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罗氏全自动免疫组化染色仪特点

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1 / 4下载文档可编辑 目前罗氏独有的SISH技术和北京金菩嘉的FISH技术两者区别如下：

由于FISH方法中的荧光容易淬灭，保存时间短，不利于病理科存档。没有相应的仪器完成全自动检测，对操作人员技术要求高，荧光显微镜价格昂贵；但技术开展较早，有较好的市场声誉。SISH与目前应用的FISH方法对比其结果符合率大于98％；可用仪器全自动完成检测；操作相对简单；不需特殊显微镜；结果可长期保存；将是未来分子病理发展的重点，目前罗氏可提供Her2和EGFR探针，可同时和17号染色体在同一张片子上显色，未来会有TOP2，MIT等各种新的探针提供给临床。

FISH：荧光原位杂交，需用荧光显微镜观察。

SISH：银染原位杂交，可用光学显微镜观察。

 Benchmark XT 仪器介绍

Benchmark XT病理检测系统是罗氏于2008年推出的最新型全自动多功能的组织病理检测系统，具有以下优势：

➢ 运用于免疫组化和原位杂交技术

免疫组织化学技术与原位杂交技术是近年来病理诊断发展先进的检测技术；为临床实现个体化及分子靶向治疗提供有力的支持。

➢ 具备最佳检测性能，包括以下指标：1.高灵敏度2.高特异性检测3.高稳定性4.全液体试剂5.条形码技术6.专利的喷射清洗2 / 4下载文档可编辑 7.多喷头分配器8.专利液体封盖膜技术（LCS）9专利空气涡流混匀技术10.专利Themopad温控技术11.检测方案多样化及个性化（为各厂家最齐全的）12.专利的脱蜡液

1.仪器可以开展哪些新项目？会对学科发展和临床诊断有哪些指导作用？

仪器除了解决常规IHC的工作，还可以进行基因检测ISH，如鼻咽癌和Bukitt’s淋巴瘤的EBER， 宫颈HPV 6和16型检测, 乳腺癌her2/new基因检测等。这些基因检测目前对临床的靶向治疗有指导作用，同时在病人癌前预测方面有价值，值得推广。

2.新的广东省免疫组化收费是多少钱、银染原位杂交收费是多少钱？

新的广东省免疫组化收费，大概是200元左右/项；银染原位杂交收费大概是2200元左右/项。

3.该设备可给医院和科室解决哪些问题？

减少免疫组化染色工作中手工操作带来的误差，使操作程序标准化，缩短实验时间，提高科室工作效率，可满足科室免疫组化质量控制。满足免疫组化需求及分子病理项目的开展，为临床实现个体化及分子靶向药物治疗提供有力的支持。环保的试剂有益于病理技术人员身体健康，降低医院处理废液的成本。

Roche Benchmark XT与Leica Bond-Max对比表

Benchmark XT Bond-Max

仪器级别 全自动多功能组织病理检测系统

实现全自动染色同时，进行IHC，ISH（DNA 和RNA检测）,真正的全全自动IHC与ISH染色机

不能做DNA杂交，不是真正的全自动系统，只是染色机 3 / 4下载文档可编辑 自动病理检测系统

仪器外观 立式机 台式机

切片保护功能 液体封盖膜（LCS）油性保护剂，可防止干片现象；专利空气涡流技术可以防止边缘效应及阶梯效应 Covertile易碎；虹吸作用无法避免染色产生阶梯效应；重复使用易交叉污染；由于清洗无质控，对组织可产生粘附损伤；产生清洗成本；

效率 30张切片位专利独立温控，30个独立控制模块系统，实现单次循环IHC 和ISH （DNA 和RNA检测） 同时完成。IHC和ISH同时运行，能实现多重染色 仅3个独立控制模块系统，只能实现每个独立玻片架（10张）同方案放置运行，空间利用效率低；无法独立温控，只能室温37度做RNA原位杂交，无法做DNA杂交，实验方案有限

