免疫透射比浊法测定HbA1c的可靠性研究

吉林医学２０１　１年８ｆｌ第３２卷第２４期　免疫透射比浊法测定ＨｂＡ１　ｃ的可靠性研究　４９６９　

胡应秀　，张红梅。（１．陕西省商洛市镇安县医院检验科，陕西商洛７１１５００；２．陕西省商洛市柞水县医院检验科，陕西商洛　７１１４００）　【摘要】目的：对免疫透射比浊法测定糖化血红蛋白（ＨｂＡｌｃ）进行可靠性评价。方法：用离子交换高效液相色谱法和免疫透射　比浊法分别对健康人和糖尿病患者（共ｌＯ０例）进行ＨｂｌＡｃ的测定，比较两者的相关性并最终对免疫透射比浊法的准确性作出评价。结　果：两种检验方法测的结果差异有统计学意义（Ｐ＜０．０５），免疫透射比浊法的平均回收率在９７．９％。结论：该方法的重复性好，准确　性高，操作简便，检测周期短，成本低，为临床提供了一种快速、简便、可靠的常规方法。　【关键词】免疫透射比浊法；糖化血红蛋白；高效液相色普法　Ｔｕｒｂｉｄｉｍｅｔｒｉｃ　Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｅｐｉｄｅｍｉｃ　ｔｒａｎｓｍｉｓｓｉｏｎ　ｒｅｌｉａｂｉｌｉｔｙ　ａｎａｌｙｓｉｓ　ｏｆ　ＨｂＡｌｃ　ＨＵ　ＩＴｎｇ－ｘｉｕ１，ＺＨＡＮＧ　Ｈｏｎｇ－ｍｅｉｅ　（１．Ｓｈａｎｇｌｕｏ　Ｃｉｔｙ，ＳｈａａｎｘｉＰｒｏｖｉｎｃｅＺｈｅｎ＂ａｎ　ＣｏｕｎｔｙＨｏｓｐｉｔａｌＬａｂｏｒａｔｏｒｙ，ＳｈａａｎｘｉＳｈａｎｇｌｕｏ　７１１５００；２．Ｓｈａｎｇｌｕｏ　Ｃｉ￣ＳｈａａｎｘｉＰｒｏｖｉｎｃｅＺｈａｓｈｕｉ　Ｃｏｕｎｔｙ　ｈｏｓｐｉｔａｌｌａｂｏｒａｔｏｒ￣，ＳｈａａｎｘｉＳｈａｎｇｌｕｏ　７１１４００）　Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ　Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｉｍｍｕｎｅ　ｔｕｒｂｉｄｉｍｅｔｒｉｃ　ｇｌｙｃｏｓｙｌａｔｅｄ　ｈｅｍｏｇｌｏｂｉｎ（ＨｂＡｉｃ）ｆｏｒ　ｒｅｌｉａｂｉｌｉｔｙ　ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ．Ｍｅｔｈｏｄｓ　Ｔｈｅ　ｉｏｎ—　ｅｘｃｈａｎｇｅ　ｈｉｇｈ　ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅ　ｌｉｑｕｉｄ　ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ　ａｎｄ　ｉｍｍｕｎｅ　ｔｒａｎｓｍｉｓｓｉｏｎ　ｔｕｒｂｉｄｉｔｙ　ｗｅｒｅ　ｈｅａｌｔｈｙ　ａｎｄ　ｄｉａｂｅｔｉｃ　ｐａｔｉｅｎｔｓ（１００　ｐａｔｉｅｎｔｓ）ｗｅｒｅ　ＨｂｌＡｃ　ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ，ｃｏｍｐａｒｅ　ｔｈｅ　ｃｏｒｒｅｌａｔｉｏｎ　ｂｅｔｗｅｅｎ　ｔｈｅ　ｔｗｏ　ａｎｄ　ｕｌｔｉｍａｔｅｌｙ　ｔｈｅ　ｉｍｍｕｎｅ　ｔｕｒｂｉｄｉｍｅｔｒｉｃ　ｍｅｔｈｏｄ　ｏｎ　ｔｈｅ　ａｃｃｕｒａｃｙ　ｏｆ　ｔｏ　ｅｖａｌｕａｔｅ．　