马铃薯茎尖脱毒及组培快繁技术研究
摘要：以下寨65和青薯168为实验对象，采用不同培养基，对马铃薯两个品种进行脱毒及组培，对培养基及关键技术措施进行了分析，结果表明：与青薯168在不同培养中生长表现不同，下寨65茎尖组织在ms中加入ba2 mg/l的培养基中生长表现突出，而青薯168茎尖组织在ms中加入ba2 mg/l的培养基中成苗率较高。在同等条件下，加入iaa 0.50 mg/l的培养基宜用于下寨65脱毒苗的组织快繁，加入iaa 0.30 mg/l的培养基宜用于青薯168脱毒苗的组织快繁。
关键词：马铃薯；茎尖脱毒；组织快繁
我国是马铃薯生产第一大国，2008年种植面积达到573.33万hm2，鲜薯总产达8 800万t，平均单产约15.45t／hm2，总产位居世界第一[1]。马铃薯是无性繁殖作物，体内病毒的积累可使品种种性退化、品质和产量降低，对其生产造成严重危害[2]。因为大部分病毒不能感染马铃薯茎尖组织，通过茎尖脱毒，生产脱毒种薯用于生产是防止马铃薯退化的切实可行的措施[3]。马铃薯脱毒及组培快繁中所用基质和培养条件等关键技术方面的报道较多，但对下寨65和青薯168报道较少，本文既通过对马铃薯下寨65和青薯168两个品种进行脱毒及组培试验研究，为西部高原地区当家品种脱毒种薯的工厂化生产提供帮助。
1 材料和方法
1.1 供试材料
采用当家品种下寨65和青薯168。
1.2 试验方法
1.2.1 催芽于11月中旬左右，挑拣表皮光滑、正常薯形、大小均匀、无病害和无损伤薯块，放置在有供暖的房间，室内温度
24 ℃左右进行催芽。在催芽前薯块正处于休眠期，采用0.05～0.l0 mg/l的ga3来处理薯块，浸没于ga3溶液中10～20 min，以打破休眠[4]。
1.2.2 种薯处理采用ms培养基，加入不同配比的激素，准备ba、naa、ga3、iba和iaa，由于激素在培养基中用量非常少，且不易溶于水，所以采用特殊的配置方法，配置成500 mg/l的溶液待用。当两个品种的种薯芽长到2～3 cm时，挑选生长健壮的芽，用清水冲洗芽部表面污物，在无菌操作室采用12种不同的方法进行表面消毒，用最近制作的蒸馏水冲洗四五次，将表面消毒剂彻底清除，不同表面消毒剂处理时间见表1。
1.2.3 茎尖组织培养在解剖镜下剥取大小为0.30～
0.50 mm茎尖生长点，置于不同浓度生长调节剂的ms培养基上进行培养，培养基编号为ms1～ms12，另设不加任何生长调节剂的ms 培养基作为对照（ck），植物生长调节剂配比见表2。
1.2.4 马铃薯脱毒苗培养在无菌条件下，将得到的无毒苗进行切段，每段带一叶，置于不同种类、浓度的1/2ms培养基中进行
培养，以不加任何生长调节剂的1/2ms培养基作为对照，编号为m1～m9，快繁培养基配比见表3。
2 结果与分析
2.1 不同表面消毒方法对茎尖成活率和污染的影响
从表4可以看出，在茎尖组织培养过程中，外植体在清水冲洗后，直接采用0.1 %升汞或5 %次氯酸钠消毒，都可以将污染控制在5 %以下，但需时稍长，不同程度地影响到成活率。另外由于升汞的渗透性强，不宜彻底清洗，且对环境污染严重，建议尽量不要使用。
2.2 不同生长调节剂培养基配比对茎尖组织生长的影响
从表5可以看出，不含生物调节剂的培养基，马铃薯茎尖组织的生长非常缓慢，导致成苗率低下。在同等条件下，kt和6-ba对马铃薯茎尖组织的生长都具有促进作用，且效果显著，就这两种物质而言，含有kt的培养基中成苗率较低。在同等条件下加入ga3，可明显促进马铃薯茎尖组织分化，加快生长，提高成苗率。
2.3 不同生长调节剂配比对马铃薯脱毒苗快繁的影响
经过观测表明，与对照培养基相比较，培养基中加入生长调节剂后，芽萌发推迟，有效促进幼根生长。生长调节剂浓度过大时，愈伤组织发达，生根受到抑制。在实验中观察到下寨65对naa较为敏感，浓度稍大就会产生较大愈伤组织，生根较为缓慢，而青薯168反应较为迟钝，结果见表6。
3 结论
通过实验发现，在马铃薯脱毒技术实施过程中，采用酒精与其他两种表面消毒剂配合使用效果最好，能有效控制污染，降低对茎尖组织的影响。剥离的茎尖组织诱导成苗是脱毒快繁的关键技术，在实验中，kt和ba均有助于茎尖组织分化成苗。在快繁中，适当浓度的生物调节剂对马铃薯茎段生根有促进作用，但当浓度过高时只产生分生组织，不利于小苗生根，而且各品种表现有所不同。
参考文献：
[1]戴亨仁，吴建军，韦禄春，等.江西红壤区马铃薯高产、高效、优质综合栽培技术[j].江西农业学报，2010，(2)：74-76.
[2]冉毅东，王蒂，戴朝曦.用组培法诱导试管微型薯的研究［j］.马铃薯杂志，1991，5（4）：193-199.
[3]王炳君．马铃薯茎尖脱毒与微型薯生产[m]．北京：高等教育出版社，1990．
[4]张勇飞，谢庆华.几种主要的马铃薯种薯催芽方法及其操作要点[j].种子，2000，（3）：46-47.
