第二十章 酶免疫技术

酶联免疫分析法生工121 徐娜酶联免疫分析法是目前分析化学领域中的前沿课题，它是一种特殊的试剂分析方法，是在免疫酶技术的基础上发展起来的一种新型的免疫测定技术，特别是在食品和饲料中有毒有害物质的检测应用极为广泛。

酶联免疫分析法是把抗原抗体的免疫反应和酶的高效催化作用原理有机地结合起来的一种检测技术。

该技术的原理主要有三点：第一、抗原或抗体能结合到固相载体的表面仍具有其免役活性；第二、抗体或抗原与酶结合所形成的结合物仍保持免疫活性和酶的活性；第三，结合物与相应的抗原或抗体反应后，结合的酶仍能催化底物生成有色物质，而颜色的深浅可定量抗体或抗原的含量。

酶联免疫法在医药、食品加工业、农牧渔业等领域有着广泛的应用：如乙型肝炎、莱姆病，急性心肌梗死的早期诊断，定量检测内毒素，HIV抗体初筛，SARS 病毒的快速检测；检测食品中的病毒，残留农药，微生物及其其它成分；检测香蕉有关病毒，小麦黄花叶病毒，检测水产品中氯霉素的残留量，禽脑脊髓抗体等。

一、医学临床中的应用医学中，检测各种抗原和抗体，为临床疾病的辅助诊断和早期诊断提供了特异性、敏感性强的试验基础。

1、乙型肝炎、原发性肝癌的血清学检测：用血清学方法检测肝炎病毒的抗原或抗体，一直受到各级医疗卫生机构检验科室的高度重视。

尤其是对乙型肝炎，甲型肝炎，丙型肝炎的血清学检测，更因为试剂盒的推出而得到广泛开展。

上述各种肝炎病毒抗原或抗体的检测方法，绝大部分都是酶联免疫分析法。

2、简化莱姆病的诊断：由于在作出博氏疏螺旋体感染诊断前要进行双重测试，因此莱姆病的测试可能花费很长时间。

采用由关键的疏螺旋体抗原决定簇构成的重组蛋白开发出一种新的酶联免疫测定方法。

该测试比最常用的商业全细胞酶联免疫测定法特异，而敏感性相同，并且在20分钟就会产生结果。

3、急性心肌梗死的早期诊断：急性心肌梗死为一多发病，病情严重。

目前对此病的策略是尽早的确诊并迅速积极的治疗。

约有四分之一或更多的患者，在初诊时心电图并不显示典型心肌梗死心电图异常，无Q波。

第一章概论一、A IgG B IgA C IgM D IgE E IgD1、血清中含量最高的免疫球蛋白是2、再次免疫应答的主要抗体3、唯一能通过胎盘的抗体4、参与粘膜局部免疫的主要抗体是5、抗原刺激诱导的体液免疫应答中最先产生的抗体是6、介导I型超敏反应的是二、T细胞特有的表面标志是A CD8B CD4C TCRD CD2E CD5三、A骨髓B法氏囊C 脾脏 D 胸腺E淋巴结F周围免疫器官G中枢免疫器官H黏膜伴随淋巴组织1、T细胞发育的重要器官是2、T淋巴细胞和B淋巴细胞发生免疫应答的免疫场所3、人体最大的外周免疫器官是4、功能性B细胞分化的唯一免疫场所第二章抗原抗体反应一、抗原抗体结合力中作用最大的是A静电引力 B 范德华引力 C 氢键结合力 D 疏水作用力 E 分子间结合力二、抗原抗体结合力中作用最小的是A静电引力 B 范德华引力C 氢键结合力D 疏水作用力E 分子间结合力三、抗原抗体结合形成复合物的原理主要是蛋白质A亲水胶体转化成疏水胶体B酸氨基数量和结构发生变化C酸氨基数量发生变化D酸氨基结构发生改变E酸氨基种类发生变化四、A前带 B 后带 C 前带或后带 D 等价带1、抗体过量时称为2、只形成可溶性的抗原抗体复合物3、抗原过量时称为五、抗原抗体反应的特异性是指A两者分子功能的相近性 B 两者之间空间结构的相似性C 两者分子的电子云吸引力D两者分子大小的相近性E 两者之间结构的专一性六、下面哪项不属于抗原抗体反应的特点A高度特异性 B 高度的敏感性C 比例性D 可逆性E 共价键结合第三章、免疫原和抗血清的制备一、弗氏完全佐剂的组成包括A液体石蜡、羊毛脂、卡介苗 B 液体石蜡、羊毛脂C 液体石蜡、卡介苗D 羊毛脂、卡介苗E羊毛脂、卡介苗、氢氧化钠二、A反复冻融法 B 研磨法 C 酶处理法 D 超声破碎法 E 表面活性剂处理1、哪项不属于可溶性抗原的制备方法2、制备蛋白质抗原时，破碎组织细胞最常用的方法是三、制备免疫球蛋白重链片段时，用于裂解免疫球蛋白的酶最好选用A木瓜蛋白酶 B 胃蛋白酶C 限制性核酸内切酶D 胰蛋白酶E 胰肽酶四、制备人工抗原时，最常用于偶联半抗原的载体是A牛血清白蛋白B牛甲状腺球球蛋白C 人血清白蛋白D 人甲状腺球蛋白E 兔血清白蛋白五、免疫小鼠采血通常采用的方法是A颈静脉采血法 