溴甲酚绿结合法

血清白蛋白测定标准操作规程1 检验申请单独检验项目申请：血清白蛋白测定（缩写ALB）;组合项目申请：血生化中肝功能测定项目组合。

临床医生根据需要提出检验申请。

2 标本采集与处理2。

1标本采集2。

1.1常规静脉采血约2ml,不抗凝,置普通试管中。

或采用含分离胶的真空采血管。

2。

1。

2检验申请单和血标本试管标上统一且唯一的标识符。

2。

1.3急诊标本采集后，在检验申请单上填写标本采集时间。

2.1.4标本采集后与检验申请单一起及时运送至检验科。

专人负责标本的接收并记录标本的状态，对不合格标本予以拒收。

2。

1。

5下列标本为不合格标本2。

1。

5.1标本量不足：少于0.3ml的全血标本,或少于0。

1ml的血清或血浆。

2。

1。

5。

2对反应吸光度有干扰的标本，包括严重溶血、严重浑浊的标本。

2。

1.5.3无法确认标本与申请单对应关系的.2。

1。

5。

4其他如标识涂改、标本试管破裂等.2。

2标本保存2.2。

1接收标本后在30min内将标本离心分离出血清.2.2.2标本保存时间：室温(15～25℃)下可稳定一周，普通冰箱中（2～8℃）稳定一个月。

为避免标本中水分挥发使血清浓缩，对保存时间超过1天的标本均加塞密闭或覆盖湿巾。

2.3标本采集的注意事项2.3。

1采血前使受检者保持平静、松弛和空腹状态。

2。

3.2不建议采集抗凝血标本,如果必须使用血浆，推荐的抗凝剂是肝素。

3 方法原理血清中的白蛋白与溴甲酚绿在PH=4.2的条件下结合生成绿色复合物，溶液由黄色变为绿色，其颜色深浅与白蛋白浓度成正比，通过在630nm处测定其吸光度可得出白蛋白的含量。

PH=4.2白蛋白 + 溴甲酚绿—-—-—-------———绿色复合物4 试剂及其他用品4.1试剂:溴甲酚绿法测定白蛋白试剂盒，由北京利德曼生化技术有限公司出品.4。

2试剂盒保存：保存于2～8℃，不开盖情况下至标签的失效期。

开盖后放于仪器的冰箱中至少稳定14天.开盖后避免污染。

变质指示：当试剂有浊度时,表明有细菌污染，不能继续使用.4.3试剂盒准备：液态单试剂型，即开即用，无特殊准备4.4试剂盒主要成分:缓冲液（pH 4.2）50 mmol/L，溴甲酚绿0.25 mmol/L,其中含有稳定剂与保护剂＜0.1%。

碱度的测定碱度表示水样中与强酸中的氢离子结合的物质的量。

它能反映出废水在厌氧处理过程中所具有的缓冲能力。

一般常用溴甲酚绿-甲基红指示剂滴定法测定。

溴甲酚绿-甲基红指示剂滴定法：1、原理以溴甲酚绿-甲基红作指示剂滴定水样碱度时，终点由淡蓝色变为淡粉红色时，报告时终点pH值可记为4.6。

2、仪器、药品酸式滴定管、锥形瓶、滤纸、漏斗(1)溴甲酚绿-甲基红指示剂：称取100mg溴甲酚绿和20mg甲基红溶于100ml 95%乙醇中。

(2)0.1mol/L(1/2Na2S2O3)溶液：称取0.79g硫代硫酸钠溶于水中，稀释至100ml。

(3) 0.0200mol/L碳酸钠标液：称取0.53g(于250℃烘干4h)的无水碳酸钠，溶于少量无二氧化碳水中，移入500ml 容量瓶中，稀释至标线，混匀。

贮于聚乙烯瓶中，保存一周。

(4)0.0200mol/L盐酸标准溶液：取1.66ml浓盐酸定容至1000ml，以碳酸钠溶液标定。

吸取25.00ml碳酸钠标液于250ml锥形瓶中，加无二氧化碳水稀释至100ml，加入3滴甲基橙指示剂，用盐酸标液滴定至由桔黄色刚变成桔红色，记录用量V 。

计算：()Vl mol HCl 0200.000.25/⨯= 3、测定步骤：(1)取20ml 过滤水样于锥形瓶中，加入100ml 无二氧化碳水；(2)加入3滴溴甲酚绿-甲基红指示剂和1滴硫代硫酸钠溶液，用盐酸标准溶液滴定至恰好出现淡红色，记录消耗盐酸的量。