单张玻片温度 30张切片位每个位置可以分别设置室温，37度，42度，100度等不同温度 只可以每个抽屉（10个切片一个抽屉）设置一个温度

原位杂交项目 可以应用银染原位杂交方法检测her2(乳腺癌靶向治疗指标)，EGFR(肺癌靶向治疗指标),显色原位杂交法可以检测HPV,EBER,

appa ,Lambda 没有银染原位杂交检测方法，只能用DAB显色方法检HPV和EBER

试剂滴加量 独立的抗体分配器，每次100ul，无浪费液体 单个加样枪头抽吸抗体，每次需有300ul最低保留量，加样100－150

ul，导致试剂浪费，同时可能产生交叉污染

过夜运行能力 LCS保护组织，可隔夜运行，无需另浇灌缓冲液，次天可以得到结果 不能过夜运行，否则需不断加缓冲液浇灌covertile

抗体模块设计 一抗，二抗检测试剂采用独立的试剂模块系统，与切片模块系统分开，试剂不会受到温度的影响从而保证试剂的稳定性 一抗，二抗检测试剂与温度控制模块在一个空间下摆放，试剂会受到加热的影响而降低稳定性。

染色质量 FDA认证的专利ultr viewDAB与RED试剂盒产生卓越的染色效果 不稳定，花片，背景不清楚

机用试剂 4度保存保证抗体质量 抗体也是常温保存？如何保质？

清洁维护 机器可实行自动清洗功能需手工清洗 4 / 4下载文档可编辑 5min/run

标签识别系统 条形码识别系统，机器和人工都可识别 OCR光学识别系统，人工不能识别，系统错误无法识别

浓缩液稀释模式 Ventana/Roche即用型抗体已是最优化浓度，支持全自动染色程序；开放性抗体可用手工滴定个性化程序，100ul/次加样量 机器稀释需保持5ml/瓶最低稀释量，造成浪费

环保设计 环保型EZpre脱蜡液不含二甲苯和酒精；废液中DAB浓度最低，达直接排放标准 常规二甲苯酒精脱蜡造成环境污染；covertile与单个加样枪头可造成DAB二重污染

认证 具有FDA认证和ISO认证 不祥

服务 服务与技术支持体系专业完善，由全球最大的诊断公司罗氏公司提供专业服务，中国服务的工程师和应用人员队伍达150人，覆盖全国所有直辖市和省会城市 可提供服务和技术支持体系，但国内技术人员严重不足，售后体系有待完善

拓展性能 每台电脑最多可同时控制8台Bench mark ，满足实验室发展需求 每台电脑最多可同时控制5台Bond-Max

（学习的目的是增长知识，提高能力，相信一分耕耘一分收获，努力就一定可以获得应有的回报）

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原发于结肠的梭形细胞瘤病理及基因突变特点(附1例分析)

原发于结肠的梭形细胞瘤病理及基因突变特点(附1例分析)

山东医药2021年第61卷第6期

原发于结肠的梭形细胞瘤病理及基因突变特点

（附1例分析）

刘芮菡1，赵娜1，薛金慧1，王宁1，赵志华2，张全武1

1郑州大学附属郑州中心医院，河南郑州450007；2郑州大学第一附属医院

摘要：目的总结原发于结肠的瘤梭形细胞肿瘤的病理及基因突变特点。方法1例原发于结肠的梭形细胞

瘤患者，分析其病理特点，NTRK荧光原位杂交（FISH）法检测基因突变。结果患者病理可见肿瘤细胞侵及黏膜

至浆膜层，无包膜，界不清，肿瘤细胞呈片状或束状排列，血管壁及间质可见玻璃样变性，瘤细胞有疏松区及致密区，

局部水肿；高倍镜可见瘤细胞呈短梭形或卵圆形，胞质丰富弱嗜碱性，细胞核呈多边形或椭圆形，可见核仁及核异型

性。可见组织坏死及钙化灶，偶见细胞核分裂。瘤组织波形蛋白（Vimentin）、钙结合蛋白（S-100）、跨膜唾液酸糖蛋

白（CD34）表达阳性，神经嵴转录因子（SOX-10）表达阴性，Ki-67表达低（约5%）。瘤细胞神经营养性酪氨酸受体激

酶2（NTRK2）基因重排。结论原发于结肠的梭形细胞肿瘤组织可共表达S-100、CD34，细胞为无模式生长结构，伴

血管壁及基质玻璃样变，瘤细胞存在NTRK2基因重排。

关键词：软组织肿瘤；梭形细胞瘤；钙结合蛋白；跨膜唾液酸糖蛋白；S-100及CD34蛋白共表达；神经营养性酪氨酸受体激酶2；基因重排

doi：10.3969/j.issn.1002-266X.2021.06.007

中图分类号：R738.6文献标志码：A文章编号：1002-266X（2021）06-0026-05

Pathologicalcharacteristicsandgenemutationsofspindlecelltumorsoriginatingincolon（onecase

