大鼠外侧隔在中央杏仁核情绪升压系统中作用的实验研究

・论　萱・　Ｊ　Ｍｅｄ　Ｒｅｓ，Ｍａｒ　２００８，Ｖｏ１．３７　Ｎｏ．３　醇给予时间或增加乙醇剂量可以出现明显的纤维化　和肝硬化形成尚需进一步研究观察。　本研究采用的模型造模过程与人类饮酒相似，每　日定量的白酒一玉米油一吡唑混合液灌服，保证了血　中的乙醇含量，每日１次的灌服白酒，便于进行药物　的干预研究，因此适用于ＡＬＤ的发病机制及筛选有　效药物的基础研究。本实验乙醇灌胃由专门从事动　物实验的专职人员进行操作，但仍有１／３的大鼠死　亡，主要原因是乙醇灌胃时大鼠容易挣扎、激怒，造成　食管受损或乙醇反流入气管，个别大鼠因一次灌服乙　醇量较大急性乙醇中毒死亡。尢圣富　等将每日乙　醇灌胃量分２次灌胃，认为能避免１次灌胃量太多造　成急性乙醇中毒死亡，但每日２次灌胃造模方法较繁　琐，多次灌胃易引起插管灌胃相关的并发症，并且增　加实验的成本。如何提高模型的形成率，降低病死率　值得我们今后进一步研究。　中医认为酒为湿热之品，味甘、苦、辛，性温，少量　饮之可行气活血，有益健康，过饮之必伤及脾胃肝胆　而引起疾病。《诸病源候论》认为：“乙醇有毒，有复　大热，饮之过多，故毒热气渗溢经络，浸溢脏腑，而生　诸病也。”《内经》亦指出“以酒为浆”可致病。其病因　病机是饮酒过度导致脾胃损伤、湿热内蕴、脾失健运、　气机不畅、气血失和、痰浊内生、气血痰搏结而致病。　其证本虚标实，虚实相兼，以实为主。肝血瘀阻为病　理基础。所以在进行临床辨治时，多数学者　倾向　于在病程早期和中期，以疏肝清热、化痰利湿、活血祛　瘀为主要治则，而在晚期则以益气养肝、补肾活血为　主。由于气血为病贯穿ＡＬＤ的整个病程，因此，益气　行气、活血化瘀等调理气血法则常贯穿治疗的始终。　而单药也多从活血化瘀，清热化痰除湿等药物人手进　行研究。　三七是经典的活血化瘀良药，味甘、微苦，性温，　归肝、胃经，具有善化瘀止血，消肿定痛等功效。近年　来以三七治疗肝炎、肝纤维化及肝硬化等多种肝病，　都取得了较好的疗效。研究发现三七可通过有效改　善肝脏微循环，使肝脏血运增加，改善肝脏缺血缺氧，　增强细胞超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）活力，减轻细胞损　伤；通过抑制肝星状细胞增生及细胞内外Ｉ型胶原生　成来实现抗肝纤维化作用的。本研究发现在ＡＬＤ建　立过程中应用三七以及硫普罗宁进行干预，大鼠肝脏　的脂肪变程度及炎症程度均较模型组明显降低，血清　肝功能ＡＬＴ、ＡＳＴ和肝纤维化指标ＨＡ、ＬＮ的含量均　明显下降，表明三七及硫普罗宁能明显改善乙醇引起　的肝组织的脂肪变和炎症程度，减轻肝组织损伤。　