下载文档原格式
马铃薯茎尖脱毒技术体系优化研究马铃薯是一种粮、菜、饲、工业原料兼用型经济作物,其产量高、营养丰富、适应性强、分布广。
但是在马铃薯的连年种植过程中,产量和品质逐年下降,退化是造成这一后果的主要原因,而解决退化的有效措施就是生产脱毒种薯。
马铃薯茎尖培养脱毒苗是马铃薯脱毒种薯产业的基础,优质快速地茎尖培养为以后脱毒苗和脱毒薯的生产赢得了时间和效益,当前脱毒马铃薯茎尖培养效率低,成苗率和脱毒率达不到预期目的,因此优化马铃薯茎尖脱毒培养方法非常必要。
本试验对茎尖培养的培养基和脱毒方法对脱毒效果的影响进行了系统研究,得出了以下主要结果: 1.激素对马铃薯茎尖分化成苗的影响本试验以MS培养基为基础培养基,添加不同种类及不同浓度的植物生长调节剂,共24个处理组合,研究了不同植物生长调节剂及不同浓度配比对茎尖分化成苗的影响。
结果表明,诱导茎尖分化的成苗不仅与植物生长调节剂的绝对浓度有关,又与不同种类植物生长调节剂的配比有关。
其他条件相同的情况下,添加GA<sub>3</sub>浓度为0.1mg/L时的成苗率比浓度为0.2mg/L时的成苗率高,且差异显著,说明GA<sub>3</sub>的浓度对马铃薯的成苗具有极大影响。
试验得出,培养基中加入0.1mg/LGA<sub>3</sub>有助于马铃薯茎尖更好的生长和分化,0.2mg/L GA<sub>3</sub>对茎尖分化的成苗率有抑制效应。
同等条件下培养基中添加0.1mg/L的IAA和0.2mg/L的IAA相比较,0.2mg/L IAA的成苗率较高,达50%,0.05 mg/L的NAA和0.1mg/L的NAA相比较,0.05mg/L NAA的成苗率较高,可达56.98%,但0.05mg/L的NAA比0.2mg/LIAA成苗率更高,说明使用0.05mg/LNAA作为生长素对马铃薯茎尖的分化生长有较好的促进作用。
马铃薯茎尖脱毒技术研究本试验以马铃薯茎尖分生组织为实验材料,应用单一试剂和组合试剂法对马铃薯茎尖进行消毒预处理,消毒试剂包括酒精、漂白粉、氯化汞、次氯酸钠、次氯酸钙和过氧化氢六种试剂。
通过分析植株染菌和成活等生长情况来判断消毒的效果。
在消毒时长与无菌水冲洗次数上进一步优化,采取酒精处理30s、60s和120s,无菌水冲洗2、4和6次,氯化汞处理2min、3.5min和5min构成三因素三水平正交实验,依据染菌和成活情况确定最优的灭菌组合,结果表明氯化汞处理 3.5min,酒精处理120s,无菌水冲洗6次,马铃薯的脱毒苗无菌成活率可达90%以上采用黄皮薯“中薯一号”、白皮薯“早大白”、紫皮薯“紫薯”,研究不同品种的茎尖分生组织经脱毒培养后的成活情况,结果表明中薯一号的成活率可达到70%,而紫薯的成活率为0%,表明不同品种的茎尖脱毒效果和效率存在显著的差异。
研究了“中薯1号”不同类型的外植体茎尖的脱毒培养情况,包括母薯上、自然环境下植株上的侧芽和培养箱中脱毒幼苗的侧芽茎尖三种。
结果表明母薯上茎尖脱毒培养出的苗染菌率较高,生长情况比较差的,成活率只有50%；培养箱中的是经过脱毒预处理且在无菌环境下生长的侧芽,虽没有自然环境下的苗长势旺盛,但成活率能达到80%,所以采用无菌苗的侧芽尖进行脱毒培养效果最好。
