胸苷激酶1

胸苷激酶1的研究进展邢晓光【摘要】恶性肿瘤是威胁人类健康最主要的疾病之一,目前主要靠病理学及影像学来诊断,只有患者具有明显占位性病变和临床症状后才能确诊,而此时已非癌变最早期,且已过最佳治疗时期.因此,对恶性肿瘤具有早期诊断作用的血清肿瘤标志物是目前研究的重点.随着现代血清学肿瘤标志物相关研究的迅速发展,一种新的细胞增殖标志物,即胸苷激酶1(TK1)被证实在肿瘤早期发现、疗效评估、预后判断等方面具有重要意义.现从TK1的结构、功能、与DNA合成及肿瘤的关系等方面予以综述.%Malignant tumor is the most important disease threatening human health, current major di-agonsis of which is by pathology and imaging; affirmative diagnosis can only be achieved when patients have obvious space-occupying lesions and clinical symptoms, missing the early stage of canceration, which is the optimal treatment time. Therefore it is the current research focus to find serum tumor marker for early diagnosis of malignant tumor. With the rapid development of the serum tumor marker,thymidine kinase-l( TK1 ),a new cell proliferation marker, has been confirmed to be of great significance in early detection, therapeutic effect evaluation and prognosis of tumors. Here is to make a review on TK1 structure, function and its correlation with DNA synthesis and tumors.【期刊名称】《医学综述》【年(卷),期】2012(018)001【总页数】4页(P66-69)【关键词】胸苷激酶1;恶性肿瘤;细胞增殖标志物【作者】邢晓光【作者单位】天津港口医院检验科,天津,300456【正文语种】中文【中图分类】R730恶性肿瘤是威胁人类健康最主要的疾病之一，对其早期诊断更具临床意义。

胸苷激酶1（TK1）细胞周期分析项目说明一、 癌症已成为最主要的致死类疾病 近10年来，癌症逐渐取代心血管疾病，成为中国人首要致死类病变，防癌形势严峻（右图）。

《2012中国肿瘤登记年报》显示，国人每分钟有6人确诊为肿瘤。

以我省（湖南省）为例，截至2010年，肿瘤死亡率为143.67/10万（略高于全国肿瘤死亡率135.88/10万），每四到五个死亡者中就有一个死于肿瘤，肿瘤类型以肝癌、食道癌、胃癌、肺癌为主。

二、肿瘤发病率逐渐升高带来的高社会成本和经济压力 癌症病人医疗费用在全民医疗费用中占比极高,根据全国政协教科文卫体委员会和中国癌症基金会2006年编写的《癌症的科学与实践》，如果按照每位病人花费2万元来估算，中国每年癌症病人的医疗费用高达近千亿元，占全国医疗卫生总费用的20％以上，远图1：2009年全国死亡病因分析2006年全国医疗费用支出肿瘤其他>20%高于其他慢性病的医疗费用。

而一般以为，2万元每人的标准完全被低估了。

世界卫生组织指出：三分之一以上甚至约一半以上的癌症都是可以预防的。

而癌症预防的成本，远远低于癌症治疗的花费。

同时造成肿瘤发病率和死亡率高及费用高昂的原因有:（1）早期发现难：缺乏经济、灵敏度高的适于早期全身筛查的检测手段：肿瘤标记物增强CT PET-CT 内窥镜免疫组化是否定性否否是配合组化否灵敏度低，尤其早期高高高高特异性低低高高高发现恶变阶段早期灵敏度低，中晚期灵敏度高肿瘤早期癌巢早期，较CT早6个月癌前病变期不典型组织增生是否适合全身筛查需联合使用是是否否安全性微创或无创造影剂易产生过敏，辐射辐射微创，但易发生出血样本来源有创费用低高昂贵低低（2）中晚期治疗难原因1：治疗过程中，缺乏准确预后的方法，治疗方案评估信息不足，方案有效性评估不足；原因2：治疗恢复过程中，缺乏灵敏、准确的复发风险评估方案，无法进行动态、有效的评估。

以上原因使得难以对患者实施具有针对性的个体化治疗方案。

TK1-胸苷激酶1-检测项目指导手册第一部分项目运行意义概述胸苷激酶1简称TK1，是一种国际公认的细胞增殖特异性标志物；它参与DNA补救合成途径,是DNA合成的特殊标志酶。

