胶体金法隐球菌荚膜多糖抗原检测肺隐球菌病的诊断价值分析

・810・Modern Practical Medicine,June2019,Vol.31,No.6胶体金法隐球菌荚膜多糖抗原检测肺隐球菌病的诊断价值分析徐慧,董肖琦，张亮，许园园，余碧芸，汤耀东【摘要】目的探讨胶体金法隐球菌荚膜多糖抗原检测对无免疫功能缺陷的肺隐球菌患者的诊断价值。

方法收集37例肺隐球菌病患者的临床资料，分析胶体金法诊断肺隐球菌病的敏感度、特异度;比较胶体金法检测阳性与阴性的肺隐球菌病患者的临床表现及影像学特点。

结果37例均行LFA检测，其中阳性29例，阴性8例;灵敏度78.38%,特异度100%；LFA检测阳性组中6例患者行腰椎穿刺术，脑脊液隐球菌检测均阴性。

LFA检测阳性组与阴性组除性别外，其他临床特征差异均无统计学意义(均F>0.05)。

LFA检测阳性组病灶个数>9个比例更高(44.83%)(P<0.05),而LFA检测阴性组病灶个数2~4个比例更高(75.00%)(P<0.05)。

结论胶体金法隐球菌荚膜多糖抗原检测对无免疫缺陷肺隐球菌病患者临床诊断价值较高，对可疑患者，特别是CT表现为多发结节/团块影肺部病灶的患者应尽早检测。

【关键词】肺隐球菌病;胶体金免疫层析法;隐球菌荚膜多糖抗原doi:10.3969^.issn,1671-0800.2019.06.050【中图分类号】R563【文献标志码】A【文章编号】1671-0800(2019)06-0810-03新生隐球菌是一种常见的人类真菌病原体，主要感染CD4+T细胞计数较低的个体，尤其是艾滋病患者，可经呼吸道感染导致肺隐球菌病叫国外研究发现血胶体金免疫层析法(LFA)隐球菌荚膜多糖抗原检测对诊断免疫缺陷患者肺隐球菌感染的敏感度及特异度均可达98%〜100%'2'1,是一种简便、快捷及有效的早期诊断方法。

但近年关于无免疫缺陷患者感染肺隐球菌的报道越来越多，且其临床症状及影像学表现缺乏特异性,极易误诊或漏诊。

本文主要研究LFA隐球菌荚膜多糖抗原检测对无免疫功能缺陷的肺隐球菌患者的诊断价值及其与临床、影像学表现的相关性。

现报道如下。

1资料与方法1.1一般资料收集2015年12月至2018年12月在宁波市医疗中心李惠利东部医院经病理诊断明确的肺隐球菌病患者51例,除外胸外科手术病理明确的14例，共37例临床资料齐全的患者纳入研究(均来自呼吸内科)。

纳入标准：在本院诊治的经肺组织病理诊断明确及用LFA法行隐球菌荚膜多糖抗原检测的临床资料完整的肺隐球菌病患者。

排作者单位：315100宁波，宁波市医疗中心李惠利东部医院通信作者：徐慧，Email：panyumo 201l@ 除病理不明确的或者临床资料不完整的肺隐球菌病患者。

经本院研究伦理委员会批准(批号DXLL2018071),涉及的临床资料、记录和数据均为匿名分析，不干预患者目前及将来的健康与病情。

1.2方法收集患者的相关临床资料(人口学资料、临床症状、基础疾病、实验室检查、影像学资料、病理诊断)，分析LFA诊断肺隐球菌病的敏感度、特异度及临床诊断价值，分析LFA检测阳性的肺隐球菌病患者的临床表现、影像学特点。

1.2.1检测试剂LFA试纸条为美国Immuno-Mycologics公司生产，由美国食品药品监督管理局(FDA)批准。

1.2.2病理诊断37例患者均行CT引导下经皮肺穿刺活检术，送检肺组织切片用苏木精存红(HE)染色,过碘酸-希夫(PAS)和六胺银等特殊组织化学染色。

1.3统计方法釆用SPSS17.0统计软件进行数据分析，计数资料以率表示，采用Fisfter检验，计量资料以均数士标准差表示，采用t检验;P<0.05为差异有统计学意义。

2结果2.1LFA检测阳性组与阴性组一般资料比较37例均行LFA检测，其中阳性29例，阴性8例(灵敏度78.38%,特异度100%)；LFA检测阳性组中6例患者行腰椎穿刺术,脑脊液隐球菌检测均阴性。