参考文献　１厉有名．第一讲酒精性肝病的分类及其诊断标准若干问题．中华消　化杂志，２００２，２２（１）：３８—３９　２　中华医学会肝病学分会脂肪肝和酒精性肝病学组．酒精性肝病诊　诊疗指南．肝脏，２００６，１１（１）：６６—７０　３朴丽花，金政，李相伍．悦肝胶囊对小鼠酒精性肝损伤的保护作用．　延边大学医学学报，２００４，２７（１）：２２—２５　４　Ｍａｎｎ　ＲＥ。Ｓｍａｒｔ　ＲＧ，Ｇｏｖｏｎｉ　Ｒ．Ｔｈｅ　ｅｐｉｄｅｍｉｏｌｏｇｙ　ｏｆ　ａｌｃｏｈｏｌｉｃ　ｌｉｖｅｒ　ｄｉｓ－　ｅａｓｅ．Ａｌｃｏｈｏｌ　Ｒｅｓ　Ｈｅａｌｔｈ，２００３，２７（３）：２０９—２１９　５陈芝芸，严茂祥，蔡丹莉，等．三七抗酒精性脂肪肝的实验研究．中　华中医药杂志，２００６，２１（１Ｏ）：６１４—６１６　６尢圣富，郑培水，季光．清肝活血方对酒精性肝病大鼠肝脏脂质过　氧化损集体损伤的影响．中西医结合肝病杂志，２００５，１５（４）：２１８—　２２０　７宋育林，曾民德，陆伦根，等．枸杞多糖防治大鼠酒精性肝病的形态　学观察．学研究生学报，２００２，１５（１）：１３—１６　（收稿：２００７—１１—１５）　

大鼠外侧隔在中央杏仁核情绪升压系统中　作用的实验研究　

李耀华　吴建新　周　萍顾蕴辉　摘要　目的本实验在于分析乙酰胆碱一外侧隔（Ａｃｈ—ＳＬ）升压系统与中央杏仁核（ＡＣ）情绪升压环路之间的关系。方　基金项目：云南省教育厅科学研究基金项目（０２ＺＹ１３６）　作者单位｝６７１０００昆明，云南大理学院生理学与病理生理学教研室（李耀华、吴建新、周萍）；１０００８３北京大学医学部生理系（顾蕴辉）　通讯作者：李耀华，电子信箱：ｌ￣ａｏｈｕａ１４６＠ｙａｈｏｏ．ｅｏｍ．ｅｎ　

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维普资讯 http://www.cqvip.com 医学研究杂志２００８年３月　第３７卷第３期　・论　蕾・　法脑内核团微量注射不同的药物，记录血压和心率的变化。结果　（１）促肾上腺素（ＣＲＦ）或Ｐ物质（ｓＰ）注射入双侧ｓＬ可引　起升压反应。Ｌ一谷氨酸钠（Ｇｌｕ）微量注射到ＡＣ的升压反应均被双侧ｓＬ内注入ＣＲＦ或ｓＰ拮抗剂所减弱。（２）阿托品（Ａｔｒｏ）　预先注入双侧外侧僵核（ＨＢ。．）、蓝斑（Ｌｃ）、延髓头端腹外侧区（ＲＶＬ），Ｇｌｕ对ＡＣ的升压反应可被减弱。（３）ＨＢＬ有Ａｃｈ能神经　纤维投射到背侧丘脑后核（ＨＰ）并兴奋ＨＰ，ＨＰ又通过ＲＶＬ、ＬＣ—ＲＶＬ产生升压反应。Ａｔｒｏ预先注入ＨＰ可减弱Ｇｌｕ对ＡＣ的升　压反应。结论用Ｇｌｕ兴奋ｓＬ能依此有效地兴奋ＨＢ　ＬＣ、ＲＶＬ，此系统的各个通路由Ｍ一受体介导，ＳＬ—ＨＢ。．（或ＨＢ。．一ＨＰ）　