马铃薯脱毒苗组培快繁技术 (酒泉职业技术学院秦晓萍甘肃?酒泉 730500) 摘要本论文主要从培养基的制作、脱毒苗的制取、继代培养、培养条件、瓶装苗污染控制等方面介绍了马铃薯脱毒苗快繁技术，为马铃薯快繁生产提供参考。关键词马铃薯脱毒苗快繁技术马铃薯是我国主要的粮食、蔬菜及工业原料作物，其国民经济意义十分重要，在保证粮食安全生产方面发挥了重大作用。随着农业产业结构的调整，我国马铃薯的种植面积和总产量也在不断的增加。但在连年的栽培过程中，病毒或类病毒不断的侵染和积累，从而导致马铃薯种性变劣，长势逐步减弱，产量逐年降低。马铃薯快繁是在短时间内利用组织培养技术获得大量高质量的试管苗，应用种薯脱毒技术， [1]培养无毒组培苗，在提高产量、保证品质、耐贮藏方面体现出了独特的优势。 1 培养基的制作 1.1培养基的配方 利用提供的母液和材料MS+0.01mg/L NAA+3%蔗糖+0.56%的琼脂，PH为5.8，配置培养基1000ml,并均匀分装到24个培养瓶，进行灭菌。 母液浓度/扩大倍数配置体积(ml) 母液吸取量(ml) 称取量(g) 大量元素 20 50 — 钙盐母液 20 50 — 磷酸盐溶液 20 50 — 铁盐 100 10 — 微量元素 100 10 — 1000 有机物 100 10 — 萘乙酸(NAA) 0.1mg/L 0.1 —
蔗糖 3% — 30 琼脂粉 0.56% — 5.6 1.2 培养基的配制 1.2.1仪器、用具与试剂 (1)仪器:PH试纸、电磁炉、高压灭菌锅 (2)用具:移液抢、移液管、量筒、容量瓶、培养瓶、玻璃棒、洗瓶、烧杯、搪瓷缸、镊子、钥匙、称量纸、胶头滴管、抹布、卷纸、标签纸、 (3)试剂:配置MS培养基的各种母液、激素母液、琼脂、蔗糖、蒸馏水、 0.1mol/LHCL、0.1mol/LNaOH 1.2.2 培养基制作 (1)准备工作将配置好的MS培养基母液从冰箱中取出，检查是否沉淀或变色，避免使用已失效的母液。 (2)移取母液用移液管移取各种母液，在移取时冲洗移液管，移取出后加入事先准备好装有蒸馏水的烧杯中定容，然后加入熬好的培养基中。 (3)称取蔗糖、琼脂然后融化琼脂，边加热边搅拌防止糊底。直至琼脂全部融化及清撤见底，加入准备好的母液和蒸馏水。 (4)混合培养基各个成分并定容，调整PH值。用0.1mol/LNaOH或HCL液把PH 值调5.8左右后，连续调三次所测定的平均值作为最后的用量值。加后一定要搅拌均匀。 1.3 培养基的分装 培养基合成后要趁热分装，1000ml的培养基要分装到24个培养瓶中每瓶约30,40ml培养基。分装时要垂直向下，不要让培养基沾到杯壁上。然后快速的盖上盖子，盖子要拧紧。 1.4灭菌操作步骤
马铃薯茎尖脱毒培养技术的研究进展 第一组：郭保密、尹韵绮、张岳 摘要：马铃薯茎尖脱毒技术的应用克服了马铃薯的病毒病和类病毒病的危害，是目前解决马铃薯退化最为有效的途径。文章从马铃薯茎尖脱毒的原理、过程以及影响病毒去除的因素等方面进行了综述，以期为马铃薯茎尖脱毒技术的深入研究提供一定的理论依据。 关键词：马铃薯；茎尖脱毒；病毒类型；影响因素 栽培种的马铃薯（Solanum tuberosumL.,2n=48）是双子叶种子植物，属茄科（Solanceae）茄属（Solanum）的一年生草本植物，生产上绝大多数是利用块茎进行无性繁殖[1]。马铃薯栽培种起源于南美洲秘鲁以及沿安第斯山脉智利沿岸、玻利维亚等地，在五大洲140多个国家都有种植和分布。2004年国际马铃薯中心（CIP）和国际食品政策中心（IFPRI）合作研究表明，在世界范围内，到2020年对马铃薯的需求将有望增长40%，超过水稻、小麦和玉米的增长。特别是在亚洲和非洲，对马铃薯的需求将增长更快[2]。 随着农业产业结构的调整，我国马铃薯的种植面积和总产量也在不断的增加，到2010年，我国马铃薯种植面积达到600万hm2，产量达到1.8亿t[3]。但在连年的栽培过程中，病毒或类病毒不断的侵染和积累，而病毒在马铃薯植株中是系统感染，能阻碍病毒增殖的药剂往往也会影响寄主植物的代谢系统，到目前为止，还没有像防治病虫害一样能有效防治植物病毒病的化学药剂。病毒的侵染及其在薯块内积累引起了马铃薯的退化，马铃薯退化后一般减产20%～30％，严重者减产80％以上[4]。随着病情逐年加重，严重者失去发芽能力，最后失去利用价值，给我国马铃薯乃至世界马铃薯生产带来十分严重的危害，使得栽培面积及产量难以进一步提高[5]。在我国主要侵染马铃薯的病毒有7种，它们是PVX、PVY、PVS、PVM、PAMV、PAV、PLRV[6]，其余侵染马铃薯的病毒是来自其它寄主植物的病毒。 采用无病毒植株是解决马铃薯退化的有效途径，获得无病毒植株的途径有自然选择、物理学方法、化学药剂处理和生物学方法[7]。其中最行之有效的方法便是生物学方法中的茎尖脱毒。文章就马铃薯茎尖脱毒培养技术中各个环节的研究进展和影响因素做出综述，以期为马铃薯茎尖脱毒技术的深入研究提供参考。 1茎尖培养脱毒的原理 马铃薯脱毒的方法有多种，其中以茎尖脱毒的效果最好，已成为最常用和经济有效的脱毒方法，其原理是利用病毒在植物体内分布的不均匀性，即根尖和芽尖的分生组织含病毒量少或不含病毒的特性，导致这一现象的原因可能由以下因素引起：（l）分生组织旺盛的新陈代谢活动。病毒的复制须利用寄主的代谢过程，无法与分生组织旺盛的代谢活动竞争；（2）分生组织缺乏真正的维管组织。大多数病毒在植株内通过韧皮部进行迁移，或在细胞间通过胞间连丝传输，因为细胞与细胞间的移动速度较慢，在快速分裂的组织中病毒浓度高峰被推迟；（3）高浓度的生长素。分生组织的生长素浓度通常很高，可能影响病毒的复制[8-9]。 根据这些原理，Morel等人在1955年以马铃薯为材料，利用茎尖组织培养，获得了无病毒植株[10]。这个试验的成功，为马铃薯脱毒开辟了新途径。现在几乎所有马铃薯生产国都在使用这种技术，马铃薯脱毒去除了主要病毒，恢复了原品种的特征特性，有效解决了马铃薯退化的问题。 2马铃薯脱毒过程 2.1脱毒种薯生产程序 采用微茎尖组织培养的方法，诱导出苗，采用联免疫吸附试验法或指示植物方法鉴定马铃薯病毒和类病毒，经鉴定后，无主要病毒及类病毒的试管苗可定为脱毒试管基础苗。试管
(第一组)年产500万株马铃薯组培苗工厂设 计 -CAL-FENGHAI-(2020YEAR-YICAI)_JINGBIAN