计算：()()501000/201⨯⨯⨯-=V C V V l mg 碱度 1V —试样消耗盐酸标液的体积，ml;2V —试样的体积，ml0V —空白对照消耗盐酸标液的体积，mlC —盐酸标液的浓度，mol/L50—21碳酸钙的摩尔质量碱度的测定碱度表示水样中与强酸中的氢离子结合的物质的量。

它能反映出废水在厌氧处理过程中所具有的缓冲能力。

一般常用溴甲酚绿-甲基红指示剂滴定法测定。

测定步骤：取20ml 过滤水样于锥形瓶中，加入3滴溴甲酚绿-甲基红指示剂，用0.0200mol/L 盐酸标准溶液滴定至恰好出现淡红色，记录消耗盐酸的量。

白蛋白检测试剂盒(溴甲酚紫比色法)简介：总蛋白(Total Protein ，TP)由白蛋白和球蛋白组成，检测白蛋白的方法有双缩脲法、色氨酸法、染料结合法。

检测白蛋白的染料结合法可采用溴甲酚绿或溴甲酚紫染料结合，上述染料对白蛋白具有高度的亲和力，通常监测染料与白蛋白结合的初速率，该速率与样品中白蛋白浓度成正比。

Leagene 白蛋白检测试剂盒(溴甲酚紫比色法)检测原理是在酸性环境下，白蛋白分子带正电荷，与带负电荷的溴甲酚紫(Bromocresol purple ，BCP)结合生成绿色复合物，在603nm 处有吸收波，该复合物的吸光度与白蛋白浓度成正比，与同样处理的白蛋白标准比较，求得待测样品中白蛋白浓度。

本试剂盒多用于人或动物血清、血浆、组织等样本中的蛋白含量测定，该法操作简单、方法特异，既可手工操作，又可采用自动分析仪检测，对血清清蛋白的特异性比BCG 法(溴甲酚绿法)要好，不易受时间和温度变化的影响。

本试剂盒仅用于科研领域，不宜用于临床诊断或其他用途。

组成：自备材料：1、 离心管、小试管2、 比色杯3、 分光光度计操作步骤(仅供参考)：1、 取白蛋白标准配制液或稀释液加入到白蛋白标准中，充分溶解后配制成40mg/ml 的白蛋白标准溶液，配制后可立即使用，溶解后的白蛋白标准溶液应-20℃保存。

亦可按自己试验要求继续进行稀释，如稀释至1mg/ml 。

特别提示：待测蛋白溶解于什么样的稀释液中，白蛋白标准也宜溶解于什么样的稀释液中。

例如待测蛋白溶解于蔗糖中，亦取白蛋白标准溶解于蔗糖中。

一般也可以用NaCl 或PBS 作为溶解白蛋白标准品的稀释液。

2、 样本处理：血清、血浆样本直接取检测。

对于组织样本，按组织质量(g)：生理盐水比例，加入生理盐水或PBS ，冰浴下匀浆后，离心，取上清待检。

编号 名称TC0567 100T Storage试剂(A): BCP 试剂 200ml 4℃ 避光试剂(B): 白蛋白标准 20mg RT 试剂(C): 白蛋白标准配制液 100mlRT使用说明书1份3、白蛋白加样操作，按下表依次加入试剂：加入物(ml) 空白管标准管待测管白蛋白标准配制液0.01 −−白蛋白标准溶液(40mg/ml) −0.01 −待检样品(血清、血浆、组织匀浆液) −−0.01BCP试剂 2.0 2.0 2.04、比色杯光径，先在分光光度计以空白管调零，逐管加入BCP试剂，并立即混匀。

