百合的组织培养综述

竭诚为您提供优质文档/双击可除百合组培实验报告篇一：植物组织培养实验报告实验一植物组织培养实验报告一实验目的让植物组织经过脱分化作用，形成愈伤组织，经过再分化作用，愈伤组织又能重新分化为有结构的组织和器官，最终形成完整的植株。

二实验原理植物组织培养是把植物的器官，组织以至单个细胞，应用无菌操作使其在人工条件下，能够继续生长，甚至分化发育成一完整植株的过程。

植物的组织在培养条件下，原来已经分化停止生长的细胞，又能重新分裂，形成没有组织结构的细胞团，即愈伤组织。

这一过程称为“脱分化作用”，已经“脱分化”的愈伤组织，在一定条件下，又能重新分化形成输导系统以及根和芽等组织和器官，这一过程称“再分化作用”。

植物激素在此过程中起着重要的作用，吲哚乙酸（IAA）和6–苄基氨基腺嘌呤（6–bA）的比例，决定了根和芽的分化。

三实验器材（一）试剂乙醇、IAA或2，4–D、hgcl2（或次氯酸钠）、6-苄基氨基腺嘌呤（6-bA）ms培养基（二）仪器设备培养室，高压灭菌锅，水浴锅，解剖刀，三角烧瓶（100mL），烧杯，量筒，培养皿，超净工作台，分析天平，长镊子，剪刀，橡皮筋等三实验步骤1.配制培养基（1）愈伤组织诱导培养基：ms培养基（蔗糖含量为10g/L，2,4–D含量为2mg/L，琼脂10g/L）。

（2）试验培养基：在ms培养基中按表33–1加入IAA和6–bA。

吲哚乙酸先用少量0.1mol/Lnaoh溶解，6-苄基氨基腺嘌呤先用少量0.1mol/Lhcl溶解，然后用蒸馏水稀释，再加入培养基中。

2.培养基灭菌将配好的培养基加入琼脂加热溶解，调至ph5.8，趁热分装于100mL三角烧瓶中，每瓶约20mL。

待培养基冷却凝固后，用两层称量纸包扎瓶口，并用橡皮筋扎牢，然后在高压灭菌锅中121℃（1kg/cm2）下灭菌20min。

取出三角烧瓶放在台子上，冷却后备用。

接种操作所需的一切用具（如长镊子、解剖刀、剪刀等）及灭菌水，需同时灭菌。

百合珠芽组培繁殖技术百合珠芽组培繁殖技术是一种基于组织培养的生物技术，用于推动百合苗木的快速繁殖和大量生产。

本文将详细介绍百合珠芽组培繁殖技术及其应用。

一、百合珠芽组培繁殖技术的定义百合珠芽组培繁殖技术是指将从百合茎叶、花序等部位分离得到的珠芽、球墨体、茎尖等组织，经过营养基进行处理，使其分化和增殖成百合幼苗的技术。

