浅谈马铃薯脱毒快繁流程步奏及配方
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马铃薯脱毒试管苗快繁技术一、引言马铃薯是我国重要的粮食作物之一,也是世界上著名的经济植物之一。
然而由于病毒的不断侵袭和疫病的流行,马铃薯的产量和品质不断下降,给农民带来了巨大的经济损失。
因此,繁殖健康无害的马铃薯脱毒试管苗已成为种植业的重要课题。
本文将就马铃薯脱毒试管苗快繁技术进行详细描述。
马铃薯脱毒试管苗快繁技术是指利用组织培养技术,从马铃薯营养组织中培养出无菌结果愈伤组织,然后通过激素处理,使其分化成愈伤组织和根发生体,并再次通过激素培养,使其分化成幼苗。
经过快速繁殖和转移,只需数月就可以获得大量无菌试管苗。
1、原种资料筛选首先要去毒源,选择健康、无病毒的马铃薯株作为原种资料。
2、表型鉴定通过观察和检测,鉴定选定的原种资料是否存在病害。
3、进行消毒处理将所选的马铃薯根茎进行消毒处理,保证原种资料无菌。
4、组织培养将原种资料营养组织分离出来,并进行无菌培养,培养至结果愈伤组织。
5、激素处理将结果愈伤组织分裂成愈伤组织和根发生体,经过激素处理,使愈伤组织分化成为幼苗。
6、快速繁殖和转移幼苗经过快速繁殖和转移,可以在数月时间内获得大量的无菌试管苗。
1、高效快捷马铃薯组织培养技术可以在短时间内获得大量无菌马铃薯苗,极大地提高了马铃薯繁殖的效率。
2、无病毒由于是无菌培养,可以避免病毒的传播和侵袭,从根本上解决了马铃薯病害的问题。
3、一致性强试管苗的形态、生长状态、品种、性状和同一生产人群下的分布均一。
4、推广灵活马铃薯组织培养技术可以根据不同地区和不同需求进行灵活推广和应用。
马铃薯脱毒试管苗快繁技术具有广阔的应用前景,可以成为解决马铃薯病害的重要手段。
同时,随着科技不断发展和创新,马铃薯脱毒试管苗快繁技术将进一步提高繁殖效率和质量,并推动种植业的发展。
马铃薯脱毒试管苗快繁技术马铃薯作为我国重要的经济作物之一,是广大农民和经济发展所依靠的重要农业领域。
而随着现代农业发展的不断推进,马铃薯种植也面临着各种各样的困难和问题。
其中,病毒病是马铃薯种植过程中最严重的问题之一。
为了解决这一问题,现在越来越多的科技工作者开始探索马铃薯脱毒试管苗快繁技术。
以下就从马铃薯脱毒试管苗的定义、制备流程、优势及应用等方面进行详细介绍。
马铃薯脱毒试管苗是指利用组织培养和生物学技术手段在无菌条件下,从被病毒污染的母株中取材,经过一系列处理,得到一定数量无菌苗,最终培育成符合生产要求的健康幼苗。
二、制备流程1、材料准备选择健康的马铃薯作为原材料,对其进行外观检查和芽眼筛选。
同时还需准备有较高的生长潜力和再生能力,无菌培养必需的基本培养基、辅助培养基及添加适量激素和营养物质的诱导培养基等。
2、无菌处理将马铃薯进行消毒处理,以确保材料无菌化。
处理方法包括酒精消毒、盐酸消毒、滴定消毒等。
3、切瘤、分化在消毒的基础上,进行切瘤和分化处理,分离出芽鳖、块茎鳖、滋液鳖等预备试管苗材料。
4、根、茎、叶分离通过培养基的诱导,将原始材料中的根、茎、叶进行分离和再生,形成独立的无菌苗,以便进行大规模培养和繁殖。
5、无菌培养得到无菌苗后,进行无菌培养,增殖数量,以期达到无菌苗的快速繁殖和生长。
6、弱化适应繁殖的苗期过长、适应性不足,则会极大地限制试管苗的生长和繁殖。
为此,可以通过加强营养管理、控制温度环境以加强其适应能力。
三、优势及应用1、提高繁殖能力试管苗繁殖效率高,可以在很短时间内繁殖出大量的健康马铃薯苗,提高其生产效益。
2、保证生产质量脱毒试管苗繁殖过程严格按照国家标准执行,每批苗都具有相同的生长特征和品质,可以保证生产质量。
