洁净手术室空气采样方法

空气、物体表面、医务人员手的监测采样及检查原则：采样应具有一定数量和代表性，采样后必须尽快对样品按要求指标进行检测，送检时间不得﹥6小时，若样品保存在冰箱内送检时间不﹥24小时。

一、空气监测：1、采样时间：消毒处理后，操作前2、采样方法：平板沉降法（1）布点方法：室内面积≤30ｍ²，设内、中、外对角线3点，两端距墙1米；室内面积＞30ｍ²，设东、西、南、北4角及中央5点，其中东、西、南、北均距墙1米。

洁净手术室9个点。

（2）采样方法：将直径为9cm普通营养琼脂平板在室内各采样点处，采样高度为距地面0.8--1.5米，采样时将平板盖打开，扣放于平板旁，暴露5-15-30分钟，盖好立即送检。

( 3)注意事项：采样前，关好门、窗，在无人走动的情况下，静止10min 进行采样。

表4：洁净手术室静态（空态）时空气采样方法（沉降法）等级空气洁净度级别布点要求细菌最大平均浓度手术区周边区手术区周边区100级1000级0.2 0.4Ⅱ1000级10000级0.75 1.5Ⅲ10000级100000级2 4辅Ⅲ100000级 5(5)质控标准：Ⅰ类区域（洁净手术室）：细菌总数≤4cfu/m3(30分钟9cm平皿)，新风机组2d清洁一次，初效过滤器1-2月更换，中效每周检查3个月更换，高效每年更换，末端高效每年检查3年更换。

回风口每周清洁一次、每年更换一次。

Ⅱ类区域：细菌总数≤4cfu/m3(15min9cm平皿)，Ⅲ类区域：细菌总数≤4cfu/m3(5min9cm平皿)，二、医务人员手的监测：1、采样时间：在接触病人和从事医疗活动前进行采样或消毒后立即采样。

2、采样面积及方法：放被检人（五指并拢），用浸有无菌盐水的棉拭子在双手指屈面从指根到指端往返涂擦各2 次(双手涂擦面积约60平方厘米），并随之转动采样棉拭子，剪去操作者手接触部位，将棉拭子投入5ml 无菌盐水试管内，立即送检。