该技术主要应用于高档食品、药材及观赏园艺等领域的快速繁殖和大量生产。

二、百合珠芽组培繁殖技术的步骤1.取材处理百合珠芽组培繁殖技术的第一步是取材处理。

常用的材料有百合的球茎、花序、茎尖、离体珠芽等。

在取材时，应尽量选择无损、新鲜、健康的组织，并在无菌条件下进行。

取材后要立即进行处理，以保持样本新鲜。

2.消毒处理消毒处理是百合珠芽组培繁殖技术的重要一环，关系到后续操作的成败。

在消毒时，可以采用醇、氯、过氧化氢等消毒剂，也可以采用高压灭菌的方法。

消毒时间和剂量的选择应根据组织的类型和大小、处理温度和时间、消毒剂的种类和浓度等因素加以合理确定。

3.分离组织分离组织是百合珠芽组培繁殖技术的核心操作之一。

在此步骤中，要将珠芽、球墨体、叶片、茎尖等组织分离开来，并通过筛选和鉴定，选择出强生长能力和快速分化的优良组织。

分离组织后，将其置于营养基中进行培养。

4.培养基处理培养基处理是百合珠芽组培繁殖技术中最关键的一步。

在处理过程中，需要根据不同组织的特点和需求设计出合适的营养基成分和浓度，以满足组织生长与分化所需。

营养基的主要成分包括无机盐、有机物、维生素、激素等。

5.组织培养组织培养是百合珠芽组培繁殖技术中最关键的步骤之一。

在此步骤中，需要将经过处理的组织转移到营养基中进行培养，以促进组织生长、分化和增殖。

组织培养的条件应根据不同的组织类型和处理方式进行合理的调整，例如温度、湿度、光照、激素浓度等。

6.移栽和扩繁在组织培养一定时间后，可以选择将获得的百合幼苗进行移栽和扩繁。

移栽时可将百合苗木转移到培养基中，并加入适量的生长调节剂和矿质元素进行加速生长。

一、实训目的本次实训旨在通过学习百合初代培养的方法和技巧，掌握百合组织培养的基本原理和操作流程，提高对植物组织培养技术的理解和应用能力。

同时，通过对百合初代培养过程中的各个环节进行实践操作，培养自己的动手能力和团队协作精神。

二、实训内容1. 百合组织培养概述百合（Lilium）是百合科百合属多年生草本植物，具有较高的观赏价值。

百合组织培养技术是一种无性繁殖方法，通过将百合的外植体接种到培养基上，使其在无菌条件下生长、分化，最终形成完整的植株。

2. 百合初代培养方法（1）外植体选取选取百合鳞茎或叶片作为外植体。

鳞茎选取饱满、无病虫害的健康鳞茎；叶片选取叶尖或叶缘部位。

（2）外植体消毒将外植体放入70%酒精中浸泡30秒，然后用无菌水冲洗3-5次。

将消毒后的外植体放入0.1%的氯化汞溶液中浸泡5-10分钟，再用无菌水冲洗3-5次。

（3）接种将消毒后的外植体接种到含有不同植物激素的培养基上。

培养基成分：MS培养基+6-BA 0.5mg/L+NAA 0.1mg/L。

（4）培养条件将接种后的培养基放入培养箱中，温度设置为25℃±2℃，光照强度为1000勒克斯，每天光照12-14小时，空气相对湿度保持在70%-80%。

3. 百合初代培养过程（1）愈伤组织诱导接种后3-5天内，外植体开始生长，形成愈伤组织。

愈伤组织呈白色、质地松软。

（2）芽分化愈伤组织培养7-10天后，开始分化出芽。

芽分化过程中，可适当调整培养基中植物激素的比例，以促进芽的分化。

（3）生根芽分化后，将芽转移到含有NAA 0.1mg/L的培养基上，促进生根。

生根过程中，芽可逐渐转移到生根培养基中。

（4）移栽当百合植株长到2-3片叶时，可将其移栽到营养土中。

三、实训结果与分析1. 百合初代培养结果通过本次实训，成功诱导出百合愈伤组织，并分化出芽和根，最终形成完整的植株。

2. 实训结果分析（1）外植体选取对百合初代培养效果有较大影响。

鳞茎外植体诱导愈伤组织的效果优于叶片外植体。

百合组织培养快速繁殖组织培养是进行植物快速繁殖的常规手段,通过组织培养可以快速获得无病毒植株,对繁殖珍贵花卉品种是简易而有效的方法。

本研究通过组培快繁再生体系的建立、试管鳞茎的增、大再分化及移栽后的生理检测对东方百合“西伯利亚”、“索邦”和铁炮百合“白天堂”的快速繁殖进行了系统的研究。

以鳞片和试管苗叶片为外植体,通过直接诱导不定芽再生的方式,对启动培养、增殖培养、生根移栽等组织培养快速繁殖各个环节的影响因素进行了分析。

研究结果表明:1、MS基本培养基中附加适宜浓度配比的NAA与6-BA可诱导不定芽再生,再生频率在80%以上。

2、试管苗叶片下部分化能力较强,是建立高频快速增殖体系的首选材料:“西伯利亚”和“白天堂”再生芽的能力要强于“索邦”;用NAA或IBA与KT组合诱导不定芽增殖效果较好,再生频率在86%以上,适宜“白天堂”“西伯利亚”“索邦”试管苗增殖的激素配比分别为NAA 0.2mg/L+KT 0.4mg/L、NAA 0.1mg/L+KT0.2mg/L、IBA 0.1mg/L+KT 0.2mg/L。

