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HPLC法测定吴茱萸超微速溶饮片中吴茱萸碱、吴茱萸次碱及柠檬苦素的含量目的建立一种同步测定吴茱萸超微速溶饮片中吴茱萸碱，吴茱萸次碱及柠檬苦素含量的高效液相色谱方法。
方法采用Hypersil ODS2 C18柱（4.6 mm×250 mm，5μm），岛津LC-20AD高效液相色谱仪，流动相为乙腈-水-四氢呋喃-冰醋酸（34︰64.7︰1.1︰0.2），流速：1.0 mL/min，检测波长：225 nm，柱温：30℃。
结果吴茱萸碱、吴茱萸次碱、柠檬苦素进样量分别在0.101 6～2.032μg（r2=0.999 9，n=6）、0.097 4～1.948μg（r2=0.999 9，n=6）、0.7010～14.02μg（r2=0.999 9，n=6）范围内与峰面积呈良好线性关系，平均回收率分别为100.37%（RSD=1.29%，n=6）、99.11%（RSD=0.83%，n=6）、99.30%（RSD=0.52%，n=6）。
结论该测定方法简便，测定结果准确，重复性好，可作为质量控制方法。
标签：吴茱萸碱；吴茱萸次碱；柠檬苦素；HPLC吴茱萸为芸香科植物吴茱萸Evodia rutaecparpa（Juss）. Benth，石虎E.rutaecarpa（Juss.）benth.var.offcinalis（Dode）Huang或疏毛吴茱萸E.rutaecarpa （Juss.）benth.var.Bodinieri（Dode）Huang的干燥近成熟果实，具有散寒止痛、降逆止呕、助阳止泻等功效[1]。
吴茱萸主要有效成分为生物碱类和柠檬苦素类，其中吴茱萸碱和吴茱萸次碱，具有镇痛和抗炎作用[2]，柠檬苦素具有调节体内胆固醇水平，防止动脉粥样化和除虫等作用[3]。
吴茱萸经超微粉碎后制成的饮片可提高中药成分的利用率，减少中药资源的浪费[4]。
本实验通过对吴茱萸超微速溶饮片的研究，建立了高效液相色谱法测定吴茱萸超微速溶饮片中吴茱萸碱，吴茱萸次碱及柠檬苦素含量的方法。
吴茱萸及其习用品药材中7个成分的HPLC含量测定建立HPLC同时测定吴茱萸及其习用品药材中柠檬苦素、吲哚类生物碱（14N-甲酰二氢吴茱萸次碱、吴茱萸碱和吴茱萸次碱）及喹诺酮类生物碱（1-甲基-2-正十一烷基-4（1H）-喹诺酮、吴茱萸卡品碱和二氢吴茱萸卡品碱）含量的方法。
采用YMC C18 （4.6 mm ×250 mm，5 μm）色谱柱；流动相为乙腈（A）-四氢呋喃（B）-5 mmol·L-1醋酸铵缓冲液（pH 3.8）（C），梯度洗脱；流速1.0 mL·min-1；柱温30 ℃；检测波长220，250 nm。
7个成分的分离度良好，标准曲线在检测范围内均呈良好线性，r=0.999 9。
加样回收率平均值为96.69%～102.4%，RSD为1.4%～3.1%。
该方法简便、准确，重复性好。
对5种18批吴茱萸类药材进行含量测定，结果显示7个被测成分在5种药材中均有分布，但含量差异很大。
16批正品吴茱萸中7个成分的总质量分数在9.46～69.9 mg·g-1，平均为28.2 mg·g-1。
密果吴萸中7个成分的总含量为25.8 mg·g-1，在正品含量范围内，略低于平均值；臭辣吴萸中7个成分的总质量分数为7.69 mg·g-1，低于正品的含量下限。
密果吴萸和臭辣吴萸与正品吴茱萸相比，主要成分一致，含量总体低于正品吴茱萸。
标签：吴茱萸；柠檬苦素；生物碱；含量测定；高效液相色谱法吴茱萸为传统中药，始载于《神农本草经》，列为中品。
其性味辛、苦，热，有小毒；具散寒止痛，降逆止呕，助阳止泻的功效。
主要用于治疗厥阴头痛，寒疝腹痛，寒湿脚气等[1]。
