骨髓间充质干细胞促进大鼠小体积肝移植后肝再生的实验研究

第14卷 第3期2023年5月Vol. 14 No.3May 2023器官移植Organ Transplantation ·论著·间充质干细胞来源的细胞外囊泡对放射性肝损伤的保护作用及其机制研究陈池 萧家麒 隋昕 张英才 【摘要】 目的 探讨间充质干细胞来源的细胞外囊泡（MSC-EV ）对照射诱导的小鼠放射性肝损伤和肝细胞系损伤的保护作用及相关机制。

方法 分别将C57BL/6小鼠随机分为空白组、造模组和MSC-EV 治疗组（治疗组），每组9只；将AML12细胞随机分为对照组、照射组和MSC-EV 干预组（干预组）。

分别通过一次性 15 Gy 和6 Gy X 线照射建立动物和细胞放射性损伤模型，照射后48 h 取小鼠的肝组织与血清进行相关实验，照射后15 h 对细胞进行相关检测。

检测血清丙氨酸转氨酶（ALT ）、天冬氨酸转氨酶（AST ）水平，肝组织和细胞丙二醛（MDA ）含量，实时荧光定量逆转录聚合酶链反应（RT-qPCR ）检测白细胞介素（IL ）-1β、IL-6、转化生长因子（TGF ）-β、CXC 趋化因子配体（CXCL ）10 信使RNA （mRNA ）相对表达量，肝组织苏木素-伊红（HE ）染色进行肝组织病理损伤评分，脱氧核糖核酸末端转移酶介导的dUTP 缺口末端标记（TUNEL ）染色法、碘化丙啶（PI ）染色法分别检测肝组织、细胞凋亡情况，蛋白质印迹法测定谷胱甘肽过氧化酶（GPX ）4、铁死亡抑制蛋白（FSP ）1的蛋白表达情况，二氢乙啶（DHE ）染色检测活性氧簇（ROS ）产生水平，并检测线粒体通透性转换孔（mPTP ）荧光强度。

结果 与空白组比较，造模组小鼠血清AST 、ALT 水平均增高，小鼠肝组织IL-1β、TGF-β和CXCL10 mRNA 相对表达量均增加，MDA 含量增加，肝损伤评分升高，细胞凋亡率增加，细胞内ROS 水平升高，小鼠肝组织GPX4、FSP1蛋白相对表达量下降，差异均有统计学意义（均为P <0.05）；与造模组比较，治疗组小鼠血清AST 、ALT 水平均降低，小鼠肝组织IL-1β、TGF-β和CXCL10 mRNA 相对表达量均下降，MDA 含量减少，肝损伤评分降低，细胞凋亡率下降，细胞内ROS 水平降低，小鼠肝组织GPX4、FSP1蛋白相对表达量增加，差异均有统计学意义（均为P <0.05）。

探讨骨髓间充质干细胞移植在肝硬化治疗中的应用分析摘要】目的：研究探讨骨髓间充质干细胞移植在肝硬化临床治疗中的应用。

方法：选取我院2012 年2 月至2013年3 月收治的68 例肝硬化患者的临床资料，将其按照随机分配的方法分为治疗组和对照组分别34 例，手术后分析对比两组患者的手术治疗效果与各项指标情况。

结果：治疗组患者在手术后，总胆红素、血浆白蛋白以及凝血酶原时间与对照组相比具有明显差异，P＜0.05，具有统计学意义。

治疗组患者在手术后，体力改善、腹胀改善、是与改善方面，治疗组明显优于对照组，对比P＜0.05，具有统计学意义。

结论：采用自体内骨髓源性干细胞移植手术治疗肝硬化对于患者的肝功能以及主观感受有一定程度的改善效果。

【关键词】骨髓间充质；肝硬化；干细胞移植；应用分析间充质干细胞（mesenchymal stem cells,MSC）是干细胞家族的重要成员，来源于发育早期的中胚层和外胚层。

间充质干细胞最初在骨髓中发现，因其具有多向分化潜能、造血支持和促进干细胞植入、免疫调控和自我复制等特点而日益受到人们的关注。

间充质干细胞临床应用于解决多种血液系统疾病，心血管疾病，肝硬化，神经系统疾病，膝关节半月板部分切除损伤修复，自身免疫性疾病等方面取得了重大突破，挽救了更多病患的生命。

此外，间充质干细胞在神经系统修复及更多方面具有长远的发展前景。

本次研究探讨采用自体内骨髓源性干细胞移植手术治疗肝硬化的临床治疗效果，有一定进展，现报告如下。

1 资料与方法1.1 临床资料选取我院2012 年2 月至2013 年3 月收治的68 例肝硬化患者的临床资料，将其按照随机分配的方法分为治疗组和对照组分别34例，手术后分析对比两组患者的手术治疗效果与各项指标情况。

两组患者各临床资料如年龄、性别、病程等各方面均无显著差异性（P＞ 0.05），两组患者均符合疾病纳入标准，各临床资料对比无显著差异性（P>0.05），可以进行组间比较。