LFA检测阳性组与阴性组除性别外，其他临床特征差异均无统计学意义(均F> 0.05)=见表1。

2.2LFA检测阳性组与阴性组影像学特征比较所有患者胸部CT表现肺内病灶位于肺野外带或胸膜下，表现为单发或多发的结节或团块影或混合型。

LFA检测阳性组病灶个数>9个比例更高(44.83%)(P<0.05),而LFA检测阴性组病灶个数2~4个比例更高(75%)(P<0.05)=见表2。

3讨论隐球菌最常见的感染部位是中枢神经系统，其次为肺。

近10年来国内关于隐球菌的研究发现不管是瞬菌炎还是肺隐球菌病,主要感染对象还是非艾渐感染者,尤其宿主，而且无輙缺陷的肺隐球菌病患者往往以中青年男性为主有文献报道肺隐球菌病的易感因素除了艾滋病，还包括T细胞介导的免疫功能受损的其他疾病，如糖尿病、血液系统肿瘤及糖皮质激素使用等竺由于肺隐球菌病患者大部分免疫功能正常或轻度受损,其起病往往隐匿,无任何临床症状或轻度咳嗽、胸痛等症状,极少数严重者可出现呼吸衰竭等重症肺炎表现冋，但与肺部其他疾病的症状无现代实用医学2019年6月第31卷第6期•811•特异性区别。

本研究中有12例患者无任何症状，其余患者最常见的症状为咳嗽咳痰，其次为胸痛。

发现有4例患者出现发热，其中2例患者发热考虑为合并急性尿路感染所致。

同时发现实验室检查结果绝大部分正常，少数为轻度升高，说明肺隐球菌病没有引起明显的全身免疫炎症反应。

可以进一步部分解释肺隐球菌患者无临床症状或轻微症状。

经呼吸道吸入的隐球菌抱子可被人类免疫系统完全清除或者持续存在肺内增殖，或者因为各种因素从肺部逃逸引起侵袭性播散性感染。

国外有研究表明与免疫缺陷组患者相比，免疫功能正常的肺隐球菌病的诊断要更晚^，而导致死亡风险增高，甚至在一些发达国家中，这一组患者的死亡率可达〉30%何。

因此改善预后的一个关键因素是疾病的早期诊断。

LFA法作为一种最新的隐球菌病的血清学诊断方法于近几年被引入隐球菌病的诊断库m m,与胶乳凝集、酶联免疫吸附法和培养法具有良好的一致性，但它具有操作简单、诊断快捷、对实验室及操作者要求低等优点。