1977～2010年版《中国药典》均收载吴茱萸为芸香科植物吴茱萸Evodia rutaecarpa（Juss.）Benth.，石虎E. rutaecarpa（Juss.）Benth. var. officinalis （Dode）Huang或疏毛吴茱萸E. rutaecarpa（Juss.）Benth. var. bodinieri （Dode）Huang的干燥近成熟果实。
吴茱萸中7种活性成分的含量测定曾金祥;朱继孝;黄碧涛;王劭华;杨雅琴;王晓云【期刊名称】《安徽农业科学》【年(卷),期】2011(039)026【摘要】[目的]采用高效凌相色谱及紫外检测法建立同时测定吴茱萸药材中辛弗林、绿原酸、芦丁、金丝桃苷、槲皮素、吴茱萸碱和吴茱萸次碱7种活性成分含量的方法.[方法]采用浓度为50％的甲醇-水溶液超声制备样品.以HypersilC18(5μm,250 mm×4.6mm)为色谱柱,以乙腈-乙酸( V/V,1％)水溶液为流动相进行梯度洗脱.在254 nm波长下检测芦丁、金丝桃苷和槲皮素的含量；在270 nm波长下检测辛弗林和吴茱萸碱的含量；在340nm波长下检测吴茱萸次碱和绿原酸的含量.[结果]辛弗林、绿原酸、芦丁、金丝桃苷、槲皮素、吴茱萸碱和吴茱萸次碱各成分分离效果良好；其平均回收率均接近100％,RSD均小于3.1％.[结论]该方法适用于同时测定吴茱萸药材中辛弗林、绿原酸、芦丁、金丝桃苷、槲皮素、吴茱萸碱和吴茱萸次碱的含量,为吴茱萸药材的质量评价提供了更好的技术手段.【总页数】3页(P15988-15990)【作者】曾金祥;朱继孝;黄碧涛;王劭华;杨雅琴;王晓云【作者单位】江西中医学院江西省中药种质资源工程技术研究中心,江西南昌330004;江西中医学院江西省中药种质资源工程技术研究中心,江西南昌330004;南昌市洪都中医院,江西南昌330008;江西中医学院江西省中药种质资源工程技术研究中心,江西南昌330004;江西中医学院江西省中药种质资源工程技术研究中心,江西南昌330004;江西中医学院江西省中药种质资源工程技术研究中心,江西南昌330004【正文语种】中文【中图分类】S567.23+9【相关文献】1.吴茱萸中吴茱萸碱和吴茱萸次碱提取工艺及含量测定 [J], 史艳财;邹蓉;唐辉;韦记青;蒋运生;漆小雪2.综合评分法优化吴茱萸中5种活性成分的提取工艺 [J], 董嘉皓;李斐;魏飞亭;陈洋;陈欢;曹岚;杨武亮;陈海芳;袁金斌3.泡吴茱萸中吴茱萸碱·吴茱萸次碱和柠檬苦素含量测定方法研究 [J], 周劲松;陈俊禧;罗文英;马恩耀;孔箭;侯皓然4.34种吴茱萸中吴茱萸碱和吴茱萸次碱的含量测定 [J], 侯晓虹;于治国;徐赞美;王艳;戴凤丽;毕开顺5.吴茱萸水提物中吴茱萸碱和吴茱萸次碱的高效液相色谱含量测定 [J], 谢娟;张启云;余日跃;刘红宁;徐国良因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
中药吴茱萸中生物碱类成分的HPLC指纹图谱杨立芳;李小燕;尹显洪【期刊名称】《沈阳药科大学学报》【年(卷),期】2007(24)10【摘要】目的研究中药吴茱萸中生物碱类成分的HPLC特征指纹图谱。
方法应用HPLC法分析吴茱萸药材生物碱类成分色谱图。
色谱柱:Agilent Extend C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相:乙腈-水系(水-四氢呋喃-乙酸,体积比48∶1∶0.1);洗脱方式:线性梯度洗脱;柱温:35℃;流速:1 mL.min-1;检测波长:240 nm;进样量:20μL。
理论板数按吴茱萸次碱计算不低于3 000。
结果10批不同来源的吴茱萸药材所含生物碱类成分均得到很好的分离,获得14个共有特征峰。
结论HPLC指纹图谱法能较好地识别吴茱萸药材,为吴茱萸的质量控制提供了方法学依据。