3、百合试管苗具有较强的生根能力,在继代增殖的同时就可达到生根的目的。

4、以珍珠岩:土(3:1)为移栽基质,选取鳞茎直径≥1cm的试管苗移栽,成活率在95%以上。

培养基添加物对百合快繁体系影响的研究结果表明:培养基中添加30g/L蔗糖和3mg/L多效唑分别为促进“索邦”和“西伯利亚”生长的最佳培养基。

在添加60g/L蔗糖和3mg/L多效唑的培养基中“白天堂”试管鳞茎的增大及再分化效果最佳。

在上述最佳培养基中,各供试品种出瓶直径均在1cm以上,东方百合增殖系数可达8以上。

活性炭可以提高试管苗的质量,浓度在4～10g/L时,“白天堂”、“索邦”及“西伯利亚”试管鳞茎生长情况较好。

将移栽成活的健壮试管苗移栽入土后进行多效唑叶面喷施,研究结果表明:以500mg/L多效唑处理5周,百合叶片的气体交换特性得到明显改善、叶绿素、可溶性糖、可溶性蛋白含量均有所提高,组织含水量减少,对试管苗移栽入土后的生长发育起到了显著的促进作用。

最新百合组培实验报告实验目的：本次实验旨在探究百合组织培养的最佳条件，以实现高效繁殖和遗传改良。

通过对比不同培养基、激素浓度和培养环境对百合组织生长的影响，确定最适合的培养参数。

实验材料：1. 百合种球2. MS培养基3. 植物生长调节剂（生长素和细胞分裂素）4. 无菌水5. 培养皿和培养箱6. 75%酒精和0.1%硝酸银用于消毒7. 称重天平和移液器实验方法：1. 种球消毒：选取健康无病虫害的百合种球，用75%酒精浸泡10分钟，再用0.1%硝酸银溶液消毒5分钟，最后用无菌水冲洗3次。

2. 组织切割：在无菌条件下，将种球切成约1平方厘米的小块。

3. 培养基制备：按照MS培养基配方，添加不同浓度的生长素和细胞分裂素，制备出一系列实验组。

4. 接种：将处理好的百合组织块接种到培养基上，每个培养基接种3块组织。

5. 培养条件：将接种好的培养皿放入培养箱中，设定温度为25°C，光照周期为16小时光照/8小时黑暗。

6. 数据记录：每天观察记录组织生长情况，包括生长速度、形态变化和任何异常情况。

实验结果：经过两周的培养，发现在添加了适量生长素和细胞分裂素的MS培养基上的百合组织生长最为良好。

其中，生长素浓度为0.5mg/L，细胞分裂素浓度为1.0mg/L的培养基上，百合组织的增殖率最高，且无明显变异现象。

结论：本实验确定了百合组织培养的最佳激素浓度，为百合的快速繁殖和遗传改良提供了科学依据。

未来工作将进一步探索其他影响因素，如培养环境的湿度、光照强度等，以优化培养条件，提高百合组织培养的成功率。

组培实验室百合组培扩繁的实习内容百合属一年生草本植物，有长达25年的观赏期。

因其花开洁白如雪，故名百合。

百合为百合科植物鲜切花的干燥根和鳞茎部分，鲜切花含有花青素、原花青素等营养成分，具有很好的观赏价值、药用价值和科研价值。

百合可作药用；百合干燥根具有润肺止咳作用；百合鳞茎还可作饲料添加剂。

百合干和百合干根可以食用，鲜切花可作为鲜花出售，干燥鳞茎可作为观赏花材。

一、百合组培扩繁的目的及基本步骤从百合无菌小苗中收集具有2个以上子代的根茎叶进行培植，培养基要求以有机质、钙镁磷等无机盐为营养成分，以适宜的温度和光照为条件，培养后置于营养钵中进行增殖培养。

在培养基 pH值为6.5~7.0及一定水流量下，培养7~10天后，子代根茎叶长到1 cm左右时，选择叶片上有少许绒毛、叶片肥厚、根系完整时剪去老叶片，保留嫩茎，剪后放在培养基中进行催芽。