3、质控标准：工作人员手卫生：细菌总数≤10cfu/cm2。

层流手术室空气日常监测方法：要求日常实行动态监测，必测项目为平板采样法（沉降法）或采样器法(浮游菌法)检测细菌菌落总数。

（1）回风口动态平板采样法：应在手术开始、手术2小时、手术结束前抽检3-4次。

每个回风口中部摆放3个倾斜30℃，Φ90 培养皿，暴露30分钟后，37°C培养24小时。

标准：每皿菌落计数平均值应符合表4标准要求。

单皿最大值不应超过平均值3倍。

（2）动态采样器法：浮游菌菌落检测应在手术进行如切皮、缝合、连台手术之间、手术进行4小时等，选择不少于3个程序，测定细菌菌落总数。

标准：I级<30cfu/m3 ；II级<150 cfu/m3；III级<450 cfu/m3；IV级<500 cfu/m3。

（3）其他洁净用房在当天上午10时和下午4时各测1次，在每个回风口中部摆放3个Φ90培养皿，沉降0.5h后在37℃下培养24h。

标准：同回风口动态平板采样法标准。

层流手术室静态（空态）时空气采样方法：1、采样方法：（1）当送风口集中布置时，应对手术区和周边区分别检测；当送风口分散布置时，按全室统一布点方法检测。

（2）沉降法采样时，用直径9cm的培养皿，在空气中暴露30min，37℃培养24h，培养皿中的菌落数（cfu）代表空气中沉降下来的细菌数，以个/皿表示。

（3）浮游法采样时，用裂隙采样器在空气中随机采样30min，对采样皿或采样条培养得出的菌落数（cfu），代表空气中浮游下来的细菌数，以个/m3表示。

2、采样高度：（1）采样点可布置在地面上或不高于地面0.8m的任意高度上；（2）在手术区检测时应无手术台；当手术台已固定时，检测高度应在台面之上0.25cm。

3、布点方法：（见表1）4、采样注意事项：（1）在100级区域检测时，采样口应对着气流方向；在其他区域检测时，采样口均向上；（2）采样后的培养基条或培养皿，应37℃条件下培养24h，并计算菌落数，菌落数的平均值均四舍五入选位到小数点后1位；（3）当采用浮游法测定浮游菌浓度时，细菌浓度测点数应和被测区域的含尘浓度测点数相同，且宜在同一位置上。

环境卫生学监测要求一、空气的消毒效果监测1、采样时间采用洁净技术净化空气的房间在洁净系统自净后与从事医疗活动前采样；未采用洁净净化空气的房间在消毒或规定通风换气后与从事医疗活动前采样，或怀疑与医院感染暴发有关时采样。

2、监测方法洁净手术部（室）及其他洁净用房可选择沉降法或浮游菌法，参照GB50333要求进行监测。

监测时将培养皿置于室内中央0.8m～1.5m高度，每次采样时间不应超过30min。

未采用洁净净化空气的房间采用沉降法，室内面积≤30m2，设内、中、外对角线三点，内、外点距墙壁1米处；室内面积＞30m2，设四角及中央五点，四角的布点位置应距墙壁1米处，将普通营养琼脂平皿（Φ90mm）放置各采样点，采样高度为距地面0.8m～1.5m；采样时将平皿盖打开，扣放于平皿旁，暴露规定时间后盖上平皿盖及时送检。

将送检平皿置36℃±1℃恒温箱培养48h,计数菌落数，若怀疑与医院感染暴发有关时，进行目标微生物的检测。

3、结果判定洁净手术部（室）和其他洁净场所，空气中的细菌菌落总数要求应遵循ＧＢ５０３3３。

非洁净手术部（室）、产房、新生儿室、烧伤病房、重症监护病房、血液病病区空气中的细菌菌落总数≤４cfu／（１５min·直径９cm平皿）。

儿科病房、母婴同室、妇产科检查室、人流室、治疗室、注射室、换药室、输血科、消毒供应中心、急诊室、化验室、各类普通病室、感染疾病科门诊及其病房空气中的细菌菌落总数≤4cfu/(5min·直径9cm平皿)。

4、注意事项采样前，关闭门、窗，在无人走动的情况下，静止10min后采样。

5、采样频次洁净手术室或洁净病房每月1次,非洁净手术部（室）、产房、新生儿室、烧伤病房、重症监护病房、血液病病区等每季度1次,其它普通病室则需要时进行监测或怀疑医院感染有关时进行监测.二、手的消毒效果监测1、采样时间在接触患者、进行诊疗活动前采样。

2、采样方法被检者五指并拢，用浸有含相应中和剂的无菌洗脱液浸湿的棉拭子在双手指曲面从指根到指端往返涂擦2次，一只手涂擦面积约30cm2，涂擦过程中同时转动棉拭子；将棉拭子接触操作者的部分剪去，投入10ml含相应中和剂的无菌洗脱液试管内，及时送检。

医院空气、物表与医务人员手卫生学监测根据卫生部下发的《医院空气净化管理规范》、《医疗机构消毒技术规范》（2012年8月1日实施）及《医务人员手卫生规范》要求，特制定我院环境卫生学监测方法与结果判断标准，请遵照执行。

一、空气净化效果的监测1.监测科室医院应对感染高风险部门如手术室、产房、导管室、层流洁净病房、骨髓移植病房、器官移植病房、重症监护病房、新生儿室、母婴同室、血液透析中心(室)、烧伤病房的空气净化与消毒质量进行监测。

2.监测频率（1）感染高风险部门每季度进行监测；（2）洁净手术室及其他洁净场所、新建与改建验收时、换高效过滤器后应进行监测；（3）遇医院感染暴发怀疑与空气污染有关时随时监测，并进行相应致病微生物检测。