3、有效防控病害通过脱毒试管苗快繁技术,可以有效避免病毒病等病害的传播,提高马铃薯的健康状态,减少生产损失。
4、推动可持续发展脱毒试管苗效益显著,有助于推动现代化农业发展和可持续发展,为农民增收和增加就业构建了良好的平台。
玉米秸秆基质生产马铃薯脱毒微型薯技术规程一、技术背景马铃薯是我国重要的经济作物之一,但常常受到病毒病的威胁,导致产量下降和品质降低。
为了解决这个问题,研究人员开发了玉米秸秆基质生产马铃薯脱毒微型薯的技术,可以高效地去除马铃薯病毒,提高产量和品质。
二、技术原理1. 材料准备:收集健康的马铃薯种薯和玉米秸秆作为基质。
2. 秧苗繁殖:将马铃薯种薯垫高温脱毒30分钟,然后切割成小块,埋入玉米秸秆基质中,经过一段时间的培养,培育出健康的马铃薯秧苗。
3. 脱毒培养:将马铃薯秧苗转接到含有植物生长调控物质的培养基中,经过适当的温度和光照条件下培养,脱除马铃薯病毒。
4. 繁殖生产:将脱毒的马铃薯秧苗持续传代培养,以获得足够数量的脱毒马铃薯微型薯。
四、技术要点1. 材料要求:选择健康的马铃薯种薯和无病毒的玉米秸秆作为基质。
2. 温度控制:不同阶段需要适宜的温度和湿度控制,保证马铃薯秧苗的正常生长。
3. 病毒检测:在培养过程中,定期进行病毒检测,及时发现并处理感染的植株。
4. 研究成果:根据不同病毒类型和地区,优化培养条件和处理方法,提高脱毒效果和产量。
五、技术优势1. 高效性:通过玉米秸秆基质生产马铃薯脱毒微型薯技术,可以在较短时间内大量繁殖健康的马铃薯微型薯。
2. 可行性:该技术所需材料易得,操作简单,适用于不同农田环境。
3. 经济效益:使用脱毒的马铃薯微型薯作为种薯,可以提高产量和质量,减少病毒病的损失。
六、技术应用玉米秸秆基质生产马铃薯脱毒微型薯技术可以广泛应用于马铃薯种植行业,提高种薯质量,避免病毒病的传播,增加产量和收益。
该技术也可推广应用于其他作物的脱毒繁殖。
马铃薯组织培养脱毒快繁植物组织培养(Plant tissue culture)是指在无菌的条件下,将离体的植物(根、茎、叶、花、果实、种子等)、组织(形成层、花药组织、胚乳、皮层等)、细胞(体细胞和生殖细胞)以及原生质体,培养在人工配制的培养基上,给予适当的培养条件,使其长成完整的植株。
由于培养物是脱离植物母体,在玻璃瓶中进行培养,所以也叫做离体培养。
在有些情况下,再分化也可不经愈伤组织阶段,而直接发生于脱分化的细胞。
[1]植物组织培养脱毒快繁是人工在无菌条件下利用植物体的一部分,在人工控制的营养和环境条件下繁殖植物,脱除病毒得到无毒苗株,继而在大田快速繁殖的技术。
脱毒及离体快繁,这是目前植物组织培养应用最多、最广泛和是有效的一个方面。
主要是进行茎尖培养脱除病毒。
对于脱毒苗、新育成、新引进、稀缺良种、优良单株、濒危植物和基因工程植株等可通过离体快速繁殖,同时可不受地区和气候的影响,比传统的繁殖方法快数万倍。
植物组织培养已发展成为一门富有生命力的学科。
[2]植物组织技术在农业上的应用有很多方面,其中植物脱毒和离体快速繁殖是目前植物组织培养应用最多、最有效的一个领域。
通过植物生物技术改良作物是以后农业科学领域最重要的发展之一。
首先用茎尖脱毒获得无病毒植株成功的是法国人莫勒尔,他们用大丽花为原料,在1952 年试验产生了无病毒植株。
在1955 年以马铃薯为材料产生了无病毒植株。
农业生产中,许多农作物都带有病毒,无性繁殖方式植物如马铃薯、甘薯、大蒜等尤为严重,但是感病植株并非每个部位都带有病毒。
[3]一、国内外研究动态(一)研究背景栽培种的马铃薯(Solanurn tuberosurn)是双子叶种子植物, 属茄科(Solanceae)茄属(Solanum)的一年生草本植物,生产上绝大多数是利用块茎进行无性繁殖。
