海水中致病性弧菌分离及抗菌药物敏感性分析_韩善桥

中国水产科学 2015年1月, 22(1): 129-138 Journal of Fishery Sciences of China研究论文收稿日期: 2014-03-07; 修订日期: 2014-04-22.基金项目: 国家自然科学基金项目(31202027); 中央级科研院所基本科研业务费专项资金项目(2013A0604). 作者简介: 曾德乾(1986−), 男, 硕士研究生, 主要从事海水鱼类弧菌病害研究. E-mail: qianqian052@ 通信作者: 冯娟(1973−), 博士, 研究员. E-mail: jannyfeng@DOI: 10.3724/SP.J.1118.2015.00098海水养殖鱼哈维弧菌分离株的耐药谱型分析曾德乾1, 2, 冯娟1, 徐力文1, 苏友禄1, 郭志勋11. 中国水产科学研究院 南海水产研究所, 农业部南海渔业资源开发利用重点实验室, 广东 广州 510300;2. 上海海洋大学 水产与生命学院, 上海 201306摘要: 为了解和分析南海沿岸地区临床分离的哈维弧菌(Vibrio harveyi )菌株耐药谱多样性, 采用K-B 法对84株哈维弧菌分离株进行了12种抗生素的敏感性实验, 并通过聚类分析对分离菌株耐药性进行研究, 探讨其抗生素耐药性同菌株时空分布的关系。

实验结果显示, 84株哈维弧菌的耐药谱型数量为26种, 谱型丰富度为31.0%; 多重耐药谱型数量(耐药种数3种以上)为13种, 占总耐药谱型数量的50.0%, 谱型丰富度达59.1%。

海南、广东、广西、福建的分离株分别包含有18种、15种、3种、1种耐药谱型, 4个地区均具有J 型(FUR/AMO)耐药谱; 2007―2012年各年份菌株耐药谱型为: 2007年2种(J 、M, 耐2种抗生素)、2010年4种(A 、B 、J 、M, 耐5种抗生素)、2011年24种(除Y 、Z 外的A-X 耐药谱型, 耐7种抗生素), 2012年26种(包括Y 、Z 耐药谱型, 耐8种抗生素)。

注 ： ＝Ｉ６ ８
物划线接 种于庆大霉 素琼脂 、弧苗琼脂和碱性琼脂平板 ．３ ℃ 了 １ ２ 养。挑取 可疑菌落做氧化酶和粘丝实验后接种克 氏 ８ ４ｈ培 双糖 。符合弧苗特征的再 以 （ 群多价 和 Ｏ ３ 霍乱弧 菌诊 ¨ １９群
断血 清做玻片凝集试验。阴性 者排腺 Ｏ １和 Ｏ ３ １９群霍乱弧菌 ，
表 １ 海 、水产 品中致病性弧菌检出率及构成 比
１１ 标本来源 ；采集 当 日由飞机运往 西安 市海 、水产 品销售 ．
市场及各大饭 店的鲜活 海 、水产 品 １６份 ，其 中蟹类 ４ ８ ４份 ，
虾类 ２ ８份 ，鱼类 ｌ ０份 ，贝壳类 ８ 份 ．甲鱼 ２ 份 ４ ０
１２ 分离培养 ：鱼 类标本 以无 菌操 作剖 取鳃 部和 肠 内容 物 ，
贝类 以无 菌手续 取出壳 内软组 织 ．分别 剪碎 后取 １ ０ｇ置 １０ １ ７ ｍ 碱性 蛋 白胨 水 （ Ｐ １ Ａ 中 ，蟹 类 及 甲鱼 以无 菌 棉 签 蘸 取 Ａ Ｗ 沫擦 表面后置 １ ｌ Ｐ 中 ，３ ｃ Ｐ Ｏｍ Ａ Ｗ ７ｃ过夜 培养 ，取 １ 培 养物加＾ １ ｌ Ｐ 中．３ ｃ６ 第 ２次增 菌 ，取表面生长 ０ｍ Ｗ Ａ ７ｃ —８ｈ
亡造成 检 出率 低。有资 料 表 明Ｉ ，从 自由市场 采集 的标 本 ， ３ Ｊ 检出率 ４∞％，而直接 从鱼 场 和海边 采集 的鱼 和 贝壳类 ．检
２２ 致病性 试验 ：对 ２０ ． ０ Ｏ年分离的 ９株致病性弧菌 （ 中河 其 弧菌 ４株 、非 Ｏｌ 霍乱弧菌 ３株 ，霍 利斯弧菌 、溶藻弧菌各 群 １ ）进行试 验。 株
２２ １ 小 白鼠毒性试 验 ：试 验结果表 明 ．教 测试菌株感染 小
白鼠 ２ｈ后 ，均 出现程度不 同的病症或死亡 ：小白鼠表现为精 神萎靡 ，反应迟钝 ，竖毛 ，呼吸急促 ，蜷 曲不 动 ，双眼闭合 ，

警惕可怕的海洋创伤弧菌杀手每年夏季,将有大量人群涌向大海,尽情享受海水和海鲜对人们的恩赐；再加近年来大量海鲜输入内陆和促进内陆人尝鲜的热潮不断高涨。

由于人们对这类海洋弧菌的杀伤力普遍缺乏应有的防范意识和措施,促使这类原本较少见的(特别是病死)病例，近年来渐有增多和向内陆扩散的趋势,给旅游欢乐和海鲜品尝带来无穷悲伤和终身遗憾。