溴甲酚绿比色法检测γ—氨基丁酸含量γ-氨基丁酸（GABA）会对溴甲酚绿、乙醛酸和琥珀酸的混合液有专一性的显色反应。

显色剂溴甲酚绿、乙醛酸和琥珀酸的最适浓度分别为0.5 mg/mL、6mg/mL和4mg/mL，比例为1∶1∶1。

测定GABA最适条件4mL样品溶液，加入2mL显色剂，混匀，在618nm测定吸光度。

γ-氨基丁酸（γ-Aminobutyric Acid，GABA）是一种非蛋白质的天然氨基酸。

由谷氨酸（Glu）经谷氨酸脱梭酶（GAD）催化而来，是哺乳动物中枢神经系统中的重要的抑制性神经递质。

GABA有镇静安神、增强记忆、抗晒老、调节食欲、改善脂质代谢等生理功能，在食品和医药等领域有重要作用。

1 材料与方法1.1 主要试剂与仪器GABA：源叶生物；溴甲酚绿：天津市风船化学试剂科技有限公司；乙醛酸：萨思化学技术有限公司；琥珀酸：天津市福晨化学试剂厂；L-谷氨酸钠：国药集团化学试剂有限公司。

紫外可见分光光度计TU-1800：北京普析通用仪器有限责任公司。

1.2 方法1.2.1 显色剂的配制配置0.5 mg/mL溴甲酚绿、6mg/mL乙醛酸、4mg/mL琥珀酸，并以比例1∶1∶1混匀。

1.2.2 最适波长的检测吸取4mg/mLGABA标准溶液4mL，加入2mL显色剂，混匀。

在紫外可见分光光度计检测最适波长。

1.2.3 显色条件的影响（1）溴甲酚绿浓度的影响。

分别配置0.1、0.3、0.5、0.7、0.9mg/mL的溴甲酚绿溶液，与6mg/mL乙醛酸溶液，4mg/mL琥珀酸溶液以1∶1∶1的比例混合为显色剂。

4mg/LGABA标准溶液4mL，加入2mL显色剂，混匀，618nm处测定吸光度。

（2）乙醛酸浓度的影响。

分别配置2、4、6、8、10mg/mL的乙醛酸溶液，与05mg/mL溴甲酚绿溶液，4mg/mL琥珀酸溶液以1∶1∶1的比例混合为显色剂。

4mg/LGABA标准溶液4mL，加入2mL显色剂，混匀，618nm处测定吸光度。

广东医学院实验报告实验题目肝功能检查（十一项）Liver Function Tests专业：医学检验组别：13 姓名：邓秋妹学号：07203090283实验日期：2010年5月27日—2010年6月10日实验类型：综合性摘要目的: 检测肝功能检查十一项指标，并对检测结果进行评价。

方法: 改良J-G法测血清总胆红素和结合胆红素。

双缩脲法测定血清总蛋白，溴甲酚绿法测定血清清蛋白。

改良赖氏法测定丙氨酸氨基转移酶和天冬氨酸氨基转移酶。

结果：测得的血清TB为5.244μmol/L，血清Bc为0.912μmol/L。

测得的血清总蛋白为48.98g/L,血清清蛋白为23.79g/L 。

测得的血清ALT为33.5卡门氏单位，血清AST为87.99卡门氏单位。

结论：患者胆红素代谢功能紊乱，蛋白质合成功能障碍，肝实质细胞损害很严重，可初步诊断为肝硬化。

AbstractObjective:Test the 11 indicators of liver function,and evaluate the results.Methods:The determination of serum TB and Bc by mod. Jendrassik and Graf’s method.The determination of serum TP by Biure and Alb by bromocresol green method.The determination of ALT and AST by Reitman - Frankel modified method.Results:The serum TB is 5.244μmol/L,and the serum Bc is 0.912μmol/L.The serum TP is 48.98g/L,and the serum Alb is 23.79g/L.The serum ALT is 33.5Carmen's unit and the AST is 87.99 Carmen's unit.Conclusion:The patient has bilirubin metabolic disorders, protein synthesis dysfunction and severe liver cell damage. And the initial diagnosis is cirrhosis.1 材料与方法1.1 材料主要试剂：血清胆红素测定试剂盒（南京建成科技有限公司）；蛋白定量（双缩脲法）试剂盒（南京建成科技有限公司）；白蛋白（溴甲酚绿法）测定试剂盒（南京建成科技有限公司）；谷丙转氨酶测定试剂盒（南京建成科技有限公司）；谷草转氨酶测定试剂盒（南京建成科技有限公司）。