临床上,可用于监测和评估体内细胞的异常增殖速度。

健康人细胞多处于静止状态（非增殖细胞），血清中的TK1酶含量极微，而随着增殖类疾病的发生，尤其是肿瘤、组织异常增生类疾病，细胞发生过度增殖，血清中TK1酶的含量出现显著升高，超过健康人平均水平2倍甚至100倍以上。

所以，通过检测血清中TK1浓度水平的变化，能够敏感地发现细胞增殖异常，动态评估细胞增殖发展趋势，为提前干预治疗高风险癌前病变，遏制肿瘤进程提供重要信息。

在瑞典卡罗琳斯卡大学(诺贝尔医学和生理学奖评审机构)二十多年的研发基础上,华瑞同康生物技术（深圳）有限公司与瑞典Karolinska大学TK1研究团队共同研制出高灵敏度的胸苷激酶1（TK1）细胞周期分析试剂盒及CIS系列化学发光数字成像仪，该系统是世界上唯一用于临床检验血清中TK1浓度的产品，其特异性高于95%,对各类增殖性疾病的综合检测灵敏度高于70%。

该系统已在多临床领域得到较为广泛地应用：1、独立的肿瘤预后因子：多国家，多机构的研究表明，TK1是优选的预后评估指标，可作为独立的肿瘤预后因子；2、动态评估手术、放化疗效果：能够对各种实体肿瘤（例如：肺癌，胃癌，结肠癌，直肠癌，食道癌，乳腺癌，宫颈癌，前列腺癌等）以及白血病和淋巴癌患者的治疗效果进行评估，为治疗方案的改善提供参考；3、更早评估肿瘤复发风险：对肿瘤康复期患者进行动态跟踪，较影像学更早提示肿瘤复发或转移风险信号；4、评估各类增殖类疾病恶变风险：处于过度增殖的增殖类疾病是肿瘤形成的第一步。

基于TK1与细胞增殖的密切关系，能够灵敏地通过TK1的浓度变化，发现恶性增殖风险，为肿瘤的癌前干预提供了更有效率，更有价值的信息，适用于无疾病人群的恶性增殖风险筛查。

第二部分项目运行准备一.项目环境1、环境参数温度： 24-25℃；湿度：小于65%；实验用水：（1）双蒸水；（2）去离子水；2、实验室设置要求：（1）项目最小占地约8-9平方米；（2）工作区域可放置两张1.5m×0.8m或一张3m×1m工作台；（3）控温设备：30立方米左右的独立空间，可选用2匹的挂式空调进行控温,或选用恒温摇床，如下图：二、项目所需设备1、实验用设备（1）实验用工具：（3）实验耗材三、实验样本处理要求及保存样本种类：血清采集要求：1、必须使用无任何添加剂的真空采血管；2、取静脉血2ml（室温）；3、建议空腹采血；4、脂血、溶血样本可能造成实验结果的偏差，不建议使用；样本处理：1、采血完成后，室温下静置或37℃水浴至凝固后离心使用；2、离心转速：4000r/min，离心时间：5min；注：室温放置时间不宜超过3h；样本保存：1、离心后的血清如非即时使用，应立即分装，推荐血清分装量100-200μl/管，放置于-20℃保存；2、-20℃保存时间以不超过7天为佳；3、如需长时间保存，建议提高分装量（1.5ml），并放置于-80℃（可保存3年左右）；样本运输：1、样本如需外送检验（本市范围内或行程小于3小时），建议采血后先放置于2-8℃静置，到检验点后取出离心，处理要求同上；2、样本如需外送检验（外省市），建议离心后分装至分装管中，血清分装量 1.5ml/管，运输介质建议使用保温箱+化学冰+干冰，干冰用量 2公斤/24小时（根据路程耗费时间增量）；样本复融：1、血清使用前需充分振荡混匀；2、冷冻保存的血清样本，需放置于室温完全解冻后使用；3、反复冻融的血清样本严禁使用。

