公选-抗菌药物的敏感性试验

四、抗菌药物敏感性试验（一）药敏试验的目的测定病原微生物对化学治疗药物敏感性的试验称为化疗药物敏感性试验（Drug sensitivity test ）,简称药敏试验。

药敏试验的主要目的是：①用于测定新的抗菌药物或制剂的抗菌谱；②对病灶分离菌进行流行病学调查，主要应用于测定细菌经过多年后敏感性的变化情况和地区特异性；③在临床治疗感染性疾病时，针对病原菌选择合适的首选药物品种。

（二）药敏试验的原理及种类药敏试验是通过培养基培养的细菌确定细菌对药物的敏感性方法。

将被检菌接种在适当的培养基上，然后加上不同种类或不同浓度的抗菌药物（或制剂），观察细菌生长发育的速度和程度。

用药后，细菌在培养基上停止生长并且死亡，抑菌圈清晰，说明细菌对药物敏感，药物表现有较强的杀菌作用；用药后，细菌停止生长，但液体培养基经过一定时间后还可能出现浑浊或固体培养基上的抑菌圈不清晰，说明细菌对药物比较敏感，预示药物对被检细菌只是起抑菌作用。

通常判定一种药物对细菌的杀菌或抑菌作用的强度指标是固体培养基中抑菌圈的大小，但这也不是绝对的，因为抑菌圈的大小与药物对培养基的渗透性是密切相关的。

药敏试验方法较多，但在原理上不外乎是稀释法和扩散法两大类。

而扩散法（包括纸片法、管碟法）通常适用于临床治疗选择药物。

（三）常用培养基制作法1．普通肉汤培养基牛肉浸膏 3.0克蛋白胨10.0克氯化钠 5.0克蒸馏水1000毫升放在三角烧瓶中，微温溶解后，调节pH值至7.4~7.6，煮沸10分钟，冷却后的pH 值为7.2 ± 0.2。

15磅压力下灭菌15分钟（115C灭菌30分钟）即得。

本培养基可用作为固体、鉴别、选择等培养基制造的基础原料，大部分细菌都能在其中生长。

1 ．普通肉汤琼脂培养基照上述普通肉汤培养基的配方及制法，加入15~20 克琼脂，加热溶解后，调节pH 值使灭菌后为7.2 ±0.2，分装，115C灭菌30分钟，即得。

3．0 . 5%葡萄糖肉汤培养基蛋白胨10 克氯化钠 5 克葡萄糖 5 克牛肉浸膏3 克蒸馏水1000 毫升微温溶解后，调节pH 值至弱碱性，煮沸后，加葡萄糖溶解，摇匀，滤清，调节pH 值使灭菌后为7.2 ±0.2，分装，115C灭菌30分钟，即得。