[4]马铃薯用块茎繁殖,植株长势逐年削弱、矮化,分枝变小,结薯变小,产量逐年下降,甚至绝产,这种现象叫做种性退化。
脱毒马铃薯高产栽培管理技术脱毒马铃薯高产栽培管理技术是指利用脱毒苗种植和科学管理的方法,提高马铃薯的产量和质量。
下面将介绍脱毒马铃薯高产栽培管理技术的具体措施和步骤。
一、脱毒马铃薯的选种和繁殖1.选择健康无病、无害虫的优良母株作为种薯,并进行分疪、脱毒处理。
分疪是指将母株切割成多份,每份保留一个芽眼,然后在消毒后的培养基上进行培养,以繁殖出健康的薯苗。
脱毒则是利用化学消毒剂或热处理法使薯苗免受病毒和其他病原体的感染。
二、脱毒马铃薯的育苗和定植1.选用营养成分丰富的育苗基质,如稻谷壳、藻饼等。
将分疪并脱毒处理过的马铃薯母薯放入育苗床中,将种植密度控制在每亩5000株左右,保持相对湿润的环境,适时给予适量的光照和温度。
2.脱毒马铃薯的定植要选用适当的日期和地点。
一般在秋季或春季早期进行定植。
选用肥沃的土壤进行种植,土壤PH值在6.0-7.0之间,土壤深厚,有良好的排水条件。
三、脱毒马铃薯的管理1.施肥:脱毒马铃薯在生长过程中对肥料的需求较高。
一般在定植前进行底肥施用,根据土壤肥力进行施肥量的调整,一般每亩施用有机肥2000-3000公斤,磷肥10-15公斤,钾肥10-15公斤。
根据植株的生长情况和需求适量进行追肥。
2.灌溉:脱毒马铃薯的灌溉要注重时机和水量的掌握。
定植后的早期生长阶段,要保持土壤湿润,但不可积水;中后期则要控制灌溉的频率和水量,避免过度湿润。
3.病虫害的防治:定期进行病虫害的监测,一旦发现病虫害,采取及时的防治措施。
如利用生物防治、化学药剂等进行病虫害的防治,同时注意除草和清除病虫害源。
四、脱毒马铃薯的收获和储存1.脱毒马铃薯的收获要在植株生长合适的时候进行,一般以植株叶片凋萎70%以上为宜。
收获时要避免刺伤或损伤薯块,以减少病原体侵入和感染。
2.收获后应及时进行薯块的清理、晾晒和分类。
将有病害或损伤的薯块进行淘汰,清洗后放置在通风、阴凉干燥的地方晾晒。
3.储存时要选择通风良好、温度适宜、湿度适中的地方进行储存,避免薯块受潮或过热。
实验序号实验五实验名称马铃薯脱毒试管苗的快繁和微型薯的诱导实验时间2010年6月——8月实验室组培实验室1.实验目的(1)马铃薯脱毒试管苗的快速繁殖;(2)马铃薯试管薯的诱导。
通过本次实验,进一步熟悉无菌操作技术;了解马铃薯脱毒种薯生产的过程,为马铃薯脱毒种薯的生产提供必要的基础苗。
2.实验原理、设备及材料:实验仪器及用具:50mL三角瓶、500mL搪瓷杯、25mL量筒、1mL和5mL 吸管、PH试纸、封口膜、棉线、药勺、称量纸、电炉、普通电子天平、酒精棉球、小块纱布、灭菌滤纸、枪状镊子、手术剪、解剖刀、已灭菌培养皿、酒精灯、超净工作台。
药品和试剂:MS基本培养基母液、马铃薯快速繁殖培养基、蒸馏水、75% 酒精、蔗糖、琼脂、NAA、6-BA、水解酪蛋白、1moL/L HCL、1mol/LNaOH。
3.实验方法步骤及注意事项:(一)实验准备:材料:马铃薯脱毒试管苗。
培养基:(1)单节茎段繁殖:MS+蔗糖2.5%+琼脂0.8%(2)微型薯诱导:MS+BAP(5mg/L)+CCC(500mg/L)+蔗糖2%(3)微型薯保存:MS+蔗糖2.5%+甘露醇4%+琼脂0.8%.(二)单节茎段繁殖1).在无菌条件下,将由茎尖培养得到的脱毒小植株从试管中取出,放在无菌培养皿中。
2)将小植株切成单节茎段,每段只带有1——2个叶片和腋芽。
将茎段植入装有mL单节茎段繁殖培养基的试管中,每管4个茎段。
3)将试管置于培养室中培养。