B 耳颈静脉采血法C 摘除眼球或断尾法D 心脏采血法E颈动脉采血法六、分离亚细胞成分最常用的方法是A凝胶过滤法 B 低速离心法C 超速离心法D 选择性沉淀法E 高速离心法七、颗粒性抗原免疫接种的方法通常采用A皮下注射 B 淋巴结注射C 肌肉注射D 皮内注射E 静脉注射八、配制绵羊红细胞免疫原一般细胞浓度为A103∕ml B 104∕mlC 105∕mlD 106∕mlE 107∕ml九、制备菌体抗原的方法是A 100℃加温2小时B 0.5%甲醛C 75%乙醇D 1%氯化钙E 2％氯仿第四章单克隆抗体与基因工程抗体的制备一、杂交瘤细胞含有A两亲本细胞各一半染色体 B 两亲本细胞全部染色体C 两个染色体D 融合特有基因信息E 亲代某些特性信息二、选择性培养基要选择融合的A脾细胞与瘤细胞 B 瘤细胞和瘤细胞C 脾细胞和脾细胞D 细胞多聚体E 单倍体细胞三、阻断细胞DNA合成的化合物是A次黄嘌呤 B 胸腺嘧啶核苷 C 叶酸D 聚乙二醇E 甲氨蝶呤四、单克隆抗体纯化法目前最有效的方法是A盐析法 B 凝胶过滤 C 离子交换 D 辛酸提取 E 亲和层析法五、人－鼠嵌和抗体是A人IgV区与鼠IgC区连接 B 人IgC区与鼠IgV区连接C 人Ig与鼠Ig重组D 鼠IgV区与人IgV区连接E 以上都是六、A次黄嘌呤 B 胸腺嘧啶核苷 C HGPRT D 甲氨蝶呤 E 叶酸1、参与由糖和氨基酸合成核苷酸的重要辅酶2、杂交之前骨髓瘤细胞必须缺陷3、阻断细胞DNA合成的化合物是第五章凝集反应一、关于凝集反应，说法正确的是A IgM类抗体的作用比IgG类抗体要强B IgM类抗体常出现不完全反应C IgG类抗体不易出现不完全反应D 反应的发生可分为四个阶段E 可进行定量检测二、玻片凝集试验A只能检测抗原不能检测抗体 B 只能检测抗体不能检测抗原C 既能检测抗原又能检测抗体D 为半定量试验E 不能用于ABO血型鉴定三、关于不完全抗体，下列说法正确的是A与抗原结合 B 与抗原结合 C 与抗原结合不出现凝集反应D 常为IgM类抗体E 为多克隆抗体四、关于直接Coombs试验，说法错误的是A检验血清中游离的不完全抗体 B 可定性检测C 可做半定量分析D 可用于新生儿溶血检测E 可用于自身免疫性溶血性贫血的检测五、间接Coombs试验检测何种抗体A结合在红细胞表面的IgG B 游离的IgGC 结合在红细胞表面的IgM D游离的IgM E 以上都不是六、关于SPA说法错误的是A为金黄色葡萄球菌的细胞壁成分 B 能与IgG的Fc段结合C 能与IgG的F（ab,)2段结合D 不能与IgG3结合E 与IgG结合后不影响其活性第六章沉淀反应一、影响絮状沉淀试验的主要因素是A抗原的质量 B 抗体的质量C 抗原抗体的比例D 反应溶液的PHE 抗体特异性强二、可用来进行定量测定的试验是A双向扩散试验 B 单向扩散试验C 免疫电泳D 对流免疫电泳E 抗人球蛋白试验三、双向扩散试验中当抗体含量大时A沉淀线靠近抗原孔B沉淀线靠近抗体孔C 沉淀线位于抗原孔与抗体孔同等距离的位置D 出现多条沉淀线E 不出现沉淀线四、沉淀反应中的钩状效应是因为A PH浓度过高B PH浓度过高低C 抗体过量D 抗原过量E 以上都不是五、鉴定多发性骨髓瘤最常用的免疫电泳技术是A对流免疫电泳 B 火箭免疫电泳C 免疫电泳D 免疫固定电泳E 以上都可以六、下列抗原抗体反应中不属于沉淀反应的是A单向扩散试验 B 免疫电泳C 免疫比浊D 肥达反应E 双向扩散试验七、A对流免疫电泳 B 火箭免疫电泳C 免疫电泳D 免疫固定电泳E 免疫印迹技术1、区带电泳与免疫沉淀反应相结合的技术2、区带电泳与免疫双扩散相结合的技术3、单向免疫扩散与电泳相结合的技术4、双向免疫扩散与电泳相结合的技术第七章放射免疫技术一、标记免疫技术的根本特点是A用放射性核素对免疫反应进行标记B 标记技术与免疫技术的结合C 高灵敏度与高特异性的有机结合D 免疫反应的生物放大作用E 标记抗原与未标记抗原竞争结合限量抗体二、关于IRMA实验原理，下面那一项不正确A IRMA标记抗体，比活度高B IRMA可测定大小分子的抗原C 较RIA，具有更好的特异性和灵敏度D 检测范围较RIA者更宽E 不能用PEG作分离剂三、经典放射免疫分析系统中，下述那一项叙述是错误的A标记抗原和未标记抗原的化学量大于抗体的分子结合容量B 未标记抗原、标记抗原竞争与抗体结合C 