鼻咽癌患者血清中胸苷激酶1的检测意义的开题报
告
背景:
鼻咽癌是一种常见的头颈部恶性肿瘤，具有高度侵袭性和转移性。

胸苷激酶1 (TK1) 是一个细胞增殖标志物，其水平与人体肿瘤细胞增殖活性密切相关。

许多研究表明，血清中 TK1 的检测可以作为肿瘤的早期诊断和治疗随访的重要指标。

但是，目前尚无关于患有鼻咽癌的患者血清中 TK1 水平的详细研究报道。

目的:
本研究旨在探究鼻咽癌患者血清中 TK1 的水平，并评估其在鼻咽癌早期诊断和治疗随访中的诊断价值。

方法:
收集经临床诊断和组织学检查确诊的 50 名鼻咽癌患者和 50 名健康对照者的血样。

采用 ELISA 法检测血清中 TK1 的水平，并比较两组之间的差异。

通过 ROC 曲线分析确定 TK1 的最佳诊断阈值，并计算 TK1 的敏感性、特异性、阳性预测值和阴性预测值。

此外，对鼻咽癌患者的临床病理特征进行综合分析。

预期结果:
预计患有鼻咽癌的患者血清中 TK1 的水平将高于健康对照组，并且TK1 可能成为鼻咽癌的潜在诊断标志物。

我们还预计，血清中 TK1 水平将与鼻咽癌的临床病理特征相关联。

结论:
本研究将评估鼻咽癌患者血清中 TK1 的水平，并评估其在鼻咽癌早期诊断和治疗随访中的潜在诊断价值。

此研究结果可能为鼻咽癌的早期诊断和治疗提供新的诊断标志物和治疗目标。

胸苷激酶1是恶性肿瘤预后判断的动态标志国内外学术界近十余年来，针对TK1作为肿瘤预后标志物方面作了大量的研究工作，小结如下：1、肿瘤的恶性行为和DNA加速合成密切有关，以满足其异常快速增值的需要。

TK1反映了肿瘤增殖时S期嘧啶补救途径合成的关键酶的活性，是有特殊价值的S期增殖标志物，能用于监测和随访肿瘤患者，当肿瘤恶化时细胞快速增殖，该酶显著升高。

2、TK1升高和肿瘤恶化的关系得到了细胞试验、动物实验和大量临床资料的验证：国内外论文都表明一致的规律：不管什么肿瘤，当血清TK1处于正常状态，意味肿瘤处于稳定期或缓解期，TK1浓度或活性升高，意味肿瘤复发，预后较差，生存期明显短于TK1活性或浓度低者，且差异有统计学意义。