再加医务人员对此类重症缺乏诊疗经验和处理勇气,漏诊误治实例间有所闻。

这绝不是危言耸听,一旦遭袭后果严重,不能不引起（特别是整体抗病能力较低的内陆）人们的重视.现将我今年夏季协助外院救治过的有关两例该病防治体会简介如下,供参考。

发病机理海洋创伤弧菌（Vibriovulnificus），乃是栖息于海洋中以及海鲜体内外的一种常见海洋弧形细菌中的一种。

它“怕冷”，因而冬天几乎没法存活，夏天是其活动的高峰期。

这种细菌“嗜盐”，故只能在海水中存活，但可从蛤蜊、螃蟹、贝壳及鱼虾等类海产品中检出。

常好通过肢体远端皮肤上的刺伤、割伤或口腔等小伤口侵入人体，对抗病能力低下的易感人群常易致病。

临床表现临床上大多以脚趾或手指远端的伤口接触到被创伤弧菌污染的海水或上述海产品而被感染。

对一般抗病能力较强的健康人群或经常接触海水和海鲜的近海人们来说，感染多半很轻微或不发病。

但对酗酒、肝病、糖尿病、风湿性关节炎、慢性肾衰、淋巴瘤以及长期服用免疫抑制剂药物等高危人群以及内陆人们来说，由于其免疫功能和抗病能力低下，一旦感染此类弧菌后，局部皮膚很快出现不断扩大的紅腫热痛、出血性水泡和皮肤变黑坏死等症状。

当深部筋膜和肌肉遭受侵犯时，感染常順沿肌肉間隙快速（1~2天内）蔓延到大腿或上臂，引发大面积的肌肉及筋膜严重坏疽溃烂和发出恶臭。

創傷弧菌以及坏死组织释放出的強烈毒素大量進入人体血液后，將引发高热、敗血症和中毒性休克等严重症状；最后多因全身器官（包括脑）功能衰竭而致病人于发病后1~2天内死于严重的败血症和毒血症（病死率一般高達50%，重症者可高达90%）。

海水养殖斜带石斑鱼致病性鳗弧菌的分离鉴定及药敏试验饶颖竹;梁静真;陈蓉;杨廷宝【期刊名称】《南方农业学报》【年(卷),期】2016(047)008【摘要】[目的]了解海水养殖斜带石斑鱼弧菌病的病原,为生产中有效防治石斑鱼弧菌病提供科学依据.[方法]采用常规方法进行患病斜带石斑鱼病原菌分离,人工感染试验确定其致病性,以形态学观察、生理生化测试结合16SrRNA和gyrB基因序列分析等方法进行菌株鉴定,并以K-B纸片扩散法进行药敏试验.[结果]从广东省湛江市某养殖场患病斜带石斑鱼中分离获得l株优势菌株(M1),经人工感染试验证实其对斜带石斑鱼具有较强的致病性.M1菌株的16S rRNA序列和gyrB基因序列与GenBank数据库中的鳗弧菌具有较高相似性,其同源性均在95.7％以上.根据M1菌株的形态特征、生理生化特性及分子特征,可鉴定其属于弧菌属的鳗弧菌(Vibrio anguillarum).药敏试验结果显示,M1菌株对庆大霉素、新生霉素、阿奇霉素、氟苯尼考、利福平、诺氟沙星和左氟沙星等7种药物高度敏感,对阿洛西林、强力霉素、链霉素、复方新诺明和甲氧苄啶等14种药物敏感.[结论]引起广东省湛江市某养殖场海水养殖患病斜带石斑鱼弧菌病的病原菌为弧菌属鳗弧菌,生产中可适度选用氟苯尼考、强力霉素、复方新诺明和甲氧苄啶等抗菌药物进行防治.【总页数】7页(P1416-1422)【作者】饶颖竹;梁静真;陈蓉;杨廷宝【作者单位】岭南师范学院生命科学与技术学院/岭南师范学院应用生物技术研究所,广东湛江524048;广西大学动物科学技术学院,南宁530005;岭南师范学院生命科学与技术学院/岭南师范学院应用生物技术研究所,广东湛江524048;中山大学生命科学学院寄生生物研究中心/有害生物控制与生物资源利用国家重点实验室,广州510275【正文语种】中文【中图分类】S965.334.42【相关文献】1.海水养殖斜带石斑鱼致病性鳗弧菌的分离鉴定及药敏试验 [J], 饶颖竹;梁静真;陈蓉;杨廷宝;2.海水养殖动物致病性(Pathogenicity)鳗弧菌(Vibro anguillarum)的研究综述 [J], 张新中;张世秀;李海平;谢珍玉;周永灿3.养殖松江鲈鳗弧菌的分离鉴定及药敏试验 [J], 夏苏东;尤宏争;李楠;郝爽;尹川;张丹;张振国;吕爽;仲雷4.养殖松江鲈鳗弧菌的分离鉴定及药敏试验 [J], 夏苏东;尤宏争;李楠;郝爽;尹川;张丹;张振国;吕爽;仲雷5.蛋鸡水线绿脓杆菌的分离鉴定、药敏试验和致病性试验 [J], 周业飞;张琰杰;柳依灵因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。