Ｒｅｓｕｌｔｓ　ｔｗｏ　ｔｅｓｔｓ　ｍｅａｓｕｒｅｄ　ｔｈｅ　ｒｅｌｅｖａｎｃｅ　ｏｆｔｈｅ　ｒｅｓｕｌｔｓ　ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ（Ｐ＜Ｏ．０５），ｔｈｅ　ｉｍｍｕｎｅ　ｔｕｒｂｉｄｉｍｅｔｒｉｃ　ｍｅｔｈｏｄ，ｔｈｅ　ａｖｅｒａｇｅ　ｒｅｃｏｖｅｒｙ　ｗａｓ　９７：９％．　Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ　Ｔｈｉｓ　ｍｅｔｈｏｄ　ｉｓ　ｇｏｏｄ　ｒｅｐｒｏｄｕｃｉｂｉｌｉｔｙ，ｈｉｇｈ　ａｃｃｕｒａｃｙ，ｔｈｅ　ｏｐｅｒａｔｉｏｎ　ｓｉｍｐｌｅ，ｓｈｏｒｔ　ｔｅｓｔｉｎｇ　ｃｙｃｌｅ，ｌｏｗ　ｃｏｓｔ，ｔｏ　ｐｒｏｖｉｄｅ　ａ　ｃｌｉｎｉｃａｌ　ｆａｓｔ，ｓｉｍｐｌｅ　ａｎｄ　ｒｅｌｉａｂｌｅ　ｒｏｕｔｉｎｅ　ｍｅｔｈｏｄ．　Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：Ｉｍｍｕｎｅ　ｔｒａｎｓｍｉｓｓｉｏｎ　ｔｕｒｂｉｄｉｔｙ；Ｇｌｙｃａｔｅｄ　ｈｅｍｏｇｌｏｂｉｎ；Ｈｉｇｈ　Ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅ　Ｌｉｑｕｉｄ　Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ　糖化血红蛋白（ＨｂＡｌｃ）是糖基化血红蛋白中的重要组成成　分，是在红细胞存在期间ＨｂＡｌｃ与己糖非酶促反应的产物Ⅲ。其　糖化过程非常缓慢，反应不受血糖暂时性升高的影响，而是取决　于血糖水平和高血糖持续的时间，所以其含量常用来反应近２～３　个月的血糖水平。因此临床实践中常将其水平作为评价糖尿病控　制程度，筛检糖尿病，预测血管并发症及鉴别糖尿病的重要指　征。为研究免疫透射比浊法测定ＨｂＡｌｃ的可靠性，Ｘ￣１００例研究　对象进行研究，现报告如下。　１资料与方法　１．１　一般资料：本组对糖尿病患者和血糖正常者各５Ｏ例进行研　究，其中男４７例，女５３例，正常人血糖浓度为４．３—６．０　ｍｍｏｌ／Ｌ，　糖尿病患者的血糖浓度为９．１～３０．０　ｍｍｏｌ／Ｌ，对标本用乙二胺四　乙酸进行处理，并在１２　ｈ内进行测定。　１．２仪器与试剂：免疫透射比浊法（深圳国赛Ｎｅｐｈｓｔａｒ　ＮＳ．２型　特种蛋白定量仪及配套试剂）和离子交换高压液相色谱法的试剂　（西班牙ＢｉｏｓｙｓｔｅｍＳ．Ａ公司产品）。　１．３方法　１．３．１免疫透射比浊法：用免疫透射比浊法和离子交换微柱层析　法分别对标本进行测量，将标准溶液进行稀释，稀释成５种浓度　的溶液：９　ｍｇ／Ｌ、１８　ｍｇ／Ｌ、４０　ｍｇ／Ｌ、８２　ｍｇ／Ｌ、１６４　ｍｇ／Ｌ，将　测出５点的值进行定标，并画出标准曲线。样本为２Ｏ　ｌ，乳胶　试剂１为３００　ｌ，加入试剂１过５　ｒａｉｎ后加入试剂２，试剂２为抗体Ｂ　１００　ＩＸ１、抗体Ａ　４０　ＩＸ１，吸光度为３４０　ｎｍ，５　ｍｉｎ后进行试验，反　应时间：１５ｍｉｎ。　１．３．２离子交换高压液相色谱法：是～类常用的物质分离技术，　该技术利用了同物质成分在不同相的分配差别，在两相物质相互　运动的过程中，混合物能够相互分离的原理进行物质分离。