植物组培育苗 工厂设计 题目：年产500万株马铃薯苗组培育苗工厂设计 姓名：邬龙祺 组员：杨宇鹏、田涛、周桂花、 张路、李彪、冯恩辉、李弥 班级：生物工程111 班 指导老师：郭燕华 时间：2014年12月19日
目录 第一章前言 (3) 第二章厂址选择与工厂总平面设计 (6) 厂址选择 工厂平面设计 第三章车间布置及其设备介绍 (7) 准备间 培养基配制及灭菌室 检测、称量室、药品室 接种室 培养室 主要设备 第四章工厂化组培苗工艺流程 (12) 组培苗工艺流程 商品组培苗生产流程 第五章工艺计算 (17) 生产规模与生产计划计算 计划的制定 每年物料总衡算 第六章废物处理 (23) 废水处理方法 废弃琼脂培养基处理方法 第七章工程项目的设计概算 (25) 投资估算 工厂组织及劳动定员 经费总预算和用途 设计的预期经济效益
第一章前言 1.该植物的生物学知识、特性 马铃薯是茄科植物，通常用块茎繁殖，但也可用种子种植。许多马铃薯品种能天然结果。育种家利用杂交方法得到的种子和天然结实的种子进行马铃薯新品种选育。分离小的种子还可以直接用于生产。所以了解马铃薯的生物学特征在生产上有重要意义。 1．根 马铃薯用块茎种植和用种子种植时，根部形态不相同。用块茎种植的根为须根，没有直根。须根从种薯上幼芽基部发出，而后又分枝形成许多侧根。根系发育及分枝情况，因品种与栽培条件不同而异。大部分品种的根系分布在土壤表层下40厘米，一般不超过70厘米，在砂质土壤中根深也可达1米以上。早熟种的根系一般不如晚熟种发达，而且早熟种根系分布较浅，晚熟种分布广而较深。所以，种植马铃薯时要根据品种的熟性和根系的分布情况来确定株、行距，才能获得高产。 用种子种植时植株有主根(直根)和侧根。根的分枝随植株的生长而增多。主根为圆锥形深入土中，若生长条件好，实生苗的根系也很发达。有的地方实生苗当年单株产量可达1千克以上，这与实生苗形成的强大的根系是分不开的。 2．茎 马铃薯的茎有地上茎、地下茎、匍匐茎和块茎。 ⑴地上茎：种植的马铃薯块茎发芽生长后，在地面上着生枝叶的茎为地上茎。茎上有棱3--4条，棱角突出呈翼状。茎上节部膨大，节间分明。节处着生复叶，复叶基部有小型托叶。多数品种节处坚实，节间中空。茎色有绿、紫褐等，因品种而异。 茎有直立、半直立和匍匐型3种。栽培种的茎，大多为直立或半直立型。茎高多数品种在40--100厘米之间，少数中晚熟品种在100厘米以上。茎上分枝的部位与品种有关，早熟品种在中上部发出，中晚熟品种大都在下部或靠近茎的基部发出。另外，茎的粗细、有无茸毛等均可作为区分品种的标志。
马铃薯茎尖组织脱毒培养应用及前景 林英烨222012326012094（农学四班） 西南大学农学与生物科技学院，重庆400715 摘要：此文总结了近几年来马铃薯茎尖脱毒技术的研究进展，从马铃薯生产概况及危害马铃薯的病毒种类、茎尖剥离发展历史及原理、茎尖脱毒技术要点、影响马铃薯茎尖脱毒效率的因素方面做了概述并对其发展进行了展望。 关键词：马铃薯；茎尖;组织培养；应用；前景 An Review On virus-free technoligy of potato meristem tip tissue culture Lin ying ye studentid(The four class of Agriculture College of Agronomy and Biotechnology,Southwest University,Chongqing400715,China Abstract: This paper summarizes the research progress of potatostem apex virus-free technology in recent years,from thevirus species,potato production situation and the harm of potato shoot tip development history and theory,stem apexvirus-free technology points,effect of potato stem apex detoxification efficiency factors are summarized and the prospect for its development Keywords:Potato;shoot tip;tissue culture;application;Prospect 前言 马铃薯栽培分布较广，世界上共有148个国家栽培，主要分布在欧洲和亚洲。据联合国粮农组织资料统计表明，全世界现有马铃薯栽培面积为1838.1万公顷，总产29511.8万吨，平均单产16吨每公顷。我国是马铃薯种植大国，种植总面积达460多万公顷，届时我国马铃薯产量将达到1.8亿吨。尤其是近年随着我国农业产业结构调整和种薯、商品薯、加工企业市场的发展，优质马铃薯加工产品供不应求，加工用薯比例大幅度增加，马铃薯栽培正成为种植业结构调整和增加农民收入的一项战略选择，种植逐步走向规模化、标准化、区域化。但马铃薯在连年的栽培过程中，由于病毒或类病毒的侵害和积累，造成了马铃薯质量退化和产量下降，因而无病毒植株具有重要的生产价值。解决马铃薯退化，获得无病毒植株的途径由自然选择、物理学方法、化学药剂处理、生物学方法。其中最行之有效的方法便是生物学方法中的茎尖脱毒。 1马铃薯生态习性和种类 1.1生长周期 （1）休眠期 土豆块茎收获以后，放到适宜发芽的环境中而长时间不能发芽，属于生理性自然休眠，是一种对不良环境的适应性。块茎休眠始于匍匐茎尖端停止极性生长和块茎开始膨大的时刻。休眠期的长短关系到块茎的贮藏性，关系到播种后能否及时出苗，因而关系到产量的高低。土豆休眠期的长短受贮藏温度影响很大，在26摄氏度左右的条件下，因品种的不同，休眠期
马铃薯组培苗污染原因及解决对策 马铃薯是兴安盟重要经济作物之一，在居民日常饮食中有着不可或缺的地位，马铃薯组培苗是生产脱毒马铃薯的有效办法，全国各地马铃薯研究生产单位大多用这一方法生产，并取得了很好的效果。兴安盟农业科学研究所经过多年实践和探索，形成了一套完整全面的马铃薯组织培养生产体系。在生产过程中，控制污染率无疑是提高经济效益的有效途径之一，因此，采取相关措施降低组培过程中的污染，在生产中值得重视。经过一年的马铃薯组培苗工作经验，对马铃薯组培苗污染原因及解决对策提出我个人几点意见，希望和大家共同探讨。 1、污染原因 马铃薯组织培养中：常见的污染情况有细菌污染和真菌污染两大类，它们相应的污染源也就是细菌和真菌。 1.1细菌污染：若在接苗前发现培养基污染，可能是培养瓶口不干净而带有不易