培养条件是:18——22C,每天光照16h,光强1000lx,。
4)2——3个月后,每个茎段都能长出十多个叶片,为开始液体振荡培养提供了足够的材料。
(三)液体振荡培养:1)把由单节茎段培养得到的小植株打顶去根后,整个投入液体振荡繁殖培养基中。
每个250mL三角瓶装20mL培养基,接种5个茎条。
每个茎条长约4cm,沿其全长着生6个腋芽。
2)接种后将三角瓶置于摇床上,摇床转速60r/min,每天光照16h,光照1000lx。
马铃薯脱毒试管苗快繁技术马铃薯是全球重要的食用作物之一,其种植面积和产量在世界范围内都很大。
马铃薯种薯中常常存在着多种病毒,这些病毒会严重影响马铃薯的生长和产量。
研究人员开发了马铃薯脱毒试管苗快繁技术,该技术能够高效地将马铃薯病毒脱毒,并快速繁殖出健康的马铃薯苗,为马铃薯种植业提供了重要的支持。
马铃薯脱毒试管苗快繁技术基于组织培养技术,利用马铃薯体细胞和组织的特性进行操作。
从感染病毒的马铃薯植株中采集组织和细胞,经过消毒处理后,将其接种到含有适当培养基的试管中。
培养基中含有营养物质、激素和抗生素等成分,可以提供细胞生长所需要的养分和激素,同时抗生素可以防止细菌和真菌感染。
随着培养的进行,马铃薯细胞和组织会不断增殖和分化,形成新的组织。
一段时间后,研究人员会对试管中的新组织进行检测,以判断是否成功脱毒。
常用的检测方法有PCR、ELISA等,通过检测病毒的存在来判断是否脱毒成功。
若检测结果为阴性,则表示新组织已经脱毒,并且不再存在病毒感染。
此时,研究人员会进一步将新组织进行快速繁殖。
马铃薯脱毒试管苗快繁技术的快速繁殖过程主要是通过分化和增殖组织来实现的。
研究人员会将脱毒成功的新组织进行切割,然后将切割后的组织培养在含有适当培养基的培养瓶中,利用培养基提供的营养物质和激素等,新组织会不断分化并形成新的马铃薯苗。
这样一来,可以快速繁殖出大量的健康马铃薯苗,为马铃薯种植提供了可靠的种苗。
马铃薯脱毒试管苗快繁技术具有许多优势。
通过试管培养,可以在较短的时间内大量繁殖出健康的马铃薯苗,提供了高效的种苗来源。
通过脱毒处理,可以去除马铃薯病毒,保证种苗的健康。
该技术相比传统繁殖方法,减少了土地的占用和对环境的侵害,有利于可持续农业的发展。
马铃薯脱毒试管苗快繁技术马铃薯是一种重要的农作物,在全球范围内广泛种植。
由于马铃薯易受到病毒感染,其产量和质量往往受到严重影响。
为了解决这个问题,研究人员开发了马铃薯试管苗快繁技术,能够快速繁殖健康、无病毒的马铃薯苗。
马铃薯脱毒试管苗快繁技术是一种通过离体培养的方法,利用马铃薯的无菌组织进行繁殖。
从健康的马铃薯植株中取得组织样品,将其表面进行消毒处理,以去除可能带有病毒的污染物。
然后,将组织样品切割成小块,将其置于含有适宜培养基的试管中。
培养基是一种含有营养物质和激素的液体或凝胶介质,能够提供细胞生长所需的营养物质和环境条件。
马铃薯试管苗通常使用的培养基是含有葡萄糖、氨基酸和维生素的MS培养基。
在培养基中,马铃薯组织样品会开始不断分裂和增殖,形成新的细胞。
在试管苗的培养过程中,需要注意控制温度、光照和湿度等环境条件,以促进马铃薯组织的生长和发育。
通常情况下,温度保持在20-25摄氏度,光照强度为3000-5000勒克斯,湿度保持在60-70%左右。
经过一段时间的培养,马铃薯组织样品会形成白色的愈伤组织,然后再通过再生诱导、分化和生根等步骤,最终形成健康的无菌试管苗。
在试管苗生长发育良好后,可以将其转移到土壤中进行实验室外的进一步繁殖。
马铃薯脱毒试管苗快繁技术的优点在于,它能够快速繁殖大量的无病毒马铃薯苗。
相比传统的马铃薯繁殖方法,试管苗技术更加高效和可靠,并且能够避免病毒的传播。
