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植物组织中无机磷含量测定

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目的意义 磷参与植物体内多种代谢，促进碳水化合物的合成、转化和运输，施磷对提
高作物产量和品质有明显的效果。通过本实验掌握植物体内磷含量测定的方法及其原理。
一、实验原理
测定磷含量的方法主要有磷钼蓝比色法(适宜含磷量较低)和钒钼黄比色法(适宜含磷量
较高)等。可直接用于植物组织可溶性磷的测定。如用于植物材料全磷含量测定，需将材料
用浓H2SO4 —H202消煮转化为可溶性磷。
1．磷钼蓝比色法 在适宜的酸性条件下，磷酸能与钼酸铵作用形成磷钼酸按，并被抗
坏血酸或氯化亚锡等还原剂还原，生成蓝色的磷钼蓝，并在650 nm处有最大吸收蜂，其颜
色深浅与含磷量成正比，可直接比色测定。
2．钒钼黄比色法 待测液中的正磷酸与偏钒酸和钼酸能生成黄色的三元杂多酸，溶液
黄色的深浅与磷酸含量成正比，生成物在440nm波长有吸收高峰。可用比色法定量磷。此
法的优点是黄色稳定，对显色条件要求不十分严格，操作简便，干扰物少，灵敏度较低，工
作范围随选用的吸收波长而异。
选用波长（nm） 400nm 440nm 470nm 490nm
测磷工作范围（mg/g） 0.75-5.5 2.0-15 4-7 7-20
二、材料、设备及试剂
1．材科 玉米、接骨木、瓜类、葡萄等幼苗；各种植物的根、茎、叶、种子及全株过
60-80目筛干粉。
2．设备 电子天平、分光光度计、恒温水浴锅、容量瓶、刻度试管、漏斗、小纸等。
3．试剂
(1)2.5％钼酸铵溶液 称取(NH4)2MoO4鸣’25g用蒸馏水溶解并定容至1000ml。
(2)10mg/L磷标准液 精确称取烘至恒重的分析纯KH2PO4 0.4398g加蒸馏水溶解定容
至1000m1，摇匀；取此液10ml定容至100ml即为10mg/L磷标准液。
(3)10％抗坏血酸溶液（现用现配)。 ‘
(4)定磷试剂 按下列顺序及比例将各试剂混合即成。蒸馏水、6mol/L硫酸、2.5％钼酸
铵、10％抗坏血酸按2:1:1:1(体积比)混合，贮于棕色瓶内。若变为棕黄色即不能使用。
(5)钒钼酸铵试剂A液：25g(NH4)6MO7O24·4H2O(钼酸铵)溶于400ml水。B液：1.25g偏
钒酸铵溶于300ml沸水．冷却后加入250ml浓HNO3将A液缓缓倾入B液中，搅匀定容
1000m1，贮于棕色瓶中。
(7)6mol/L Na0H 称24gNa0H溶于100ml水。
(8)0.2％二硝基酚指示剂 0.2g 2,6—二硝基酚(或2,4—二硝基酚)溶于100ml水。
(9)50mg/L磷标难液 称0.2197g经烘干的分析纯KH2PO4溶于400ml水加入25ml，
3mol/LH2SO4定容1000m1，此液可久贮。
三、操作方法
1．磷钼蓝比色法
(1)样品制备 取作物组织(叶、叶鞘或茎等)用组织捣碎机或研钵制成匀浆，定容，过滤
(必要时可用活性炭脱色)，滤液备用。伤流液可直接测定。
(2)标难曲线制作及样品测定 取6支试管，分别编号为o。5，按下表顺序加入磷标准
液及其他试剂，以制作标准曲线。另取1支试管编号为6，作为样品管，按下表加人各试剂。
并将各管充分摇匀，在45℃水浴中保温25min，以空白作对照，在分光光度计650nm处测
定吸光度。以吸光度值为纵坐标，磷含量为横坐标，绘制标准曲线。并根据6号管的吸光度
值，从标准曲线上查出测定液中磷含量。
表一 磷钼蓝比色法测磷反应体系
项目 管号
0 1 2 3 4 5 6
各管含磷量（µg）
0 2 4 6 8 10 x
10mg/L磷标准液（ml） 0 0.2 0.4 0.6 0.8 1.0 样品0.2
蒸馏水（ml）
3.0 2.8 2.6 2.4 2.2 2.0 2.8
定磷试剂（ml）
3.0 3.0 3.0 3.0 3.0 3.0 3.0
吸光度值（A650）
2．钒钼黄比色法
(1)样品制备(参见磷钼蓝比色法)。
(2)样品测定：吸待测液5-10ml于容量瓶，加2滴二硝基酚指示剂，加6mol/LNaaOH中
和至刚呈黄色，加10ml钒钼酸铵试剂，用蒸馏水定容，在440nm处比色，以空白溶液调零。
(3)标准曲线制作：50ml容量瓶8个，编号0—7，准确吸50mg/L磷贮备标液0、1、2.5、
5、7.5、10、15ml分别加入各瓶，按步骤(2)加入各试剂显色，即得：0、1.0、5、5.0、7.5、
10、15磷的标准色阶，测定A440。以吸光度为纵坐标，磷标准浓度为横坐标，绘制工作曲
线。
四、实验结果
按计算公式计算样品中磷的百分含量。
样品含磷量(％)＝mx×V/V1×W×10-4
mx：标准曲线查出测定液中磷含量(µg)
V：样品提取液总体积(ml)
V1：用于测定的样品液(ml) ：
w：样品鲜重或干重(g)
10-4：样品含磷量(µg/g)换算成百分含量应乘系数