被杀死的耐高压、高温的杂菌；或是培养基灭菌不彻底造成的；若在接苗后外植体周围发现细菌污染，则可能是植物材料本身带菌引起的，也可能是接苗工具消毒不彻底或是操作不规范造成的；或者是在接苗前没有及时发现污染苗，在接苗过程中由于交叉感染造成的。 1.2真菌污染：若在接苗前培养基表面存在大量真菌污染，多数情况是由于培养基瓶口封的不严或是培养基存放的环境中孢子浓度过大；培养基内部存在大量真菌污染，则可能是母液储备过程中已经被污染。接苗后的培养基表面存在真菌污染而且位置不定，如果是初期，可能是因为接种室真菌孢子浓度过大或是操作台不干净；如果是接苗后期发现污染，主要是因为封口不严或是培养材料本身就携带有内生菌；在培养过程中发现外植体周围出现真菌污染，可能是因为外置体材料本身就带有菌，只是菌源太小，再接苗时肉眼无法识别，当接到新的培养基里之后，才引起感染；若在培养基中发现污染的真菌是
马铃薯茎尖脱毒及组培快繁技术研究 摘要：以下寨65和青薯168为实验对象，采用不同培养基，对马铃薯两个品种进行脱毒及组培，对培养基及关键技术措施进行了分析，结果表明：与青薯168在不同培养中生长表现不同，下寨65茎尖组织在ms中加入ba2 mg/l的培养基中生长表现突出，而青薯168茎尖组织在ms中加入ba2 mg/l的培养基中成苗率较高。在同等条件下，加入iaa 0.50 mg/l的培养基宜用于下寨65脱毒苗的组织快繁，加入iaa 0.30 mg/l的培养基宜用于青薯168脱毒苗的组织快繁。 关键词：马铃薯；茎尖脱毒；组织快繁 我国是马铃薯生产第一大国，2008年种植面积达到573.33万hm2，鲜薯总产达8 800万t，平均单产约15.45t／hm2，总产位居世界第一[1]。马铃薯是无性繁殖作物，体内病毒的积累可使品种种性退化、品质和产量降低，对其生产造成严重危害[2]。因为大部分病毒不能感染马铃薯茎尖组织，通过茎尖脱毒，生产脱毒种薯用于生产是防止马铃薯退化的切实可行的措施[3]。马铃薯脱毒及组培快繁中所用基质和培养条件等关键技术方面的报道较多，但对下寨65和青薯168报道较少，本文既通过对马铃薯下寨65和青薯168两个品种进行脱毒及组培试验研究，为西部高原地区当家品种脱毒种薯的工厂化生产提供帮助。 1 材料和方法
1.1 供试材料 采用当家品种下寨65和青薯168。 1.2 试验方法 1.2.1 催芽于11月中旬左右，挑拣表皮光滑、正常薯形、大小均匀、无病害和无损伤薯块，放置在有供暖的房间，室内温度 24 ℃左右进行催芽。在催芽前薯块正处于休眠期，采用0.05～0.l0 mg/l的ga3来处理薯块，浸没于ga3溶液中10～20 min，以打破休眠[4]。 1.2.2 种薯处理采用ms培养基，加入不同配比的激素，准备ba、naa、ga3、iba和iaa，由于激素在培养基中用量非常少，且不易溶于水，所以采用特殊的配置方法，配置成500 mg/l的溶液待用。当两个品种的种薯芽长到2～3 cm时，挑选生长健壮的芽，用清水冲洗芽部表面污物，在无菌操作室采用12种不同的方法进行表面消毒，用最近制作的蒸馏水冲洗四五次，将表面消毒剂彻底清除，不同表面消毒剂处理时间见表1。 1.2.3 茎尖组织培养在解剖镜下剥取大小为0.30～ 0.50 mm茎尖生长点，置于不同浓度生长调节剂的ms培养基上进行培养，培养基编号为ms1～ms12，另设不加任何生长调节剂的ms 培养基作为对照（ck），植物生长调节剂配比见表2。 1.2.4 马铃薯脱毒苗培养在无菌条件下，将得到的无毒苗进行切段，每段带一叶，置于不同种类、浓度的1/2ms培养基中进行
怎么提高马铃薯脱毒组培苗移栽成活率 1、培育壮苗 组培苗本身的质量是决定移栽成活率的关键因素，因此，培育壮苗是提高移栽成活率的主要措施之一。具体做法：一是利用LED组培灯全自然光培养；二是在移栽前的最后一次继代中，不加任何激素的MS培养基培养，这样不仅降低了生产成本，还培育出粗壮浓绿、根系发达的组培苗，移栽后容易成活。 2.1、基质的选择 移栽组培苗的基质常常是能否移栽成活和幼苗生长好坏的关键。基质选择的原则是疏松透气，具有一定的保水、保肥能力，容易灭菌处理，不利于杂菌滋生。移栽马铃薯组培苗常用的基质有珍珠岩、蛭石、河沙、过筛的腐殖土等，其中珍珠岩和蛭石虽通透性好，但成本较高，且浇水后易流动，对原原种的结薯有一定影响，而腐殖土则较难灭菌，易滋生杂菌。实践证明河沙是马铃薯组培苗最理想的移栽基质，它不仅通透性、保水性好，易于消毒，且对匍匐茎有较好的压实覆盖作用，很有利于结薯。
2.2、苗床和网棚的消毒 移栽前对苗床和网棚的消毒是提高马铃薯组培苗移栽成活率必不可少的措施之一。如果不对苗床和基质进行消毒，则在无菌状态下生长的幼嫩组培苗移栽后容易感染各种病菌，导致死亡，另外，生产脱毒原种的基本要求是对组培苗的移栽基质进行彻底消毒，以杀灭所有的致病源。
3、移栽 在led组培灯培育出马铃薯组培苗继代扩繁后，在培养瓶中生长20天后左右为最适宜的移栽期。此时苗高达6～7cm，平均每株苗有5.8条根，根尖的颜色为细胞分裂旺盛的黄白色，平均根长2.96cm,叶片数有5～6苔，最大叶面积约0.48cm2。这种状态下的苗，移栽后易成活。如果苗在培养瓶中生长期过短，则苗细弱矮小，移栽后难管理，易死亡。相反，在培养瓶中生长期过长，则苗太高，移栽时易折断，且根系过长，变褐老化，不利于成活。另外，在组培苗出瓶时，要仔细洗去附在其上的培养基，否则残留的培养基会导致霉菌污染，同时，注意不要损伤根系和茎叶，避免病菌感染致死。