一ＬＣ—ＲＶＬ的升压系统参与ＡＣ情绪升压环路。　关键词　乙酰胆碱外侧隔　中央杏仁核升压反应情绪压力　

Ｒｏｌｅ　ｏｆ　Ｌａｔｅｒａｌ　Ｓｅｐｔｕｍ—ＡＣｈ　Ｐｒｅｓｓｏｒ　Ｓｙｓｔｅｍ　ｉｎ　Ｃｅｎｔｒａｌ　Ａｍｙｇｄａｌｏｉｄ　Ｎｕｃｌｅｕｓ—ｅｍｏＵｏｎａｌ　Ｐｒｅｓｓｏｒ　Ｓｙｓｔｅｍ．Ｌｉ　Ｙａｏｈｕａ，Ｇｕ　Ｙｕｎｈｕｉ．Ｄｅｐｅｒｔ—　ｍｅｎｔ　ｏｆ　Ｐｈｙｓｉｏｌｏｇｙ　ａｎｄ　Ｐａｔｈｏｌｏｇｙ，ＤａＬｉ　ｃｏｌｌｅｇｅ，Ｙｕｎｎａｎ　Ｄａｌｉ　６７１０００，Ｃｈｉｎａ　Ａｂｓｔｒａｃｔ　Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ　Ｔｈｅ　ｐｒｅｓｅｎｔ　ｓｔｕｄｙ　ｗａｓ　ｔｏ　ａｎａｌｙｚｅ　ｔｈｅ　ｒｏｌｅ　ｏｆ　ＡＣｈ—ｌａｔｅｒａｌ　ｓｅｐｔｕｍ（ＳＬ）ｐｒｅｓｓｏｒ　ｓｙｓｔｅｍ　ｉｎ　ｔｈｅ　Ｃｅｎｔｒａｌ　ａｍｙｇ・　ｄａｌｏｉｄ　ｎｕｃｌｅｕｓ（ＡＣ）一ｅｍｏｔｉｏｎａｌ　ｐｒｅｓｓｏｒ　ｃｉｒｃｕｉｔ．Ｍｅｔｈｏｄ　Ｉｎｔｅｒｕｒｂａｎ　ｍｉｃｒｏｉｎｊｅｃｔｉｏｎ　ｏｆ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ｄｒｕｇｓ，ｔｈｅｎ　ｂｌｏｏｄ　ｐｒｅｓｓｕｒｅ　ａｎｄ　ｈｅａｒｔ　ｖａｔｅ　ｗｅｒｅ　ｖｅｃｏｒｄｅｄ．Ｒｅｓｕｌｔｓ　（１）ＣＲＦ（ｃｏｒｔｉｃｏｔｒｏｐｉｎ　ｒｅｌｅａｓｉｎｇ　ｆａｃｔｏｒ）ｏｒ　ＳＰ（ｓｕｂｓｔａｎｃｅ　Ｐ）ｍｉｃｒｏｉｎｊｅｃｔｉｏｎ　ｉｎｔｏ　ｔｈｅ　ＳＬ　ｃａｎ　ｉｎｄｕｃｅｄ　ｐｒｅｓｓｏｒ　ｒｅ－　ｓｐｏｎｓｅｓ．Ｔｈｅ　ＡＣ　ｐｒｅｓｓｏｒ　ｒｅｓｐｏｎｓｅｓ　ｔｏ　ｇｌｕｔａｍａｔｅ（Ｇｌｕ）ｃｏｕｌｄ　ｂｅ　ａｔｔｅｎｕａｔｅｄ　ｂｙ　ｐｒｅｉｎｊｅｃｔｉｏｎ　ｏｆ　ＣＲＦ　ａｎｔａｇｏｎｉｓｔ　ｏｒ　ＳＰ　ａｎｔａｇｏｎｉｓｔ　ｉｎｔｏ　ｂｉｌａｔｅｒ－　ａｌ　Ｓ　Ｌ＿（２）ｔｈｅ　ＡＣ　ｐｒｅｓｓｏｒ　ｒｅｓｐｏｎｓｅｓ　ｔｏ　Ｇｌｕ　ｗｅｒｅ　ａｌｓｏ　ｒｅｄｕｃｅｄ　ｂｙ　ｐｒｅｉｎｊｅｃｔｉｏｎ　ｏｆ　ａｔｒｏｐｉｎｅ　ｉｎｔｏ　ｅｉｔｈｅｒ　ｂｉｌａｔｅｒａｌ　ＨＢ　Ｌ，ＬＣ　ｏｒ　ＲＶＬ　ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅ・　ｌｙ，（３）Ｓｉｎｃｅ　ｌａｔｅｒａｌ　ＨＢ（ＨＢＬ）ｐｒｏｊｅｃｔｓ　ｔｏ　ｔｈｅ　ｐｏｓｔｅｒｉｏｒ　ｈｙｐｏｔｈａｌａｍｕｓ（ＨＰ）ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ　ＡＣｈ—ｅｒｇｉｃ　ｎｅｕｒｏｎｓ，ａｎｄ　ｅｘｃｉｔａｔｉｏｎ　ｏｆｔｈｅ　ｌａｔｔｅｒ　ｐｒｏｄｕｃｅｓ　ｐｒｅｓｓｏｒ　ｒｅｓｐｏｎｓｅ　ｖｉａ　ｔｈｅ　ＲＶＬ　ａｎｄ　ＬＣ—ＲＶＬ；ａｔｒｏｐｉｎｅ　ｐｒｅｉｎｊｅｃｔｉｏｎ　ｉｎｔｏ　ｔｈｅ　ＨＰ　ｃｏｕｌｄ　ａｌｓｏ　ｄｅｃｒｅａｓｅ　ｔｈｅ　ＨＢＬ—ａｎｄ　ＡＣ—ｐｒｅｓｓｏｒ　ｒｅｓｐｏｎｓｅ．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ　Ｔｈｅ　ｐｒｅｓｅｎｔ　ｒｅｓｕｌｔｓ　ｉｎｄｉｃａｔｅ　ｔｈａｔ　ｔｈｅ　ＡＣ　ｐｒｏｄｕｃｅ　ｐｒｅｓｓｏｒ　ｒｅｓｐｏｎｓｅｓ　ｉｎｖｏｌｖｅｄ　ｗｉｔｈ　ｔｈｅ　ＳＬ　ｖｉａ　ｔｈｅｉｒ　ＣＲＦ　ａｎｄ　ＳＰ，　ｍｅｃｈａｎｉｓｍ　ｕｎｄｅｒｌｙｉｎｇ　ｐｒｅｓｓｏｒ　ｒｅｓｐｏｎｓｅ　ｏｆ　ＳＬ　ｉｓ　ｉｎｖｏｌｖｅｄ　ｉｎ　ｐｒｅｓｓｏｒ　ｒｅｓｐｏｎｓｅ　ｏｆ　ＡＣ．　Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ　Ａｃｅｔｙｌｃｈｏｌｉｎｅ；Ｌａｔｅｒａｌ　ｓｅｐｔｕｍ；Ｃｅｎｔｒａｌ　ａｍｙｇｄａｌｏｉｄ　ｎｕｃｌｅｕｓ；Ｐｒｅｓｓｏｒ　ｒｅｓｐｏｎｓｅ；Ｅｍｏｔｉｏｎ；Ｓｔｒｅｓｓ　

众所周知，过度紧张常常能引起人体功能紊乱，　长期情绪紧张是神经源性高血压发展的重要因素，但　机制尚未明了。本实验室的一系列研究结果证明，控　制情感和压力的神经升压环路中，ＡＣ是最重要的，　ＡＣ通过ＣＲＦ一或ｓＰ一能神经元与其他的神经核团　有广泛的联系…。本实验室过去的实验也显示ｓＬ，　ＨＢ，ＬＣ，ＲＶＬ组成了另一升压系统，此系统的各个通　路由Ｍ一受体介导，鉴于ｓＬ在整合情绪和自主性反　应中起着很重要的作用Ｃ２］，ＡＣ有纤维投射到ｓＬ，我　们推测ｓＬ—ＨＢ—ＬＣ—ＲＶＬ升压系统可能是ＡＣ一情　绪升压环路的一部分，因此以下的实验设计为：（１）　ＣＲＦ或ｓＰ注射入双侧ｓＬ，或ＣＲＦ或ｓＰ的拮抗剂注　射入双侧ｓＬ，检测Ｇｌｕ对ＡＣ升压反应的影响。（２）　Ａｔｒｏ预先注入双侧的ＨＢ　Ｌ、ＬＣ、ＲＶＬ，检测Ｇｌｕ对兴奋　ＡＣ升压反应的影响。（３）ＨＢ。．有Ａｃｈ能神经纤维投　射到ＨＰ并兴奋ＨＰ，ＨＰ又通过ＲＶＬ、ＬＣ—ＲＶＬ产生　升压反应。ＡＣｈ预先注入ＨＰ可检测对ＨＢＬ一或ＡＣ　