进行了培养基组分的优化,设计了在MS培养基中加入不同浓度的激素PIX以及不同果汁添加物的试验,结果表明激素PIX对促进马铃薯脱毒苗缩短节间,增加茎粗,抑制徒长,促进壮苗有着显著的效果。
当PIX浓度为0.5mg/1和1.Omg/l时,马铃薯的脱毒苗长得最壮,分枝最多,叶子最多,且颜色为绿色,有的是墨绿色。
不同浓度的果汁添加物对脱毒苗均有促进或抑制作用,它们能提供脱毒苗在生长过程中所需要一些微量营养成分、生理活性物质和生长物质等,其中低浓度的水萝卜汁最有助于马铃薯脱毒苗的生长。
马铃薯茎尖脱毒、愈伤组织诱导及分化技术优化研究的开题报告一、研究背景和意义马铃薯是我国重要的食用和工业原料作物之一，也是世界上最重要的食用作物之一。
但是，马铃薯叶片、茎尖等组织中常常携带多种病毒，如果不进行脱毒处理，就会对马铃薯的生产和质量造成很大影响。
另外，马铃薯茎尖是愈伤组织诱导和分化的重要材料之一，开展马铃薯愈伤组织的研究对马铃薯的育种和繁殖有着重要的意义。
现有的马铃薯茎尖脱毒及愈伤组织诱导和分化技术存在着一些问题，如操作复杂、效率低下、成本高等问题。
因此，本研究旨在优化马铃薯茎尖脱毒、愈伤组织诱导及分化技术，提高脱毒效率和愈伤组织诱导率，降低成本，并进一步探讨其应用前景和发展方向。
二、研究内容和方法1. 马铃薯茎尖脱毒技术优化研究通过对传统马铃薯茎尖脱毒方法的改进和优化，探索更为高效、稳定的脱毒技术，主要包括以下方面：（1）不同消毒和灭菌方法对茎尖脱毒效果的影响研究；（2）不同处理条件对茎尖脱毒效果的影响研究；（3）茎尖脱毒后的存放条件和时间对其真实性的影响研究。
2. 马铃薯茎尖愈伤组织诱导和分化技术优化研究通过对马铃薯茎尖愈伤组织诱导和分化技术的优化，提高愈伤组织诱导率和分化效率，主要包括以下方面：（1）不同物种、不同品种马铃薯茎尖的愈伤组织诱导率研究；（2）不同植物生长调节剂浓度对愈伤组织诱导和分化的影响研究；（3）外源DNA导入对马铃薯愈伤组织形成的影响研究。
3. 研究方法本研究将采用实验室培养和相关分析方法，包括细胞培养、组织培养、酶活性测定、PCR检测等方法，对马铃薯茎尖脱毒、愈伤组织诱导和分化技术进行优化研究，同时通过对比实验和数据分析，探索更为高效、稳定的脱毒和愈伤组织诱导技术，并对其应用前景做出初步预测。
三、研究预期成果本研究预计通过优化马铃薯茎尖脱毒、愈伤组织诱导和分化技术，取得以下预期成果：（1）探索出更为高效、稳定的马铃薯茎尖脱毒技术，并提高脱毒效率和真实性；（2）提高马铃薯愈伤组织诱导率和分化效率，探索出更为稳定的愈伤组织诱导和分化技术；（3）通过实验数据分析，预测优化技术将应用到实际生产中，并对其发展前景进行初步分析和探讨。
马铃薯茎尖脱毒及组培快繁技术研究摘要：以下寨65和青薯168为实验对象，采用不同培养基，对马铃薯两个品种进行脱毒及组培，对培养基及关键技术措施进行了分析，结果表明：与青薯168在不同培养中生长表现不同，下寨65茎尖组织在MS中加入BA2 mg/L 的培养基中生长表现突出，而青薯168茎尖组织在MS中加入BA2 mg/L的培养基中成苗率较高。
在同等条件下，加入IAA 0.50 mg/L的培养基宜用于下寨65脱毒苗的组织快繁，加入IAA 0.30 mg/L的培养基宜用于青薯168脱毒苗的组织快繁。