在用　高压输液泵为洗脱液加压后使用弱酸性阳离子交换树脂，在选定　ｐＨ值和低浓度洗脱液离子强度下，进行洗脱，ＨｂｌＡｃ首先被洗脱　出来，记量ＨｂｌＡｃ值（以ＨｂｌＡｃ部分面积在全血红蛋白面积的百　分率来表示）。　２结果　２．１　重复性评定：取高值和低值两份标本，１　ｄ内用免疫透射比　浊法测定正常人和糖尿病患者ＨｂｌＡｃ　１０次，计算批内变异系数，　结果为：ＨｂＡ１Ｃ的平均批内变异系数为１．８１％。　２．２相关性评定：每天随机抽取标本１５份，用免疫透射比浊法　和离子交换高压液色谱法分别测定标本的ＨｂｌＡｃ，连续试验８　ｄ，　对试验结果做出客观、详细的记录，以离子交换高压液相色谱　法结果做ｘ轴，免疫透射比浊法结果做为Ｙ轴，计算出线性回归　方程，画出线性回归曲线，结果显示：Ｙ＝Ｉ．０２５８　ｘ—Ｏ．１９６５（尸　＜０．０５），由数据知两者有良好的相关性。　２．３　线性试验：以ＮＣＣＬＳ为依据进行线性试验结果的评定。结　果显示线性良好的取值范围为０．０７～２．５　ｇ／Ｌ。　２．４　回收试验：取１００　ＩＸ　ｌ　ＨｂＡ１ｃ￣准液加入到浓度为０．６８　ｇ／Ｌ的　９００　１　ＨｂＡｌｃ溶血液中。测定样本中ＨｂＡｌｃ的浓度，其参照标准　为ｎｌ：高值（ＨｂＡ１ｃ＝２．２１　ｇ／Ｌ），中值（ＨｂＡｌｃ＝１．５６　ｇ／Ｌ），低　值（ＨｂＡｌｃ＝０．７６　ｇ／Ｌ）。使用免疫透射比浊法测定ＨｂＡｌｃ的方法　的平均回收率为１００．４％。详见表１。　表１使用免疫透射比浊法测￣Ｉ－ＩｂＡ１ｃ

时回收试验的结果统计　４９７０　３讨论　ＨｂＡｌｃ在人体内含量不受血糖暂时性升高的影响，而是取决　于血糖水平和高血糖持续的时间，可提示近２　３个月内血糖的控　制情况，其含量越高表示血糖控制水平越差，病情越严重。２００２　年美国糖尿病协会已将ＨｂＡ１ｃ作为监测糖尿病控制的金标准［２１。　目前，临床实践中ＨｂＡｌｃ含量的测定除用于评价血糖控制情况外　还用于以下几种情况：①筛检糖尿病；②预测血管并发症；③　鉴别高血糖口１。目前临床上用于检测ＨｂＡｌｃ的方法有很多。选择　一种准确稳定，可广泛应用的方法很重要。研究结果显示，免疫　透射比浊法与离子交换高效液相色谱法测定的结果相关性良好，　而且具有较高的精密度和准确度，方法可靠，能够准确的显示　ＨｂＡｌｃ的变化。另外，由于其检验过程操作相对简单，适用范围　吉林医学２０１１年８Ｂ第３２卷第２４期　广，适合推广使用。因此，Ｉ｝缶床实践中应用价值很高，具有较高　的可靠性。　４参考文献　【１】邹伟．免疫透射比浊法检测糖化血红蛋白的方法评价［Ｊ］．临床　和实验医学杂志，２０１０，９（７）：５２７．　［２】Ｎａｔｈａｎ　ＤＭ，Ｂｕｓｅ　ＪＢ，Ｄａｖｉｄｓｏｎ　ＭＢ，ｅｔ　ａ１．Ｍａｎａｇｅｍｅｎｔ　ｏｆ　ｈｙｐｅｒｇｌｙｃｅｍｉａ　ｉｎ　ｔｙｐｅ　２　ｄｉａｂｅｔｅｓ：ａ　ｃｏｎｓｅｎｓｕｓ　ａｌｇｏｒｉｔｈｍ　ｆｏｒ　ｔｈｅ　ｉｎｉｔｉａｔｉｏｎ　ａｎｄ　ａｄｉｕｓｔｍｅｎｔ　ｏｆｔｈｅｒａｐｙ［Ｊ］．Ｄｉａｂｅｔｅｓ　Ｃａｒｅ，２００６，２９（８）：１９６３．　［３】李钟响．糖化血红蛋白检测对糖尿病诊断、血糖控制及疗效评　价的临床意义【Ｊ］．临床和实验医学杂志，２００９，８（１）：１１０．　［收稿日期：２０１１－０５．