一升压反应的影响。　材料与方法　１．动物处理：实验用体重１７０～３００ｇ雄性Ｗｉｓｔａｒ大鼠，用　乌拉坦（１．５　ｇ／ｋｇ，ｉｐ）麻醉下进行气管插管和动脉插管，并将　动物固定在脑立体定位仪上，用直接法测量右颈总动脉平均　动脉血压，同时用心电图机记录心率变化，用颅骨钻开颅暴露　脑组织并插入微量注射管（微量注射管所用的不锈钢管外径　为０．４ｍｍ，内径为０．２ｍｍ），用氯化筒箭毒（２ｍｇ／ｋｇ，ｉｐ）制　动，调节人工呼吸（７５次／分）的呼吸量，待血压平稳后进行各　项试验。整个实验过程中保持直肠温度在３７℃±０．５℃。详　细的手术措施、所用仪器、脑内注射的方法、脑组织固定、切片　染色等技术同以往实验…。　２．核团定位：前脑的核团按Ｊａｃｏｂｏｗｉｔｚ和Ｐａｌｋｏｖｉｔｓ图谱…　进行定位：ＡＣ的坐标为Ａ４１１０～５３４０１￣ｍ，ＬＲ：４．２ｍｍ，脑表面　下７．０ｍｍ；ＳＬ：Ａ　６８６０～８６２０￣ｍ，ＬＲＯ．６　ｍｍ，脑表面下　４．５ｍｍ；ＨＢ　Ｌ：Ａ３４３０～３７５０Ｉ．Ｌｍ，ＬＲＯ．７ｍｍ，脑表面下４．２　ｍｍ；　ＨＰ：Ａ　３４３０～３７５０￣ｍ，ＬＲ　０．３ｍｍ，脑表面下７．２ｍｍ。后脑核　团的坐标Ｐａｌｋｏｖｉｔｓ和Ｊａｃｏｂ０ｗｉｔｚ图谱定位：ＬＣ：Ｐ　２．８　ｍｍ，　ＬＲ１．３　ｍｍ，小脑表面下５．５ｍｍ；ＲＶＬ：Ｐ　５．０～５．５ｍｍ，　ＬＲ１．９　ｍｍ，小脑表面下７．７ｍｍ。注射管的尖端定位于核团的　上缘，以免损坏核团。　３．脑内微量注射：所用的药品：Ｇｌｕ（Ｓｉｇｍａ产品）ＡＣ每部　位０．３　ｌ，含１１．２　Ｉ．Ｌｇ；ＨＢ　Ｌ每部位０．２ｔｄ，含７．５　Ｉ．Ｌｇ；ＣＲＦ　（Ｓｉｇｍａ产品）每部位０．２　ｌ，含０．７４　Ｉ．Ｌｇ，ｏｔ—Ｈｅｌｉｃａｌ　ＣＲＦ（ｄ　—Ｈ　ＣＲＦ，ＣＲＦ拮抗剂，Ｓｉｇｍａ产品）每部位０．０８　ｇ；［Ｄ—Ｐｒｏ　２，Ｄ—Ｐｈｅ　７，Ｄ—Ｔｒｐ　９］一Ｐ物质（ＤＰＤＰＤＴ，ＳＰ拮抗剂，Ｓｉｇ—　ｍａ产品）每部位含０．２Ｉ．Ｌｇ；阿托品（Ａｔｒｏ，北京市医药公司制　药厂产品）每部位含４．２　ｔＬｇ；对照用０．９％生理盐水，实验　组和对照组注射药量一致，药品均在ｌＯｓ匀速注射完毕。每　一只大鼠以自身为对照，在注射生理盐水（对照组）或阻断剂　（实验组）８—１４ｍｉｎ时检验Ｇｌｕ兴奋ＡＣ引起的血压、心率变　化，每只鼠只用一种阻断剂。　４．组织学定位：实验结束后动物用０．９％的ＮａＣ１　ｌＯＯｍｌ