【总页数】5页(P631-635)【关键词】吴茱萸;生物碱;高效液相色谱法;指纹图谱【作者】杨立芳;李小燕;尹显洪【作者单位】广西民族大学化学与生态工程学院【正文语种】中文【中图分类】R917【相关文献】1.吴茱萸HPLC指纹图谱的建立及3种成分含量的测定 [J], 曾金祥;刘勇;黄碧涛;杨雅琴;朱继孝;张忠立;罗光明;熊红红2.中药鬼臼毒性成分HPLC/UV指纹图谱分析方法研究及与威灵仙、龙胆HPLC图谱比较 [J], 粟晓黎;林瑞超;王兆基;徐树棋;关锡耀3.苦参生物碱类成分的HPLC指纹图谱研究 [J], 易远红;郝月莆4.吴茱萸不同产地加工方法HPLC指纹图谱及多成分含量比较 [J], 王先菊;李玮;杜洪志;张敏;刘亚琴;邱亚磊5.吴茱萸生物碱类成分指纹图谱的研究 [J], 张敏;袁金斌;黄加龙;黄兴发;王慧军因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
吴茱萸汤不同配伍情况下生物碱含量的RP-HPLC测定
赵冬梅;张英;毕开顺
【期刊名称】《药物分析杂志》
【年(卷),期】1999(19)1
【摘要】目的：采用反相高效液相色谱法测定吴茱萸汤不同配伍情况下的各处方中吴茱萸碱和吴茱萸次碱的含量。
方法：ＯＤＳ柱，以乙腈－水－四氢呋喃－冰醋酸（４８∶５２∶１∶０１）为流动相，氯氟舒松为内标，紫外检测波长２２５ｎｍ。
结果：吴茱萸单味药中吴茱萸碱和吴茱萸次碱的回收率分别为９７１％、９３７％；ＲＳＤ分别为２５％、２６％ｎ＝。
结论：本方法操作简单、准确、易行。
【总页数】4页(P16-19)
【关键词】吴茱萸汤;吴茱萸碱;RP-HPLC;生物碱;测定
【作者】赵冬梅;张英;毕开顺
【作者单位】沈阳药科大学药分研究室
【正文语种】中文
【中图分类】R284.1
【相关文献】
1.泻心汤不同配伍情况下黄酮类、蒽醌类和生物碱类成分的含量比较 [J], 冯有龙;胡浩彬;余伯阳
2.不同样品制备方法对RP-HPLC法测定附子生物碱含量的影响 [J], 侯大斌;赵祥
升
3.半夏泻心汤不同配伍情况下黄芩甙煎出量的RP-HPLC测定 [J], 段天璇;马长华;伦丽辉;侯艳霞
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![一种黄连和吴茱萸提取物中生物碱成分的检测方法[发明专利]](https://img.taocdn.com/s1/m/ac409f99fc0a79563c1ec5da50e2524de518d0f4.png)
专利名称：一种黄连和吴茱萸提取物中生物碱成分的检测方法专利类型：发明专利
发明人：李艳英,李正,杨秀伟,臧新钰,魏宏伟
申请号：CN202111592416.3
申请日：20211223
公开号：CN114460216A
公开日：
20220510
专利内容由知识产权出版社提供
摘要：本发明涉及一种黄连和吴茱萸提取物中生物碱成分的检测方法，属于药物分析领域。
该方法通过色谱分析能够快速、准确的测试黄连和吴茱萸的生物碱成分，可以检测同时含有这两种药材的组方，具有良好的精密度、重复性、稳定性和高回收率。
申请人：盈科瑞(天津)创新医药研究有限公司,北京大学,北京盈科瑞创新医药股份有限公司
地址：300385 天津市西青区学府工业区思智道1号E12
国籍：CN
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吴茱萸高效液相色谱特征吸收波长
吴茱萸，学名Evodia rutaecarpa（又称吴茱萸、骆驼梨、鱼腥草），是一种传统的中草药，其化学成分包括多种生物碱、黄酮类化合物等。
吴茱萸的特征成分之一是吴茱萸碱。
对于吴茱萸的高效液相色谱（HPLC）特征和吸收波长，这取决于你具体感兴趣的成分。
一般来说，HPLC是一种用于分离、识别和测定混合物中各组分的方法，而吸收波长通常用于检测化合物的含量。
吴茱萸碱（Evodiamine）是吴茱萸的主要活性成分之一。
它的HPLC 检测通常在紫外线光谱下进行。