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土壤无机磷的分级测定

土壤无机磷的分级测定

土壤有机磷测定方法土壤全磷含量约10～1000 g/kg，与土层、质地、发育、利用方式与强度等有关。

土壤磷分为无机磷和有机磷两大部分，根据我国土壤普查资料，一般耕作土壤中，有机磷含量约占全磷量的25%～56%。

土壤有机磷测定，是指土壤有机磷是土壤全磷的重要组成部分，主要是植素、核酸等含磷有机物中的磷。

通常采用间接测定法，主要有烧灼法和浸提法。

烧灼法是用高温（550°C）或低温（250°C）烧灼，使有机磷矿化，然后用酸溶解，酸液中的磷来自有机磷和无机磷两部分；未经灼烧的土壤用同浓度酸浸提，酸液中的磷只来源于无机部分；两者相减即为土壤有机磷的含量。

浸提法先用硫酸再用氢氧化钠浸提出酸溶及碱溶有机和无机磷，减去其中无机磷从而得到有机磷含量。

两种方法均使用钼锑抗比色法测定溶液中的磷。

烧灼法的主要缺点是在烧灼过程中可能改变矿物态磷的溶解度，尤其是在高度风化的土壤中测定结果偏高；而且有机磷含量高时，高温可使部分磷挥发从而引入误差。

浸提法克服了烧灼法不适用于高度风化的热带土壤的缺点，其优点是将总有机磷进一步区分为酸溶性有机磷和碱溶性有机磷，二者的和即为土壤有机磷总量；缺点是浸提不易完全而且有机磷可能水解。

一、方法原理土壤经550℃灼烧，使有机磷化合物转化为无机态磷，然后与未经灼烧的同一土样，分别用0.2mol/L(1/2H2SO4)溶液浸提后测定磷量，所得结果的差值即为有机磷。

二、主要仪器高温电炉、烘箱、分光光度计。

三、试剂0.2mol/L(1/2H2SO4)溶液。

取浓H2SO46ml溶解于1000ml水中，标定。

四、操作步骤称取通过60目的风干土样品1.000g置于15ml瓷坩埚中，在550℃高温电炉内灼烧1h，取出冷却，用0.2mol/L(1/2H2SO4)溶液100ml将土样洗入200ml容量瓶中。