3.采样时间（1）采用洁净技术净化空气的房间在洁净系统自净后与从事医疗活动前采样；（2）非洁净技术净化空气的房间在消毒或规定的通风换气后与从事医疗活动前采样；（3）怀疑与医院感染暴发有关时采样。

4.监测方法（1）洁净手术室及其他洁净用房可选择沉降法或浮游菌法，参照GB50333要求进行监测。

浮游菌法可选择六级撞击式空气采样器或其他经验证的空气采样器。

监测时将采样器置于室内中央0.8m～1.5m高度，按采样器使用说明书操作，每次采样时间不应超过30min。

房间面积＞10 m2者，每增加10 m2增设一个采样点；（2）未采用洁净技术净化空气的房间采用沉降法：室内面积≤30 m2，设内、中、外对角线三点，内、外点应距墙壁1m处；室内面积＞30 m2，设四角及中央五点，四角的布点位置应距墙壁1m处。

将普通营养琼脂平皿（Φ90mm）放置各采样点，采样高度为距地面0.8m～1.5m；采样时将平皿盖打开，扣放于平皿旁，暴露规定时间后盖上平皿盖及时送检；（3）平皿暴露时间：①层流洁净手术室或场所暴露30min；②非洁净手术室、产房、导管室、新生儿室、重症监护病房、器官移植病房、血液病病区、烧伤病房等感染高风险部门暴露15min；③儿科病房、母婴同室、妇产科检查室、人流室、治疗室、注射室、换药室、输血科、消毒供应中心、血液透析中心（室）、急诊室、化验室、各类普通病室、感染疾病科门诊暴露5min。

洁净手术室的取样
百级：布点：局部百级区5点（双对角线布点）、Ⅰ级周边区8点（每边内2点）
千级：布点：Ⅱ级周边区6点（长边内2点，短边内1点）
万级：布点：Ⅲ（10万级）级周边区4点（每边内1点）
布点；Ⅳ（30万级）级周边区，面积＞30m2，布4点（每边内1点）；面积≤30m2，布2点，均避开送风口正下方。

1、测点布置在距地面0.8m的平面上，在手术区检测时应无手术台；当手术台已固定，测点高度在台面之上0.25m。

2、在100级检测时，采样口应对着气流方向，在其他级别区域检测时，采样口均向上。

3、检测人员不得多于2人，都应该穿洁净工作服，处于测点下风向的位置，尽量少动作。

4、采样时间为30min。

5、结果判定：
Ⅰ级洁净手术室：手术区≤10cfu/m3，周边区≤10cfu/m3(特别洁净手术室)
用于关节置换、器官移植手术及脑外科、心脏外科和眼科等手术中的无菌手术。

Ⅱ级洁净手术室：手术区≤25cfu//m3，周边区≤50cfu/m3 (标准洁净手术室)
用于胸外科、整形外科手术、泌尿外科、肝胆胰外科、骨外科和普通外科中的Ⅰ类切口无菌手术。

Ⅲ级洁净手术室：手术区≤75cfu//m3，周边区≤150cfu/m3(一般洁净手术室)
用于普通外科（除去Ⅰ类切口手术）、妇产手术。

Ⅳ级洁净手术室≤175cfu/m3(准洁净手术室）
用于肛肠手术及污染类手术。

医院消毒灭菌效果监测标准操作规程医院消毒是预防医院内感染的重要措施之一，消毒效果的监测是评价其消毒设备运转是否正常、消毒药剂是否有效、消毒方法是否合理、消毒效果是否达标的唯一手段。

为规范消毒效果监测，特制定医院消毒灭菌效果监测的标准操作规程。

一、空气消毒效果的监测1、监测频次：每季进行。

2、采样⑴采样时间：空气消毒后4小时内、手术操作前。

⑵平板暴露法：暴露前先检查平板是否污染，是否有气泡及霉点。

将普通营养琼脂平板（直径为 9cm）放在室内各采样点处，采样高度为距地面 1.5m，采样时将平板盖打开，斜扣放于平板旁，暴露5min，在放置、收取平皿时，手不能在暴露平皿的正上方移动。