这一结论已为肿瘤学术界所公认，认为有里程碑价值。

35届世界肿瘤大会经专家讨论，建议在肿瘤诊治中，将TK1作为常规检测项目，定期监测。

3、为了进一步探讨TK1在判断肿瘤预后中的价值，不少研究都做了COX比例风险回归模型分析。

本文中引用了多种肿瘤的COX报告结果，这些报告除了TK1外，比较了大量公认的影响肿瘤预后的因素，统计结果表明TK1属于风险率最高的风险率因子。

4、TK1是一个独立的动态的预后标志物。

该标志物和肿瘤类型无关，只反映肿瘤细胞增殖速度和恶化程度。

临床经验表明，TK1主要用于预后评估，令学术界倍感兴趣的是该标志物是动态的，其敏感性取决病情，恶化程度越高，敏感性越高。

TK1在恶化症状出现3个月、6个月甚至9个月前，即出现异常，可提醒临床及时采取措施。

临床试验表明，当特异性为95%时，肿瘤恶性度高时，敏感性＞70%可靠性较大。

5、TK1也是制订临床抗肿瘤治疗方案的有效依据。

世界肿瘤大会和随后出现的大量临床研究结果都表明：肿瘤术后若TK1不高，可不必使用有强毒副作用的化疗药物。

抗癌治疗时若TK1逐渐降低，说明治疗有效，TK1不降甚至升高，意味治疗无效。

综上所述，TK1对肿瘤患者的治疗效果监控和预后评估有重要的参考价值，学术界正逐渐认识，广泛应用TK1，提高临床肿瘤的诊治效率，造福肿瘤患者。

检验科新开展项目之胸苷激酶1（TK1）简介胸苷激酶1（TK1）是肿瘤细胞DNA合成关键酶之一，是S期（DNA合成期）的特殊酶。

它的表达与肿瘤细胞增殖紧密相关，因此，TK1是国际公认的检测肿瘤细胞增殖速率的优选标志物，可实现动态、连续检测和评估。

TK1的临床应用价值体现在：1、动态监控手术、放化疗效果；2、独立的肿瘤评估预后因子；3、更早评估肿瘤复发风险；4、评估各类增殖类疾病恶变风险。

另外TK1在健康体检也有一定的应用价值：1、早期发现体内的恶性增殖状况，具有早期性；2、筛查出进展期癌前病变，预防肿瘤发生，具有广谱性。

建议以下人员重点检测监控TK1：1、有肿瘤家族史人群 2、肿瘤治疗后的康复期患者 3、良性肿瘤者 4、不典型组织增生 5、年龄超过35岁的人群 6、从事特殊行业者：如采矿,石化等
TK1水平以2Pm/L 为标准，检测结果解读如下：
临床中常用的肿瘤标志物，如CEA,AFP,PSA等只能发现部分器官的临床期肿瘤。

增加TK1细胞增殖度检查，能更准确地排查病变部位的癌变风险，是肿瘤标志物不能替代
的指标，在门诊检查中，不仅比肿瘤标志物有更大的排查范围，而且能进一步提高判别肿瘤增殖速度的准确度。

肿瘤标志物是探测人的体内是否已存在癌症，是“完成时态”，而TK1检测的是人的身体目前所处的风险状况，是“进行时态”，PET-CT是检测癌细胞的“代谢”状况，几者不能相互替代，但能相互补充，相互参照，互补信息。

应临床需要，检验科及时开展了TK1的外送检测，样本要求为新鲜空腹静脉血(不含任何抗凝剂)，检测时间为每周一、周四，五个工作日出报告。

胸苷激酶1是恶性肿瘤预后判断的动态标志国内外学术界近十余年来，针对TK1作为肿瘤预后标志物方面作了大量的研究工作，小结如下：1、肿瘤的恶性行为和DNA加速合成密切有关，以满足其异常快速增值的需要。

TK1反映了肿瘤增殖时S期嘧啶补救途径合成的关键酶的活性，是有特殊价值的S期增殖标志物，能用于监测和随访肿瘤患者，当肿瘤恶化时细胞快速增殖，该酶显著升高。

2、TK1升高和肿瘤恶化的关系得到了细胞试验、动物实验和大量临床资料的验证：国内外论文都表明一致的规律：不管什么肿瘤，当血清TK1处于正常状态，意味肿瘤处于稳定期或缓解期，TK1浓度或活性升高，意味肿瘤复发，预后较差，生存期明显短于TK1活性或浓度低者，且差异有统计学意义。

这一结论已为肿瘤学术界所公认，认为有里程碑价值。

35届世界肿瘤大会经专家讨论，建议在肿瘤诊治中，将TK1作为常规检测项目，定期监测。

3、为了进一步探讨TK1在判断肿瘤预后中的价值，不少研究都做了COX比例风险回归模型分析。

本文中引用了多种肿瘤的COX报告结果，这些报告除了TK1外，比较了大量公认的影响肿瘤预后的因素，统计结果表明TK1属于风险率最高的风险率因子。

4、TK1是一个独立的动态的预后标志物。

该标志物和肿瘤类型无关，只反映肿瘤细胞增殖速度和恶化程度。

临床经验表明，TK1主要用于预后评估，令学术界倍感兴趣的是该标志物是动态的，其敏感性取决病情，恶化程度越高，敏感性越高。

TK1在恶化症状出现3个月、6个月甚至9个月前，即出现异常，可提醒临床及时采取措施。

临床试验表明，当特异性为95%时，肿瘤恶性度高时，敏感性＞70%可靠性较大。

5、TK1也是制订临床抗肿瘤治疗方案的有效依据。

世界肿瘤大会和随后出现的大量临床研究结果都表明：肿瘤术后若TK1不高，可不必使用有强毒副作用的化疗药物。

抗癌治疗时若TK1逐渐降低，说明治疗有效，TK1不降甚至升高，意味治疗无效。

综上所述，TK1对肿瘤患者的治疗效果监控和预后评估有重要的参考价值，学术界正逐渐认识，广泛应用TK1，提高临床肿瘤的诊治效率，造福肿瘤患者。

TK1早早期肿瘤风险筛查技术一、什么是TK1TK1早早期肿瘤风险筛查技术是由世界著名的瑞典卡罗琳斯卡医学院TK1研究团队历经二十多年开发研制，而该医学院正是诺贝尔医学奖的评审机构，其科学性和权威性毋容置疑。