待测抗原的含量，可通过剂量-反应曲线查得D 反应结束时，游离标记抗原含量与未标记抗原呈反比E 与抗体结合的标记抗原量不取决于它与抗体间的亲和力大小第八章荧光免疫技术一、荧光效率是A指荧光素产生荧光的强度B 指荧光素将吸收的光能转变为荧光的百分率C 指物质产生荧光的效率D 指特异性荧光和非特异性荧光的强度比E 指荧光素接受激发光后，产生的荧光色调二、主要用于测定各种激素、蛋白质、酶、药物及病毒抗原的技术A荧光偏振免疫免疫技术 B 荧光抗体技术C 时间分辨免疫技术D 底物标记免疫免疫技术E 流式细胞术三、最适合时间分辨荧光免疫测定的荧光物质是A异硫氢酸荧光素 B 四乙基罗丹明C 四甲基异硫氢酸罗丹明D 藻红蛋白E 镧系稀土元素（Eu3＋）四、荧光显微镜观察的注意事项中，不正确的是A染色后标本应即刻镜检B 镜下观察时间不易太长C 油镜检查时，应用无荧光油镜D 在37度是，观察效果更好E 检查在暗视野进行第九章酶免疫技术一、目前ELISA双抗体夹心法是A、酶标记特异性抗体用于抗原的检测B、属于竞争结合测定C、先将待测抗原包被于固相载体上D、标记一种抗体可检测多种抗原E、能用于半抗原物质的检测二、酶免疫技术是根据何种特征分为均相和异相两类技术的A、抗原特性B、抗体特性C、抗原抗体反应后是否需要分离结合和游离酶标记物D、酶的稳定性E、载体特性三、关于ELISA竞争法，下面叙述正确的A、用于检测抗原B、被测物与酶标记物的免疫活性各不相同C、被测物多则标记物被结合的机会少D、待测管正确的颜色比对照管的浅则表示被测物量少E、结合于固相的酶标记抗原量与被测抗原量成正比第十章化学发光免疫分析技术一、化学发光酶免疫测定系统中常用的酶：A辣根过氧化氢 B B－半乳糖苷酶C 碱性磷酸酶D A和C均是E A、B、C均是二、大多数化学发光反应属于哪类反应：A水解反应 B 分解反应C 氧化还原反应D 中和反应E 置换反应三、A吖啶酯类 B 鲁米诺C 三联吡啶钌D HRPE 4－MUP1、化学发光酶免疫测定中常用的发光物是2、直接化学发光标记免疫测定中常用的发光底物是3、电化学发光免疫测定中常用的发光底物是第十二章固相膜免疫测定一、AIDS的确诊实验是A病毒培养 B 直接红细胞凝集实验C ELISAD Western-blotE PCR二、关于固相膜描述正确的是A常用的固相膜有玻璃钎维素膜、尼龙膜、聚氯乙烯膜和硝酸钎维素膜B 固相膜具有多孔性、非共价键高度吸附抗体或抗原等优点，但不宜于漂洗C 固相膜免疫测定的标记物可用酶和各种有色微粒子，其中以胶体金最为常用D 玻璃钎维素膜是最为常用的膜E 固相膜免疫测定与ELISA相类似，特点是均以微孔板作为固相三、膜载体免疫测定的种类不包括A放射免疫沉淀试验 B 酶联免疫斑点试验C ELISAD 免疫层析试验E 免疫渗滤试验第十四章免疫细胞的分离及其表面标志检测技术一、Ficoll液单次密度梯度离心后外周血细胞分布由上至下依次为A单个核细胞、血小板和血浆、粒细胞、红细胞B 血小板和血浆、粒细胞、单个核细胞、红细胞C 血小板和血浆、单个核细胞、粒细胞、红细胞D 血小板和血浆、单个核细胞、红细胞、粒细胞E 血小板和血浆、红细胞、单个核细胞、粒细胞二、分离纯化淋巴细胞亚群的基本原理是A相应细胞体积不同的特点B 相应细胞具有不同的表面标志C 形态不同特点D 相应细胞贴壁生长的特点E 相应细胞具有吞噬性的特三、为B细胞所特有、是鉴定B细胞可靠的指标是A SmIgB FC受体C 补体受体D EB病毒E 小鼠红细胞受体第十五章免疫功能检测技术一、测定人NK细胞活性的靶细胞多用什么细胞A K562细胞株B Y AC-1细胞株C 肝癌7401细胞株D 破伤风类毒素疫苗接种试验E 多价肺炎链球菌菌苗接种试验二、溶血空斑试验用于检测下列何种细胞功能A T细胞B B细胞C 中性细胞D 吞噬细胞E NK细胞第十六章细胞因子与细胞粘附因子的测定一、细胞因子测定可用于A特定疾病的辅助诊断B 评估机体的免疫状态和临床治疗效果及预后C 某些细胞因子可以用作治疗药物D 临床疾病的预防E 上述各种情况二、A IL-1 B EPO C IFN—r D GM—CSF E TNF1、抗病毒作用2、促进粒细胞和巨噬细胞生长的是3、促进红细胞生长4、杀肿瘤作用5、巨噬细胞分泌三、A ELISA B ELISPOTC 抗病毒活性测定法D 细胞因子诱导产物测定法E 