移植骨髓间充质干细胞肝癌大鼠细胞凋亡及炎症因子的动态变化张清琴;寇小格;崔艳慧;王荦楠;靳彩玲;陈美玲;李伟伟【摘要】背景：骨髓间充质干细胞移植后对肝癌细胞凋亡及炎症因子的影响，尚没有详细的报道。

<br> 目的：观察骨髓间充质干细胞移植后大鼠血清炎症因子水平及肝癌细胞凋亡情况。

<br> 方法：选取60只健康SD大鼠随机分为正常组、对照组及移植组，每组20只。

对照组及移植组大鼠喂食普通饲料和二乙基亚硝胺溶液，以诱导大鼠肝癌模型，造模后移植组经尾静脉注射骨髓间充质干细胞。

移植2周后，采用ELISA检测血清CXCL5、白细胞介素8、白细胞介素6水平，RT-PCR检测肝组织HNF1αmRNA表达，免疫组化法检测肝组织Bcl-2、Bax表达，TUNEL技术检测肝癌细胞凋亡指数。

<br> 结果与结论：①对照组血清CXCL5、白细胞介素8、白细胞介素6水平明显高于正常组(P<0.05)，移植组CXCL5、白细胞介素8、白细胞介素6水平较对照组明显下降(P<0.05)，与正常组接近(P>0.05)；②对照组肝组织HNF1α表达显著低于正常组(P<0.05)，移植组HNF1α表达又明显上调，与对照组比较，差异有显著性意义(P<0.05)；③移植组肝组织Bcl-2表达较对照组明显下调，而Bax表达较对照组明显上调(P<0.05)；④与对照组比较，移植组肝癌细胞凋亡指数明显上升(P<0.05)；⑤结果表明，骨髓间充质干细胞移植有助于减少肝癌大鼠血清炎症水平、促进肝癌细胞凋亡，有利于肝细胞分化及再生。

%BACKGROUND:Bone marrow mesenchymal stem cel transplantation has not been thoroughly reported on its effects on apoptosis in hepatoma carcinoma cel s and inflammatory factor level. <br> OBJECTIVE:To investigate the effect of rat bone marrow mesenchymalstem cel s on dynamic change of inflammatory factors and cel apoptosisduring hepatocarcinogenesis. <br> METHODS:Sixty healthy Sprague-Dawley rats were divided randomly into healthy group (n=30), control group (n=30) and transplantation group (n=30). Healthy group was given ordinary feed and normal water, while other groups were given diethylnitrosamine solution in drinking water to induce liver cancer models. Then, rats in the transplantation group were subjected to bone marrow mesenchymal stem cel transplantation via the tail vein. Two weeks after cel transplantation, CXCL5, interleukin-8 and interleukin-6 levels were tested by ELISA, mRNA level of hepatocyte nuclear factor 1αdet ected by RT-PCR, expression of Bcl-2 and Bax in liver tissue measured by immunohistochemical method, and liver cancer cel apoptosis index detected by TUNEL technique. <br> RESULTS AND CONCLUSION:After modeling, the expressions of CXCL5, interleukin-8 and interleukin-6 in the control group were significantly higher than those in the healthy group (P<0.05), while these indexes were reduced significantly after bone marrow mesenchymal stem cel transplantation (P<0.05) and close to the normal levels (P>0.05). Bone marrow mesenchymal stem cel transplantation significantly up-regulated the mRNA level of hepatocyte nuclear factor1αin the liver tissue that was decreased obviously after modeling (P<0.05). In addition, the expression of Bcl-2 was reduced, while the expression of Bax and the apoptosis index increased significantly in the transplantation group compared with the control group (P<0.05). These findings indicate that bone marrow mesenchymal stem cel transplantation contributes to hepatocyte differentiation and regeneration in liver cancer rats by reducingserum inflammatory factor levels and promoting apoptosis in hepatoma carcinoma cel s.【期刊名称】《中国组织工程研究》【年(卷),期】2016(020)036【总页数】6页(P5358-5363)【关键词】干细胞;移植;骨髓间充质干细胞;肝癌;细胞;凋亡指数;炎症因子【作者】张清琴;寇小格;崔艳慧;王荦楠;靳彩玲;陈美玲;李伟伟【作者单位】新乡医学院第一附属医院肿瘤科，河南省新乡市 453100;新乡医学院第一附属医院肿瘤科，河南省新乡市453100;新乡医学院第一附属医院肿瘤科，河南省新乡市 453100;新乡医学院第一附属医院肿瘤科，河南省新乡市 453100;新乡医学院第一附属医院肿瘤科，河南省新乡市 453100;新乡医学院第一附属医院肿瘤科，河南省新乡市 453100;新乡医学院第一附属医院肿瘤科，河南省新乡市 453100【正文语种】中文【中图分类】R394.2引用本文：张清琴，寇小格，崔艳慧，王荦楠，靳彩玲，陈美玲，李伟伟.移植骨髓间充质干细胞肝癌大鼠细胞凋亡及炎症因子的动态变化[J].中国组织工程研究，2016，20(36):5358-5363.文章快速阅读：张清琴，女，1973年生，河南省鹤壁市人，汉族，2006年遵义医学院毕业，硕士，副主任医师，主要从事肿瘤学研究。