２４编校：杨宇】　手术内固定治疗胸腰椎爆裂骨折１　６例临床分析　路仲晓，马社荣，陈会强，刘鹏飞（神华电力医院，陕西神木７１９３００）　【摘要】目的：探讨两种手术人路方式内固定治疗胸腰椎爆裂骨折的临床效果。方法：３２例胸腰椎爆裂骨折并经手术治疗患者根　据入路方式的不同分成后入路组（１７例）与前入路组（１５例），都采用内固定治疗。结果：前入路组比后人路组手术时间长、出血量　多，差异有统计学意义（Ｐ＜０．０５）。前入路组的术后３个月、１２个月植骨融合率都比对照组高（Ｐ＜０．０５）。结论：前入路手术和后人　路手术内固定治疗胸腰椎爆裂骨折各有适应证和优缺点，其选择取决于骨折类型、部位及椎管受压迫的程度，正确选择手术适应证和　良好掌握手术技巧是预防手术失败的关键。　【关键词】胸腰椎爆裂骨折；手术内固定治疗；前人路手术；后入路手术　胸腰椎爆裂骨折多由高能量暴力所致，破坏了脊柱的前中柱　甚至后柱，常导致进行性不稳，大约９０％爆裂性骨折发生在胸腰　段”　。手术内固定治疗目的在于恢复脊柱解剖结构的完整性和稳　定性　。ｆｌ２００９年４月　２０１０年２月应用两种内固定方法治疗胸腰　椎爆裂骨折，取得了不同的效果，现报告如下。　１资料与方法　１．１　一般资料：２００９年４月～２０１０年２月，我院共收治了胸腰椎　爆裂骨折并经手术治疗患者３２例，所有病例在治疗前均行脊柱　ｘ线正侧位摄片、ＣＴ扫描确定疾病，排除骨质疏松、椎体病理　性骨折。男２０例，女１２例，年龄１７～６３岁，平均３４．２岁。骨折部　位：Ｔｌ。５例，Ｔ　２　ｌ０例，Ｌ　１２例，Ｌ２　５例。致伤原因：车祸伤２Ｏ　例，坠落伤８例，重物砸伤４例。均为爆裂性骨折，按ＡＳＩＡ脊椎　神经功能障碍标准：Ａ级１Ｏ例、Ｂ级１Ｏ例、Ｃ级８例、Ｄ级３例、Ｅ　级ｌ例。受伤至手术时间３～８　ｄ，平均５　ｄ。把上述患者根据治疗　方法的不同分为后人路组（１７例）与前入路组（１５例），两组患　者的一般资料情况比较，差异无统计学意义（Ｐ＞０．０５），具有　可比性。　１．２手术方法：前人路组：气管插管全身麻醉，侧人路，显露　病椎及上下相邻椎体，采用经胸腹膜外进入，分离切开腰大肌，　结扎节段性腰横动静脉。将骨折椎体行大部次全切除，彻底解除　压迫脊髓的碎组织，刮除伤椎的上下终板，进行植骨，安放合适　的内固定器械复位固定。放置引流管，在无明显血液或渗出液流　出后拔除。后人路组：气管插管全身麻醉，俯卧位，以伤椎为中　心取后正中切口，暴露棘突、椎板、关节突及横突，行椎弓根内　固定，横突间植骨。放置引流管，在无明显血液或渗出液流出后　拔除两组术后均给予抗感染、激素、脱水及营养神经等治疗。　１．３观察指标：手术出血量、手术时间、术后３个月、１２个月植　骨融合率。　１Ａ统计学处理：计量资料以均数±标准差（　±　）表示，采用　艟验，计数资料采用秩和检验。使用统计软件ＳＰＳＳ　１７．０进行统　计分析，以Ｐ＜０．０５为差异有统计学意义。　２结果　２．１手术出血量与手术时间：在治疗过程中，前入路组比后人　路组手术时间长、出血量多，差异有统计学意义（Ｐ＜０．０５）。　详见表１。　２．２植骨融合率：治疗后，前入路组的术后３个月、１２个月植骨　融合率都比对照组高（Ｐ＜０．０５），详见表２。　表ｌ两组治疗中的手术出血量与手术时间（ｉ±ｓ）　表２两组植骨融合率（　±　）　３讨论　胸腰椎是指Ｔ，　一Ｌ　这一节段，是相对固定的胸椎与活动度