流式细胞分析法1、定量测定细胞因子分泌细胞的方法2、判断不同细胞亚群细胞因子和膜分子的表达情况3、血清或血浆中细胞因子或可溶性粘附分子测定方法4、IL－I测定方法5、通过检测细胞病变效应反应含量方法第十八章体液免疫球蛋白测定一、A IgG B IgM C IgA D IgE E IgD1、哪种免疫球蛋白在血清中含量最高2、哪种免疫球蛋白在血清中含量最低3、哪种免疫球蛋白分子量最大4、哪种Ig最易通过血脑屏障5、哪种免疫球蛋白能通过胎盘6、巨球蛋白血症患者血清中哪种免疫球蛋白量增加二、A免疫固定电泳 B 透射比浊法C ELISAD 速率散射比浊法E 单向免疫扩散技术1、目前进行免疫球蛋白定量，最灵敏、快速、精确的方法2、多发性骨髓瘤最佳实验诊断方法3、单克隆丙种球蛋白病时测定免疫球蛋白推荐的方法4、目前实验室测定IgG、IgA、IgM使用较多的方法5、乙肝表面抗体测定常使用的方法6、目前最常用的鉴定M蛋白类型的方法第十九章补体检测及应用一、CH50说法正确的是：A、总补体的蛋白质B、总补体蛋白浓度C、总补体活性D、总补体体积E、单个补体蛋白质二、正常血清中，补体含量最高的是：A C1B C2C C3D C4E C5三、补体结合实验检测系统中血清作56℃30分钟处理是：A、提高血清中抗体的激活状态B、增强血清中抗原抗体结合能力C、破坏补体，以排除标本中补体对结果的影响D、破坏血清中抗羊红细胞成分E、增加补体活性第二十章免疫检验自动化仪器分析一、免疫胶乳比浊法的最大优点是：A、提高免疫浊度测定的特异性B、提高免疫浊度测定的灵敏度C、减少抗原的用量D、减少抗体的用量E、减少伪浊度的形成二、化学发光免疫分析主要用于检测：A、体液中大分子蛋白质B、体液中中等分子蛋白质C、体液中小分子蛋白质或多肽D、淋巴细胞活性分析E、在流动池中进行三、A AMPPD B 吖啶酯类C 鲁米诺D 三联吡啶钌E TPA1、碱性磷酸酶标记的化学发光免疫分析仪常用的发光底物2、辣根过氧化物酶标记的化学发光免疫分析仪常用的发光底物3、电化学发光免疫测定常用的电子供体是第二十二章感染性疾病与感染免疫检测一、肥达反应的凝集效价阳性的判断标准是A≥1：20 B ≥1：40C ≥1：80D ≥1：160E ≥1：320二、下列不属于感染性疾病的是A败血症 B 白血病C 胆囊炎D SARSE 艾滋病三、感染性疾病出现最早,消失快可作为感染早期指标的免疫球蛋白是A IgMB IgGc IgA D IgEE 以上都是第二十三章超敏反应性疾病及免疫学检测一、参与Ⅰ型超敏反应的主要抗体是A IgAB IgGC IgMD IgD D IgE二、A单核细胞 B 淋巴细胞C 肥大细胞D 中性粒细胞E 嗜碱性粒细胞F 嗜酸性粒细胞1、在Ⅲ型超敏反应中浸润的细胞主要是2、IgE型变态反应时，数量增多的是三、A类风湿关节炎 B 强直性脊柱炎C 新生儿溶血症D 血清过敏性休克E 接触性皮炎1、属于Ⅰ型超敏反应的疾病2、属于Ⅱ型超敏反应的疾病3、属于Ⅲ型超敏反应的疾病4、属于Ⅳ型超敏反应的疾病第二十四章自身免疫性疾病及其免疫检测一、检查自身抗体的主要方法A RIAB ELISAC 间接免疫荧光法D 沉淀反应E 化学发光分析法二、可作为SLE特异性标志的自身抗体A抗ssDNA抗体和ANA、AnuAB 抗dsDNA抗体和ANAC 抗smDNA抗体和dsDNA、AnuAD AnuA和ANAE 抗dsDNA抗体和抗RNP抗体三、那些类风湿性关节炎的特征是错误的A关节病变为主的慢性AIDB 多发于青壮年，女性多于男性C 血清中可检出RFD 血清中IgG、IgM、IgA下降E CCP阳性的患者可能表现为AKA阳性第二十六章免疫缺陷性疾病及其免疫检验一、遗传性血管神经性水肿为何种缺陷A CIqB C2C C3D C1抑制剂E C4二、HIV确诊试验为A ELISA测HIV抗体B 免疫印迹法测HIV抗体C 血凝试验测HIV抗体D 胶体金免疫层析法测HIV抗体E 放射免疫法测HIV抗体第二十七章肿瘤免疫与免疫学检验一、在机体抗肿瘤效应中起关键作用的是A CD4+T细胞B CD8+T细胞C γδ+T细胞D 巨噬细胞E 抗体依赖的细胞介导的细胞毒效应二、下列关于CEA的叙述，哪项是不正确的A是一种胚胎性抗原，属糖蛋白B 是一种广谱肿瘤标志物C 正常人血清含量是＜5ug/LD 对于消化道肿瘤的诊断特异性较高E 属肿瘤特异性抗原。