⑶布点方法：室内面积≤30m2，设内、中、外对角线上的3点，内、外点布点部位距墙1M处；室内面积＞30m2，设 4 角及中央共 5 点，4 角的布点部位距墙壁 1m 处。

图1 室内面积≤30m2布点图图2 室内面积＞30m2的布点图3、注意事项⑴采样前，关好门、窗，在无人走动的情况下，静止10min 进行采样。

⑵平板摆放如取一条对角线，避免离门近的一条。

⑶工作人员不要靠近自动门，以免影响监测结果。

4、结果判定⑴非洁净手术部（室）、非洁净骨髓移植病房、产房、导管室、新生儿室、器官移植病房、烧伤病房、重症监护病房、血液病病区空气中的细菌菌落总数≤４cfu／15min·直径9cm平皿。

⑵儿科病房、母婴同室、妇产科检查室、人流室、治疗室、注射室、换药室、输血科、消毒供应中心、血液透析中心（室）、急诊室、化验室、各类普通病室、感染疾病科门诊及其病房空气中的细菌菌落总数≤4cfu/5min·直径9cm平皿。

二、手、物体表面消毒效果监测1、监测重点科室：手术室、产房、导管室、层流洁净病房、骨髓移植病房、器官移植病房、重症监护病房、新生儿室、母婴室、血液透析病房、烧伤病房、感染疾病科、口腔科、消毒供应中心等。

2、监测频次⑴重点科室物表每月监测，工作人员手每季度监测。

空气洁净度检测方法
空气洁净度的检测方法可以分为以下几种：
1. 采样分析法：使用专业的空气质量监测设备，将空气样品采集到采样器中，然后送回实验室进行分析。

这种方法可以得出空气中各种污染物的浓度和组分。

2. 颜色指数法：使用颜色指数试剂，将其暴露在空气中一段时间后，观察试剂的颜色变化程度来判断空气洁净度。

一般来说，颜色越深表示污染物含量越高。

3. 气象法：通过观察和记录天气现象，如雾霾、烟尘、气味等，来评估空气洁净度。

这种方法适用于对大范围区域的空气洁净度进行粗略评估。

4. 敏感人群反应法：将敏感人群置于待测空气环境中，观察他们是否出现呼吸困难、咳嗽、眼睛刺痛等不适症状来间接评估空气洁净度。

5. 空气质量指数（AQI）法：根据国家或地区的相关标准，通
过监测污染物浓度、风速、湿度等因素，综合计算得出一个数值来表示空气质量的好坏。

这种方法常用于对大气环境质量进行定量评价。

需要注意的是，不同的检测方法适用于不同的场景和需求，需要根据具体情况选择合适的方法。

同时，准确的空气洁净度检测可能需要专业设备和实验室条件，一般人无法轻易实施。

空气采样标准操作程序1.目的正确进行空气微生物监测。

2.适用范围本院各科室。

3.职责医院感染管理专职人员和微生物实验室感控岗位的人员应遵守本程序。

4.程序(平板暴露法)采样时间在消毒处理后、操作前进行采样。

4.1布点方法室内面积≤30m2，设内、中、外对角线3点，内、外点布点部位距墙壁1m处；室内面积>30m2，设4角及中央5点，4角的布点部位距墙壁1m处。

4.2采样方法将普通营养琼脂平板(直径为9cm)放在室内各采样点处，采样高度为距地面0.8m~1.5m采样时将平板盖打开，扣放于平板旁，暴露5分钟，盖好立即送检。

计算公式：细苗总数(CFU/m2)=50000N/(A*T)注：A为平板面积(cm2)，T为平板暴露时间(min)，N为平均菌落数(CFU)。

5.结果判定I类区域细菌总数遵循GB 50333，未检出金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌为消毒合格。