待萌发出幼苗后移入大盆栽培。

百合无根小苗生长迅速，为防止植株失水造成死亡，要及时采取控水措施。

由于百合根系较浅，为了避免植株倒伏、减少植株伤口感染病毒等疾病和真菌感染，要及时清理组培材料中被感染的根部并清洗干净。

在实验室进行百合小苗组培前，应先进行消毒处理，在一定条件下用50-60 mg/L波尔多液浸泡20分钟以上进行消毒。

二、百合组培扩繁过程中各步骤的操作要点1.种子处理：用1%~2%高锰酸钾溶液浸泡种子10~20分钟后捞出沥干后晾干待用。

2.扦插：用0.1%~0.3%次氯酸钠溶液扦插，时间为3~4天。

3.去杂和消毒：用1%次氯酸钠溶液先将根茎冲洗干净后置于20℃左右的条件下烘2~3小时。

4.子叶接种：使用0.1%~0.3%过氧乙酸溶液浸种3~4小时后从叶尖中抽出。

5.扩繁：可使用无性繁殖（也可扦插繁殖）或扦插繁殖（利用无性遗传繁殖原理培养基中带有致病基因）均可用无菌操作方法。

6.定芽：选取健壮无病虫害、健壮子叶上长有顶芽、有2~3片叶、3~4片叶且无病虫害的枝条用于定芽、扦插。

百合组织培养及递进热处理脱毒法的研究百合组织培养及递进热处理脱毒法的研究近年来，百合作为一种重要的观赏花卉和药用植物，受到了广泛的关注。

然而，与之伴随的是病毒感染带来的严重问题，限制了百合的生产和应用。

为了解决这一问题，研究人员开始探索培养百合组织并使用递进热处理脱毒法来减少和消除病毒污染。

百合组织培养是利用组织培养技术，通过外植体培养和植株再生，实现快速繁殖和病毒检测的方法。

该技术可以通过选择合适的外植体材料和培养基成分，实现百合的无菌培养和大规模繁殖。

此外，组织培养还可以通过诱导突变和基因转化等手段，改良百合的性状和抗病能力。

然而，在百合组织培养过程中，病毒污染仍然是一个不可忽视的问题。

病毒可以通过外植体材料、培养基和培养环境等途径进入培养组织，导致培养物的污染和百合病毒病的传播。

因此，采用脱毒方法是非常必要的。

递进热处理脱毒法是目前广泛应用的一种脱毒方法。

该方法是将百合组织在一定的温度和时间条件下进行热处理，通过破坏或杀灭病毒使组织达到脱毒的目的。

递进热处理方法主要分为两种类型：温度递增法和时间递增法。

温度递增法是将组织逐渐暴露在不同温度下，逐步提高温度并延长处理时间；时间递增法是将组织暴露在恒温条件下，逐步延长处理时间。

递进热处理脱毒法的成功与否，关键在于找到适当的温度和处理时间。

温度过高或处理时间过长可能导致组织损伤和抗性下降，而温度过低或处理时间过短则无法达到脱毒效果。

因此，在实践中需要根据具体的百合品种和病毒类型进行优化和调整。

然而，尽管递进热处理脱毒法可以有效地减少和消除病毒污染，但仍然存在一些问题和挑战。

首先，该方法只对病毒起到部分杀灭的作用，无法完全去除病毒。

其次，递进热处理可能导致百合组织的代谢和生长受到影响，影响其再生和生长发育。

此外，病毒可能通过其他途径重新感染递进热处理后的组织，这需要加强培养环境的无菌管理和病毒检测。

总的来说，百合组织培养及递进热处理脱毒法是解决百合病毒污染问题的一种有效方法。

龙牙百合的组织培养研究现状和进展摘要从龙牙百合组织培养的过程和不同激素种类、浓度及其组合等因素的影响以及组培脱毒技术、组培苗移栽研究,综述龙牙百合组织培养的意义和研究现状与进展,关键词龙牙百合;组织培养;快速繁殖;研究龙牙百合(Lilium brownii F.E.Brown var. viridulum Baker)系野百合变种,在湖南邵阳至少有1800多年的种植历史。