甘露醇抑制马铃薯脱毒瓶苗生长效果试验 摘要:以MS全脱水培养基粉剂制备基本培养基,以庄薯3号脱毒试管苗为供试材料,研究甘露醇在马铃薯脱毒瓶苗生长及保存中的抑制作用。结果表明,在每升培养基中加入30g甘露醇,能有效抑制瓶苗生长,常温下可以保存2个月,如果给予较低温度(10℃±1),则可以保存3~4个月。 关键词:甘露醇;马铃薯脱毒瓶苗;保存 近年来,庄浪县生产的马铃薯各级脱毒种薯已在本县及周边县市得到广泛认可和应用,极大地推动了该县马铃薯产业的迅猛发展。随着农业综合开发农业部专项项目“庄浪县脱毒马铃薯良种繁育基地建设”在我县的实施和“庄浪县陇原薯业有限责任公司”的成立,马铃薯脱毒瓶苗的生产和研究也向纵深方向发展。根据我县生产实际,大量扩繁瓶苗时间为每年的2-7月份,至次年2月份,瓶苗陆续移栽出去,为瓶苗保存期,期间应转接1~2次,保持一定数量基础苗即可。为此,寻求一种保持瓶苗缓慢生长的方法,对我县马铃薯脱毒苗的生产具有非常重要的现实意义。 1材料与方法 1.1试验材料 庄薯3号脱毒苗;MS全脱水培养基粉剂;7cm高罐头瓶作为培养瓶。 1.2试验方法 试验设4个处理:处理①(CK),不加甘露醇;处理②,每升培养基加10g甘露醇;处理③,每升培养基加20g甘露醇;处理④,每升培养基加30g甘露醇。每升培养基称取40g MS全脱水培养基粉剂和相应的甘露醇,加1 000mL煮沸的开水,搅拌均匀分装于30个培养瓶中,常规灭菌后在超净工作台上接种,每瓶接20个单节茎段,置于温室内正常培养,每隔20d统计一次生长情况。各处理每次抽取5瓶掏出苗子洗净根部培养基,随机抽取10株统计生长情况。试验于8月25日进行。 2试验结果与分析
一.实验设计方案
实验序号一实验名 称 马铃薯脱毒试管苗的快速繁殖和试管薯的诱导 实验时间2012-4-10至 2012-6-15 实验 室 生科院324 1．实验目的 ①熟练准确配制MS培养基母液和组培室常用的化学试剂，巩固相关理论基础知识。 ②掌握无菌操作的基本技术；了解马铃薯脱毒种薯生产的过程，为脱毒种薯的生产提供必要的基础苗。 ③进一步熟悉配制培养基的步骤，能熟练准确配制培养基；掌握马铃薯试管薯 形成的条件，设计适合的马铃薯试管薯诱导培养基。 ④通过本次实验，掌握马铃薯试管薯诱导的方法和技术。 2．实验原理、实验流程或装置示意图 实验1-1 MS培养基母液和常用试剂的配制 培养基是植物离体培养组织和细胞赖以生存的营养基质。配制培养基时，为了减少试剂称取时的工作量和少量称取时出现的误差，以及避免多种营养成分混合导致沉淀产生或相互反应而失去培养效果，预先要将各种营养成分配制为一定倍数的培养基母液，待使用时稀释到要求的浓度。母液的浓度为培养基浓度的10倍、100倍或更高。 实验1-2 马铃薯试管苗快速繁殖培养基的配制
将事先配制好的培养基母液按一定比例稀释至浓度为培养基中规定的使用浓度，再加入琼脂、蔗糖、生长调节物质等，制备成符合要求的培养基。 实验1-3 马铃薯试管苗的快速繁殖 利用适宜的培养基，诱导带有腋芽的马铃薯单节茎段进行芽生长和根再生形成单苗，从而达 到快速繁殖的目的。 实验1-4 马铃薯试管薯诱导培养基的配制将事先配制好的培养基母液按一定比例稀释至浓度为培养基中规定的使用浓度，再加入琼脂、蔗糖、生长调节物质等，制备成符合要求的培养基。 实验1-5 马铃薯试管薯的诱导 在培养马铃薯脱毒试管苗的培养容器中（试管苗培养4-6周），加入液体的马铃薯试管薯诱导培养基，置于全黑暗条件下即可诱导马铃薯试管苗结薯。 3．实验设备及材料 设备 冰箱、50ml三角瓶、500ml搪瓷杯、25ml量筒、1ml和5ml吸管、pH试纸（5.4~7.0）、封口膜、橡皮筋、扎口用棉线、药勺、称量纸、普通电子天平、移液管、量筒、烧杯、酒精棉球、小块纱布、已灭菌滤纸、枪状镊子、手术剪、解剖刀、已灭菌培养皿、酒精灯、高压蒸汽灭菌锅、电磁炉、超净工作台等。 药品及试剂 MS基本培养基母液、马铃薯快速繁殖培养基、蒸馏水、75％酒精、蔗糖、
工作总结 本人任文英于2009年10月进入民丰薯业公司。初任组培室的接种工，经过试用期与考核，成为民丰署业的一名正式员工。初进民丰工作，就意识到我所掌握的知识结构与马铃薯种苗培育所需的技术之间有不小的差异，本着对公司、工作岗位负责的态度，在一年多的工作学习中，我不断提升自己的专业知识与业务水平，对实际工作中出现的问题及时的与领导进行沟通汇报，定期对工作进行总结，归结症结所在。下面就是我在实际工作中发现的问题： 一．设备管护及物资供应 1对组培室常出问题的灭菌锅和灌装机应定时派专人进行检修。一些常用配件购进不及时导致生产延误，应多备些易损易耗的配件。如灭菌锅的配件等。提前申请购买。 2.洗瓶车间和各室下水堵死。污水对整个无菌工作环境及员工身心健康产生影响使工作效率下降。需要修理。 3洗瓶车间密封不严。使洗干净的瓶子又着落尘土，加大了工人的工作量。需进行密封。 4现有地面严重损坏。应进行整体修整。 二．生产程序和任务任务 1洗涤—配制MS培养基——灭菌——接种操作——培养基本生产程序。每一工作流程都要严格把守质量关。首先保证培养瓶干净而且瓶内无水分。配制过程中准确称量药品，把瓶
盖拧严实。灭菌时严格按照操作规程。灭菌时间不能太短或太长。太短造成灭菌不彻底。太长培养基不凝固，营养流失。接种是重中之重。应该在无菌条件下操作按照.操作规程进行接种。把接好的瓶苗放入培养室陪。给予适合的温度和光照。目前培养室的苗子大部分缺少光照。部分架子没有灯管。摆放密度大，造成苗子生长不好。培养员每天进行观察并做好记录。及时清理污染的瓶苗。根据生产任务做一个详细的工作计划。每周每月每季度要进行总结报告。从中找出问题和缺点。最好做一下成本核算。 三．工作人员的配备和工作制度 目前组培室大约有50人。接种室有40人、洗涤和配置室约10人、培养室3人、还有一部分实习的学生。作为公司的重要部门，对正式工、试用工、临时工、还有实习学生进行统一管理有一定难度。另外每天上班时间为8小时，每周休息一天（正式工）没有节假日。工作时间长、压力大，假期休息少也在一定程度上影响了员工的工作情绪。 我在民丰的工作时间不长，专业技术不够全面，相对缺乏管理经验，因此我发现与解决问题的角度可能很偏激，以上材料仅做领导参考。