TK1的学名叫胸苷激酶1，是DNA合成的关键酶之一，是一个调控细胞合成的特殊酶，其含量与细胞异常增殖紧密相关。

而肿瘤就是一种细胞异常增殖的慢性疾病，是体内的正常细胞在环境因素影响下增生与异常分化形成的癌细胞，癌细胞不断增多就形成了实体瘤，不过这个过程很漫长，往往要通过几年时间才可以达到一定的大小并可以通过CT等检测设备检测出来。

TK1就是在细胞癌变初期就可以检测到这些变化，进而在形成实体瘤之前就进行风险预警。

TK1的检测方式是抽取人体血液进行检测得出相应的TK1值，根据TK1值来评估罹患肿瘤的风险。

二、TK1基础值建立对于健康人而言，要评估肿瘤风险，首先要取得一个TK1的基础值，一般情况下基础值是通过连续三次的TK1检测而获得，每次检测的间隔是10天，取三次的平均值即为TK1的基础值。

以后可以选择每三个月或每半年检测一次，获得的TK1值和基础值进行比对，以评估罹患肿瘤的风险。

对于TK1的检测，有部分情况下会影响到值的准确性：1、有明显的增殖性疾病，如乳腺增生，前列腺增生，脂肪肝等；2、有严重出血外伤；3、女性生理期。

这些都要在检测前说明，并延期进行检测，以确保检测结果的准确性。

得出TK1基础值后，我们就可以对它进行评估，0-2（PM）是正常范围，通常0.5是一个健康人TK1水平的参考平均值。

一般TK1值在1以下的表示细胞异常增殖度非常低，即患癌症的风险极低，无需作医学干预，建议一年复检一次TK1。

TK1值在1~2之间的表示细胞异常增殖度低，罹患癌症的风险较低，平时稍加注意即可，建议半年复检一次TK1。

如果测出的TK1值在2~10之间表示细胞异常增殖增加，在10年内进程为恶性肿瘤的风险是健康人的2倍，建议关注身体的一些病变，每三个月复检一次TK1。

血清胸苷激酶1在中老年人肿瘤免疫监测中的作用血清胸苷激酶1（serum thymidine kinase 1, STK1）是一种脱氧胸腺嘧啶核苷酸酶，它在细胞增殖时起着重要作用。

STK1的水平与肿瘤细胞增殖活性、预后和治疗反应密切相关，因此其在肿瘤诊断和治疗监测中有广泛的应用。

本文主要探讨STK1在中老年人肿瘤免疫监测中的作用。

随着人口老龄化的加剧，中老年人肿瘤发病率逐渐增加，成为一个全球性问题。

肿瘤免疫治疗研究表明，检测免疫治疗前、后的STK1水平与治疗反应密切相关。

免疫治疗通常采用免疫检查点抑制剂（PD1、PD-L1、CTLA-4等）及其联合治疗（如CDK4/6抑制剂、HER2受体拮抗剂等）。

STK1在中老年人肿瘤免疫监测中的作用主要有以下几个方面：1.预测免疫治疗反应：免疫治疗后，STK1水平的变化可以较好地反映患者的治疗反应。

一些研究表明，在PD1抑制剂治疗中，治疗前STK1水平高的患者乐于PD1治疗的反应也更好。

因此，检测STK1水平有助于预测免疫治疗的反应。

2.反映肿瘤进展情况： STK1高水平与肿瘤进展有很大关系，因此对于治疗后STK水平仍高的患者，应及时调整治疗方案。

一些研究也发现，STK1差异较大的患者，其之后的预后也有所不同。

如果STK1水平在治疗后持续上升，将预示肿瘤恶化和患者预后不佳。

因此，定期检测STK1水平有助于监测肿瘤的进展情况。

3.诱导免疫耐受性： STK1还被认为是一种辅助性因子，可能有助于诱导免疫耐受性。

一些研究表明，STK1对T细胞的调节具有重要作用，其低水平可能导致T细胞异常，增加肿瘤的免疫逃逸。

因此，研究STK1的免疫调节作用，可能有助于开发更有效的免疫治疗策略。

综上所述，STK1作为一个新型的肿瘤标志物，已经在中老年人肿瘤免疫监测中展现了重要的作用，可以作为预测免疫治疗反应、反映肿瘤进展情况和诱导免疫耐受性等方面的一个有效指标。