这对于提高马铃薯产量和质量,减少病毒病害的发生具有重要意义。
马铃薯脱毒试管苗快繁技术是一种重要的马铃薯繁殖方法,能够快速繁殖健康、无病毒的马铃薯苗。
随着这项技术的进一步发展和应用,相信可以为马铃薯产业的发展做出更大的贡献。
马铃薯脱毒种薯繁育技术(一)一、良种繁育体系马铃薯良种繁育过程中,要注重防止机械混杂,保证品种纯度,还要防止病毒的再侵染和病原菌的侵染,以保证为生产提供优质种薯。
建立良种繁育体系,要按照品种用途和种植区域举行合理规划,有方案地支配各级原种及良种的生产。
严格禁止超代薯进入种薯市场。
对繁殖的各级种薯都要举行检验,质量合格方可进入生产。
我国马铃薯良种繁育体系是从1976年开头建立和完美的。
按区域划分基本分为北方春作一季繁种区、中原春秋二作繁种区。
现将这两个繁种区的繁育程序介绍如下。
(1)北方春作一季繁种区该区是我国重要的种薯繁殖基地。
如黑龙江省每年调出种薯几十万吨,供给各省。
内蒙古自治区每年也有大量种薯调运各省。
这些繁殖基地主要建在纬度高、传毒媒介少、气候冷凉、交通便利的地区。
该区的良种繁育体系普通为五年五级制;有些单位采取四年四级制。
随着微型薯生产技术的不断成熟,生产的规模不断扩大,生产成本随之下降,现在推行的是三级制。
在各级种薯繁殖过程中,都采纳种薯催芽促早熟栽培,生育早期拔除病株,按照有翅蚜迁飞测报,在蚜虫迁飞盛期到来后的一周至十天将薯秧割掉,防止蚜虫传扬的病毒侵染块茎,以及密植早收生产小种薯举行整薯播种,防止切刀传染病毒或病菌。
(2)中原春秋二作繁种区该区春马铃薯生育时节气温较高,蚜虫活动频繁,植株易感染病毒,因此必需通过阳畦或日光温室早种早收,避免蚜虫迁飞期,防止病毒再侵染。
秋繁则适当推迟播种期,避开病毒再侵染。
中原春秋二作繁种虽可解决从北方--作区大量调种造成的运送压力和防止晚疫病、环腐病等随种薯调入的问题,但是因为早春阳畦或日光温室成本高,秋繁感染病毒和病害的机率较大,脱毒效果降低。
因此,中原春秋二作区繁种,应重点防止病毒和病菌的侵染,确保种薯的质量。
建立良种繁育体系是保证种薯质量、满足生产需要的须要基础条件,各地可按照当地市场需要确定品种及繁种方式。
2.良种繁育体系的建设目前因为组织培养所需的设备、药品及设施价格昂贵,通过试管苗剪顶扦插在基质中快繁微型薯原原种,虽可降低一些成本,但直接用于生产农夫仍觉承受不起。
什么是马铃薯脱毒种薯脱毒技术“点土成金”马铃薯产量翻番引言近年来,农业技术的进步为农作物的产量和质量带来了不小的提升。
在众多的农作物中,马铃薯是一种非常重要的粮食作物。
然而,传统的种植方式往往由于种薯植物体中带有病毒和病菌,从而导致种植马铃薯的产量急剧下降。
在这种情况下,脱毒种薯脱毒技术作为一种非常有效的种植方式被广泛应用,使得马铃薯产量得到了极大的提升。
本文将着重介绍马铃薯脱毒种薯脱毒技术的基本概念、影响和应用。
什么是马铃薯脱毒种薯脱毒技术?马铃薯脱毒种薯脱毒技术是一种非常重要的种植方式。
简单来说,它是将病毒或病菌感染的马铃薯种薯通过一系列的物理和化学处理,消除其中的病毒和病菌,然后再进行繁殖。
由于病毒和病菌会直接影响马铃薯的生长和发育,因此这种方式可以有效保证种薯的质量和产量。
具体来说,脱毒种薯的制作主要包括以下几个步骤:1.药物预处理。
使用一定的药物,对种薯进行水洗和消毒处理。
2.内部消毒处理。
对马铃薯种薯进行两次内部消毒处理,使用含氯和活性氧的物质,可以有效地消除种薯中的病菌和病毒。
3.生物鉴定和筛选。
对脱毒马铃薯进行生物鉴定,排除其中存在的病毒和病菌。
然后进行筛选,保留质量好的种薯。
4.繁殖和扩增。
将脱毒种薯进行繁殖和扩增,用于下一步的种植。