马铃薯组织培养苗的标准化培育 李清萍 (甘肃省定西地区旱农科研推广中心,定西 743000) 中图分类号:S532 文献标识码:B 文章编号:167223635(2003)042240202 1 前 言 马铃薯组织培养苗(组培苗)应用于生产,由于它具有繁殖速度快,生长整齐一致,高产优质,性状稳定和便于运输等优点,所有生产马铃薯的主要国家都采用这一技术。为了长期保持优良品种的生产潜力,生产无病毒基础种,其组培苗的培育是种薯生产的基础,并可源源不断地为生产提供优质种薯。因此种苗的发展增长迅速,生产厂家也相应的不断踊现,大到科研院所,小到私人企业,生产的种苗出现混乱,质量无法保证。为确保种植者和生产组培苗厂家的利益,充分且持续利用马铃薯组织培养苗的优点来加速实现我国马铃薯良种繁育体系的完善,标准化、规格化、规范化培育马铃薯组培苗是急需解决的问题。 2 马铃薯组培苗的培育技术标准化 在马铃薯组培苗商品化生产过程中,必须定时、定量的为种植户提供优质种苗,所以必须把生 收稿日期:2003-01-20 作者简介:李清萍(1969-),女,农艺师,从事马铃薯组培苗快繁生产工作.产种苗的整套技术用数量化指标表示出来,形成标准化的培育生产技术。整套的生产技术包括:外植体部位、消毒方法、培养基成分、单位培养材料所需培养基量、切割转移技术、培养条件、继代培养周期和增殖倍率,经过多年的研究、实践和商品化生产基础上,我们总结了马铃薯标准化组织培养快繁技术。 外植体:剪取经过热处理的发芽块茎的茎尖1～2cm,清水漂洗,剥去外面叶片。 消毒方法:011%HgCl2消毒8～10min,无菌水冲洗4～5次。 诱导培养基:MS+G A3012+NAA0155+BA 015。 生根培养基:MS基本培养基。 检测培养植株脱毒效果:电子显微镜检测、血清学检测或指示植物接种检测。 快繁所需培养基:117ml/每个芽。 继代培养周期:20～30d。 快繁切割技术:以带一个腋芽的茎段为一个单位,剔除异常芽。 繁殖系数:3～4/继代周期。 培养条件:温度:25～27℃,光照强度: 2000～3000lx,每日光照:10～12h。 多,否则会影响超净工作台工作无菌气流。接种时先用酒精擦洗双手与超净工作台,然后进行操作。为了加快接种速度又能达到无菌操作,可以采用两套接种工具———镊子与剪刀。一套在接种时另一套在酒精火焰上灼烧。操作时,转接瓶及被转接瓶等应紧挨酒精灯,而且,手千万不要在器皿上方晃动,否则可能会有不安分的病菌飞入器皿,造成污染,另外,使用镊子时一定要让其烧烫,并且镊子在接种的过程中不要上下滑动,以免手上的细菌掉入瓶中。更重要的是不管超净工作台是平行风还是垂直风,一定要在下风方向操作,那样就可最大限度避免病菌顺风飘入器皿。 以上是在组培室应该注意的问题,如果每步都做到细心有效操作,在快繁中污染问题将得到良好解决,但如一步不慎的话,可能会带来严重的后果。所以一定要慎重每一环节,切实做到无菌操作。 ? 4 2 ?中国马铃薯,第17卷,第4期,2003
马铃薯茎尖组织脱毒培养及植物激素在培养中的作用摘要：马铃薯茎尖组织脱毒培养,愈伤组织解除分化形成新个体时,体细胞有丝分裂的异染色质延迟复制行为较正常活体植株更严重,后代变异较自然群体变异高出500倍,若在培养过程添加辐射和化学诱变试剂变异率会更高。因此,组织培养环境不只是现代生物技术辅助育种的一个重要条件,更是诱变育种的一个有效途径,对于以营养体繁殖的马铃薯作物效果更好。本文介绍了马铃薯茎尖培养的意义和方法，综述了植物激素在马铃薯生长中的作用。 关键词：茎尖体细胞组织培养变异植物激素 Abstract:Potato virus-free cultivation of the tip meristem,callus formation of new individual remove differentiation,somatic cell mitosis heterochromatin delay of normal living plant copy behavior more serious than natural group,variation and variation of500times higher in the training process,if add radiation and chemical mutagenesis reagent mutation rate is higher. Therefore,tissue culture of modern biological technology environment is not only an important supplementary conditions,is an efficient way of mutation breeding for excessive n-redistribution breeding,potato crop effect is better.The paper introduces the significance of potato meristem-tip culture were reviewed,and the method of plant hormone role in growth of potatoes. Key words:Stem cells;Tissue culture;variation;Plant hormones 1马铃薯生态习性和种类 对土壤的适应性很强，但对气候要求凉、冷、燥，在湿热地区虽然也能生长，不过一代以后品种就会演化，需要经常从寒冷地区引进新的种。种薯在土温5～8℃的条件下即可萌发生长，最适温度为15～20℃。适于植株茎叶生长和开花的气温为16～22℃。夜间最适于块茎形成的气温为10～13℃（土温16～18℃），高于20℃时则形成缓慢。出土和幼苗期在气温降至-2℃即遭冻害。开花和块茎形成期为全生育期中需水量最大的时期。 马铃薯在原产地就有几百个品种，在世界各地又不断地培养新品种，目前全世界有几千个品种，有含淀粉比例较高，适合作为主食的，也有适合作为蔬菜食用的。人们根据不同的用途培养出很多新品种，花色有白色、红色、紫色等品种，地下块茎有圆形、卵形和椭圆形，其皮色有红色、黄色、白色和紫色的不同品种。一般用块茎上的“芽眼”切下播种，如果用种子种植，很快就会产生变异，因此非常容易出现新品种。 2马铃薯的市场效益分析（为什么选马铃薯做实验材料） 马铃薯是世界上仅次于小麦、水稻和玉米的第四种主要农作物。就单位面积出产的干物质而言，它高于小麦、大麦和玉米，就单位面积出产的蛋白质而言，分别为小麦、水稻和玉米的2.02、1.33和1.20倍。目前我国马铃薯常年种植面积为467万公顷左右，鲜薯年总产量5500万吨，居世界第一位。种植区域主要分布在黑龙江、吉林、内蒙古、山西、甘肃、青海、云南、贵州、四川等广大地区。但是我国的马铃薯加工业发展十分缓慢，基本上以鲜食为主，少部分用于传统食品加工和制取粗淀粉，深加工产品很少，而且加工生产规模小，工艺落后。20世纪90年代国内以马铃薯为原料的食品工业进入了一个蓬勃发展的时期，然而产品与国外同类产品相比，无论是在色泽、口味、品质，还是在包装上均存在一定差距。 马铃薯块茎水分多、脂肪少、单位体积的热量相当低，所含的维生素C是苹果的10倍，B族维生素是苹果的4倍，各种矿物质是苹果的几倍至几十倍不等，土豆是降血压食物膳食中某种营养多了或缺了可致病。 近年来随着人民群众生活水平的日益提高，我国的食品结构出现了一些新的变化，中西方的饮食文化开始相互渗透和融合，马铃薯加工食品在我国同样备受欢迎。随着麦当劳、肯