Evodiamine的吸收波长通常在紫外区域，大致范围在230至300纳米之间。
具体的吸收波长可能因具体的实验条件和仪器设置而有所不同。
需要注意的是，分析吴茱萸或其成分时，最好参考相关的文献、方法或药典，以确保获得准确的分析条件和波长范围。
液相色谱-质谱法同时测定吴茱萸水提物中吴茱萸碱和吴茱萸次碱的含量鄢良春;李波;华桦;廖利;赵军宁【摘要】Objective:To establish a LC-MS method for the simultaneous determination of evodiamine and tutaecarpine in water extracts of Evodia rutaecarpa Methods:A Welch Materials Xtimate-C18 (2.1 mm ×150 mm,3μm) was used .The mobile phase consisting of a mixture of methanol and 10 mmol/L ammonium acetate (85:15) was delivered at a flow-rate of 0.2 mL/min.The column temperature was maintained at 30℃.The mass spectrometer was operated under the positive ion mode .Atomization pressure(N2) was 40 psi, volt-age was 4000v and temperature was 100℃.The drying gas ( N2) flow was 10 L/min, the drying gas temperature was 350℃.Results:The linear ranges were 2.02~504 ng/mL (r=0.9992) and 1.97~493.33 ng/mL (r=0.9999) for evodiamine and rutaecarpine .The method extraction recoveries of evodiamine and rutaecarpine were87.8%~97.04%and 86.35%~98.22%respectively.The intra-and inter -day RSD were also lower than 10%.Conclusion:The method is simple , reliable and sensitive .It can be used for the phar-macokinetics research of water extracts of Evodia rutaecarpa .%目的：建立同时测定吴茱萸水提物中吴茱萸碱（Evodiamine，EVO）和吴茱萸次碱（Rutaecarpine，RUT）的LC/MS方法。
吴茱萸中吴茱萸碱和次碱的提取及测定王世永;李小定【期刊名称】《湖北农业科学》【年(卷),期】2008(47)3【摘要】采用HPLC法测定了湖北阳新县所产吴茱萸在不同提取方法下吴茱萸碱和吴茱萸次碱的含量.结果表明,在流动相为水-甲醇-乙腈(44:20:36)、流速1.0mL·min-1、检测波长290 nm、柱温25℃的色谱条件下,阳新产吴茱萸药材中吴茱萸碱和吴茱萸次碱的线性浓度范围均为0～1.2μg.mL-1:平均回收率分别为96.32%和95.46%,RSD分别为3.05%和1.78%;线性关系、精密度及重现性都较好.3种生物碱提取方法的效果中,采用超声提取较常规的水提取和索氏提取方法效率高、时间短、提取温度低.是提取吴茱萸碱和吴茱萸次碱的较好方法.