关键词：马铃薯；茎尖脱毒；组织快繁我国是马铃薯生产第一大国，2008年种植面积达到573.33万hm2，鲜薯总产达8 800万t，平均单产约15.45t／hm2，总产位居世界第一[1]。
马铃薯是无性繁殖作物，体内病毒的积累可使品种种性退化、品质和产量降低，对其生产造成严重危害[2]。
因为大部分病毒不能感染马铃薯茎尖组织，通过茎尖脱毒，生产脱毒种薯用于生产是防止马铃薯退化的切实可行的措施[3]。
马铃薯脱毒及组培快繁中所用基质和培养条件等关键技术方面的报道较多，但对下寨65和青薯168报道较少，本文既通过对马铃薯下寨65和青薯168两个品种进行脱毒及组培试验研究，为西部高原地区当家品种脱毒种薯的工厂化生产提供帮助。
1材料和方法1.1供试材料采用当家品种下寨65和青薯168。
1.2试验方法1.2.1催芽于11月中旬左右，挑拣表皮光滑、正常薯形、大小均匀、无病害和无损伤薯块，放置在有供暖的房间，室内温度24 ℃左右进行催芽。
在催芽前薯块正处于休眠期，采用0.05～0.l0 mg/L的GA3来处理薯块，浸没于GA3溶液中10～20 min，以打破休眠[4]。
1.2.2种薯处理采用MS培养基，加入不同配比的激素，准备BA、NAA、GA3、IBA和IAA，由于激素在培养基中用量非常少，且不易溶于水，所以采用特殊的配置方法，配置成500 mg/L的溶液待用。
不同马铃薯植株茎尖脱毒试验研究作者：于凤丽李搏远来源：《现代园艺·下半月园林版》 2017年第3期于凤丽李搏远（黑河学院，黑龙江黑河164399）摘要:以“中薯1 号”、“早大白”、“大西洋”3 种马铃薯茎尖分生组织为试验材料，研究不同品种的马铃薯茎尖分生组织及同一品种不同来源植株脱毒苗的成活情况。
结果表明，“中薯1 号”的成苗率可到达70%，“早大白”的成苗率为50%，而“大西洋”的成苗率仅为40%，表明不同品种马铃薯茎尖脱毒成效存在差异。
“中薯1 号”种薯侧芽培养出的脱毒苗染菌率较高，生长情况较差，成活率为50%，培养箱培养成活率为80%。
关键词:马铃薯；茎尖脱毒；培养基金项目：黑河学院青年科研拔尖人才支持计划资助；黑河学院服务地方专项项目资助。
马铃薯种植过程中，容易感染病毒，病毒侵染马铃薯植株后会逐代传递并积累[1]，最终导致种性退化而大幅度减产。
解决这一问题的最有效办法是，采用茎尖脱毒技术脱除已侵染到块茎中的病毒，使之恢复原有品种的生长特性[2]。
本文对“中薯1号”、“早大白”、“大西洋”3个品种的马铃薯茎尖进行脱毒研究，并对“中薯1号”的3种来源的植株进行了脱毒研究，进而比较不同品种马铃薯脱毒的差异，及同一品种不同来源植株脱毒的差异。
1 试验材料、试验试剂及试验仪器1.1 试验材料、试验试剂以马铃薯品种“中薯1号”、“早大白”、“大西洋”为基本试验材料。
马铃薯品种来源于齐齐哈尔市马铃薯育种培育中心。
试验用试剂：蔗糖、琼脂粉、硝酸钾、硝酸铵、氯化钙、硫酸镁、磷酸二氢钾、硫酸亚铁、乙二胺四乙酸钠、硫酸锰、硫酸锌、硼酸、硫酸铜、碘化钾、氯化钴、钼酸钠、甘氨酸、肌醇、烟酸、维生素B2、维生素B6、吲哚乙酸等。