马铃薯的块茎组织培养的研究 生命科学学院生物工程132班组长：林伟平组员：温楚婷凌琦雯刘钰荧 一,实验目的 (1)以马铃薯的块茎为材料，研究经过器官分化或愈伤组织增殖与再分化途径，获得较多的试管苗，掌握植物快速繁殖的基本方法和过程。 (2)观察和分析不同糖类对外植体愈伤组织诱导，增殖和器官分化的影响。 二,实验原理 在植物组织培养体系中，从外植体形成再生植株有不同的再分化途径，会受到培养基中不同浓度的糖的影响。植物的快速无性繁殖是指以合适的外植体为起始材料，在无菌条件下，通过合适的培养技术，在有限的空间，短时间内快速生产大量植株的技术。 三,实验材料，试剂与器具 (1)实验材料：马铃薯块茎 (2)试剂：实验十一配制的各种培养基母液，蔗糖，葡萄糖，琼脂，蒸馏水，1mol/LHCl,1mol/LNaOH,HgCl或次氯酸钠，吐温20，75%乙醇或20g/L新洁尔灭，无菌水等。 (3)器具：高压灭菌锅，分析天平，酸度计，光照培养箱，微波炉，冰箱，培养架，果酱瓶，烧杯（1000mL,500mL,100mL,50mL）,移液管，量筒，不锈钢镊子，剪刀，解剖刀，脱脂棉，培养皿，称量纸，记号笔，标签纸，药匙，玻璃棒，洗耳球，洗瓶，电炉，酒精灯 四,实验内容 1,确定培养基配方，MS+2，4-D1.0mg/L+6-BA1.0mg/L+8g/L琼脂+不同浓度的葡萄糖/不同浓度的蔗糖（分别为1%，2%，3%，4%的葡萄糖或蔗糖） 3,移液与溶化：将所需的各储存母液按顺序摆放好，将洁净的量筒，烧杯，移液管，玻璃棒，漏斗等放在指定的位置，准备好蒸馏水及瓶盖，包装纸等，取100mL小烧杯一只，用50mL 量筒量取大量元素，用各母液专用移液管分别吸取微量元素母液，铁盐母液，有机附加物母液，2，4-D母液，6-BA母液。取1000ml烧杯一只，先用量筒取1000mL蒸馏水倒入烧杯中，用记号笔画好液位线，将蒸馏水倒出一半，准确称取8g琼脂倒入烧杯中，置于电炉煮沸，待琼脂完全溶化后，加入10g葡萄糖，充分溶解后，将准备好的含大量元素，微量元素，铁盐，有机附加物和植物生长调节物质的母液混合物倒入烧杯中，用蒸馏水将盛过母液混合物的小烧杯洗三次，一并倒入1000mL烧杯中，加热至沸腾，将烧杯远离火源，并加蒸馏水定容至设定的液位线。 4,调节pH：用酸度计测定培养基的pH，用1mol/LHCl或1mol/LNaOH溶液将培养基的pH调整至5.8到6.0。调整时，应用玻璃棒不断搅拌。 5,分装：将溶化的培养基趁热均匀的分装于果酱瓶，每瓶30mL培养基，分装3瓶，随即封
国内外马铃薯产业发展现状及趋势一、国内外马铃薯产业发展现状与趋势 马铃薯是继玉米、水稻、小麦之后的世界第四大粮食作物，马铃薯适应性强、栽培模式多、经济效益好，在许多国家和地区被广泛种植，是世界上最大的非谷物类食品。马铃薯产业发展对于保障食物安全、促进农业现代化、发展区域经济等意义重大。 1.1国外马铃薯种薯产业发展现状与趋势马铃薯品质的好坏和产量高低关键在种 薯。因此，马铃薯种薯产业在马铃薯产业链中占有重要地位。 1.1.1国外马铃薯种薯产业发展现状中国、印度、俄罗斯、乌克兰、美国、德国、孟加拉国、波兰、法国和白俄罗斯是世界上十大马铃薯生产国。其中，荷兰是全球第 一马铃薯种薯出口大国，出口量超过了其他国家出口量的总和，种薯出口到60多个国家，其种薯生 产面积占总种植面积的21%，种薯单产达到30?35t/hm2，所种植种薯的75%用于出口，是农作物中产量、种植面积及经济效益最大的一种作物。 1 、马铃薯种薯生产体系 英国、荷兰主要以田间无性系筛选的方法获得脱毒快繁的基础材料和扩繁生产 种薯，而法国、德国、美国、加拿大和日本等种薯生产国家都采用茎尖脱毒、分生 组织培养的方法来获得脱毒快繁的基础材料和扩繁生产种薯。 2、马铃薯种薯生产技术 成熟和先进的种薯生产技术为生产优质、高产的种薯提供了强大的技术支撑和有效的质量保证。在荷兰，利用无性系选择、无性系快速繁殖、种薯催芽播种、种薯生产合理密植、测土精准施肥、GPS精细播种、GPS引导机械中耕 和除草、全自动灌溉系统及卫星图像分析应用、晚疫病防治专家预警系统、适时灭 秧等多种生产技术提高了马铃薯种薯的产量及品质，使其成为全球第一马铃薯种薯 出口大国。美国的爱达荷州被誉为“马铃薯之州”，驰名世界，该州马铃薯年种 植面积约15万hm2,平均产量达30t/hm2以上，面积和产量都占全美国的四分之一左右。爱达荷州马铃薯普遍丰产的原因也与其成熟、先进的生产技术密不可分。 3、马铃薯种薯检测和检验监督制度 完善的种薯检测和检验监督制度为种薯生产和质量定级提供了可靠的保障机制。 荷兰发达的种薯产业与其健全的马铃薯种薯检测、认证体系关系密切。在荷兰，承担种薯检测和认证工作的是荷兰农业种子和马铃薯种薯服务公司(NAK ）。该组织是荷兰农业部指定的荷兰农业种子和马铃薯种薯检测及定级的唯一权威组织。任何在荷兰生产经营马铃薯种薯和申请种薯合格证的个人和组织，必须得到NAK的批准。生产者和经销商必须服从NAK委员会为其制定的检测标准和规则，该检测标准应能符合任何国家的最严格的质量要求。在荷兰，每批出售的种薯的所有相关信息均被列在