《免疫学检验》课程教学大纲课程编号：课程名称：免疫学检验课程英文名称：Immunological Examination课程类别：必修课课程学时数：38学时（理论：78学时；实验：30学时）总学分：6适用专业：医学检验专业本、专科生一、课程的性质、地位与任务《免疫学检验》是研究免疫学技术及其在医学领域中应用的一门学科。

它重点阐述免疫学技术的原理、类型、技术要点、临床应用及其方法学评价。

通过该课程的学习，让学生能熟练掌握常用的免疫学检验技术，临床免疫相关疾病的免疫学特征，并能针对不同的临床病例开展相关免疫学项目的诊断，并能对诊断结果进行合理的临床解释和分析。

由于免疫学是当今生命科学中最前沿的学科之一，新知识、新理论、新技术层出不穷。

因而，在以上所提要求的基础上，还要求学生了解免疫学的新知识、新理论及新技术，以使学生既能适应•般临床免疫检验工作，又要有一定的创新工作的能力教材使用全国高等医药院校教材“免疫学检验”（吕世静主编）。

理论课讲授方式应抓住最基本内容，突出重点，讲清难点，并根据学生的接受能力与教学时数可适当地介绍反应本学科的有关进展，或已被公认并在本学科有广泛影响的重点学派观点，并给以公正的评价。

实验课可根据教学经费和实验条件，尽町能多地增加学生动手、动脑的机会。

免疫学教学内容分为重点内容（重点掌握），熟悉内容和了解内容。

重点掌握是指学生必须掌握的有关知识，同时会联系实际加以灵活运用。

熟悉内容要求学生对其内容清楚明确。

了解内容要求学生有一般性认识，供有余力的学生深入学习参考。

二、课程的基本要求（-）思想教育目标1.树立一切为病人服务的思想，热爱医学检验专业，具有良好的职业道德；2.具有认真细致、严谨求实的科学态度和团结协作与人共事的工作作风；3.具有创新意识和创业精神，有自学能力和创造性的开展各项工作的能力。

（二）理论知识目标1.掌据免疫学检验技术的原理、类型、技术要点、临床应用及其方法学评价；2.熟悉免疫学检验技术常用分析仪的构造、性能与检测原理，掌据仪器正常操作、使用、维护保养，使仪器处于良好的工作状态；3.了解经典传检验方法和现代检验技术各自特征，与时俱进，不断学习新理论、新知识，了解国内检验的最新进展。

