细菌室标本操作流程
细菌室是进行细菌培养和鉴定的重要实验室，操作流程的规范
性和严谨性对于实验结果的准确性至关重要。
下面将详细介绍细菌
室标本操作的流程。
1. 样本接收：首先，接收来自临床的标本，如血液、尿液、脑
脊液等，标本应该在规定时间内送到细菌室，并在接收时进行标记，包括标本来源、送检医生、送检时间等信息。
2. 样本处理：接收到标本后，需要进行处理，包括标本的分装、保存和处理。
不同类型的标本需要采取不同的处理方法，确保标本
的完整性和质量。
3. 样本培养：将处理好的标本进行培养，通常采用琼脂培养基，根据标本的性质选择不同的培养基。
培养条件包括温度、湿度、氧
气含量等，需要根据不同的细菌种类进行调整。
4. 细菌鉴定：培养出的细菌需要进行鉴定，包括形态学特征、
生理生化特性、抗生素敏感性等。
通常采用显微镜观察细菌形态，
进行生化试验和抗生素敏感性试验。
5. 结果记录：对鉴定结果进行记录，包括细菌种类、数量、鉴
定方法、结果等信息。
确保结果的准确性和可追溯性。
6. 报告发放：将鉴定结果整理成报告，发送给临床医生，帮助其进行治疗方案的制定。
7. 清洁消毒：操作结束后，对实验室进行清洁消毒，确保实验室的卫生和安全。
细菌室标本操作流程需要严格遵守操作规程，确保实验结果的准确性和可靠性。
同时，操作人员需要具备专业知识和技能，保证操作的规范性和安全性。
只有这样，才能为临床诊断和治疗提供可靠的实验结果。
检验标本采集储存运输交接处理制度临床检验的任务就是对临床标本进行检测分析,为临床疾病诊断、治疗及疗效观察提供实验室结果,并为临床提供咨询服务;因此,检验标本的正确采集储存运输交接处理是确保临床检验顺利进行的重要条件;为此,制订检验标本采集储存运输交接处理制度;1检验标本采集按照检验标本采集与送检须知及采集标本注意事项附件1,2要求采集合格的标本,并及时送检;2 标本的储存,未能及时检验的标本按实验的要求正确保存,有专用保存标本的冰箱,冰箱有温度记录,报告结果后的标本至少保存48小时,以便复查或与重新采集的标本进行对比分析;3 标本的运输和交接按临床实验标本送检暂行规定执行附件3,防止标本丢失;4 检验后的标本要按照医疗废物处理规定处理附件4;检验标本采集与送检须知一、采集标本要求1．血细胞分析包括血细胞五分类、细胞分类、Eos计数、Ret计数、疟原虫等：紫色真空采血管EDTA盐抗凝管、血细胞五分类试管,只须采血1管至刻度充分混匀注意：充分混匀：一般指迅速将血液和抗凝剂轻轻的颠倒混匀,避免用力振荡;2．血氨、糖化血红蛋白：紫色真空采血管,采血1管至刻度充分混匀;3．淋巴细胞亚群测定：紫色真空采血管,采血1管至刻度充分混匀;4．HLA组织配型：紫色真空采血管,采血3管至刻度充分混匀；PRA分析采1管不抗凝血3-4毫升;5．血栓与止血项目PT四项、凝血因子、D-二聚体、纤维蛋白原、3P试验等：兰色真空采血管枸橼酸钠抗凝管、PT试管,只须采血1管至刻度充分混匀注意：务必采血至刻度若是凝血、溶血、血量少或血量多的标本,需要重新采血,否则检测结果不可靠;6．HLA-B27检测：兰色真空采血管,采血1管至刻度充分混匀;7．三溶试验：采血2管,1管用兰色真空采血管,采血至刻度充分混匀,另1管采不抗凝血2-3毫升;8．血沉：％枸橼酸钠液毫升,血毫升充分混匀;或用专用黑盖血沉管采血至刻度充分混匀;9．红细胞脆性实验：用肝素抗凝,采血2毫升充分混匀;10．血气分析：专用血气注射器采动脉血1毫升充分混匀并及时送检注意：标本须密封隔离空气,送检单上须注明体温、血红蛋白值、是否输氧、输氧浓度等;;11．血DNA及RNA检测：黄色带分离胶真空采血管,采集不抗凝血2-3毫升;分泌物等标本由医生无菌采样;12．找红斑狼疮细胞、血渗透压测定：采不抗凝血2-3毫升;13．生化项目如肝功、肾功、电解质、血糖、血脂、心肌酶、免疫球蛋白、补体、抗0、类风湿因子等：只须采不抗凝血1管约3毫升;14．蛋白电泳只须采不抗凝血1管约2毫升;15．免疫项目HBV、EBV、CEA、AFP等：只须采不抗凝血1管3-5毫升;16．