抗菌药物敏感性试验执行标准抗菌药物敏感性试验是临床微生物学中非常重要的一项实验，它可以帮助医生选择最有效的抗菌药物来治疗感染性疾病。

执行标准的严格性和准确性对于试验结果的可靠性至关重要。

下面将介绍抗菌药物敏感性试验执行标准的相关内容。

首先，进行抗菌药物敏感性试验前，需要准备好所需的培养基、试验材料和各种试剂。

同时，要做好实验室的消毒和无菌操作，以确保试验的准确性和可靠性。

在进行试验时，需要按照严格的操作规程进行。

首先，要准备好待测菌株的悬浮液，然后按照一定比例将其接种到含有不同浓度抗菌药物的琼脂平板上。

接种后，要在恒温培养箱中进行培养，培养时间一般为16-18小时。

培养结束后，需要观察菌落的生长情况，并进行相关的数据记录和分析。

根据菌落的生长情况和抗菌药物的浓度，可以判断出菌株对抗菌药物的敏感性。

在记录和分析数据时，要注意细致入微，确保数据的准确性和可靠性。

在执行标准中，对试验结果的解释和判定也非常重要。

根据试验结果，可以判断出菌株对抗菌药物的敏感性、耐药性或者中间敏感性。

这些判定对于临床治疗具有指导意义，可以帮助医生选择最合适的抗菌药物来治疗感染性疾病。

此外，在执行标准中，还需要对试验过程中可能出现的干扰因素进行控制和排除。

比如，培养条件、试剂质量、操作技术等都可能对试验结果产生影响，需要在试验过程中进行严格的控制和调节。

总的来说，抗菌药物敏感性试验执行标准的严格性和准确性对于试验结果的可靠性至关重要。

在实验过程中，需要严格按照操作规程进行，确保试验过程的准确性和可靠性。

同时，对试验结果的解释和判定也非常重要，可以帮助医生选择最合适的抗菌药物来治疗感染性疾病。

在执行标准中，还需要对试验过程中可能出现的干扰因素进行控制和排除，以确保试验结果的准确性和可靠性。

目前，我国抗菌药物的应用现状是临床无指征治疗性、预防性用药严重及选择错误的品种、剂量及疗程。

而不合理用药可导致治疗失败、不良反应增多、细菌耐药性增长迅猛、医药资源大量消耗等不良后果。

而我们应该如何为临床正确选用抗生素呢？正确的答案是，我们应该根据感染菌株的药物敏感性试验合理选用抗生素。

抗菌药物的敏感性试验就是测定抗菌药物在体外抑制病原微生物生长的效力。

目前，我科遵循美国临床实验室标准化研究所（CLSI）2010版抗微生物药物敏感性试验执行标准进行操作。

由于CLSI标准的公认程度和准确性，许多国家都采用该标准。

该标准根据不同的细菌分类（如肠杆菌科、葡萄球菌属、铜绿假单胞菌等）制定可选用的抗生素及其药敏试验的判读标准，并将它们分成四组：A组：一级试验并常规首选报告的抗微生物药物；B组：一级试验，临床使用的主要抗生素（尤其在院内感染时）有选择报告的药物；C组：补充试验，有选择报告的药物；U组：补充试验，仅用于泌尿道感染细菌的抗微生物药物。

CLSI标准所制定的三级划分制及临床意义如下：高度敏感（S）：用该种药物常用剂量治疗有效；中介（I）：仅在应用高剂量抗菌药物时才有效，或者细菌处于体内抗菌药物的浓缩部位（如尿液、胆汁等）才被抑制；耐药（R）：药物对某一细菌的MIC高于药物在血或体液中可能达到的浓度，有时细菌能产生灭活抗菌药物的酶，则不论其MIC值大小如何，均应判定该菌为耐药。

在临床实践中，我们常可以听到一些关于细菌药敏试验与临床药效不符的抱怨。

这一现象的出现，国内外的一些文献认为主要与以下几方面有关。

①与临床是否正确地获得合格的标本至为相关；我们应规范标本的取材、送检及减少送检污染部位的标本（如：痰、咽拭子等）。

②可能出现真菌等二重感染。

③CLSI药敏标准制定中的局限性。

④细菌感染的诊断是否正确。

⑤药敏试验操作不当。

⑥用药剂量不足或出现耐药菌株。

⑦一般医院的微生物实验室做细菌培养仅限于需氧非苛养菌的检测。

四、抗菌药物敏感性试验（一）药敏试验的目的测定病原微生物对化学治疗药物敏感性的试验称为化疗药物敏感性试验（Drug sensitivity test），简称药敏试验。

药敏试验的主要目的是：①用于测定新的抗菌药物或制剂的抗菌谱；②对病灶分离菌进行流行病学调查，主要应用于测定细菌经过多年后敏感性的变化情况和地区特异性；③在临床治疗感染性疾病时，针对病原菌选择合适的首选药物品种。

（二）药敏试验的原理及种类药敏试验是通过培养基培养的细菌确定细菌对药物的敏感性方法。

将被检菌接种在适当的培养基上，然后加上不同种类或不同浓度的抗菌药物（或制剂），观察细菌生长发育的速度和程度。

用药后，细菌在培养基上停止生长并且死亡，抑菌圈清晰，说明细菌对药物敏感，药物表现有较强的杀菌作用；用药后，细菌停止生长，但液体培养基经过一定时间后还可能出现浑浊或固体培养基上的抑菌圈不清晰，说明细菌对药物比较敏感，预示药物对被检细菌只是起抑菌作用。

通常判定一种药物对细菌的杀菌或抑菌作用的强度指标是固体培养基中抑菌圈的大小，但这也不是绝对的，因为抑菌圈的大小与药物对培养基的渗透性是密切相关的。

药敏试验方法较多，但在原理上不外乎是稀释法和扩散法两大类。

而扩散法（包括纸片法、管碟法）通常适用于临床治疗选择药物。

（三）常用培养基制作法1．普通肉汤培养基牛肉浸膏 3.0克蛋白胨 10.0克氯化钠 5.0克蒸馏水 1000毫升放在三角烧瓶中，微温溶解后，调节pH值至7.4~7.6，煮沸10分钟，冷却后的pH值为7.2±0.2。

15磅压力下灭菌15分钟（115℃灭菌30分钟）即得。

本培养基可用作为固体、鉴别、选择等培养基制造的基础原料，大部分细菌都能在其中生长。

1．普通肉汤琼脂培养基照上述普通肉汤培养基的配方及制法，加入15~20克琼脂，加热溶解后，调节pH值使灭菌后为7.2±0.2，分装，115℃灭菌30分钟，即得。

3．0.5%葡萄糖肉汤培养基蛋白胨 10克氯化钠 5克葡萄糖 5克牛肉浸膏 3克蒸馏水 1000毫升微温溶解后，调节pH值至弱碱性，煮沸后，加葡萄糖溶解，摇匀，滤清，调节pH值使灭菌后为7.2±0.2，分装，115℃灭菌30分钟，即得。