1.2 试验仪器与器皿显微镜（时代TMR200）、电子分析天平（精确到0.1g）、PHS-3C型精密PH计、LCZX-4OSBI型立式自动电热压力蒸汽灭菌器、JB-CJ-1FX型超净工作台、HPG-280B型光照培养箱、海尔冰箱、电热炉、锥角瓶、培养皿、无菌封口膜、烧杯、容量瓶、移液枪、滴管、解剖刀等。
组培课程论文题目马铃薯茎尖培养脱毒研究进展学院生命科学技术学院专业生物技术(制品方向)姓名刘小强指导教师李胜职称教授甘肃农业大学生命科学技术学院二〇一一年六月马铃薯茎尖培养脱毒研究进展刘小强（甘肃农业大学生命科学技术学院09级甘肃兰州 730070）摘要: 综述了马铃薯茎尖培养脱毒的原理,影响马铃薯茎尖培养脱毒的因素，马铃薯试管苗快繁技术与培养条件优化等方面的研究进展,指出了茎尖培养脱毒中尚存在的一些问题。
关键词: 马铃薯；茎尖培养脱毒；脱毒试管苗；前景马铃薯是世界上第四大粮食作物，属茄科茄属双子叶植物，其特点是产量高、营养丰富、适应性强、经济价值较高，又是重要的工业原料。
随着农业产业结构的调整和国内外马铃薯加工业的不断发展扩大，市场对马铃薯的需求也逐渐增多，近年来，我国马铃薯的栽培面积不断扩大，占世界第二位。
但是长期以来有“植物癌症”之称的病毒病一直困扰着马铃薯生产的发展。
马铃薯整个生育期均易感染多种病毒病，在我国马铃薯产区危害马铃薯的主要病毒和类病毒有：马铃薯X 病毒（PVX）、马铃薯Y 病毒（PVY）、马铃薯卷叶病毒（PLRV）、马铃薯A 病毒（PVA）、马铃薯S病毒（PVS），还有一种类病毒-马铃薯纺锤块茎类病毒（PSTVD）。
其中PVY、PLRV、PVX 是危害马铃薯最严重的病毒。
田间表现使植株矮小，叶片翻卷、花叶、皱缩，马铃薯品种种性退化，品质变劣，甚至失去种用价值。
目前主要通过茎尖脱毒获得脱毒试管苗的方法防治该病的发生。
目前,马铃薯茎尖培养脱毒的研究及在生产上的广泛应用取得了巨大的经济效益。
近年来, 这方面的研究又取得了不少研究成果, 现作一综述。
1 马铃薯病毒病及茎尖培养脱毒原理目前, 在马铃薯作物上已发现了多种病毒、类病毒以及植原体, 已报道的就有25 种之多, 但仅少数病毒危害严重, 如马铃薯Y 病毒( PVY) 、马铃薯卷叶病毒(PLRV) 、马铃薯A 病毒和 X 病毒(PVA、PVX) 以及马铃薯纺锤块茎类病毒(PSTVD) 等。
马铃薯茎尖脱毒培养技术的研究进展第一组：郭保密、尹韵绮、张岳摘要：马铃薯茎尖脱毒技术的应用克服了马铃薯的病毒病和类病毒病的危害，是目前解决马铃薯退化最为有效的途径。
文章从马铃薯茎尖脱毒的原理、过程以及影响病毒去除的因素等方面进行了综述，以期为马铃薯茎尖脱毒技术的深入研究提供一定的理论依据。
关键词：马铃薯；茎尖脱毒；病毒类型；影响因素栽培种的马铃薯（Solanum tuberosumL.,2n=48）是双子叶种子植物，属茄科（Solanceae）茄属（Solanum）的一年生草本植物，生产上绝大多数是利用块茎进行无性繁殖[1]。
马铃薯栽培种起源于南美洲秘鲁以及沿安第斯山脉智利沿岸、玻利维亚等地，在五大洲140多个国家都有种植和分布。
2004年国际马铃薯中心（CIP）和国际食品政策中心（IFPRI）合作研究表明，在世界范围内，到2020年对马铃薯的需求将有望增长40%，超过水稻、小麦和玉米的增长。
特别是在亚洲和非洲，对马铃薯的需求将增长更快[2]。