未来，随着STK1的研究持续深入，其在肿瘤诊断和治疗中的应用将会更加广泛。

tk1 分子结构
TK1的全称是胸苷激酶1，是一种存在于人体细胞中的酶，它在细胞DNA合成和细胞增殖过程中起着关键作用。

以下是TK1的分子结构：
TK1由相对分子质量为25×10^3的蛋白质组成，其结构由一个活性中心和两个与底物结合的区域组成。

活性中心位于酶分子的中心位置，包含一个金属离子（通常是镁离子）和一个胸苷分子。

金属离子在催化过程中起重要作用，它能够与底物中的磷酸基团结合，促进底物的活化。

胸苷分子则与底物中的核糖基团结合，帮助稳定底物在活性中心的构象。

与底物结合的两个区域则分别识别和结合底物分子中的磷酸基团和核糖基团。

这些区域由酶分子中的氨基酸残基组成，其空间构象能够与底物分子很好地匹配，从而实现底物的特异性结合。

在TK1的四聚体结构中，四个单体以相反的方向聚在一起，形成一个V形的结构。

每个单体都包含一个活性中心和两个与底物结合的区域。

这种四聚体结构使得TK1能够同时催化四个底物分子的磷酸化反应，从而大大提高了其催化效率。

需要注意的是，TK1的分子结构可能会受到一些因素的影响而发生变化，例如温度、pH 值、抑制剂等。

这些变化可能会影响酶的催化功能和酶自身活性。

因此，了解TK1的分子结构和性质对于研究其生理功能和药物开发具有重要的意义。

细胞质胸苷激酶也称为胸苷激酶1（thymidine kinase 1，简称TK1），它和线粒体胸苷激酶（thymidine kinase2，简称TK2）为同工酶，是胸苷激酶在细胞内存在的两种形式。

胸苷激酶1（TK1）与细胞增殖有密切关系。

胸苷激酶1（TK1）是DNA合成中的关键酶之一，它催化胸苷（Tdr）磷酸化为胸苷一磷酸（TMP），进而形成的胸苷三磷酸（TTP——DNA合成中的4中必须脱氧核苷酸之一），从而参与DNA合成（如图1）。

TK1在细胞增殖DNA合成中的作用（图1：TK1在细胞增殖DNA合成中的作用机理图）TK1水平的升高和DNA的合成成正相关，在细胞周期中，TK1在G1期晚期开始升高，S期达到最高，至G2期开始下降，由于TK1与细胞周期S 期的特殊相关性，又被称为“S期关键酶”，与细胞增殖相关。

研究表明，对于异常增殖类病变（如：恶性组织病变，肿瘤等），由于病变细胞缺失了凋亡调控，DNA合成剧增会导致TK1水平的异常升高，即存在恶性增殖病变患者血清内TK1酶含量会比正常人有2-200倍的升高（图2）。

目前，胸苷激酶1检测被广泛应用于体检及临床中的恶性增殖病变筛查和治疗后的跟踪监测。

TK1水平在正常与异常增殖中的变化（图2：TK1在正常增殖与异常增殖患者血清中的差异）编辑本段研究历史1950s 胸苷激酶1被发现；1980s 胸苷激酶1在世界范围内掀起研究热潮，美国、欧洲、日本均开始胸苷激酶1的相关研究；1986 极富盛名的诺贝尔奖评审委员会所在的瑞典Karolinska医学院在Bernhard Tribukait教授（瑞典Karolinska大学终身教授，流式细胞技术发明者）的倡导下，成立了胸苷激酶1研究组，开始TK1的基础及应用研究；1990s 胸苷激酶1活性检测方法及试剂盒问世，但是终由于操作方法的繁琐和对实体肿瘤灵敏度偏低等问题，在掀起一段热潮后终归沉寂；1996 血清胸苷激酶1浓度免疫化学发光检测方法问世，解决了之前的实体瘤灵敏度偏低问题，同时免疫化学发光法更易操作，无放射污染；2006- 血清胸苷激酶1检测再次掀起了医学临床研究热潮。