因其鳞片肥大,形似龙牙而得名,是百合中最名贵的一种,其营养、药用、经济价值非常高。

1 龙牙百合的传统繁殖与快速繁殖的优劣势比较1)传统繁殖方式的缺陷。

龙牙百合在生产上主要是利用小鳞茎、珠芽、鳞片扦插进行无性繁殖,其缺陷主要有:繁殖率很低;种性退化;后代容易积累病毒,严重影响其产量和品质;传统留种方式占有耕地且降低产量,大大增加了种植成本;种子繁殖其后代会出现分离,不能保持原有母株的优良特性,且幼龄期长。

2)快速繁殖的优势。

龙牙百合利用组织培养进行快速繁殖,可在短期内获得保持原有品种优良性状的大量种苗,而且通过茎尖脱毒后可获得大量无毒种苗,从而大大提高其产量和品质,是防止品种退化的一种重要手段。

如能推行组织培养工厂化育苗,不仅能使一些优良株系得到迅速推广,而且能大量节约留种成本,产生显著的经济效益。

2 龙牙百合组织培养研究1)选好外植体。

龙牙百合的许多器官、组织都可作外植体,如鳞片、顶芽、茎段、叶片、根尖、花梗、花瓣、花托、花丝、花药、胚、子房都可作用为组培外植体。

卢其能采用顶芽、鳞片、茎段和叶片比较研究,以鳞片切块组培的分化率最高,并发现秋冬季的鳞片分化成小鳞茎的能力最强。

选择鳞片表皮3-4层的鳞片为外植体诱导的小鳞茎不仅快而且诱导率较高;鳞片表皮1-2层由于受损伤在接种后极易传染,不易成功;内层越深鳞片越幼嫩,诱导率越低,甚至不产生小鳞茎;鳞片的中部诱导率较两头高。

2)外植体的消毒处理。

通常用的灭菌剂是酒精、升汞和漂白粉等。

一般程序是先将外植体视洁净状况用流线形自来水冲洗15min至24h不等;再进行预灭菌,用70﹪或75﹪酒精浸泡15-30s;然后用0.1﹪升汞灭菌10min左右,顶芽和叶片用10%漂白粉溶液消毒10min即可。

百合组织培养方案
植物介绍：百合是百合科属多年生草本鳞茎植物，是世界著名的观赏花卉。

全世界的本属植物约有94种，主要分布在北半球的温带和寒带地区，少数种类分布在热带高海拔地区。

中国是百合属植物分布最多的国家，也是世界百合起源的中心，据调查约有47种18个变种，占世界百合总数的一半以上，其中有36种15个变种为中国特有种。

1.供试材料来源：在花店购得新鲜百合，取百合的鳞片为外植体。

2.技术路线：在无菌条件下，将离体的植物器官，组织，细胞以及原生质体，
在人工控制的环境里培养成完整的植株。

3.方法步骤：
(1)外植体的剪取与消毒程序:取材及灭菌优选生长健壮、开花性状好的
种球作为外植体。

在取材前，将准备接种的鳞茎在4~5℃的低温下处理
6~8周，然后经饱和漂白粉上清液清洗后，用无菌水冲洗一次。

剥去鳞
茎外皮及外部2~3层鳞片，切去少许顶部及基部，先用75%的酒精浸泡
30~60S，然后在0.125%HgCl2溶液中处理5~10分钟，无菌水洗3~4次，即可进行无菌操作切块（段）接种。

(2)初代培养基的筛选：M S+6-BA 1.0m g/L+NAA 0.1m g/L
(3)增殖培养基额筛选：M S+6-BA 0.5m g/L+NAA 0.5m g/L
(4)生根培养基的筛选：1/2MS＋NAA0.1mg/L。

(5)试管苗移栽实验：当试管苗的根原基突起或形成几毫米长的短根时，
将其取出，洗去琼脂，移入有少量营养的人工基质中。

移栽后，保持高湿度，避免阳光直射和过大的温度波动，经过7d的逐步锻炼过程，再定植到土壤中。