随着农业产业结构的调整，我国马铃薯的种植面积和总产量也在不断的增加，到2010年，我国马铃薯种植面积达到600万hm2，产量达到1.8亿t[3]。
但在连年的栽培过程中，病毒或类病毒不断的侵染和积累，而病毒在马铃薯植株中是系统感染，能阻碍病毒增殖的药剂往往也会影响寄主植物的代谢系统，到目前为止，还没有像防治病虫害一样能有效防治植物病毒病的化学药剂。
病毒的侵染及其在薯块内积累引起了马铃薯的退化，马铃薯退化后一般减产20%～30％，严重者减产80％以上[4]。
随着病情逐年加重，严重者失去发芽能力，最后失去利用价值，给我国马铃薯乃至世界马铃薯生产带来十分严重的危害，使得栽培面积及产量难以进一步提高[5]。
在我国主要侵染马铃薯的病毒有7种，它们是PVX、PVY、PVS、PVM、PAMV、PAV、PLRV[6]，其余侵染马铃薯的病毒是来自其它寄主植物的病毒。
采用无病毒植株是解决马铃薯退化的有效途径，获得无病毒植株的途径有自然选择、物理学方法、化学药剂处理和生物学方法[7]。
其中最行之有效的方法便是生物学方法中的茎尖脱毒。
文章就马铃薯茎尖脱毒培养技术中各个环节的研究进展和影响因素做出综述，以期为马铃薯茎尖脱毒技术的深入研究提供参考。
1茎尖培养脱毒的原理马铃薯脱毒的方法有多种，其中以茎尖脱毒的效果最好，已成为最常用和经济有效的脱毒方法，其原理是利用病毒在植物体内分布的不均匀性，即根尖和芽尖的分生组织含病毒量少或不含病毒的特性，导致这一现象的原因可能由以下因素引起：（l）分生组织旺盛的新陈代谢活动。
病毒的复制须利用寄主的代谢过程，无法与分生组织旺盛的代谢活动竞争；（2）分生组织缺乏真正的维管组织。
大多数病毒在植株内通过韧皮部进行迁移，或在细胞间通过胞间连丝传输，因为细胞与细胞间的移动速度较慢，在快速分裂的组织中病毒浓度高峰被推迟；（3）高浓度的生长素。
分生组织的生长素浓度通常很高，可能影响病毒的复制[8-9]。
根据这些原理，Morel等人在1955年以马铃薯为材料，利用茎尖组织培养，获得了无病毒植株[10]。
这个试验的成功，为马铃薯脱毒开辟了新途径。
现在几乎所有马铃薯生产国都在使用这种技术，马铃薯脱毒去除了主要病毒，恢复了原品种的特征特性，有效解决了马铃薯退化的问题。
2马铃薯脱毒过程2.1脱毒种薯生产程序采用微茎尖组织培养的方法，诱导出苗，采用联免疫吸附试验法或指示植物方法鉴定马铃薯病毒和类病毒，经鉴定后，无主要病毒及类病毒的试管苗可定为脱毒试管基础苗。
试管基础苗在无菌条件下，采用固体、液体培养基相结合的方法，进行扩繁基础苗，在防虫网室栽植或封闭温室扦插，生产出原原种（或称脱毒小薯）。
用原原种在一定隔离条件下产生原种1代，以后逐级称为原种2代、良种1代、良种2代。
2.2茎尖培养脱毒2.2.1取材一般多采用在室内发芽，芽经热处理（38℃）2周。
然后取顶芽或侧芽1厘米的茎尖，在自来水下冲洗干净，无菌条件下先用70％的酒精浸润组织15-20秒，再用2％的次氯酸钠溶液浸泡4-5min，然后用无菌水冲洗3次。
把消毒好的芽放在解剖镜下仔细剥离，逐层剥去幼叶，露出圆滑的生长点，可以留1-2个叶原基，0.2—0.3毫米，随即接种于MS液体培养基上，每升加0.1mgNAA 、 0.2mgGA3、0.5BA，2%蔗糖，p H值5.8。