2010年更新的IDSA指南指出：对于肺隐球菌病的非免疫缺陷患者，考虑腰椎穿刺以排除无症状的中枢神经系统受累3。

然而，对于无症状的正常宿主，肺结节或浸润，无中枢神经系统症状，血清隐球菌抗原阴性或极低，可避免腰椎穿刺。

本研究中患者及家属大部分考虑到腰椎穿刺有创性操作的风险，最终只有6例阳性患者同意并进行了腰椎穿刺术，脑脊液检查结果均为阴性。

随访所有患者至少3个月及以上，目前为止未发现继发隐球菌脑膜脑炎患者。

本文结果提示CT表现为双肺多发结节/团块影的患者血胶体金检测阳性率更高。

2017年的《肺隐球菌病诊治浙江省专家共识》推荐在肺部影像学疑似隐球菌感染的患者中，常规进行血清LFA 的检测，并将阳性结果作为诊断及治疗的重要依据冋。

本文LFA法检测敏感性只有78.38%,存在一定的假阴性。

8例假阴性患者以多无基础疾病,临床症状无或更轻微，影像学表现以2~4个结节，病灶直径＜3cm为特点。

Perfect等"」指出在早期感染中，LFA法检测偶尔会产生假阴性结果,但更常见的情况是在检测到通过培养获得的可存活的隐球菌菌落之前，检测结果可能为阳性。

因此在临床上碰到肺部影像学疑似隐球菌感染,特别是表现为多发结节/团块影的患者，LFA可作为此类患者的早期初筛方法。

参考文献：［1］Rajasingham R,Smith RM,Park BJ,et al.Global burden of disease of HIV-associ­ated cryptococcal meningitis:An updated表1LFA检测阳性组与阴性组一般资料比较临床特征CrAg阳性5=29)CrAg阴性5=8)广值P值男性［例（％）］16(55.17)8(100.00)-0.02年龄（岁）49.31±14.7051.75±14.140.420.68症状咳嗽［例（％）］16(55.17)4(50.00)一0.55胸痛［例（％）］6(20.70)2(25.00)一0.64发热［例（％）］4(13.80)0-0.36无症状［例（％）］8(27.59)4(50.00)一0.15 WBC[xl07L]7.02±1.64 6.48±1.940.800.43中性粒细胞 4.21±1.50 4.11±1.900.150.88 CRP(mg/L)8.00±5.70 5.65±4.71 1.060.30基础疾病［例（％）］高血压病7(24.14)2(25.00)一0.64 2型糖尿病4(13.79)0-0.36乙型肝炎01(12.50)一0.22脂肪肝2(6.90)0一0.61垂体微腺瘤1(3.45)0-0.78慢性肾病综合征1(3.45)0一0.78过敏性紫瘢1(3.45)0-0.78无基础疾病16(55.17)6(75.00)—0.28表2LFA检测阳性组与阴性组影像学特征比较影响特点CrAg阳性(/7=29)CrAg阴性5=8)P值单个结节/团块2(6.90)00.61多个结节27(93.10)8(100.00)0.61单叶多个10(34.48)5(62.50)0.15多叶多个17(58.62)3(37.50)0.25大小［例（％）］0〜30mm22(75.86)7(87.50)0.44 >30mm7(24.14)1(12.50)0.44个数［例（％）］12(6.90)00.612〜42(6.90)6(75.00)0.00 5〜912(41.38)2(25.00)0.34 >1013(44.83)00.02内部特征［例（％）］空洞9(31.03)1(12.50)0.29晕征22(75.86)5(62.50)0.37支气管充气征10(34.48)1(12.50)0.23胸腔积液1(3.45)00.78analysis[J].Lancet Infect Dis,2017,17(8):873-881.[2]Vidal JE,Boulware teral flow as­say for cryptococcal antigen:an importantadvance to improve the continuum of hivcare and reduce cryptococcal meningitis-related mortality[J].Rev Inst Med TropSao Paulo,2015,57(Suppl19):38-45.[3]Huang HR,Fan LC,Rajbanshi E,et al.Evaluation of a new cryptococcal antigenlateral flow immunoassay in serum,cere­brospinal fluid and urine for the diagnosisof cryptococcosis:A Meta-Analysis and812・Modern Practical Medicine,June2019,Vol.31,No.6systematic review[J].PLoS One,2015/10(5):e0127117.[4]Fang W,Fa Z,Liao W.Epidemiology ofcryptococcus and cryptococcosis in China[J].Fungal Genetics and Biology,2015,78:7-15.[5]Zhu L,Yongquan L,Hong C,et al.Epide­miology and clinical characteristics ofcryptococcal meningitis in China(1981-2013):A review of the literature[J].Medi­cal Mycology:Open Access,2017,3(1):22.[6]Kohno S,Kakeya H;Tzumikawa K,et al.Clinical features of pulmonary cryptococ­cosis in non-HIV patients in Japan[J].Journal oflnfection&Chemotherapy,2015,21(1):23-30.[7]叶枫，谢佳星,李少强，等•非免疫缺陷者肺隐球菌病110例临床分析[J].国际呼吸杂志,2014,34(2):81-86.[8]Xie X,Xu B,Yu C,et al.Clinical analysisof pulmonary cryptococcosis in non-HIVpatients in south China[J].InternationalJournal of C linical&Experimental Medi­cine,2015,8(3):3114.[9]Ye F,Xie JX,Zeng QS,et al.Retrospec­tive analysis of76immunocompetent pa­tients with primary pulmonary cryptococ-cosis[J],Lung,2012,190(3):339-346.[10]Bratton EW,Husseini NE,Chastain CA,et al.Approaches to antifungal therapiesand their effectiveness among patientswith cryptococcosis[J].Antimicrobial Ag­ents and Chemotherapy.2013,57(6):2485-2495.[11]Rugemalila J,Maro VP,Kapanda G,et al.Cryptococcal antigen prevalence in HIV-infected Tanzanians:A cross-sectionalstudy and evaluation ofapoint-of-care lat­eral flow assay[J].Tropical Medicine&International Health,2013,18(9):1075-1079.[12]Hansen J,Slechta ES,Gates-Hol1i ngsworthMA,et rge-scale evaluation of theimmuno-mycologics lateral flow and en­zyme-linked immunoassays for detectionof c ryptococcal antigen in serum and cere­brospinal fluid[J].Clinical and VaccineImmunology,2013,20(1):52-55.[13]Perfect JR,Dismukes WE,Dromer WE,et al.Clinical practice guidelines for the man­agement of cryptococcal disease:2010up­date by the infectious diseases of A merica[J].Clin Infect Dis,2010,50(3):291-322.[14]浙江省医学会呼吸病学分会•肺隐球菌病诊治浙江省专家共识[几中华临床感染病杂志,2017,10(5):321.[15]Perfect JR,Bicanic T.Cryptococcosis di­agnosis and treatment:What do we knownow[J]?Fungal Genetics and Biology,2015,78:49-54.收稿日期：2019-03-20(本文编辑:陈志翔)乙肝相关肝癌患者血清载脂蛋白B检测的临床价值探讨戎辉,马建波，髙国生，胡耀仁【摘要】目的探讨血清载脂蛋白B（ApoB）检测在乙型肝炎（乙肝）病毒（HBV）ffi关肝癌中的临床价值。