【总页数】3页(P340-342)【作者】王世永;李小定【作者单位】华中农业大学食品科学技术学院,武汉,430070;华中农业大学食品科学技术学院,武汉,430070【正文语种】中文【中图分类】S567.1;TQ464.4【相关文献】1.吴茱萸中吴茱萸碱和吴茱萸次碱提取工艺及含量测定 [J], 史艳财;邹蓉;唐辉;韦记青;蒋运生;漆小雪2.HPLC同时测定吴茱萸中吴茱萸碱、吴茱萸次碱和吴茱萸内酯的含量 [J], 苏娟娟;张璐;何明珍;冯育林;王跃生;杨世林3.响应面分析法优化吴茱萸中吴茱萸碱和吴茱萸次碱的超声提取工艺 [J], 谢妍龙; 李敏4.高效液相色谱法测定吴茱萸提取物中吴茱萸碱、吴茱萸次碱及吴茱萸内酯的含量[J], 吴建平;谭桂山;徐康平;易登峰;邓银华;黄朝晖5.高效液相色谱法同时测定制吴茱萸及其提取物中吴茱萸碱、吴茱萸次碱和吴茱萸内酯含量 [J], 鲍天冬;董宇;杨庆;朱晓新因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
电喷雾解吸电离质谱快速测定吴茱萸中生物碱陈焕文1,3 郑健32,3 王伟萍1 陈昌林1 王志畅11(东华理工学院,抚州344000) 2(北京市理化分析测试中心,北京100089)3(吉林大学化学院,长春130023)摘 要 生物碱是许多中草药的活性有效成分,其含量的多少和种类的差异是导致中草药品质差异的重要因素。
本文利用电喷雾解吸电离质谱(DESI 2MS )能够在不需要样品预处理的前提下进行复杂基体样品分析的特点,采用酸性甲醇2水混合溶液作为喷雾试剂,在优化了的实验条件下快速获得了吴茱萸的DESI 2MS 指纹谱图,然后利用串联质谱对其中有重要活性的5种生物碱进行了结构鉴定。
实验表明,基于固体表面解吸电离质谱分析的方法不需要萃取2分离手续,单个样品测定时间不超过1.5m in,大幅度提高了分析速度,有望在药品品质的在线监测和工艺过程控制中发挥重要作用。
关键词 电喷雾解吸电离质谱,吴茱萸,快速测定,生物碱 2008203226收稿;2008211224接受本文系国家自然科学基金(No .20505003)资助项目3E 2mail:zhjianhb@g mail .com1 引 言吴茱萸(F ructus Evod iae )是常用的中草药之一,其品质最好的是芸香科植物吴茱萸的干燥未成熟果实,具有温中、止痛、理气、燥湿、疏肝、散寒、止呕等多种功效。
吴茱萸在中成药中需要粉碎后制作散剂或丸剂,临床上多作单方或复方用于治疗胃腹冷痛、高血压、寒疝疼痛、神经性皮炎、口腔溃疡及疥疮等[1]。
研究认为,其主要活性成分为吴茱萸生物碱[1,2],生物碱的种类和含量与吴茱萸的品质相关。
到目前为止,对吴茱萸生物碱的测定方法主要有薄层扫描,毛细管电泳及高效液相色谱法[2～4]。
这几种测定方法为吴茱萸中的两种主要生物碱(吴茱萸碱和吴茱萸次碱)提供了较为满意的定性定量信息,由于灵敏度、参照物等方面的影响,对吴茱萸中尚缺少标准物质的生物碱成分的检测显得无能为力。
液2质联用技术具有极强的定性能力,可有效地分析复杂混合物的单个和多个组分,曾经用来对吴茱萸生物碱进行分析[5]。
但在常规LC 2MS 联用中,首先要将制药工艺中已经粉碎的样品进行萃取,然后在一定条件下进行色谱分离,最后才能够用电喷雾电离(ESI )或大气压化学电离(APC I )质谱检测。
电喷雾解吸电离(DESI )是一种新兴的离子化技术[6～8],其主要优点是能够在大气压下直接对固体表面的痕量物质进行解吸电离,形成离子后被质谱检测。
由于在大气压下进行操作(样品更换等较便利)和不需要样品预处理,使得DESI 适合于进行现场、在线分析,具有灵敏度高、速度快、特异性好等特点。
自DESI 于2004年后期问世以来,已经广泛地应用到各种爆炸物现场检测[9,10]、生物组织的质谱成像[11]、植物中生物碱分析[12]、各种形态的化学药品在线分析[13]、食品分析[14]和临床样品分析[15]等领域。
