骨髓象分析
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我们知道,广义的骨髓象已经包括了血象,另外还包括了细胞化学染色红细胞检验再生障碍性贫血(AA)简称再障,是因为化学、物理、生物因素及不明原因使骨髓造血组织减少导致骨髓造血功能衰竭,引起外周血全血细胞减少的一组造血干细胞疾病。
特征是造血干细胞功能障碍和(或)造血微环境功能障碍,造血红髓被脂肪组织所替代(红髓脂肪变),导致全血细胞减少的一类贫血。
临床表现为进行性贫血、出血和感染(伴发热),罕有淋巴结核肝脾肿大。
1、血象:以全血细胞减少,网织红细胞绝对值降低为主要特征,三系减少的程度各病例有所不同。
贫血多为正常细胞性,少数为轻、中度大细胞性。
网织红细胞绝对值明显减少。
各类白细胞都减少,其中以中性粒细胞减少尤为明显,而淋巴细胞比例相对增多血小板不仅数量减少,而且体积小、颗粒减少。
急性AA时,网织红细胞<1%,绝对值<15×10^9/L;中性粒细胞绝对值常<0.5×10^9;血小板<20×10^9/L;慢性再障血红蛋白下降速度较慢,网织红细胞、中性粒细胞和血小板减低,但各指标叫急性再障指标为高,达不到急性再障的程度。
2、骨髓象①.急性再障:红髓脂肪变是AA的特征性病理改变,骨髓涂片可见脂肪滴明显增多。
多部位穿刺结果均显示有核细胞增生减低。
造血细胞(粒/红/巨核系细胞)明显减少,早期阶段细胞减少或不见,巨核细胞减少或缺如,无明显的病态造血。
非造血细胞(包括:淋巴/浆/肥大细胞等)相对增多,非造血细胞比例增高,大于50%,淋巴细胞比例可增高达80%。
如有骨髓小粒,染色后镜下为空网状结构或为一团纵横交错的纤维网,其中造血细胞极少,大多为非造血细胞。
②.慢性再障:病程中骨髓呈向心性损害,骨髓拥有代偿能力仍可有残存散在的增生灶,常因不同的穿刺部位,骨髓象表现不一致,需多部位穿刺或进行骨髓活检,才能获得较明确的诊断。
多数患者骨髓增生减低,三系或两系减少,巨核细胞减少明显。
非造血细胞比例增加,常>50%。
二、血象检查当血液系统发生疾病时,血象、骨髓象中血细胞会发生质或量的改变,检验骨髓象同时必须检验血象,对确定诊断和鉴别诊断是十分必要的。
㈠血片检查步骤及内容1、染色(瑞姬氏、时间、避免偏酸或偏碱)2、计数100个白细胞①粒系②红系③淋巴④浆细胞(异常时出现)⑤单核细胞⑥巨核细胞⑦其他:有无寄生虫及其他异常细胞,如疟原虫、恶组、淋巴瘤3、计算结果4、描述结果1㈡血片检查的重要性1.不同疾病时,骨髓象相似而血象有区别。
2.不同疾病时,骨髓象有区别而血象相似。
(传淋)3.同一患者骨髓象变化不显著,血象有异常。
(传单)4.同一患者骨髓象异常,血象无变化。
(MM)5.血中细胞来源于骨髓,白血病细胞分化程度晚。
2三、骨髓象检查㈠临床应用1.适应症①血细胞减少或增多。
②各种急慢性白血病。
③各种类型的贫血。
④不明原因的长期发热,肝、脾、淋巴结肿大。
⑤不明原因的骨痛、骨质破坏、肾功能异常、黄疸、紫癜、出血。
⑥恶性血液病化疗的疗效观察⑦细胞培养2.禁忌症:血友病、晚期妊娠3.主要作用:辅助诊断和疗效的观察㈡骨髓穿刺1.穿刺部位①髂后上棘:第五腰椎向上3cm处。