胸苷激酶1注册指导原则（实用版）目录1.胸苷激酶 1 概述2.胸苷激酶 1 的注册指导原则3.胸苷激酶 1 的应用和研究进展4.胸苷激酶 1 的检测方法和临床意义5.结语正文一、胸苷激酶 1 概述胸苷激酶 1（Thymidine kinase 1，TK1）是一种在细胞内参与核苷酸代谢的关键酶，主要作用是催化胸苷酸（thymidine）和三磷酸腺苷（ATP）之间的转化，生成胸苷酸三磷酸酯（dTTP），为 DNA 合成提供原料。

在细胞增殖、修复和免疫反应等过程中，TK1 起着重要作用。

二、胸苷激酶 1 的注册指导原则根据我国药品注册管理办法，胸苷激酶 1 作为一款新型生物标志物，其注册指导原则主要包括以下方面：1.结构和功能研究：需要对胸苷激酶 1 的氨基酸序列、基因结构、蛋白结构等进行详细研究，并对其功能进行验证。

2.质量控制：在生产过程中，需要对胸苷激酶 1 的质量进行严格控制，包括纯度、活性、稳定性等方面的检测。

3.临床试验：注册前需要进行临床试验，以评估胸苷激酶 1 在临床应用中的安全性和有效性。

4.应用范围：根据临床试验结果，确定胸苷激酶 1 的应用范围，如用于疾病诊断、病情监测等。

三、胸苷激酶 1 的应用和研究进展近年来，胸苷激酶 1 在临床应用中逐渐受到关注，主要应用于以下几个方面：1.肿瘤诊断：研究表明，胸苷激酶 1 在多种肿瘤细胞中表达升高，可作为肿瘤标志物用于诊断和监测肿瘤病情。

2.免疫疾病：胸苷激酶 1 在免疫细胞的代谢过程中发挥重要作用，因此可用于评估免疫疾病的病情。

3.神经系统疾病：研究发现，胸苷激酶 1 在神经系统疾病患者的脑组织中表达异常，与疾病的发生和发展密切相关。

四、胸苷激酶 1 的检测方法和临床意义目前，检测胸苷激酶 1 的方法有多种，包括酶联免疫吸附试验（ELISA）、化学发光免疫分析法（CLIA）等。

这些方法在临床实验室中得到了广泛应用，有助于医生对患者的病情进行准确评估。

胸苷激酶1(TK1)测定试剂盒（酶联免疫法）使用说明书【产品名称】通用名称：胸苷激酶1（TK1）测定试剂盒（酶联免疫法）【包装规格】48人份/盒，96人份/盒【预期用途】本试剂盒用于定量检测人血清/血浆中胸苷激酶1(TK1)的浓度，不得用于肿瘤的辅助诊断。

胸苷激酶1（简称TK1）是评估细胞增殖的重要标志物，是细胞周期S期依赖酶。

它参与细胞增殖过程中S期DNA合成，与细胞增殖密切相关。

通过对血液中TK1浓度的检测，能提供人体细胞增殖的动态变化信息。

【检验原理】本实验采用双抗体夹心法测定TK1的浓度水平。

用TK1单克隆抗体包被微孔板制成固相抗体。

在包被微孔板中加入含有TK1的校准品/质控品/待测样本、TK1结合抗体及TK1酶结合物，温育后即形成一个抗体/抗原/抗体/酶标二抗的复合物，充分洗涤后加入显色剂显色，一段时间后终止反应，在450nm处测OD.值，OD.值随标本中TK1浓度的增加而升高，根据校准品绘制的校准曲线即可算出标本中TK1的含量。