Ⅱ类区域细菌总数≤4CFU/(15min•直径9cm平皿)，未检出金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌为消毒合格。

Ⅲ类区域细菌总数≤4CFu/(5min•直径9cm平皿)，未检出金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌为消毒合格。

注：I类环境包括层流洁净手术室和层流洁净病房。

Ⅱ类环境包括普通手术室、产房、婴儿室、早产儿室、普通保护性隔离室、供应室洁净区、烧伤病房、重症监护病房。

Ⅲ类环境包括儿科病房、妇产科检查室、注射室、换药室、治疗室、供应室清洁区、急诊室、化验室、各类普通病室和房间。

6.注意事项采样前，关好门、窗，在无人走动的情况下，静止10分钟进行采样。

平皿应新鲜透亮，当天领取使用。

如为空气采样机采样，按操作说明进行。

7.参考文献7.1中华人民共和国卫生部，消毒技术规范(2002年版)．20027.2钱培芬，倪语星．医院感染监测与管理．北京：军事医学科学出版社．2008。

可编辑修改精选全文完整版医院消毒灭菌效果监测标准操作规程医院消毒是预防医院内感染的重要措施之一，消毒效果的监测是评价其消毒设备运转是否正常、消毒药剂是否有效、消毒方法是否合理、消毒效果是否达标的唯一手段。

为标准消毒效果监测，特制定医院消毒灭菌效果监测的标准操作规程。

一、空气消毒效果的监测1、监测频次：每季进行。

2、采样⑴采样时间：空气消毒后4小时内、手术操作前。

⑵平板暴露法：暴露前先检查平板是否污染，是否有气泡及霉点。

将普通营养琼脂平板〔直径为 9cm〕放在室内各采样点处，采样高度为距地面 m，采样时将平板盖翻开，斜扣放于平板旁，暴露5min，在放置、收取平皿时，手不能在暴露平皿的正上方移动。

⑶布点方法：室内面积≤30m2，设内、中、外对角线上的3点，内、外点布点部位距墙1M处；室内面积＞30m2，设 4 角及中央共 5 点，4 角的布点部位距墙壁 1m 处。

图1 室内面积≤30m2布点图图2 室内面积＞30m2的布点图3、考前须知⑴采样前，关好门、窗，在无人走动的情况下，静止10min 进行采样。

⑵平板摆放如取一条对角线，防止离门近的一条。

⑶工作人员不要靠近自动门，以免影响监测结果。

4、结果判定⑴非洁净手术部〔室〕、非洁净骨髓移植病房、产房、导管室、新生儿室、器官移植病房、烧伤病房、重症监护病房、血液病病区空气中的细菌菌落总数≤４cfu／15min·直径9cm平皿。

⑵儿科病房、母婴同室、妇产科检查室、人流室、治疗室、注射室、换药室、输血科、消毒供给中心、血液透析中心〔室〕、急诊室、化验室、各类普通病室、感染疾病科门诊及其病房空气中的细菌菌落总数≤4cfu/5min·直径9cm平皿。

二、手、物体外表消毒效果监测1、监测重点科室：手术室、产房、导管室、层流洁净病房、骨髓移植病房、器官移植病房、重症监护病房、新生儿室、母婴室、血液透析病房、烧伤病房、感染疾病科、口腔科、消毒供给中心等。

盛年不重来，一日难再晨。

及时宜自勉，岁月不待人。

医院常规空气细菌培养（自然沉降法）采样方法一、采样时间选择消毒处理后与进行医疗活动之前采样。

二、采样高度与地面垂直高度80-150厘米。

三、布点方法1.面积w 30 m2,设一条对角线取三点，即中间一点，两端各距墙1米处各取一点（图1）图V2 •室内面积＞30m2，设两条对角线，东，西，南，北，中取五点，其中东，西，南，北距墙均1米（图2）四、采样方法用9厘米直径普通琼脂平皿，打开盖后面朝下斜扣到底盘，在采样点准确暴露5分钟后，送检培养。

