吴茱萸生物碱的提取工艺和含量分析研究概况

2. 3 毛细管电泳法
毛细管 电泳法与 H PLC 相比, 具有分 离时间更短, 杂质 干扰 更少, 使用有机溶剂 少, 操作简 便等 优点, 满足 了分 析某 些生 物 碱的要求。周兴旺等 [ 16] 采用高效毛细管电泳法测定吴茱萸提取
物中的吴茱萸次碱的含量, 针对吴茱萸次 碱不溶于 水, 也难溶于 酸水、碱水及氯仿等 溶剂, 进样后易产 生沉淀而 造成毛 细管堵塞 使电流中断。并加入乙腈 或甲醇 对疏水 性的吴 茱萸次 碱起增溶 作用, 有效改善 峰形与 柱效。对 吴茱 萸次 碱测定 的线 性范 围为 8~ 80L g /mL; 检出限为 0. 9Lg /mL。
2 生物碱含量分析
生物碱是吴茱萸 果实的主要活性成分, 包括 吲哚类 生物碱、 喹诺酮类 生物 碱 及其 它生 物 碱。吴茱 萸 次碱 属于 吲 哚类 生 物 碱, 不溶于水, 也 难溶于 酸水、碱 水及 氯仿 等溶 剂。吴茱 萸生 物 碱主要分析测定方法 为薄层色谱法, 高效液相色 谱法、毛细 管电 泳技术等 [ 9- 11]。
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广州化工
2010年 38卷第 11期
药物有效成分, 具有萃取速度快、效率高、操作简 单等特 点, 产品 中没有残留有机溶剂 , 特别对湿热不 稳定物的萃 取尤为 适用, 所 提取的有效成分具有 最大的生物活性 [ 5]。
刘文 [ 8] 等应用超临界流体萃取法 提取吴茱 萸中吴茱萸 碱和 吴茱萸次碱, 结果表明在 40e 条件 下, 采用无 水乙 醇作 夹带剂, 萃取压力为 30M Pa, 萃取时间为 90m in萃 取, 吴茱萸 碱产品 纯度 可达到 28. 54% 、吴茱萸次碱 27. 95% ; 证明采用超临界萃取吴茱 萸中茱萸碱和吴茱萸 次碱具有萃取效率 高, 产品 纯度大, 无 有机 溶剂残留的优点。
刘蕴秀, 罗淑荣等 [ 12]首次 应用薄 层荧光 扫描法 测定中 药吴 茱萸中 5种生物碱: 羟基吴茱萸碱, 吴茱萸 次碱、吴茱萸 酰胺甲、 吴茱萸碱、N - 甲酰二氢 - 吴 茱萸次 碱的 含量。结 果显示: 各 生 物碱的线性 范围 在 20. 5~ 245L g, 回收 率 为 96. 8% ~ 104. 5% , R SD = 3. 08% ~ 4. 75% , 分离度较好, 结果准确稳 定、简便 、快捷, 是分析吴茱萸及 其制 剂质量 的简 便有效 的手 段之 一, 但 也存 在 分离效率低、检测峰容量有限的缺点。
Guangx i Yulin 537000, Ch ina)
Abstract: Evod ia rutaecarpa ( Juss. ) B enth. , a traditional Ch inese m ed icine, wh ich had lo ts of act iv it ies such as ant ibacteria and antitum or act iv it ies. A lka lo ids were the m ost active com pounds. The m ethods used for extraction and content analysis of alkalo ids played the m a jo r ro les in the research, qua lity contro,l and u tilizat ion of the m ed icina lm ateria ls. Therefore, the ex traction and content ana lysis o f alka lo ids w ere a lso review ed.