酶免疫技术（一）单项选择题（A型题）1、HRP的活性基团是A．糖蛋白B．亚铁血红素C．白蛋白D．球蛋白E．色氨酸2、表示HRP纯度（RZ）的是A．入403nm/入275nm B．入420nm/入275nm C．入403nm/入290nmD．入275nm/入403nm E．入290nm/入275nm3、HRP（用于标记）的RZ值应大于A．3.0 B．3.1 C．3.2D．3.3 E．3.44、β-Gal的常用底物是A．OPD B．TMB C．5-ASAD．ABTS E．4MUG5、下列酶-底物-颜色反应组合中，正确的是A．HRP—OPD—蓝色B．HRP—TMB—红色C．AP—P—NPP—黄色D．HRP—P—NPP—蓝色E．AP—TMB—蓝色6、AMIT测定可以测定A．大分子抗原B．小分子抗原或半抗原C．补体D．PcAb E．McAb7、应用最广泛的均相EIA是A．CEDIA B．SPEIA C．AMITD．ELISA E．IFA8、关于酶免疫技术的特噗，正确的是A．酶标记物催化抗原反应，使其结果放大，提高了检测的灵敏度B．酶活性易受理化因素的影响，酶标记物稳定性差C．底物以酶催化后的成色，使酶标主免疫反应结果得以放大D．选择高度质量的标记用酶是建立酶免疫技术最重要的前提E．酶免疫技术检测方法较为繁琐9、关于固相化抗体的制备，正确是的A．抗体包被固相载体后，再用小牛血清蛋白包被一次为了稳寄存载体对抗体的吸附B．化学偶联包被抗体，可有效提高包被抗体的结合量．均一性和牢固程度C．为提高抗体的包被量，包被液的浓度应较高D．吸附法包被抗体时，选用偏酸性的缓冲液，可提高包被抗体的稳定性E．包被抗体时，温度越高越有利于提高包被抗体的稳定性10、关于载体的选择，正确的是A．醋酸纤维膜吸附蛋白的能力强于塑料板，但对微量样品的吸附不完全B．高分子微颗粒载体含有的基团易与抗体蛋白形成化学偶联，且结合容量大C．塑料制品吸附蛋白分子的稳定性和均一性好D．固相微颗粒因体积小，不易与磁性材料组合使用E．膜载体吸附抗体蛋白一般是采用化学偶联法11、酶免疫技术和于样品中抗原或抗体的定量测定是基于A．酶标记物参与免疫反应B．固相化技术的应用，使结合和游离的酶标记物能有效地分离C．含酶标记的的免疫复合物中酶可催化底物成色，其颜色的深玫与待测物含量相关D．酶催化免疫反应，复合物中酶的活性与样品测定值呈正比E．酶催化免疫反应，复合物中酶的活性与样品测定值呈反比12、关于HRP，描述正确的是A．HRP由具酶活性的蛋白主酶和亚铁血经素辅基构成B．测定HRP的RZ值，可判断酶活性的高低C．HRP对酶催化反尖中的受氢体专一性要求不高D．酶变性后，其RZ值不变E．邻苯二氨底物液被HRP催化显蓝色，其最大吸收波长为492nm13、均相酶免疫测定的基本特征是A．以应平衡后，抗原抗体复合物中酶活性人发生变化B．酶标抗原与抗体在固相介质表面形成复合物后，作用于底物成分C．不用分离B．F即可确定待测物质的含量，表明其反应不易受内源性酶的干扰D．反应属于非竞争结合，测定的灵敏度较高E．测定方法较为复杂，且不易用于自动化检测14、司于均相酶免疫测定的方法是A．酶联免疫化学光测定B．dot-ELISA C．双抗体夹心法ELISAD．酶增强免疫测定技术E．竞争法ELISA15、反应结束时，阴性以照管的呈色最强，此情况常见于A．双抗体夹心法ELISAB．竞争法ELISA C．间接法ELISA D．捕获法ELISA E．双抗原夹心法ELISA16、免疫渗滤试验衍生于A．RIA B．dot-ELISA C．免疫层析试验D．免疫印迹试验E．免疫扩散试验17、双位点DLISA中，造成抗原测定值低于实际含量的常见原因是A．固相抗过多B．反应时间不够C．标记抗体过多D．待测物过浓E．洗涤不彻底18、间接法ELISA中，形成的免疫复合物是A．固相抗原-抗体-酶标二抗B．固相抗体-抗原-酶标抗体C．固相二抗-IgM-抗原-酶标抗体D．固相抗体-酶标抗原固相二抗-抗体-酶标抗原19、下述酶免疫组织化学技术中，敏感性最高的方法是A．直接染色法B．间接染色法C．酶桥法D．过氧化物酶-抗过氧化物酶法E．亲和素-生物素-过氧化物酶技术20、酶桥染色法中的桥抗体是指A．免疫反应系统中的特异性抗体B．显色系统中的抗酶抗体C．第二抗体（抗抗体）D．第一抗体E．第三抗体（抗酶抗体）21、酶免疫组织化学技术中，常作的酶是A．胰蛋白酶，葡萄糖氧化酶B．辣根过氧化物酶，碱性磷酸C．胃蛋白酶，蛋白酶K D．碱性磷酸酶，胃蛋白酶E．葡萄糖氧化酶，蛋白酶K22、下列属于非标记免疫技术的是A．荧光标记免疫技术B．酶标免疫技术C．放射性核素标记免疫技术D．发光免疫技术E．免疫电泳技术23、制备ABC复合物时，亲和素的浓度不能高于A．10μg/mlB．20μg/mlC．30μg/mlD．35μg/mlE．40μg/ml 24、制备ABC复合物时，HRP-B的浓度不能高于A．