五、结果分析I类区域：＜10 cfu/m3II类区域：＜200 cfu/m3III类区域：＜500 cfu/m3六、附录I类区域：层流洁净手术室、层流洁净病房（参照洁净室空气培养方法与标准）U类区域：普通手术室、产房、婴儿室、早产儿室、普通保护性隔离室、供应室无菌区、烧伤病房、重症监护病房。

川类区域：儿科病房、妇产科检查室、注射室、换药室、治疗室供应室清洁区、急诊室、化验室、各类普通病房和房间W类区域：传染病科及病房。

洁净室空气细菌培养监测布点与标准、局部百级，周围千级:共放13个培养皿，其中手术区域5点，周边区8点。

采样布置点示意图:、局部千级，周围万级:共放9个培养皿，其中手术区域3点，周边区6点。

采样布置点示意图:三、局部万级，周围十万级：共放7个培养皿，其中手术区域3点，周边区域4点。

采样布置点示意图：五、要求：1.送风口集中布置时，应对手术区和周边区分别检测；如送风口分散布置时，全室统一检测，测点可均布，不应布置在送风门正下方；2.采样点可布置在地面上或不高于地面0.8m的任意高度上，手术区域放置在四角的平皿应离手术区边缘0.12m，培养皿放置30分钟；3.采样后的培养皿，应立即置于37度条件下培养48小时；4.然后计数生长的菌落数，菌落数的平均值均四舍五入进位到小数点后1 位。

5.放置培养皿示意图：盖面朝下斜扣到底盘A边^3. 0.5"1 洁胃手术室的尊级标進f空态或辭态）•注.k淳葡淹阿细曲醍丸平均我摩垂用括号内裁值.sa菌漓庫足■播所覇的第果.不是沉降法押浮語法互幅换亘的结果” 2.［扱噩科专用手术宣間边区按10000级套求・。

洁净房间（Ⅰ类环境）静态空气监测方法静态：是室内设施及功能齐备，空调净化系统正常运行，但无人员的状态。

1、采样时间：洁净手术室房间清洁并擦拭消毒后，使净化空调系统达到自净时间（Ⅰ级洁净手术室和洁净辅助用房监测前，系统已运行15min，其他洁净房间应已运行40min。

）并处于开启状态，然后进行测试，室内应无工作人员。

2、准备物品：直径为9cm的普通营养琼脂平板3、监测人员要求：穿洁净服，戴帽子口罩，手卫生。

动作要轻，避免产生二次污染。

4、布点顺序：放置培养皿从总平面中最靠里的房间开始布置,依次向外，最后人员撤出。

每间房间也是从房间最靠里的点开始布置，最后布置门附近的点，然后人员撤出。

收培养皿的顺序相反，从最外面的房间开始收,每间房间从门附近的培养皿开始收。

5、培养应必须设2次空白对照。

第1次对照：为培养皿对照，每监测批次中取1个培养皿做对比试验培养皿不打开直接培养，用于检测培养皿是否合格。

第2次对照：为操作过程对照，每室或每区取1个对照皿，对操作过程做对照试验，模拟微生物检测操作过程，但培养皿打开后应立即封盖，用于检测培养操作过程是否合格。

注意：两次对照结果都必须为阴性。

整个操作应符合无菌操作的要求。

6、布点高度：不高于地面0.8m的任意高度上，若有固定设备、仪器（如手术床等），可放置在设备上。

周边区：洁净手术室内除去手术区以外的其他区域。

8、检测方法：采样后立即送检，置于37℃温箱内培养24小时，然后计数菌落数。

菌落数的平均值均四舍五入进位到小数点后1位。

注意：手术区与周边区分别计算。

9、注意事项：（1）静态测试时，室内测试人员不能多于2人；（2）采样时应遵守无菌操作原则；（3）采样后2小时内将培养皿置培养箱培养。

（4）标明培养皿的编号；（5）化验单必须注明手术室的级别；（6）必须设两次空白对照；（7）采取一切措施防止人为对样品的污染。