马铃薯脱毒种薯脱毒技术的好处和影响马铃薯脱毒种薯脱毒技术可以带来以下显著的好处和影响:提高产量病毒和病菌感染的种薯往往会导致生长慢、发育不良、亩产减少等问题。
而采用脱毒种薯进行种植后,由于种薯中已经被消毒,因此病毒和病菌对马铃薯的影响将会大大减轻,从而使得马铃薯的产量得到极大的提升。
提高质量马铃薯脱毒种薯脱毒技术可以有效消除种薯中的害菌、害虫和其他病原体,保证种薯的健康和干净。
因此,种植出的马铃薯质量更佳,味道更好,营养成分也更丰富。
降低种植成本由于脱毒种薯土壤中的微生物数量大大降低,因此可以大大降低由微生物引起的病害发生率,避免大量使用农药和化肥,从而降低种植成本。
脱毒马铃薯良种繁育的研究马铃薯作为世界上重要的食用作物之一,不仅具有高营养价值,而且也是种植业中的重要农作物之一。
然而,马铃薯种植中常常受到病虫害的困扰,导致产量降低和品质下降。
因此,在马铃薯种植中,如何繁育出高质量、抗虫、抗病的优良品种,是一个非常重要的课题。
脱毒马铃薯良种繁育是目前马铃薯种植中的主要方法之一。
脱毒马铃薯指的是通过对马铃薯种薯进行繁殖和培育,去除病菌、病毒等病原体,得到无病毒、无细菌的优质育种材料。
脱毒马铃薯的优点是具有安全、高产和生长势强等特点,而且可以实现规模化、高效率的繁殖和利用,是目前种植中应用广泛的一种繁育方法。
在脱毒马铃薯良种繁育中,主要包括以下几个步骤:1. 选择优良的种薯:在繁育初始阶段,需要根据不同地区的气候、土壤等条件,选取适合生长的马铃薯种薯。
同时,还需要根据繁殖需要,选择具有抗病、抗虫、高产性等优点的优良品种作为育种材料。
2. 进行脱毒处理:根据马铃薯种薯的不同污染程度,选择适当的脱毒方法进行处理。
常用的脱毒方法包括热水浸泡、药物处理、化学药剂处理等。
3. 建立无菌培养平台:通过将经过脱毒处理的马铃薯种薯进行分株或切片,培养出植株,建立无菌培养平台。
无菌培养平台是保证育种材料无菌生长的关键环节。
4. 选择优良的植株进行筛选:通过对培养出的植株进行观察和测试,筛选出生长势强、抗病、抗虫、高产性优异的植株作为育种材料,进行后续的繁殖和利用。
总而言之,脱毒马铃薯良种繁育是种植业中非常重要的一部分,可以为马铃薯产业提供高质量、抗虫、抗病的优良品种,提高产量和品质水平。
同时,也可以为农民和种植企业提供更安全、便捷、高效的种植方式和育种材料,促进种植业的可持续发展。
浅谈马铃薯脱毒快繁流程步奏及配方
马铃薯:(Solanumtuberosum)为茄科茄属作物.是全球重要的粮菜兼用作物。
马铃薯具有生长期短、产量高、适应性强、营养丰富、耐储运的特点,因此深受
生产和消费者的喜爱。但在马铃薯生产中普遍存在种性退化的问题,而病毒侵染
是马铃薯退化的根源。由于马铃薯是无性繁殖作物,所以病毒侵染后会世代相传,
危害逐年加重。目前,世界上公认的解决马铃薯病毒危害,防止品种退化的有效
途径是茎尖离体培养。通过茎尖离体培养培育脱毒基础苗,再通过建立合理的良
种繁育体系生产优良种薯是马铃薯高产、稳产、优质的可靠保证。
一脱毒种薯繁育工艺流程
马铃薯脱毒种薯繁育工艺流程如图所示。
二脱毒技术
2.1 脱毒方法
2.1.1 外植体选择及处理
外植体的选择途径一般有3条:①在生长季节从田间挖取植株种植在无菌的盆土
中,温室内栽培,取其新长成枝条的芽;②从田间切取枝条,插入营养液中生长,
取新抽生枝条上的芽;③块茎在室内发芽,芽经热处理(38℃)2周后再取芽。另
外,定期给植株喷施内吸杀菌剂,如0.1%多菌灵和0.1%链霉素的混合液,可
以有效提高灭菌效果。经过上述处理之后,要比直接取自田间枝条污染少得多。
再加上茎尖分生组织又被彼此重叠的叶原基保护.只要仔细剥取,无须再进行消
