的蛋白质,可利用目的蛋白的抗体 进行检测。 (4)检测目的基因是否表达还可根据目标性状的有无来判断。

细胞悬液
增殖能力强，贴壁生长
有丝分裂旺10接代触以抑内制，保持正常原二代倍培体核养殖能力越洗强涤，、稀释、分离
细胞增殖缓
越容动易物培细养胞。培养
50代细胞
慢，核型可 能变化
不能最终培养
成生物体。
讨论
多细胞动物和人体的细胞都生活在内环境中， 根据你所学的内环境的知识，思考以下问题：
植物细胞和动物细胞培养的比较 比较项目 植物组织培养 动物细胞培养
原理
细胞的全能性 细胞增殖
培养基性质 培养基特有成分 培养目的 培养结果
固体培养基
蔗糖、 植物激素
快速繁殖、培育 无病毒植株等 新的个体 或细胞产品
液体培养基
葡萄糖、 动物血清、
获得细胞 或细胞产物
细胞或细胞产品
二、动物体细胞核移植技术和克隆动物
4、气体环境
O2和CO2（95%空气和5% CO2 ）
维持培养液的PH
动物细胞培养技术的应用
1、大规模的生产有重要价值的生物制品； 如病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体。
2、为基因工程技术提供受体细胞； 3、有毒物质的检测； 4、细胞的生理、药理、病理研究；
如用于筛选抗癌药物等，为治疗和预防癌症 及其他疾病提供依据。
动物细胞核移植概念：
将动物的一个细胞核，移入一个已经去掉细胞核的 卵母细胞中，使其重组并发育成为一个新的胚胎，这个
新的胚胎最终发育为动物个体（克隆动物）。
分 胚胎细胞核移植：细胞分化程度低，恢复全能性容易。 类 体细胞核移植：细胞分化程度高，恢复全能性不容易。
程过的植移核胞细体
细胞培养技术
细胞核移植技术 体内胚胎培养和 胚胎移植技术
可以。卢辛达的产奶量很高，有高产奶的遗传基础， 利用卢辛达的体细胞克隆的奶牛其遗传物质基本上 全部来自该奶牛，其克隆牛具有高产的遗传基础， 如果精心培育和饲养，有可能在世界范围内推广， 克隆牛再与高产的公牛自然繁殖，可得到很多高产

旁栏边角想一想 动物细胞培养时,除了添加糖类、氨基酸等必要的营养成分外,往往还需添 加血清等一些天然成分,原因是什么? 提示 人们对细胞所需的营养物质尚未全部研究清楚,血清等一些天然成分 的营养成分比较齐全,可以弥补人工培养基的不足。
结论语句辨一辨
1.在25 ℃的实验条件下可顺利完成人神经细胞的培养。( × )
结论语句辨一辨 1.胚胎干细胞可以来源于早期胚胎,也可以来源于成熟个体。( × ) 2.成体干细胞没有组织特异性,可以分化成特定的细胞或组织,不具有发育 成完整个体的能力。( × ) 3.由iPS细胞产生的特定细胞,可以在新药的测试中发挥重要作用。( √ ) 4.体外培养胚胎干细胞可以不断增殖而不发生分化。( √ )
第2章细胞工程
第2节 动物细胞工程
第1课时 动物细胞培养 第2课时 动物细胞融合技术与单克隆抗体 P34 第3课时 动物体细胞核移植技术和克隆动物 P63
课程标准
1.认同动物细胞培养是模拟体内生理条件在体外进行的培养, 分析动物细胞培养需要的基本条件。 2.尝试构建动物细胞培养的基本流程,比较动物细胞培养和植 物组织培养的异同。 3.概述干细胞的分类,探讨干细胞在临床上的应用及面临的风 险,理性看待生物技术。
(2)培养条件 ①营养条件:将细胞所需的营养物质按种类和所需量严格配制而成的培养 基,称为合__成__培__养__基__,在使用时,通常需要加入___血__清____等一些天然成分。 ②无菌、无毒的环境:在体外培养细胞时,需要对培养液和所有培养用具进 行灭菌处理以及在无菌环境下进行操作。培养液还需要定期更换,以便 清__除__代__谢__物__,防止其积累对细胞自身造成危害。 ③适宜的温度、pH和渗透压:维持细胞生存必须有适宜的温度。哺乳动物 细胞培养的温度多以_3_6_._5_±__0_.5__ ℃为宜。多数动物细胞生存的适宜pH为 __7_._2_~_7_.4___。 ④适宜的气体环境:通常采用培养皿或_松_盖__培__养__瓶__,并将它们置于含有95% 空气和5%CO2的混合气体的_C_O_2_培__养__箱__中进行培养。O2是细胞代谢所必 需的,CO2的主要作用是__维__持__培__养__液__的__p_H___。