2μg/mlB．4μg/mlC．6μg/mlD．8μg/mlE．12μg/ml25、PAP复合物中的酶是A．胶原酶B．胃蛋白酶C．葡萄糖氧化酶D．碱性磷酸酶E．辣根过氧化物酶26、免疫组化技术的优点不包括A．高特异性B．高敏感性C．形态学的直观性D．精确定量分析E．能对抗原表达情况进行分析27、与其他标记技术相比，免疫组化技术最大的优点是A．高特异性B．高敏感性C．形态学的直观性D．重复性好E．精确度高28、ABC技术由美籍华人Hsu于哪一年建立，已广泛应用于免疫学检测技术A．1961年B．1975年C．1981年D．1985年E．1990年29、PAP技术中酶的底物为A．TMBB．DABC．PNPD．TMBSE．OPD30、免疫组化技术不包括A．酶免疫组化B．酶免疫印迹C．荧光抗体染色D．免疫金细胞染色E．免疫电镜技术31、用于标记的HRP的RZ值应大于A．2.4B．3.0C．1.5D．3.5E．5.032、RZ表示A．酶活性B．催化效率C．标记率D．酶纯度E．效价33、HRP与底物TMB反应后的测定波长为A．278nmB．450nmC．403nmD．495nmE．492nm34、HRP与底物OPD反应后的测定波长为A．278nmB．450nmC．403nmD．495nmE．492nm35、HRP与TMB反应后，加H2SO4终止反应前呈A．蓝色B．橙黄色C．棕黄色D．黄色E．紫色36、每个亲和素能结合生物素分子的数目是A．4B．2C．1D．3E．837、生物素分子中与亲和素结合的部位是A．噻吩环B．咪唑酮环C．苯环D．羧基E．—NH—38、ELISA双抗体夹心法( )A．将酶标记特异抗体用于检测抗原B．先将待测抗原包被于固相载体C．标记一种抗体可检测多种抗原D．能用于半抗原的测定E．将酶标记抗抗体用于抗原检测39、HRP(用于标记)的RZ值应大于( )A．3.0B．3.1C．3.2D．3.3E．3.440、HRP的供氢体是( )A．TMBB．H OC．小分子醇过氧化物D．尿素过氧化物E．以上都不是41、关于ELISA的底物OPD的特点哪一条不正确( )A．具有致癌性B．灵敏度高C．比色方便D．配成应用液后稳定性好E．与酶反应后显橙黄色42、关于HRP，描述正确的是( )A．HRP由具酶活性的蛋白主酶和亚铁血红素辅基构成B．测定HRP的RZ值，可判断酶活性的高低C．HRP对酶催化反应中的受氢体专一性要求不高D．酶变性后，其RZ值不变E．邻苯二氨底物液被HRP催化显蓝色，其最大吸收波长为492nm44、HRP的活性基团是( )A．糖蛋白B．白蛋白C．球蛋白D．亚铁血红素E．色氨酸45、间接法ELISA中，形成的免疫复合物是( )A．固相抗体-抗原-酶标抗体B．固相二抗-IgM-抗原-酶标抗体C．固相抗体-酶标抗原D．固相二抗-抗体-酶标抗原E．固相抗原-抗体-酶标二抗46、制作ELISA载体材料最常用的的物质是( )A．聚氯乙烯B．聚苯乙烯C．硝酸纤维素膜D．尼龙膜E．磁性微粒47、用ELISA双抗体夹心法检测血清中甲胎蛋白(AFP)，应选择的固相包被物是( )A．已知AFPB．酶标记AFPC．抗AFP抗体D．酶标记抗AFP抗体E．待检血清48、ELISA中最常用的酶是( )A．葡萄糖氧化酶和辣根过氧化物酶B．β-半乳糖苷酶和辣根过氧化物酶C．葡萄糖氧化酶和碱性磷酸酶D．脲酶和碱性磷酸酶E．辣根过氧化物酶和碱性磷酸酶49、关于ELISA的固相载体论述有误的是( )A．最常用的是聚苯乙烯微量反应板B．每一批号的聚苯乙烯在使用前需检查其性能C．聚氯乙烯对蛋白质的吸附性能比聚苯乙烯低D．阳性和阴性标本测定结果差别最大者是最适用载体E．微孔滤膜也可作固相载体50、最常用于IgM测定的ELISA方法是( )A．双抗体夹心法B．间接法C．竞争法D．捕获法E．dot-ELISA法51、表示HRP纯度(RZ)的是( )A．λ275nm/λ403nmB．λ403nm/λ275nmC．λ290nm/λ275nmD．λ420nm/λ275nmE．λ403nm/λ290nm52、关于载体的选择，正确的是( )A．醋酸纤维膜吸附蛋白的能力强于塑料板，但对微量样品的吸附不完全B．高分子微颗粒载体含有的基团易与抗体蛋白形成化学偶联，且结合容量大C．塑料制品吸附蛋白分子的稳定性和均一性好D．固相微颗粒因体积小，不易与磁性材料组合使用E．膜载体吸附抗体蛋白一般是采用化学偶联法53、ELISA间接法通常用来检测( )A．抗体B．抗原C．免疫复合物D．抗抗体E．半抗原54、均相酶免疫测定的优点不包括( )A．多用于小分子激素和半抗原的测定B．勿需分离游离的酶标抗原C．易于自动化分析D．不易受样品中非特异的内源酶的干扰E．灵敏度可达10～9mol/L55、酶增强免疫测定技术(EMIT)是一种( )A．固相酶免疫测定技术B．液相酶免疫测定技术C．