毒,就能得到无菌的外植体。但为保险起见,在切取外植体之前,可以先进行简
单的表面消毒,一般在5%次氯酸钠中处理8~10min即可。虽然顶芽和腋芽都
能作为外植体,但顶芽的茎尖生长要比腋芽的快,成活率也高,所以一般取顶芽
作为外植体。
2.1.2 剥离茎尖和接种
在超净台上的解剖镜(8~40倍)下进行茎尖剥离。解剖时必须注意使茎尖暴露的
时间越短越好.以免超净台的气流风干茎尖。在材料下垫上一块湿润的无菌滤纸
也可达到保持茎尖新鲜的目的。在解剖镜下用解剖针将叶片和叶原基剥掉,直到
露出圆亮的茎尖生长点。将带有l~2个叶原基的茎尖切下.接种到培养基上。
要注意防止交叉污染,尤其是当芽未曾进行过表面灭菌时更要谨慎。
2.1.3 培养
对马铃薯茎尖培养来说,MS和white基本培养基都是较好的培养基,而且附加
少量(0.1~0.5 mg/L)的NAA或BA或二者都加,培养效果更好。只有生长点的
极小茎尖的培养最好采用液体培养,多放在滤纸桥上培养。
茎尖培养初期的最适光照强度为1000lx,4周后增加到2000 lx,6周后增加到
4000lx。培养温度21~25℃,光照时间以16h/d为宜。1个月左右茎尖再生成
有可见小叶的小植株,保存部分原苗,准备扩繁用;另一部分用于病毒检测。茎
尖培养时需要注意以下3个问题:①茎尖接种后基部无明显膨大,茎尖变绿,成
绿色小点,这是激素浓度或温度偏低造成的;②接种后茎尖明显膨大,3~5d可
见淡绿色愈伤组织,这是由于激素浓度或温度偏高,光照偏弱造成的。③培养基
添加0.8 mg/L的GA有利于茎尖的成活和促长,但不要浓度过高或作用时间过
长,否则会使茎尖不易转绿,导致叶原基迅速伸长,生长点并不生长,整个茎尖
变褐而死。
2.2 脱毒效果检测
马铃薯经过茎尖培养脱毒后,只有部分植株是脱病毒植株。因此,在用作脱病毒
原种苗之前,必须进行病毒检测证明无病毒后才能推广。在繁殖中还要不断重复
检测,以防重新感染。常用的病毒鉴定方法有指示植物测定法、血清学方法和电
子显微镜法。
三脱毒苗快繁技术
3.1 继代培殖与生根培养
将经鉴定无毒的马铃薯脱毒苗,采用固体与液体培养基相结合的方法进行继代增
殖培养效果好。取试管苗单节切段扦插在MS固体培养基上,每瓶可插20个左
右茎段,经20d左右便可发育成5~10cm高的小植株,然后进行切段繁殖。此
法速度快,每月可繁殖5~8倍。如果多茎节的试管苗接种在液体培养基上,进
行浅层静止液体培养,则比固体培养基生根快,长得粗壮。便于栽植,同时省去
大量琼脂,降低了生产成本,同时提高了试管苗成活率。培养基可选用MS培养
基,其中的烟酸、肌醇都可以减去,琼脂浓度也可降低。在25~28℃、光照强
度3000~4000lx、连续光照的条件下,切段繁殖速度很快,一般每月能增加7~
8倍。
另外,也可将1~2cm高的苗转人MS、IAA 0.1~0.5 mg/L,活性炭0.1~0.2g
/L的生根培养基中培养,7~10d生根。
3.2 驯化移栽
为增强试管苗对温室内环境条件的适应能力,移植前对试管苗要进行光、温锻炼。
具体方法是:移植前7d左右,将长有3~5片叶、高2~3cm的试管苗瓶摆放
在温室内的驯化畦内,畦内浇上水,畦上方半遮阳进行驯化,以防止强光、高温
灼伤试管苗和维持试管苗周围的温度。移至温室的试管苗,尽管仍处于封口的瓶
内,但由于封口膜透气性好,瓶内的湿度下降,使试管苗的茎叶变硬,加上光照
增强,茎秆变粗,叶片肥厚浓绿,有效地抑制了徒长和真菌的侵染,从而提高了
试管苗的抗逆性和对环境条件变化的适应能力,提高了移栽成活率。炼苗期温室
内的温度一般要求白天23~27℃,夜间不低于10℃。
移栽方法采用单芽茎段或双芽茎段扦插式移栽。边剪取边扦插。扦插基质可采用