analysis）

LIURuihan1，ZHAONa，XUEJinhui，WANGNing，ZHAOZhihua，ZHANGQuanwu1ZhengzhouCentralHospitalAffiliatedtoZhengzhouUniversity，Zhengzhou450007，China

CK20和ki-67在结直肠锯齿状病变中的表达及临床应用

CK20和ki-67在结直肠锯齿状病变中的表达及临床应用

CK20和ki-67在结直肠锯齿状病变中的表达及临床应用

田卫华;刘杰文;张娟;齐凤杰

【摘 要】目的 探讨CK20和ki-67在结直肠锯齿状病变中的表达水平及临床应用.方法 选取81例锯齿状病变的组织学标本,采用免疫组化方法检测各病变组中的CK20和ki-67的表达水平.结果 以增生性息肉(hyperplastic poly,HP)组分别同和无蒂锯齿状息肉或腺瘤(sessile serrate adenoma/poly,SSA/P)组和传统锯齿状腺瘤(traditional serrated adenoma,TSA)组进行比较,CK20的表达差异均有统计学意义(P<0.05);而SSA/P组和TSA组比较,差异无统计学意义;在ki-67的表达中也有相似的结果,HP分别同SSA/P组和TSA组比较差异均有统计学意义(P<0.05);SSA/P和TSA组比较,差异无统计学意义.结论 CK20和ki-67的免疫组化检测有助于锯齿状病变的诊断及鉴别,特别是形态学诊断有困难的病例.

【期刊名称】《当代医学》

【年(卷),期】2019(025)008

【总页数】3页(P84-86)

【关键词】结直肠锯齿状病变;CK20;ki-67

【作 者】田卫华;刘杰文;张娟;齐凤杰

【作者单位】广东省深圳市罗湖区人民医院病理科,广东 深圳 518001;广东省深圳市罗湖区人民医院病理科,广东 深圳 518001;广东省深圳市罗湖区人民医院病理科,广东 深圳 518001;广东省深圳市罗湖区人民医院病理科,广东 深圳 518001

【正文语种】中 文

大部分结直肠癌来源于腺瘤性的息肉恶变[1]，结直肠锯齿状癌变通路作为传统腺瘤-癌变途径的一个重要补充，对结直肠癌发生发展的研究具有重要意义。结直肠锯齿状病变是一组以上皮增生形成锯齿状结构为特征的疾病，按照最新2010版WHO的分类，这组病变分为：增生性息肉（hyperplastic poly，HP）、无蒂锯齿状息肉或腺瘤（sessile serrate adenoma/poly，SSA/P）、传统锯齿状腺瘤（traditional serrated adenoma，TSA）和锯齿状腺癌（serrated

胃癌PD-L1及c-Met的相关性研究及临床意义

胃癌PD-L1及c-Met的相关性研究及临床意义

诊断病理学杂志2022年5月第29卷第5期• 395 •

doi

：10.3969/j

.issn

. 1007-8096. 2022. 05.003

胃癌

PD-

L1及

c-Met的相关性研究及临床意义*

陈瑚，黄建平，冯昌银，杨映红

(福建医科大学附属协和医院病理科

/福建医科大学消化道肿瘤研究所，福州

35_)