组分。最常用的
SFwk.baidu.com为
CO
。应用
2
CO2 -
SFE 技术提取分离天然
* 基金项目: 广西自然科学基金项目 ( 2010GXN SFA 013064, 0991284 ), 广西教育厅基金项目 ( 200607LX 067) 。 通讯作者: 谭明雄 ( 1968- ) , 女, 博士, 教授, 从事天然产物化学研究。 E - m ai:l tanm x00@ 163. com
反相高效液相法 ( RP - HPLC) 也用 于吴茱萸 生物 碱的含 量 测定, 邹巧根等 [ 15] 建立了利用 RP - HPLC测 定吴茱 萸碱及 吴茱 萸次碱的定量方 法, 主要 色谱条 件为: 色谱 柱流 动相 为: 水 - 乙 腈 - 冰乙酸 - 四氢呋喃 ( 100z 90z 0. 2z 2) ( pH = 5. 0); 流 速为 1. 0mL /m in; 检测 波长 254nm; 线 性范围 0. 04~ 0. 2ng, 吴茱萸 碱 及 吴 茱 萸 次 碱 浓 度 与 峰 面 积 具 有 良 好 相 关 性, r 值 分 别 为 0. 9998, 0. 9995, 加样回收率分别为 99. 25% 。
K ey w ord s: Evod ia rutaecarpa (Juss. ) B enth. ; a lkalo ids; extraction; content analysis
吴茱萸 为 芸 香 科 吴 茱 萸 属 植 物 吴 茱 萸 ( Evodia ru taecarp a ( J uss. ) B enth. ) 干燥近成熟的果实, 为常 用温中 祛寒中 药, 主产 于长江流域及长江以 南各省 区。始载 于 5神农 本草经 6, 味苦 性 温, 有小毒, 归肝、脾、胃、肾经, 具有 散寒止 痛、降 逆止呕、助 阳止 泻之功。常用于 治疗呕 吐泄 泻、头痛 眩晕 [ 1] 。吴茱 萸所 含化 学 成分类型较 多, 包括 生 物 碱、柠 檬苦 素、萜 类、黄 酮、香 豆 精、甾 体、挥发油、木脂素、多糖等, 其中 生物碱为 其主要 有效成 分。如 吴茱萸碱和吴茱萸次 碱具有抗菌、抗 癌、抗 炎、镇 痛、抗血小 板聚 集、抗血栓形成、体温调节 和保护 心脏等 药理作 用 [ 2- 3] 。吴 茱萸 作为一种有良好开发 应用前景的 传统中 药, 生物碱 的提取 工艺 和含量测定对控 制吴 茱萸的 药材 的质量 控制 和进 一步的 研究、 开发具有举足轻重的 作用, 本 文综述 吴茱萸 的提取 工艺研 究和 含量分析概况。
甄攀等 [ 6] 利用超声波 辅助 提取 法提取 吴茱 萸生物 碱, 研究 结果表明, 用超声波 提取辅助可节省大量 的时间, 用醋 酸乙酯提 取, 45倍溶媒, 30e 下超声提取 40m in, 具有较 高的提取效率。王 世永等 [ 7] 在研究 3种不 同提取方法下吴茱 萸碱和吴茱萸次碱的 提取率, 超声提取 法吴茱 萸碱 得率 为 0. 266 6% , 吴茱 萸次 碱得 率为 0. 2054% ; 而 索 氏 提 取 法 的 提 取 率 分 别 为 0. 1037% 和 0. 0906% , 高于水 法 ( 两种 碱的 得率为 0. 0117% 和 O. 0029% )。 另外, 超声提取只需 要 1h, 而水提法需 2h。索 氏提取法则 需 4h。 认为采用超声提取 法较 常规的 水提 取和索 氏提 取方法 效 率高、
1 生物碱提取工艺
1. 1 传统溶剂提取法
用甲醇、乙醇等有机 溶剂 提取 是国内 目前 研究 较多 的提 取 工艺。陈洪宝 [ 4] 采用 均匀 设计法, 以 吴茱萸 总生 物碱 相对提 取 得率及浸膏得率 作为 指标, 考察 吴茱 萸生物 碱提 取最佳 工艺 条 件, 认为用 70% 乙醇提取 , 溶 剂 10 倍量用 量、提 取 2. 5h, 提 取 2 次, 浸膏得率为 25. 25% , 生物碱提取率为 1. 6369% 。
2. 2 高效液相色谱法