本实验将DESI 2MS 用于芸香科植物吴茱萸干燥未成熟果实的快速分析。
结果表明,DESI 2MS 不但可用于化学制药工业中对成药品质进行监测[12],还可根据吴茱萸中主要生物碱组分对吴茱萸的真伪进行快速鉴定。
2 实验部分2.1 仪器与试剂LT Q 线性离子阱质谱仪(美国热电菲尼根质谱公司);电喷雾解吸电离(DESI )离子源(自制);红外光谱仪的制样器(天津天光光学仪器设备有限公司)。
吴茱萸、曼陀罗等药材(南昌开心人中药房);甲醇、甲酸、氨水,均为分析纯(天津市大茂化学试剂厂);去离子水,实验室自制。
第37卷2009年2月 分析化学(FE NX I HUAXUE ) 研究报告Chinese Journal of Analytical Che m istry 第2期237～2412.2 电喷雾解吸电离(D ES I)离子源DESI 电离源实际上由一个略微倾斜的电喷雾源(ESI )和一个样品支架组成,整套装置放置在一个固定的平台上,并且能够通过32D 调节架来调节其相对位置,使ESI 喷嘴、样品表面以及LT Q 采样锥形成一定的夹角,以便在样品表面产生的离子能够更好地引入到质谱仪中进行质量分析。
关于DESI 源的详细描述、优化等参见文献[11～14]。
在通过碰撞诱导解离(C I D )进行串联质谱分析时,母离子选择窗口宽度为1.5质荷比单位,碰撞能量为20%～30%。
2.3 实验方法2.3.1 样品处理 称取500g 清洁干燥的药用吴茱萸于洁净的粉碎机中粉碎,过0.128mm 孔径筛,然后把剩余药渣继续研磨,过筛后再充分搅拌以混合均匀。
如此反复多次,直到所有药渣全部研细并且混合均匀。
由于粉末样品难以直接在DESI 源中进行分析,故采用红外光谱仪的制样器将粉末样品压制成厚度约1mm 的药片备用。
实验时,将药片放置在样品支架上,然后调整好样品支架和DESI 源的位置。
为了获得更好的信噪比,每张质谱的平均扫描时间为1.5m in 。
2.3.2 正离子模式下D ES I 2M S 主要工作参数 质量范围为50～500Th;鞘气流速、辅助气体流速均为0mL /m in;喷雾溶剂流速为3mL /m in;雾化气线性流速约为300m /s;喷雾电压为5kV,毛细管电压为12V,透镜电压为100V;毛细管温度为275℃;喷雾溶剂为甲醇∶水∶甲酸=49∶49∶2(V /V );质谱入口与样品表面的距离为5mm;喷雾针尖与样品表面的距离为2mm;喷雾针与样品表面的角度(α)为45°;样品表面与质谱入口毛细管的角度(β)为15°。
3 结果与讨论3.1 仪器工作条件的优化为了优化仪器的工作条件和实验参数,首先使用常见的中药曼陀罗(Datura stra monium )的根茎进行DESI 2MS 分析,结果获得了如图1a 所示的曼陀罗的质谱图。
从图1a 上可以看出,曼陀罗的DESI 谱图与文献[11]的结果基本一致,采集到大部分生物碱质谱峰。
为了进一步确定所获得的实验结果,选择了曼陀罗中东莨菪碱的分子离子峰(m /z 304)进行串联质谱分析。
在给定的C I D 条件下,获得了如图1b 所示的谱图,所获得的碎片与文献[11]报道一致。
因此表明DESI 实验中所选定的仪器的工作条件(如角度、电压等)正确,能够获得良好的信号。
图1 曼陀罗DESI 2M S 谱图(a )和其组织中东莨菪碱的二级质谱(b )Fig .1 Des or p ti on electr os p ray i onizati on (DESI )2MS of Datura stra moniu m (a )and C I D s pectru m ofp r ot onated scopola m ine (m /z 304)(b ),showing rep r oducibility and app r op riate operati on para metersf or DESI experi m ents1.32多聚乙烯羟基26,72二羟基托烷(32tygl oyl oxy 26,72dihydr oxytr opane );2.