均相酶免疫技术D．酶免疫组织化学技术E．酶免疫测定与电泳相结合的技术56、酶桥染色法中的桥抗体是指( )A．免疫反应系统中的特异性抗体B．显色系统中的抗酶抗体C．第一抗体D．第二抗体(抗抗体E．第三抗体(抗酶抗体)57、ELISA中用于某种特异抗体的亚型测定常采用的方法是( )A．双抗体夹心法B．捕获法C．竞争法D．间接法E．双抗原夹心法58、与双抗体夹心法相比，ELISA间接法的主要优点是( )A．有较大的放大作用B．减少了操作步骤C．减少了冲洗次数D．可以用一种酶标抗体检测各种与抗原相应的抗体E．缩短反应时间59、关于ELISA竞争法正确的是( )A．用于检测抗原B．被检测物与酶标记物的免疫活性各不相同C．被测物多则标记物被结合的机会少D．待测管的颜色比参照管的淡表示被测物量少E．只用于检测抗体60、斑点ELISA与常规ELISA比较不同之处在于( )A．二者实验原理不同B．二者所用固相载体不同C．二者所用酶不同D．二者所用酶标抗体不同E．以上都不对61、ELASA板包被后，最常用的封闭物质是( )A．人白蛋白B．人球蛋白C．牛血清白蛋白D．牛血清球蛋白E．鼠白蛋白62、免疫渗滤试验衍生于( )A．免疫扩散试验B．免疫层析试验C．免疫印迹试验D．dot-ELISAE．RIA63、目前国内ELISA常用的酶是A.HRPB.APC.β-GalD.OPDE.TMB64、双抗体夹心ELISA可用于检测A.CEAB.胰岛素C.吗啡D.ANAE.RF65、何种ELISA方法其酶标二抗具有通用特性A.双抗体夹心B.一步法C.捕获法D.竞争法E.间接法66、间接ELISA可用于检测A.AFPB.胰岛素C.HIV抗体D.吗啡E.HBsAg67、酶免疫印迹所用的固相材料为A.NC膜B.聚苯乙烯C.磁性颗粒D.尼龙膜E.凝胶68、捕获法测定病原体抗体的类别是A.IgMB.IgGC.IgAD.IgDE.IgE69、以碳酸盐作为包被缓冲液，最佳pH为A.7.2B.7.4C.7.0D.8.6E.9.670、目前通用标记HRP的试验方法为A.戊二醛交联B.过碘酸钠氧化C.琥珀酸酐法D.混合酸酐法E.碳化二亚胺法71、生物素分子中可进行修饰，形成各种活化生物素的基因是A.Ⅰ环B.Ⅱ环C.羧基D.羟基E.酮基72、链霉亲和素的活性单位是以结合多少生物素所需的量来表示A.1μgB.2μgC.3μgD.4μgE.5μg73、免疫组化技术的关键步骤是A.标本处理B.抗体的处理与保存C.免疫染色D.设立对照试验E.结果判断74、PAP复合物中的酶是A.胶原酶B.胃蛋白酶C.葡萄糖氧化酶D.碱性磷酸酶E.辣根过氧化物酶75、组化染色前，应对标本进行固定，其最主要的目的是A.保存组织细胞的抗原性B.防止细胞脱落C.防止细胞自溶D.终止胞内酶的活性E.使细胞内蛋白质凝固76、免疫组化法吸收试验是用过量已知抗原与抗体充分反应，理想的温度是A.4℃B.25℃C.56℃D.37℃E.50℃77、下列不是激光光源特征的是A.单色性强B.波长范围较宽C.亮度高D.相干性好E.方向性强78、免疫组化技术基质的来源，错误的是A.活体组织B.血清C.病毒D.培养细胞E.细菌79、微孔板包被后，加入高浓度蛋白封闭空白位点，这一过程称为A．包被B．封闭C．本底D．钩状效应E．基质效应80、与假阴性测定结果密切相关的是A．包被B．封闭C．本底D．钩状效应E．基质效应81、未加入待测物质，试验结束后测定的OD值称为A．包被B．封闭C．本底D．钩状效应E．基质效应82、标记蛋白质氨基的活化生物素为A．N-羧基丁二酰亚胺酯（BNHS）B．生物素酰肼（BHZ）C．肼化生物素（BCHZ）D．光敏生物素E．生物胞素（MPB）83、标记核酸的活化生物素为A．N-羧基丁二酰亚胺酯（BNHS）B．生物素酰肼（BHZ）C．肼化生物素（BCHZ）D．光敏生物素E．生物胞素（MPB）84、标记蛋白质醛基的活化生物素为A．N-羧基丁二酰亚胺酯（BNHS）B．生物素酰肼（BHZ）C．肼化生物素（BCHZ）D．光敏生物素E．生物胞素（MPB）85、在PAP技术中，起“桥联”作用的成分是A．Ab1B．Ab2C．anti-HRPD．HRPE．anti-AP86、在PAP技术中，与特异性抗体（Ab1）具有同种型抗原表位的成分是A．Ab1B．Ab2C．anti-HRPD．HRPE．anti-AP87、在PAP技术中，能特异性识别待检抗原的成分是A．Ab1B．Ab2C．anti-HRPD．HRPE．anti-AP88、BAS在ELISA技术中应用最广泛的反应模式是A．BABB．ABCC．BRABD．BAE．LAB89、在ABC- ELISA技术中，亲和素与生物素化酶的比例关系是A．1︰4B．1︰2C．2︰1D．4︰1E．1︰1三、名词解释1．酶免疫技术：是指利用酶的高效催化和放大作用与特异性免疫反应结合而建立的一种标记免疫技术。