【主要组成成份】1、TK1包被板：包被TK1单克隆抗体的微孔板。

48孔/96孔板2、TK1校准品1套A-F：来源于人血清，浓度0，1，2，5，10，20pM，可溯源至制造商选定的测量程序。

1×0.5ml3、TK1结合抗体：兔抗人TK1多抗。

1×2.5ml/1×5.0ml4、TK1酶结合物：HRP标记的羊抗兔IgG。

1×5.0ml/2×5.0ml5、TK1质控品：来源于人血清，质控范围为15pM±2.4PM。

1×0.5ml6、显色剂A：主要成分为过氧化脲素。

1×5.0ml7、显色剂B：主要成份为3，3，，5，5，－四甲基联苯胺盐酸盐（TMB·2HCl）。

1×5.0ml8、浓缩洗涤液（25×）：浓缩的磷酸缓冲液，使用前按1：24稀释。

1×20.0ml9、终止液：2mol/L硫酸溶液。

第一部分项目运行意义概述胸苷激酶1简称TK1，是一种国际公认的细胞增殖特异性标志物；它参与DNA补救合成途径,是DNA合成的特殊标志酶。

临床上,可用于监测和评估体细胞的异常增殖速度。

健康人细胞多处于静止状态（非增殖细胞），血清中的TK1酶含量极微，而随着增殖类疾病的发生，尤其是肿瘤、组织异常增生类疾病，细胞发生过度增殖，血清中TK1酶的含量出现显著升高，超过健康人平均水平2倍甚至100倍以上。

所以，通过检测血清中TK1浓度水平的变化，能够敏感地发现细胞增殖异常，动态评估细胞增殖发展趋势，为提前干预治疗高风险癌前病变，遏制肿瘤进程提供重要信息。

在瑞典卡罗琳斯卡大学(诺贝尔医学和生理学奖评审机构)二十多年的研发基础上,华瑞同康生物技术（）与瑞典Karolinska大学TK1研究团队共同研制出高灵敏度的胸苷激酶1（TK1）细胞周期分析试剂盒及CIS系列化学发光数字成像仪，该系统是世界上唯一用于临床检验血清中TK1浓度的产品，其特异性高于95%,对各类增殖性疾病的综合检测灵敏度高于70%。

该系统已在多临床领域得到较为广泛地应用：1、独立的肿瘤预后因子：多国家，多机构的研究表明，TK1是优选的预后评估指标，可作为独立的肿瘤预后因子；2、动态评估手术、放化疗效果：能够对各种实体肿瘤（例如：肺癌，胃癌，结肠癌，直肠癌，食道癌，乳腺癌，宫颈癌，前列腺癌等）以及白血病和淋巴癌患者的治疗效果进行评估，为治疗方案的改善提供参考；3、更早评估肿瘤复发风险：对肿瘤康复期患者进行动态跟踪，较影像学更早提示肿瘤复发或转移风险信号；4、评估各类增殖类疾病恶变风险：处于过度增殖的增殖类疾病是肿瘤形成的第一步。

基于TK1与细胞增殖的密切关系，能够灵敏地通过TK1的浓度变化，发现恶性增殖风险，为肿瘤的癌前干预提供了更有效率，更有价值的信息，适用于无疾病人群的恶性增殖风险筛查。

第二部分项目运行准备一.项目环境1、环境参数温度： 24-25℃；湿度：小于65%；实验用水：（1）双蒸水；（2）去离子水；2、实验室设置要求：（1）项目最小占地约8-9平方米；（2）工作区域可放置两1.5m×0.8m或一3m×1m工作台；（3）控温设备：30立方米左右的独立空间，可选用2匹的挂式空调进行控温,或选用恒温摇床，如下图：二、项目所需设备1、实验用设备2、实验工具及耗材三、实验样本处理要求及保存样本种类：血清采集要求：1、必须使用无任何添加剂的真空采血管；2、取静脉血2ml（室温）；3、建议空腹采血；4、脂血、溶血样本可能造成实验结果的偏差，不建议使用；样本处理：1、采血完成后，室温下静置或37℃水浴至凝固后离心使用；2、离心转速：4000r/min，离心时间：5min；注：室温放置时间不宜超过3h；样本保存：1、离心后的血清如非即时使用，应立即分装，推荐血清分装量100-200μl/管，放置于-20℃保存；2、-20℃保存时间以不超过7天为佳；3、如需长时间保存，建议提高分装量（1.5ml），并放置于-80℃（可保存3年左右）；样本运输：1、样本如需外送检验（本市围或行程小于3小时），建议采血后先放置于2-8℃静置，到检验点后取出离心，处理要求同上；2、样本如需外送检验（外省市），建议离心后分装至分装管中，血清分装量 1.5ml/管，运输介质建议使用保温箱+化学冰+干冰，干冰用量 2公斤/24小时（根据路程耗费时间增量）；样本复融：1、血清使用前需充分振荡混匀；2、冷冻保存的血清样本，需放置于室温完全解冻后使用；3、反复冻融的血清样本严禁使用。