摘要：主要从培养基的制作、脱毒苗的制取、继代培养、培养条件、瓶装苗污染控制等方面介绍了马铃薯脱毒苗快繁技术，为马铃薯快繁生产提供参考。 关键词：马铃薯；脱毒苗；快繁技术 马铃薯是我国主要的粮食、蔬菜及工业原料作物，其国民经济意义十分重要，在保证粮食安全生产方面发挥了重大作用。随着农业产业结构的调整，我国马铃薯的种植面积和总产量也在不断的增加。但在连年的栽培过程中，病毒或类病毒不断的侵染和积累，从而导致马铃薯种性变劣，长势逐步减弱，产量逐年降低。马铃薯快繁是在短时间内利用组织培养技术获得大量高质量的试管苗，应用种薯脱毒技术，培养无毒组培苗，在提高产量、保证品质、耐贮藏方面体现出了独特的优势[1]。 1 培养基的制作 1.1 培养基的配方 利用提供的母液和材料 MS+0.01mg/L NAA+3%蔗糖+0.56%的琼脂，pH 值为5.8，配置培养基1000mL,并均匀分装到24个培养瓶， 进行灭菌。具体配方材料见表1。 表1 培养基的配方材料 母液 浓度/扩大倍数母液吸取量（mL ） 称取量（g ） 大量元素2050.0—钙盐母液2050.0—磷酸盐溶液2050.0—铁盐 10010.0—微量元素10010.0—有机物10010.0—萘乙酸（NAA ）0.1mg/L 0.1—蔗糖3%—30.0琼脂粉 0.56%— 5.6 1.2 培养基的配制 1.2.1 仪器、用具与试剂 （1）仪器：pH 试纸、电磁炉、高压灭菌锅。（2）用具：移液枪、移液管、量筒、容量瓶、培养瓶、玻璃棒、洗瓶、烧杯、搪瓷缸、镊子、钥匙、称量纸、胶头滴管、抹布、卷纸、标签纸。（3）试剂：配置MS 培养基的各种母液、激素母液、琼脂、蔗糖、蒸馏水、 HCl 0.1mol/L 、NaOH 0.1mol/L 。 1.2.2 培养基制作 （1）将配置好的MS 培养基母液从冰箱中取出，检查是否沉淀或变色，避免使用已失效的母液。（2）用移液管移取各种母液，在移取时冲洗移液管，移取出后加入事先准备好装有蒸馏水的烧杯中定容，然后加入熬好的培养基中。（3）称取蔗糖、琼脂然后融化琼脂，边加热边搅拌防止糊底。直至琼脂全部融化及清撤见底，加入准备好的母液和蒸馏水。（4）混合培养基各个成分并定容，调整pH 值。用0.1mol/L 的NaOH 或HCl 液把pH 值调至5.8左右后，连续调3次所测定的平均值作为最后的用量值。加后一定要搅拌均匀。 1.3 培养基的分装 培养基合成后要趁热分装，1000mL 的培养基要分装到24个培养瓶中每瓶约 30 40mL 培养基。分装时要垂直向下，不要让培养基沾到杯壁上。然后快速地盖上盖子，盖子要拧紧。1.4 灭菌操作步骤 采用高压湿热法灭菌，在高压锅内加水至水位线淹没电热丝。将封装好的培养基、接种工具及需要的蒸馏水放入锅内，盖好锅盖接通电源，当压力升至0.05MPa 时用镊子打开排气阀排出锅内的冷空气，关闭排气阀。当压力升至0.1MPa 、温度为 121℃时维持15 20min 。让锅自然冷却，当压力为0时打开锅盖取出培养基和器具。注意：经高温灭菌后，培养基的pH 值会下降0.2 0.8，故调整后的pH 值应高于目标值0.5个单位。 2 马铃薯脱毒苗的制取 2.1 脱毒材料的选择 首先对进行脱毒复壮的马铃薯品种或材料进行田间株选和薯块选择。它不仅能提高脱毒效果，而且直接关系到经过脱毒后的材料能否应用。最好是在生长季节选择具有原品种优良特性（包括株型、叶形、花色、成熟期等性状）的健康植株，并做好标记；植株生长健壮，无明显的病毒性、真菌性、细菌性病害症状；单株产量和大薯率高；薯块无病斑、虫蛀和机械创伤的材料[2]。 2.2 茎尖脱毒2.2.1 催芽及热处理 为提高脱毒效果，脱毒材料在进行茎尖组织剥取前，应进行材料的热处理，以钝化 马铃薯脱毒苗组培快繁技术 秦晓萍 （甘肃省酒泉职业技术学院，酒泉 730500）
马铃薯组织培养 前言： 马铃薯组织培养的意义 .马铃薯（Solanum tuberosum）属茄科茄属植物! 常见的育种途径有: 常规二倍体杂交法,四倍体水平的品种间杂交法,远缘种间杂交法 ,2n配子利用法。这些途径都是通过有性生殖产生马铃薯变异体，通过系谱，回交，轮回选择的方法，需经过6-8代选出附合目标性状的新个体。进入 20世纪90年代后，随着生物技术的深入发展，人类对植物细胞遗传行为，基因表达传递行为达到分子水平深入了解，作物育种工作者开始引入了除单纯户外有性杂交育种之外，又一育种方法室内体细胞无性系变异育种法，其中组织培养（tissue culture）诱导再生植株的突变就是最常用的一种。当马铃薯外植体（茎尖脱毒分生组织）培养时，由于组培环境引发了细胞异染色质 DNA延迟复制, 产生了较田间自然突变率高出500倍的大量变异。这一现象已越来越被马铃薯育种工作者所认可，并成为一条马铃薯育种的有效途径。现从组织培养及组织培养在马铃薯育种上的发展历史，研究意义，研究方式以及未来展望等方面逐一论述。 马铃薯的市场效益（为什么选马铃薯作试验材料） 马铃薯是世界上仅次于小麦、水稻和玉米的第四种主要农作物就单位面积出产的干物质而言，它高于小麦、大麦和玉米，就单位面积出产的蛋白质而言，分别为小麦、水稻和玉米的2.02，1.33和1.20倍。目前我国马铃薯常年种植面积为467万公顷左右，鲜薯年总产量5 500万吨，居世界第一位。种植区域主要分布在黑龙江、吉林、内蒙古、山西、甘肃、青海、云南、贵州、四川等广大地区。但是我国的马铃薯加工业发展十分缓慢，基本上以鲜食为主，少部分用于传统食品加工和制取粗淀粉，深加工产品很少，而且加工生产规模小，工艺落后。20世纪90年代国内以马铃薯为原料的食品工业进入了一个蓬勃发展的时期然而产品与外同类产品相比，无论是在色泽、口味、品质，还是在包装上均存在一定差距。马铃薯块茎水分多、脂肪少、单位体积的热量相当低，所含的维生素C是苹果的10倍，B族维生素是苹果的4倍，各种矿物质是苹果的几倍至几十倍不等，土豆是降血压食物膳食中某种营养多了或缺了可致病。近年来随着人民群众生活水平的日益提高，我国的食品结构出现了一些新的变化，中西方的饮食文化开始相互渗透和融合，马铃薯加工食品在我国同样备受欢迎。随着麦当劳、肯德基等洋快餐在我国落户，其中必有一款的炸薯条、薯泥等马铃薯食品很受国内中层消费者的喜爱，尤其是儿童对其情有独钟，成为未来我国马铃薯食品潜在的庞大的消费群体。 1 马铃薯的生态习性和种类 马铃薯生长对土壤的适应性很强，但对气候要求凉、冷、燥，在湿热地区虽然也能生长，不过一代以后品种就会演化，需要经常从寒冷地区引进新的种。种薯在土温5～8℃的条件下即可萌发生长，最适温度为15～20℃。适于植株茎叶生长和开花的气温为16～22℃。夜间最适于块茎形成的气温为10～13℃（土温16～18℃），高于20℃时则形成缓慢。出土和幼苗期在气温降至-2℃即遭冻害。开花和块茎形成期为全生育期中需水量最大的时期。 马铃薯在原产地就有几百个品种，在世界各地又不断地培养新品种，目前全世界有几千个品种，有含淀粉比例较高，适合作为主食的，也有适合作为蔬菜食用的。人们根据不同的用途培养出很多新品种，花色有白色、红色、紫色等品种，地下块茎有圆形、卵形和椭圆形，