东莨菪碱(scopola m ine );3.3,62二聚乙烯羟基27β2酚酮(3,62ditygl oyl oxy 27β2hydr oxytr opane ); 4.32乙酸基262酚酮(32acet oxy 262hydr oxytr opane );5.32β2二聚乙烯羟基62异戊含氧酰基272酚酮(3β2tygl oyl oxy 262is ovaler oyl oxy 272hydr oxytr opane );6.32含氧托品酰基262聚乙烯羟基托烷(32tr opoyl oxy 262tygl oyl oxytr opane )。
DESI 进行离子化的机理虽然还没有最终定论,但是被认为主要是离子2分子间的质子转移反应[6]。
因此,溶剂的质子化能力对信号的强度具有较大的影响。
本实验考察了1%氨水、1%甲酸、中性水,中832 分析化学第37卷性甲醇、中性甲醇2水混合溶液(1∶1,V /V )、碱性甲醇2水2氨(49∶49∶2,V /V )和酸性甲醇2水2甲酸(49∶49∶2,V /V )对曼陀罗的信号的影响。
实验发现,在正离子工作模式下,碱性溶液对曼陀罗的信号有一定的抑制作用,而酸性溶液则能够对信号有较好的增强作用。
实验表明,在正离子检测模式下,酸性溶液对DESI 信号有较好的增强作用,而在负离子检测模式下,碱性溶液对信号具有较好的效果。
这与DESI 中离子2分子反应机理一致[6,13]。
无论何种检测模式,一般需要在喷雾溶剂中添加一定的甲醇等有机溶剂,主要是为了减小水的表面张力,使得喷雾更加均匀细致。
由于需要测定的主要成分是吴茱萸中具有一定碱性的生物碱,因此,实验选定甲醇2水2甲酸(49∶49∶2,V /V )混合溶液为DESI 喷雾所用的溶液。
实验还考察了甲醇2水2甲酸(49∶49∶2,V /V )溶液的流速对信号的影响,并且发现在流速为3μL /m in 时信号的强度已经达到最大而且稳定。
因此,本实验选择了3μL /m in 。
3.2 吴茱萸的D ES I 质谱检测在已经优化的实验条件下,按照实验条件操作,获得的吴茱萸的DESI 2MS 谱图如图2所示。
由图2可知,吴茱萸的DESI 2MS 谱图比较杂乱,尤其是在m /z 200～400区间内具有许多可以识别的峰(S /N ≥3)。
从前人的工作可知,吴茱萸主要活性成分是生物碱[5,16,17],分别为吴茱萸碱(分子量303)、吴茱萸酰胺(分子量307)、羟基吴茱萸碱(分子量)、吴茱萸次碱(分子量287)和吴茱萸酰胺甲(分子量305)。
由于喷雾溶剂为酸性,具有较强的质子化能力,而所测定的生物碱均具有较强的碱性。
因此,在此实验条件下,在DESI 2MS 中观测的应该是这些生物碱的质子化分子离子。
从图2可以看出,在m /z 304、308、320、288和306处分别观测到了较强的质谱峰,正好与吴茱萸5种生物碱的分子离子相对应。
为了进一步确定所获得的这些质谱峰,分别按照实验部分进行操作,考察了这些离子的二级串联质谱,其中吴茱萸碱和吴茱萸酰胺的C I D 谱图分别如图3a 和图3b 所示。
图2 吴茱萸的DESI 2M S 谱图Fig .2 DESI 2MS of F ructus Evodiae p lant tissue usingacidic s p raying s olvent 图3 吴茱萸中吴茱萸碱和吴茱萸酰胺的C I D 质谱Fig .3 DESI 2M S/MS of evodiam ine and evodia m ide in p lant tissue 图3a 中碎片m /z 171为母离子丢失碎片C 8H 7NO (结构式Ⅰ)后所得。