高效液相色谱法 (H PLC )由于具有较 高效的分离 效能, 较宽 的适用范围及条 件优 化的灵 活性 等优点, 在 生物 碱分析 中得 到 了广泛的应用。徐艳春等 [ 13] 利用 H PLC 法测定吴茱萸生物 碱的 含量。结果显示, 测定组分具有较好的 线性关系 和分离 度, 吴茱 萸碱 及 吴 茱 萸 次 碱 回 收 率 分 别 为 97. 82% , RSD = 0. 81% 和 97. 00% , RSD = 1. 11% , 该方法简便 易行、有效、重现性 好。谢娟 等 [ 14] 也利用 H PLC 法测定吴茱萸水提物中的吴茱萸碱和吴 茱萸 次碱的含量。结果显示昊茱萸 碱浓度在 0. 2~ 4. 0L g /mL 范 围内 呈良好的线性关系, r = 0. 9997, 平均回 收率 为 101. 50% , R SD = 1. 93% ; 吴茱萸次碱浓 度在 0. 5~ 6. 0Lg /mL 内呈 良好 的线性 关 系, R = 0. 9999, 平均回收率为 100. 80% , RSD = 0. 72% 。
2. 1 薄层扫描法
薄层扫描法 ( TLC ) 指用 一定 波长 的光 照射 在薄 层板 上, 对 薄层色谱中有紫外或 可见吸收的斑点或经 照射能激 发产生 荧光 的斑点进行扫描, 将 扫描得 到的 图谱 及积分 值用 于药品 的质 量 检查的方法。与高效液相色谱 法相比, 具有多通 道效应, 可 同时 平行分离分 析多 个 样品; 流 动 相用 量少 且 选择 范围 宽、更 换 方 便; 固定相为一次性使用, 对样 品的预处理 要求不 高等优 点。在 中药制剂检验中, 已成为重要的常用分析方法之一。
2. 4 液相色谱 - 电喷雾串联质谱联用法
液相色谱 - 电喷雾串联质谱联用技术 ( HLPC- E IS- M S)具 有极强的定性能力, 可 有效的 分析 复杂混 合物 的单 个和多 个组 分。特别是对一些没 有标准 物质 的生 物碱成 分, 利用 毛细 管电 泳及高效液相色谱法等这几 种测定方 法显得 无能力 时, HLLC E IS- M S却可以提供较 为满意的定性定量信息。张雪琴等 [ 17]除 了采用 RP - H PLC 对吴茱萸次碱进行含量测定外, 还采 用 H LLC - E IS- M S 联用法, 通 过色谱 保留 时间和 相应 的质谱 信息 对不 同产地中药吴茱萸中的其它 4种生 物碱成分: 吴茱 萸碱、羟基吴 茱萸碱、吴茱 萸 酰胺 甲、吴 茱萸 酰胺 等 生物 碱成 分 进行 定 性分 析, 方法简单, 快速。灵 敏。结 果令 人满 意, 为控 制吴 茱萸 的质 量, 保证药效提供了 部分科学依据。
1. 2 超声辅助提取法
超声辅助提取 ( u ltrasound - assisted extraction )技 术的 应用 原理是利用超声波 的空 化作用 加速 植物有 效成 分的溶 出, 另外 超声波的次级效应, 如机 械振 动、乳化、扩 散、击碎、化 学效 应等 也能加速欲提取成分的扩散释放并 充分与溶 剂混合, 利于 提取。 该技术具有提取时 间短、产 率高、无需 加热、低温 提取 有利 于有 效成分的保护等优点 [5] 。
时间短、提取 温 度低, 是 提 取昊 茱萸 碱 和吴 茱萸 次 碱的 较 好方 法。
1. 3 超临界 CO2 萃取法
超临界流体 萃取 ( Supe rcr itica l F lu id Ex traction)的 应用 原理
是利用超临界流体 ( SF ) 为萃取 剂, 从液体或 固体中 萃取 出待测
H UANG H ou- ze1, TAN M ing - x iong2, LI D ong - qing2 ( 1 Yulin H ealth Schoo,l Guangx i Yulin 537000; 2 Departm ent of Chem istry & B iology, Yu lin Norm al Co llege,
生物活性的重要物质基础, 生物碱的提取工艺和含量分析对吴茱萸药材的质量控制 和进一步的研究、开发具有重要意义, 本文综述了 吴茱萸生物碱提取工 艺和含量分析研究概况。
关键词: 吴茱萸; 生 物碱; 提取工艺; 含量分析
R eview of the E xtraction and Content Analysis of A lkaloids in Evodia rutaecarpa (Juss. ) B enth*
2010年 38卷第 11期
广州化工
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专论与综述 吴茱萸生物碱的提取工艺和含量分析研究概况*
黄厚泽 1, 谭明雄 2, 李冬青2
( 1 玉林市卫生学校, 广西 玉林 537000; 2玉林师范学院化学与生物系, 广西 玉林 537000)
摘 要: 吴茱萸 ( Evodia ru taecarp a ( Juss. ) B enth. )是一种具有抗菌、抗癌等多种活性的传统中药, 吴茱萸生物碱是吴茱萸具有