②髂前上棘:顶端后约1-2cm处。
3③胸骨:胸骨中线,相当第二肋间水平的胸骨体上端。
④小于3岁的小儿选择胫骨内侧2.穿刺步骤①选择部位,②消毒、戴消毒手套、将孔布盖于消毒的局部、孔布口对准穿刺部,③注射麻醉药,④左手固定穿刺部位,右手持穿刺针与骨面垂直旋转刺入,深度为达骨膜后再刺入1cm左右,⑤拔出针芯,接10ml注射器,轻轻负压抽取,抽取骨髓液不超过0.2ml,立即涂片,⑥必要时再取骨髓液0.5-2ml,作有核细胞计数,⑦拔出穿刺针,压迫伤口敷以消毒纱布。
注意事项:⑪穿刺术必须严格无菌操作,严防骨髓感染。
初诊病人在治疗前做骨髓穿刺,死亡病例应在死亡后半小时内进行。
⑫抽吸骨髓液动作要缓慢,首次吸取0.2ml4只限作涂片用。
如需作其他检查时,再吸取1-2ml。
⑬由于取材部位的不同,其检验结果也不同。
某些疾病的阳性率也有部位差异,如恶组以胸骨穿刺的阳性率较高。
对某些疑难病症最好选择多部位穿刺,可提高诊断率。
⑭“干抽”是指非技术原因多部位、多次穿刺抽不出骨髓液。
常见有骨髓纤维化、骨髓极度增生、骨髓转移瘤,此时建议作骨髓活检,以协助诊断。
3.骨髓取材情况的判断⑪取材满意:①抽吸骨髓时病人有特殊的痛感;②骨髓液和涂片均有骨髓小粒和脂肪滴;③显微镜观察涂片,可发现骨髓特有的细胞如:巨核细胞、浆细胞、组织嗜碱细胞、成骨细胞、破骨细胞、网状细胞、网状纤维等。
⑫取材失败:部分稀释完全稀释5㈢骨髓细胞学检查1.低倍镜检查⑪观察涂片情况观察涂片染色是否满意,取材是否是真正的骨髓液等。
⑫判断有核细胞增生程度低倍镜下选择细胞分布均匀处,根据骨髓片中有核细胞的密度或有核细胞与成熟红细胞的比例来估计骨髓有核细胞的增生程度。
但在临床上这种增生程度的判断在很大程度上靠检查者的经验来估计。
增生极度活跃:大于500个有核细胞1:1 明显活跃:200~500 1:10 活跃:20~200 1:20低下:3~20 1:50 重度低下:小于3 1:200 ⑬注意巨核细胞的多少,其数量变化较大,一张骨髓涂片上可有7~133个,平均35个。
如将骨髓膜标准化为 1.5cm×3.0(4.5cm²),则参6考值为7~35个。
特发性血小板减少性紫癜时,则应作全片巨核细胞计数,(油镜观察并做分类,至少需观察25个巨核细胞。
)⑭观察骨髓片边缘和尾部,注意寻找有无体积较大的或成堆的特殊病理细胞,如转移癌细胞、戈谢氏细胞、尼曼-匹克细胞、但也需油镜观察,加以确证。
这些细胞的发现,一般说对有关疾病具有肯定诊断的意义。
2.油镜观察骨髓细胞分类先浏览一下该涂片上各类细胞的形态特点,看是否容易识别,然后再分类。
⑪有核细胞的计数及分类:①计数部位的选择:②计数的秩序:③计数的细胞:除巨核细胞,破碎细胞,分裂象以外的有核细胞。
④计数的数目:骨髓计数200个有核细胞或500个以上,增7生减低时可计数100个细胞,也可采取单一快速技术法。
巨核细胞计数,分裂象①分类的同时计数各系的分裂象。
②计数单一系的有核细胞数。
⑫观察的内容①粒系、②红系、③单核、④淋巴、⑤浆细胞、⑥巨核细胞,各系的增生情况,个阶段细胞所占的比例、大小、形态、核染色质、核仁、核形、胞质量多与少、浆色、颗粒。