另外称取 1.000g同一土壤样品，放置在另一个200ml容量瓶中，加入0.2mol/L(1/2H2SO4)溶液100ml。

土壤有效磷有机磷全磷测定方法

土壤有效磷有机磷全磷测定方法

土壤有效磷有机磷全磷测定方法土壤中的磷是农业生产中必不可少的重要营养元素之一，它对作物的生长发育和产量具有重要影响。

磷在土壤中以有机磷和无机磷的形式存在，其中有机磷为植物较难直接吸收的形态，而无机磷则是植物较易吸收和利用的形态。

因此，准确测定土壤中的有效磷、有机磷和全磷含量对于指导农业生产和合理施肥具有重要意义。

常用的土壤有效磷测定方法有几种，包括离子交换膜法、Bray法、摇床浸提法等。

其中，离子交换膜法是一种常用的速测土壤有效磷的方法。

该方法的原理是利用离子交换膜对土壤中的有效磷进行吸附，并用酸溶解从而将其转化为可测定的形态，最后通过颜色反应或仪器测定得到有效磷含量。

这种方法具有快速、简单、准确的特点，但对土壤pH值较低或铁铝氧化物含量较高的土壤不适用。

有机磷是土壤中的一种重要形态，其测定的目的是为了了解土壤中有机磷的含量及其活性对植物的供磷能力。

常见的有机磷测定方法有NaOH浸提法、酶解法和硫酸浸提法等。

其中，NaOH浸提法是一种常用的测定土壤有机磷含量的方法。

该方法的原理是利用NaOH溶液将土壤中的有机磷转化为无机磷，然后通过酸溶解将其转化为可测定的形态，最后通过测定磷的浓度得到有机磷含量。

这种方法适用范围较广，操作简单，但对土壤中的无机磷和铁铝磷酸盐的干扰较大。

全磷是指土壤中所有形态的磷的总含量，包括有效磷、有机磷和难溶性磷。

常用的测定全磷的方法有硫酸浸提法、王水浸提法和微波消解法等。

其中，硫酸浸提法是最常用的测定全磷的方法之一、该方法的原理是利用浓硫酸和过量的遥浄溶解土壤中的磷，并通过酸浸液中磷含量的测定得到全磷含量。

这种方法操作简单，易于掌握，但对于含有较高铁铝氧化物的土壤不适用。

总之，准确测定土壤中的有效磷、有机磷和全磷含量对于合理施肥和农业生产具有重要意义。

要根据具体情况选择适合的测定方法，并注意排除干扰因素，以保证测定结果的准确性和可靠性。

通过定期监测磷素含量，还可以为农业生产提供科学依据，实现高产、高效、可持续发展的目标。

中国农业大学_864植物营养学_《植物营养学(上)》陆景陵_第三节_磷

中国农业大学_864植物营养学_《植物营养学(上)》陆景陵_第三节_磷


（一）缺磷
植物光合作用 呼吸作用 生物合成过程
(三）积极参与体内的代谢
1、碳水化合物代谢
在光合作用中，光合磷酸化作用必须 有磷参加； 光合产物的运输也离不开磷。
二、磷的营养功能
Pi对光合作用中蔗糖及淀粉形成的调节
蔗糖合成不同途径的示意图
Pi
磷酸蔗糖
磷酸蔗糖 合成酶
葡萄糖 6-磷酸葡萄糖 6-磷酸果糖
蔗糖
蔗糖合成酶
果糖
2.氮素代谢
磷是氮素代谢过程中一些重要酶的组分 硝酸还原酶 氨基转移酶
磷含量 (mg P/100籽粒)
6 全磷
4 植素磷
2
Pi
0
0
10
20
30
开花后天数
水稻籽粒发育过程中，