细菌培养：①普通细菌培养：黄盖瓶采血2-3mL,消毒瓶盖后注入瓶中摇匀;②L型细菌培养：绿浅绿盖瓶采血3-5mL,消毒瓶盖后注入瓶中摇匀；绿盖浅绿盖瓶亦可用于使用抗生素治疗后病人的血普通细菌培养;③厌氧菌培养：紫红盖瓶采血约5mL用上法注入瓶中摇匀注意：不得将空气注入瓶中;17．细胞学检查：送检单上务必写上相关临床资料,骨髓细胞形态学检查还需附上血常规结果①骨髓：需要推骨髓片6张,如为初诊病人另须2张外周血片;②尿液：务必于其它相关检查前留尿不少于50mL;③胸腹水：肝素或3．8％枸橼酸钠液1：10抗凝,留取标本不少于50mL;18．①24小时尿17-0H、17-KS、VMA、UCA用浓盐酸防腐1mL浓盐酸／100mL 尿,②24小时尿钾、钠、钙、蛋白、糖、尿素、肌酐、尿酸等用甲苯防腐1mL甲苯／100mL尿；定时尿标本应在排空膀胱后才开始计时留尿,注明总尿量;采集标本注意事项1．采标本前要确认病人身份和检测的项目,正确选择标本容器和抗凝剂,容器试管标签上写清楚病人姓名、化验单号等,三查三对,采标本后应及时送检;2．凡有标签的试管或培养瓶如真空试管、细菌培养瓶,直接在试管或培养瓶标签上写清楚病人的姓名及化验单号即可,请勿另贴化验单标签否则将影响新型先进仪器的使用;凡有使用条形码者,应当竖贴条形码;3．止血带不应扎得太紧,最好不要超过5分钟,如止血带使用超过5分钟,AIb、Ca、ALP、AST、ChoI、Fe等浓度可分别升高5-10％,BUN浓度下降4％;4．不能在输液侧采血：一侧手臂静脉输液时应从对侧手臂采血,以免血液被稀释或输入的液体对测定结果的影响,若二侧手臂同时进行静脉输液,应选择输液穿刺点的远心端取血;5．采抗凝血血PT、血细胞五分类检测时,采血要顺利且血量要准确至刻度若采血速度缓慢或采血困难,会激活凝血机制,使凝血因子活性增高、血小板假性降低；将血液注入试管,要避免产生气泡,气泡的产生可使纤维蛋白原、因子V和因子Ⅻ变性,还容易造成溶血,血液注入试管后迅速将血液和抗凝剂轻轻的颠倒混匀,避免用力振荡而破坏凝血蛋白;6．对于PT四项等血栓与止血项目,当血细胞比积HCT％>55％或<25％时,务必使用下面公式计算采血量,公式如下：采血量mL=抗凝剂用量mL÷0．00185X100-HCT％,否则检测结果不可靠;7．用干燥试管采血时,即使采血量少尤其小儿患者,也不应将注射器内最后带气泡的血液注入试管,以避免溶血,溶血将严重影响许多检验项目结果的准确性;8．细菌培养标本采集,注意无菌操作①血液及骨髓的采集：应在病人发热初期或发热高峰时采集,应选择在抗菌药物治疗之前,对已用药而不能中止的病人,应在下次用药之前采集;②痰标本的采集：一般以晨痰为好,留痰前反复用清水漱口,用力咳出深部痰,置于有盖无菌杯中;③尿标本的采集：冲洗外阴或尿道口后留取中段尿于有塞的无菌试管中;④脑脊液、胸腹水等采集：无菌抽取标本,置于有塞的无菌试管中;⑤鼻咽拭子采集：以无菌生理盐水沾湿无菌棉签后,挤干盐水再取标本,置于有塞的无菌试管中;临床实验标本送检暂行规定根据我院“医院管理年”活动整改方案附院发文 200561号的要求,为进一步规范临床实验标本的采集、储存、运输、接收工作,现建立临床医学实验中心标本接收登记制度,具体规定如下：一、临床实验标本应统一安排物业部专职人员送检,并实行接收登记制度;二、接收登记办法：1、标本接收登记本由医院统一印制,由二联组成,手写联为实验中心存,复写联为临床科室存复写纸复写;2、标本接收登记本由临床送检科室填写,按不同接收标本地点填写登记本;3、要求填写内容：送检科别、病人姓名、床号、标本种类、检验项目名称;三、接收标本地点：1、病原微生物检查的所有标本统一送临床实验中心5楼微生物检验室;2、血常规、大便及体液常规、血凝项目如PT四项等标本送临床实验中心4楼体液室;3、骨髓、临床细胞学标本送临床实验中心4楼细胞标本处理室;4、生化、免疫学检查送临床实验中心3楼生化室和免疫室之间的标本接收处;四、接收办法：临床实验中心人员与各科送标本人员双方校