⑦其他细胞的数量。
⑧骨髓小粒的成份。
⑨有无寄生虫及其他异常细胞。
⑩复查。
3结果计算①各系百分比及各期百分比:②粒比红比值:③巨核细胞总数及各期百分比:4填写骨髓报告单⑪填写申请单(大夫)8⑫对取材、涂片、染色的评价。
⑬增生程度、粒红比值。
⑭描述①骨髓片对粒系、红系、淋巴、单核、巨核、寄生虫及其他异常细胞进行描述,如某系有明显异常,应放在首位进行描述。
②血片情况:③组化结果:⑮诊断意见及建议:肯定诊断:白血病。
支持诊断:贫血。
可疑性诊断:MDS。
排除性诊断:恶组。
形态学描述:对临床诊断提不出具体支持和反对意见,也不能用临床表现加以解释者,可直接描述骨髓象特点(继发性贫血)。
对于复诊病例要与以前骨髓片进行比较,得出疾病目前情况。
9⑯填写日期并签名,图象处理系统。
5、骨髓象检查的注意事项①正确认识细胞是骨髓象检查的前提,检查者必须反复实践,积累经验,需经较长时间的锻炼才能熟练掌握。
不要根据一两个特点就做出肯定或否定的判断。
宁可看得仔细而少看,不可贪多而马虎。
②骨髓的取材、涂片、染色对检验结果可靠性影响很大,操作者必须熟练掌握这些基本功,如果其中任一项不满意,不要勉强的做检查,更不能勉强的做结论。
③血细胞发育阶段的划分④介于两个系之间应采用大数归类法⑤根据伴随细胞及成熟细胞推测原始细胞的归属,结合血象加组化⑥实在难以确定类型的细胞,可列入分类不明细胞,但不易过多。
⑦血小板少也可人为造成(凝固)10⑧应有血象细胞学检查㈣正常骨髓象正常骨髓象应具备四项条件:①有核细胞增生活跃。
②粒/红为2-4:1③各系各阶段细胞所占有核细胞比例大致在正常范围内,粒系占有核细胞的40-60%,原粒<2%,早粒<5%,中粒<8%,晚粒<10%,杆状<20%,分叶<12%。
红细胞约占20~25%,原红<1%,早红<5%,中红<10%,晚红<10%。
淋巴细胞占20-25%,单核细胞<4%。
浆细胞<2%。
巨核细胞在一张15*3cm骨髓涂片上可见7~35个,原巨0,幼巨0~5%,颗粒巨10~27%,产板巨44~60%,裸核8~30%。
血小板成堆可见,形态正常。
⑨其他细胞少见,未见寄生虫和异常细胞。
骨髓象分析㈠有核细胞增生程度1.极度活跃:反映骨髓造血功能亢进(白血病)2.明显活跃:反映骨髓造血功能旺盛(贫血)3.增生活跃:反映骨髓造血功能基本正常(正常骨髓象)4.增生低下:反映骨髓造血功能减低(AA)5.增生重度低下:反映骨髓造血功能衰竭(重型AA)。
㈡血细胞数量改变1。
粒/红比值⑪粒/红比值增加:>5:1,CML,感染⑫粒/红比值正常:2-4:1,两系成比例增加或减少。
⑬粒/红比值减少:<2:1,粒系减少,红系增加,增生性贫血。
㈡粒细胞数量改变1、粒系细胞增多(1)原粒增多:M1,M2a(2)早幼粒增多:M3,粒细胞缺乏,感染(3)中幼粒增多:M2b,,CML。
(4)晚幼粒,杆状核为主:感染。
(5)嗜酸粒细胞增多:变态反应,寄生虫,嗜酸粒细胞白血病,CML。