籽粒中无机磷和植素磷含量的变化
磷酸化葡萄糖
淀粉＋Pi 磷脂 无机磷 磷酸酯 RNA+DNA
3 2.5
含量（%）
2
1.5
1
0.5
0 0
24
48
72
发芽时间（h)
在发芽期间水稻种子中磷组分的变化
影响吸收磷的主要因素
3、温度 温度升高有利于磷的吸收。增加 水分也有利于土壤溶液中磷的扩散，因此能提高 磷的有效性。
4、养分的相互关系 磷与氮在植物的吸收 和利用方面相互影响。施用氮肥能促进磷的吸收。
三、作物对磷的吸收和利用
（三）利用
根系吸收的磷酸盐进入细胞后迅速参与代谢作用(?)
磷被吸收10分钟内就有80%的磷酸盐 可结合到有机化合物中，即形成 有机含磷化合物。
提高体内可溶性糖和磷脂的含量
细胞原生质的冰点降低
增强细胞对温度变化的适应性
植物生理学实验报告

植物生理学实验报告

首都师范大学生命科学学院实验报告课程名称植物生理学实验成绩姓名苗雪鹏班级 1班学号 1080800021 实验题目实验三植物体中N、P、K主要养分的速测【实验目的】1．了解植物体内N、P、K测定的意义和方法2．掌握如何测定植物体中N、P、K的实验技能【实验原理】植物体主要由C、H、O、N、P、K、Ca、Mg、S、Fe等十几种元素组成，除此以外还包括Ca、Zn、Mn、B、Mo，但需要量较少。

在通常条件下，植物利用太阳光能，从空气中获得C，从水中获得氢和氧，而N、P、K等元素则是来源土壤肥力。

在栽培过程中，能够知道植物的需要和土壤内N、P、K变动的情况，对考虑施肥措施是有帮助的，因此测定土壤及植物体内的N、P、K是很重要的。

硝态N测定：硝态N是硝酸的阴离子（NO3-），它是强氧化剂，所以鉴定N-离子几乎都用氧化反应，用二苯胺（C6H5）2NH的方法，这个方法的原理是在NO3-存在时二苯胺被硝酸氧化而显蓝色。

有效P和无机P测定：P与钼酸铵反应生成磷钼酸铵，然后以氧化亚锡作为还原剂时，使磷钼酸铵还原为“磷钼兰”（低价钼化合物混合物）溶液呈兰色。

此法能测土壤有效P，过磷酸钙中有效P和植物体内的无机磷。

速效K的测定：四苯硼钠〔NaB(C6H5)4〕与钾离子生成白色沉淀为四苯硼酸钾〔KB(C6H5)4〕【实验材料和试剂】在完全培养液、缺乏N、P、K、Fe的营养液中培养四周的玉米苗硝态氮试剂、磷试剂Ⅰ、磷试剂Ⅱ、K试剂、标准溶液1、5、10、20、40ppm【实验方法】1．植物组织浸提液制备将植物剪成小块，称取1g，迅速倒入已沸腾的蒸馏水（约10ml）烧杯中，用毛细玻璃棒经常搅动，小火煮十分钟，煮液倒入10ml容量瓶中，另加少量蒸馏水，继续小火煮植物材料5分钟，浸提液倒入上述容量瓶内，再以少量蒸馏水洗植物材料，使最后容量为10ml。

植物组织在计算含量时要乘以10，因每克鲜组织稀释了10倍。

2．硝态N测定在白瓷板的凹内分别滴入1、5、10、20、40ppm的混合标准液1滴，然后将待测液（植物浸提液）分别滴入其他凹内，最后每个凹内各加5滴二苯胺硫酸溶液，用毛细玻璃棒搅匀，3-5分钟，观察标准液与待测液蓝色变化，待测液的蓝色近似于某标准液的蓝色，就是待测液的硝态N含量。