2.2.2培养条件温度21~25℃、光量2000-3000 lx(勒克斯)、光照12h/d。
2-3周愈伤，4-5周绿点，3--6月长成2-3厘米小芽，越慢越好，出芽很快的扔掉。
2.2.3继代和生根培养成功的马铃薯脱毒苗，经ELISA（试剂盒）鉴定后（试管苗应每3月检测一次，每年4次）鉴定后，采用固体、液体培养基相结合方法扩繁。
取试管苗单节切段扦插在（或平放）固体培养基上，每瓶可插20个左右茎段，经20d左右发育成5~10cm高小植株，继续进行切段繁殖，此法速度快，每月可繁殖5~8倍，试管苗多节接种在液体培养基上，进行浅层静止液体培养。
2.2.4驯化为增强试管苗对温室内环境条件的适应能力，移植前对试管苗要进行光、温锻炼。
炼苗期温室内的温度：白天23~27℃，夜间不低于14℃。
炼苗的具体方法是：移植前7d左右，将长有3~5片叶、高2~3cm的试管苗，在不开瓶口的状态下，从培养室移至温室排好。
为防止强光、高温灼伤试管苗，在温室顶上加盖一层黑色遮阳网。
2.3脱毒苗切繁基础苗成活进入正常后便可切繁，但切繁量的多少和质量的高低，除与前边提到的水与温湿度条件有关外，能否掌握正确的切繁方法和适宜的切繁苗龄也是非常重要的。
脱毒苗切繁主要是剪取顶部芽尖茎段（主茎芽尖和腋芽芽尖）直接扦插。
3影响病毒去除效率的因素3.1茎尖大小和病毒种类马铃薯茎尖培养脱毒的效果与茎尖大小直接相关。
由于病毒浓度在茎尖附近呈递减分布，因此茎尖越小脱毒效果越理想，但茎尖越小就越难成活。
王秀英[11]研究表明：切取的茎尖大小对茎尖的成活率和脱毒率关系重大，茎尖越小，成活率越低，脱毒率越高；反之，茎尖越大，成活率越高，脱毒率越低，一般茎尖大小以0.2mm以下为宜。
齐恩芳等[12]以甘肃省主栽品种陇薯6号为材料，研究了茎尖大小对马铃薯茎尖培养脱毒效果的影响，结果表明，叶原基数为2的茎尖脱毒效果最好。
由于不同病毒在茎尖分布不同，脱毒的效果也与病毒种类有关。
各种病毒的脱除从易到难顺序如下：PLRV、PVA、PVY、PAMV、PVM、PVX、PXS和PSIVd，但此顺序也不是绝对的，会因品种、培养条件、病毒株系不同等而有所变化[13]。
3.2化学治疗剂的使用化学治疗剂能提高培养基中去除病毒的能力。
如在培养基中加入碱性孔雀绿、2，4-D和硫尿嘧啶等病毒抑制剂，能显著提高产生无病毒植株的百分率。
在甘薯茎尖培养脱毒研究中发现，培养基中添加适量的TS制剂（一种病毒钝化剂）虽稍微抑制了茎尖的发育，但可以提高脱毒率，TS制剂对马铃薯茎尖培养脱毒是否有相同的效果，值得研究和探讨[14]。
刘华、冯高[15]采用不同浓度高锰酸钾、过氧化氢、新洁尔灭、尿素稀释液对马铃薯进行浸种处理，发现病毒钝化明显，用处理过的薯块做种薯，产量明显提高。
而Cassells，A.C等[16]将病毒唑加入培养基中，培养马铃薯的分生组织和外植体，可脱除马铃薯的X、Y、S和M病毒。
4培养条件的优化4.1配制培养基的不同水质在生产实践中可以用自来水代替蒸馏水配制培养基和降低碳源等措施来降低成本[17]。
牛爱国等研究发现，只要pH调到5.8左右用自来水代替去离子水对幼苗生长没什么影响，适当降低碳源或者用食用白糖代替试剂蔗糖具有相同的效果[18]。