[摘要

]目的探讨胃癌组织中程序性死亡配体

-l(PD-Ll)及间充质

-上皮转化因子（

c-Met)临床病理特征、预后

意义及二者相关性。方法收集我院

2014年临床资料完整的病例共

208例。应用免疫组织化学的方法检测胃癌

组织中

PD-L1及

c-Met的表达，分析其与临床病理特征之间的关系以及二者之间的相关性。结果胃癌组织中

PD-L1-TPS阳性率为

14. 9%, PD-L1 - CPS阳性率为

37. 0%,女性中

PD-L1 - TPS阳性率（

25. 5%)高于男性

(11.1%),差异具有统计学意义

(P<〇

. 05)。

c-Met高表达率为

37. 5%,脉管瘤栓阳性组（

47. 1%)高表达率高于脉

管瘤栓阴性组（

34. 7%),c-Met高表达患者的

5年总生存率低于

c-Met低表达者

,分别为

42. 5%及

64. 6%,差异有统

计学意义（

P<〇

.〇

5)。胃癌组织中

PD-L1及

c-Met的表达存在正相关（

P<0.05)。结论

c-Met与

PD-L1在胃癌中

表达，其中

c-Met与脉管瘤栓及预后差相关。胃癌组织中

PD-L1及

c-Met的表达存在相关性,这为未来胃癌免疫治

疗联合靶向治疗提供依据。

[关键词

]胃腺癌；

PD-L1; c-Met;临床病理特征；生存预后

[中图分类号

]R735 [文献标识码

]A [文章编号

]1007-8096(2022) 05-0395-06

Correlation of PD-L1 and c-Met in gastric cancer and their clinical significance

免疫组化染色原理

免疫组化染色原理

免疫组化染⾊原理

⼀、项⽬介绍

免疫组织化学IHC。

肿瘤⼀般流程，做HE常规染⾊，确认后进⾏针对性IHC检测分析。

不同项⽬的染⾊位置不同，分为：核染，膜染和浆染。

⼆、乳腺癌案例

三种成因，对应三种检测对象：1.Her2，可采⽤罗⽒靶向治疗药物赫塞丁针对性治疗。

2.ER，主要因激素等原因导致的乳腺癌，术后通过调节内分泌有效治疗⽅法。

3.PR，主要因激素等原因导致的乳腺癌，术后通过调节内分泌有效治疗⽅法。

4. 三阴，以上三种测试结果均为阴性的肿瘤，原因不详，可能与转移有关，严重程度⾼。

三、检测流程1. 术后标本⾸先通过甲醛浸泡脱⽔，两⽅⾯：

1.1 防⽌细菌滋⽣使标本腐烂

1.2 防⽌组织细胞内酶渗透出细胞壁，破坏细胞形态。

2. 包埋，将标本⽤蜡包埋，便于保存和切割。

3. 切⽚，将组织切⽚，2~3微⽶，⽤于测试。

3.1 切⽚机包含⼿动和⾃动，⼿动切⽚机内部通过钢丝绕线，⼿动转动过程进⾏拉伸。提供2~5微⽶调节旋钮。

3.2 ⾃动切⽚机，原理不详，不排除齿轮⽅案。只提供特定厚度切换。

4. 上机脱蜡，由于蜡侵⼊组织，反应试剂⽆法进⼊，因此必须先脱蜡后才能反应。

4.1 设置温度80度。

4.2 4分钟清洗⼀次，清洗过程为：加-吹-加。

4.3 由于溶解蜡的液体性能⼀般，需要多次清洗。

5. 抗原修复，甲醛固定时会将位点粘连，导致⽆法与⼀抗结合，因此需要将位点打开，使⽤抗原修复液⾼温修复。

5.1 ⾼压锅⽅案温度达到121度左右，⼿⼯常规⽅式。

5.2 ⼀般采⽤三种⽅式修复：化学⽅法，微波⽅法和加热⽅法。设备采⽤化学（抗原修复液和加热组合⽅式）

5.3 上机95摄⽒度⽅案同121度⽅案偏差不⼤。

5.4 ⼲⽚问题，如果出现⼲⽚，容易导致组织皱缩，影响最后的组织观察。

5.5 ER种类包括三种：PBS（缓冲液，ph7，磷酸盐成分，容易结晶且难以去除，可使⽤84消毒液或冰⼄酸溶解，容易使长菌，5天左右可出现蓝-藻类、深⾊半点-霉菌）、CBS（ER1，ph6）、EDTA（ER2，ph9）6. 添加ER过程中需要补液，由于抗原修复液中含有⽔和特殊物质，⽔沸点低，补液过程特殊物质浓度逐渐增加且残留在玻⽚上，因此需要pbs进⾏单独清洗。