(6)嗜碱粒细胞增多:嗜碱粒细胞白血病,CML2、粒细胞减少(1)粒细胞缺乏症:(2)AA(3)急性造血停滞㈢红细胞改变1、红细胞增多(1)原红及早幼红增多:红血病(2)中红及晚幼红增多:增生性贫血(HA,MA)(3)晚幼红增多:缺铁(4)正常幼红增多:增生性骨髓象(5)巨幼红细胞增多:巨贫(各种原因引起的巨贫)(6)铁粒幼红细胞增多:铁粒幼红细胞性贫血2、红系细胞减少(1)纯红再障(2)CAA,AA㈣巨核细胞改变1、巨核细胞增多(1)增殖性疾病(2)ITP(3)脾亢2、巨核细胞减少⑪AA,⑫AL。
㈤淋巴细胞改变1、恶性增多(1)原幼淋增多:ALL(2)成熟淋巴细胞增多:CLL2、良性增多(1)传淋,传单,AA(2)病毒感染:巨球蛋白血症㈥单核细胞改变1、恶性增多(1)MDS,急单,粒-单(2)疾病的恢复期(化疗后)2、良性增多(1)粒细胞缺乏症(2)病毒感染㈦其他细胞改变1、浆细胞(1)恶性增多:浆白,MM(2)良性增多:AA,感染2、组织细胞增多(1)恶性增多:恶组,组织细胞性肉瘤(2)良性增多:感染异常血细胞形态学一、胞体异常1、大小异常:巨变,幼红,小原粒2、形态异常:不规则:多形性,伪足状突起成熟红细胞椭圆形,口形,球形,泪滴形,靶形。
二、胞核异常1、数目:双核和多核2、形态异常:不规则形,凹陷,切迹,折叠,扭曲。
3、核染色质4、核仁异常5、异常核分裂三、胞质异常1、胞质量异常:增多或减少2、内容物异常:Auer,中毒性颗粒,空泡变化3、着色异常:多嗜性红细胞4、颗粒异常:增多或减少5、内外质异常:发育不平衡四、核质发育不平衡1、核发育落后于胞质,幼核老质:M2b,巨幼红细胞2、胞质发育落后于核,老核幼质:缺铁性贫血,幼红细胞五、特殊异常细胞MHA异常MHA异常是一种少见的常染册体显性遗传性疾病,本病的特征是:血小板数目少,形态异常,呈巨大血小板,白细胞胞浆中含有浅蓝册包涵体,本病在世界各地有散在报道。
我院发现一个家系中母子二人同患MHA,现报道如下。
病例一:先证者,男,20岁,两岁时开始间断鼻出血,量时多时少不定,可自行止血。
92年8岁时门诊就医检查,血常规:Hb:125g/L,RBC:5.61×1012/L,WBC:8.6×109/L,PLT:58×109/L,中性:0.67,淋巴:0.33。
骨髓象检查:骨髓有核细胞增生活跃,粒系0.52,红系0.31,淋巴细胞0.17,巨核细胞14只,幼稚型3只,颗粒型9只,产板型2只,血小板散在可见,形态异常。
骨髓象特征:巨核细胞成熟受阻,血小板形态异常。
临床考虑血小板减少性紫癜,因无明显出血倾向,未正规接受治疗。
2003年底查体时血小板数明显减少,血常规检查:Hb:144g/L,WBC:4.2×109/L,PLT:22×109/L,中性:0.54,淋巴细胞0.18,单核细胞0.19,嗜酸性粒细胞0.08,嗜碱性粒细胞0.01,第二次骨穿,骨髓有核细胞增生活跃,粒系0.565,发现部分杆状核细胞和分叶核细胞胞浆中可见云雾状蓝斑,形状多不规则,呈圆形、椭圆形、长条形,分布在核的周边,数量不等,多为1~3个,偶见对称分布的蓝斑。
观察了500个中性粒细胞占46.4%,红系0.125,巨核细胞13只,幼稚型1只,颗粒型8只,产板型4只,血小板散在可见,可见巨大血小板,多呈圆形、椭圆形,最大者9μm左右,多数与成熟红细胞大小近似,凝聚性差。