灭过菌的珍珠岩或疏松土壤。扦插成活后每隔2~3d喷1次营养液(表4-5),
后期每隔10d喷一次,以促进扦插苗健壮和顺利结薯。
四微型薯生产技术
由试管苗生产的重l~30g的微小马铃薯称为微型薯。虽然温室或实验室内都可
以诱导产生微型薯,但以实验室内诱导生产为主,为马铃薯的种质保存、交换以
及脱毒种薯的繁育和运输提供了一种便利的途径,也便于马铃薯种薯的大面积推
广。
4.1 实验室生产微型薯
组织培养生产微型薯要求条件较严格,费用较高,但产品的质量好,整齐度高,
粒重一般只有1~5g,由于是在三角瓶中或试管中培养,因此可作为不带病原菌
的原种使用,或作为基础研究材料和病原鉴定的实验材料。实验室微型薯生产(图
4—12)一般分单茎段扩大繁殖和微型薯诱导两个阶段。
4.1.1 单茎节扩大繁殖
从试管苗中获得茎切段,每个切段上带有1~2个叶片和腋芽。每个三角瓶中接
4~5个茎段进行培养。培养条件是温度22℃、光照16h/d、光照强度1000lx。
所采用培养基:①节段培养基,MS、3%蔗糖、0.8%琼脂;②液体振荡培养基,
MS、2%蔗糖;③微型种薯诱导培养基,MS、香豆素50~100 rag/L;④离体
保存培养基,MS、3%蔗糖、4%甘露醇、0.8%琼脂。在此条件下,由腋芽形成
的小植株生长很快,当小植株长到4~5 cm时,就可以进行第二步培养。
4.1.2 微型薯诱导
微型薯要求有一定量的激素,并且要在黑暗条件下培养。采用廉价的香豆素代替
CCC和BAP,用食用白糖代替蔗糖,同样结薯很好。采用MS、香豆素50~100
mg/L的液体或固体培养基。培养基的液固状态和光照条件对微型薯诱导有很
大作用。与单茎节扩大繁殖不同,微型薯的诱导必须在黑暗条件下进行,否则只
有植株生长,而没有小薯形成。培养温度22℃。
4.2 温室生产微型薯
一般采用脱毒苗切繁方法进行。为了节约土地,充分利用空间,有人专门设计了
温室多层架盘工厂化生产微型薯的方法。具体方法是:在温室4~6层育苗架上
放育苗盘,基质可以是蛭石、珍珠岩等。将脱毒试管苗以单茎段或双芽芽茎段扦
插,然后在人工调控的温光条件下经60~90d即可收获微型薯。扦插时用GA3mg
/L、NAA5mg/I。的混合液浸泡茎段,扦插成活率达98%。
五原种种薯和生产种薯生产技术
在实验室或温室生产的微型薯(原原种),可进一步通过大田或塑料大棚在春秋两
季扩大繁殖,生产原种种薯。利用原种种薯切块播种,生产出生产种薯,用于马
铃薯栽培用种。原种和生产种的种薯生产要求在保护地设施内进行,以下介绍原
种生产技术。
选3~4年未种过马铃薯的土地,精细整地后搭棚。拱棚可采用30m×50m或
25m×8m的规格或直接在温室内生产。播种前浇水,施有机肥4000~5000 kg
/亩,并用过磷酸钙20~25kg或硫酸钾15~20kg/亩的一半作基肥,另一半
留在马铃薯现蕾期结合培土施用。微型薯原原种在播种前须用湿沙埋住,在室内
散射光下催芽。由于休眠的影响,必须等芽萌动后才能播种,这是保全苗的关键。
微型薯大小不一致时分级播种。原种生产要求高密度播种(行株距:50cm×10cm
或60cm×10cm),要求单株结薯多,以5~10g的单薯重为宜。春季防治早疫
病,秋季防治晚疫病,在温室或拱棚内扣防虫网室,防止蚜虫传播病毒。在整个
生长期要注意拔除杂草和菌株。预防病害传播,以提高种薯纯度和质量。秋季播
种时要对晚熟品种进行打破休眠处理(早熟品种可自行通过休眠)。具体方法是在
播前10~15d进行切块,晾干后喷10~50mg/L的GA溶液,并用湿麻袋或塑
料薄膜保湿,以打破休眠。另外,温室生产种薯要注意早收。采收后及时晾晒,
待表皮干燥后再进行窖藏。