但各地自来水水质不同，因此应事先做试验。
通过雨水（雪水）、自来水（开水）、蒸馏水的对比试验表明，雨水（雪水）配制的培养基更利于试管苗快繁，脱毒苗生根量大、茎粗、生长势好[19]。
4.2碳源及其浓度食用蔗糖与试剂蔗糖具有相同的效果，因此，完全可以用食用蔗糖代替试剂蔗糖作为培养基的碳源[20]，为了朝着敞开培养迈进，一些研究者在培养基中只加琼脂和大量元素，在室外自然光照下培养，幼苗能够成活，并能生长，只是比有糖的要差得多。
而理论推测，其自养能力是比较强的，移栽于土壤中成活率应有所提高。
因此较为合理的做法应根据不同的培养条件，适当降低碳源含量。
韦莹研究发现，不同蔗糖浓度对芽诱导效果不同，经过试验确定最佳蔗糖浓度为30mg/L，经此培养的植株生长旺盛，根系发达[21]。
在这方面，利用自然光源培养的马铃薯脱毒试管苗，培养基最适碳源浓度为12.5g/L，较人工灯光培养的最适碳源浓度20g/L减少了1/3，移栽成活率提高了8.91%[22]。
4.3光照与营养元素只要气温适宜（10℃～30℃），在散射太阳光照下（遮阳）幼苗生长比室内灯光下健壮得多，提高移栽的成活率，此外碳源浓度可以较人工灯光培养降低1/3，大大降低了生产成本[23]。
试验证明，培养基中除去微量元素也不影响幼苗的生长。
至于继代培养，长期缺乏这种元素，是否会使幼苗产生微量元素缺乏症尚无试验证据。
而对K+含量的研究表明，KH2PO4的含量在140～155mg/L，培养的试管苗株高合适、粗壮、叶片大，有利于栽培，且栽植成活率高[24]。
4.4生长调节物质及抗生素在马铃薯脱毒试管苗生根培养中，通常加BA作为生根诱导剂。
在生产中为了缩短培养时间，降低生产成本，可以以低价的生根粉代替BA，培育出的试管苗在生根、生长等方面都优于BA。
在简易MS培养基中加入浓度为10～20mg/L的生长延缓剂B9，培育出的试管苗株粗壮、叶片大，利于栽植，成活率高[25]。
而在继代培养试验中，添加适当浓度的Met对苗的增殖有促进效果，浓度以1.0mg/L比较适宜苗的生长。
加入0.3mg/L的生长素NAA使苗生长好，生根速度快、条数多。
韦莹发现，以6-BA浓度为1.0mg/L和NAA浓度为0.5mg/L配合使用效果比较理想，不仅使苗增殖倍数提高，而且植株比较粗壮，叶片大且浓绿。
此外，在培养基中加入抗生素具有抑菌、杀菌和改善脱毒苗根系生长的作用。
如果将氯苄青霉素和硫酸链霉素联合应用，具有更加明显的抑菌效果[26]。
当然，生长延缓剂和抗生素的加入与否以及加入量的多少应依具体情况而定。
5展望综上所述，马铃薯脱毒技术研究尽管在自然选择、物理学、化学、生物学等方面都作了大量研究工作，并取得了较大成绩，但目前最行之有效的方法是生物学方法中的茎尖培养脱毒。
而在茎尖培养脱毒过程中，影响茎尖成活、成苗及脱毒效率的因素诸多，尤其是茎尖培养过程中培养基中所加的植物生长调节剂的绝对浓度和配比，及培养基的状态等研究上存在着较大分歧。
在茎尖培养脱毒过程中热处理的使用虽然可以显著提高对有些病毒的脱毒率，但热处理法局限性很大，对一些球形病毒处理效果很好（如PLRV），但对线状病毒及杆状病毒处理效果并不是很好（如PVX，PVY等病毒），且在一些温热处理比较敏感的材料应用上，存在一定困难。