对签名后交接;为了加快医疗流程,要求病房将第一批检验标本于上午八时送达;五、拒收标本范围：不合要求的标本,临床实验中心有权不予接收,具体不合要求的如下：1、未正确使用抗凝剂造成标本凝固的;2、严重溶血及严重脂血并影响检测的血标本;3、血量不足于检验需要,而且临床实验中心又无法从其送检的其他标本中调节的标本;4、需要空腹抽血而未空腹的标本;5、需防腐处理而未加防腐剂的标本;6、24小时尿未注明总尿量的标本;7、未做到无菌处理的各种微生物培养标本;8、厌氧培养标本不符合厌氧要求者;9、标本的病人姓名、年龄、性别、住院号、床号等与检验联不相符者;10、患者信息不全,如住院病人缺住院号等;对不合格标本,检验部门填写“退标本通知单”说明理由,并由运送标本人员及时送回病房;附件4医疗废物处理规定为了加强临床医学实验中心医疗废物的安全管理,有效预防和控制医疗废物对人体健康和环境产生危害,根据医院“我院医疗废物管理的规定”附院发文200524号;应该做到：1、根据医疗废物的类别,将感染性废物和损伤性废物分别用有警示标识的黄色包装物或容器物盛装封闭;2、医疗废物中病原体的培养基、标本和菌种、毒种保存液等高危险性废物,必须首先在微生物实验室进行压力蒸汽灭菌或化学消毒处理,然后按感染性废物收集处理;3、转运人员收集医疗废物时要进行废物交接登记并签名;4、转运人员在运送医疗废物时,必须防止造成医疗废物盛装容器破损或医疗废物的流失,泄漏和扩散,并防止医疗废物直接接触身体,一律实施袋装封闭运送;5、医疗废物转交出后,应当及时对暂时储存地点、容器、运送工具及时进行清洁和消毒处理;6、医疗废物血液标本暂时储存于三楼标本储存室冰箱,时间不得超过三天;储存室上锁,不准非工作人员接触医疗废物;有防鼠、防蚊蝇、防蟑螂的安全措施;7、一旦发生医疗废物溢出、散落时,立即按医院制定的医疗废物流失、泄漏、扩散和意外事故发生应急预案进行收集、消毒处理;8、工作人员在工作中被医疗废物污染或损伤时,在采取紧急处理措施的同时立即向感染管理科报告;。
临床微生物学标本采取和处理的规范化要求正确的采取、处理与运送用于细菌培养的标本是临床细菌检验成功的关键.标本采取与处理的规范化是准确、及时地向临床提供重要的临床感染信息的基础；而标本采取与处理不当将严重影响检验结果,给临床以误导，延误对患者的正确治疗。
为此，我们提出初步的参考意见，并希望在实践中不断完善。
一、血液细菌培养标本的采集和处理临床上疑为败血症、脓毒血症或其他血液感染的患者,需做血液细菌培养以明确病原。
1．采集方法:静脉采血，以无菌操作方法抽取血液后,直接注入血培养瓶中，轻轻颠倒混匀，以防血液凝固.如果同时作需氧和厌氧培养，应先将标本接种到厌氧瓶中,再注入需氧瓶，严格防止将空气注入厌氧瓶中。
2。
采血时间以及血培养份数:在患者发热期间越早越好,最好在抗菌治疗前，用药前24小时内采集2～3次血液标本,可使细菌检出率高达99％.对间歇性寒战或发热的患者,应在寒战或体温高峰到来之前0。
5～1小时采血，亦可在寒战或发热后1小时采集血液标本。
特殊感染患者采血培养时应遵循以下原则：（1）可疑急性发热性菌血症、败血症患者：应在使用抗菌药物之前，在24小时内从不同部位采集2~3份血液标本培养.(2)可疑细菌性心内膜炎患者、感染性心内膜炎患者：在1～2小时内采集3份血标本培养,如果24小时后阴性,再采集两份血标本培养。
(3）不明原因发热患者：先采集2～3份血标本，抽血间隔60 min，24~36小时后体温升高之前，再采集2份血标本进行培养。
因为1次血培养不足以说明问题,可能会遗漏阳性结果。
（4）可疑菌血症但血培养持续阴性时;应改变血培养方法,以获得罕见或苛养的微生物。
（5）在急性发热性疾病如脑膜炎、细菌性肺炎,需马上做抗菌治疗;或急性骨髓炎、化脓性关节炎等要紧急手术的患者,应立即从两臂分别取2份标本.3。
采血部位:采血部位通常为肘静脉。
疑为亚急性心内膜炎的患者，以肘动脉或股动脉采血为宜。
疑为细菌性骨髓炎或伤寒患者，在病灶或髂前（后）上棘处严格消毒后抽取骨髓。
