畜禽饲料可消化氨基酸测定及应用中的问题

２． Ｄａｃｈａｎ Ｇｒｅａｔ Ｗａｌｌ Ｎｏｒｔｈｅａｓｔ Ａｓｉａ Ｃｏ． Ｌｔｄ， Ｂｅｉｊｉｎｇ １００００５， Ｃｈｉｎａ）
Ａ ｂｓｔｒａｃｔ： Ｔｈｅ ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ ｔｈｅ ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌ ｄｉｅｔａｒｙ ｚｉｎｃ ｏｘｉｄｅ ｏｎ ｄｉａｒｒｈｅａ， ｇｒｏｗｔｈ ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅ， ｄｉｇｅｓｔｉｂｉｌｉｔｙ ｏｆ ｎｕｔｒｉｅｎｔｓ， ａｎｄ ｅｎｚｙｍｅｓ ｏｆ ｇａｓｔｒｏｉｎｔｅｓｔｉｎａｌ ｉｎ ｎｅｗｌｙ ｗｅａｎｅｄ ｐｉｇｌｅｔｓ ｗｅｒｅ ｒｅｖｉｅｗｅｄ， ａｎｄ ｔｈｅ ｐｒｏｂａｂｌｅ ｍｅｃｈａｎｉｓｍ ｗａｓ ｉｎｔｒｏｄｕｃｅｄ ａｎｄ ｓｕｇｇｅｓｔｅｄ ｈｅｒｅ． Ｋ ｅｙ ｗ ｏｒｄｓ：ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌ； ｚｉｎｃ ｏｘｉｄｅ； ａ ｒｅｖｉｅｗ； ｗｅａｎｅｄ ｐｉｇｌｅｔｓ
回－ 直肠吻合法也还有一些悬而未解决的问题。比 如吻合部位和有无回盲瓣对氨基酸消化率测定的影响 有多大， 目前关于这方面的报道结论不一， 但是趋向使 用 瓣 前 端 端 吻 合 术［４］。Ｇｒｅｅｎ［５］报 道 保 留 回 盲 瓣 与 否 都 不 影响氨基酸消化率的测定； Ｈｅｎｎｉｎｇ 等［６］比较瓣后端侧 吻合术和瓣后端端吻合术， 发现二者对氨基酸吸收情 况有影响， 但差异不具有实际意义。由于游离了大肠， 使大肠的功能受到破坏， 有可能影响小肠或直肠中的 养分和电解质的消化和吸收， 使术后不同时间对氨基 酸的消化率有影响［７］。但张宏福等［８］的研究表明， 术后时 间对氨基酸消化率的测定基本稳定。为了弥补因游离 大肠而造成的对水盐代谢的不利影响， 电解质补充方
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Ｅ ｆｆｅｃｔｓ ｏｆＰ ｈａｒｍ ａｃｏｌｏｇｉｃａｌＺ ｉｎｃ Ｏ ｘｉｄｅ ｏｎ Ｗ ｅａｎｌｉｎｇ ｐｉｇｌｅｔｓ
ＭＡ Ｘｕｅ－ ｈБайду номын сангаасｉ１， ＦＥＮＧ Ｚｉ－ ｋｅ２， ＴＯＮＧ Ｊｕｎ１ （１．Ｃｏｌｌｅｇｅ ｏｆ Ｚｈｏｎｇｓｈｏｕｙｉ， Ｈｅｂｅｉ Ａｇｒｉｃｕｌｔｒｕａｌ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ， Ｈｅｂｅｉ Ｄｉｎｇｚｈｏｕ ０７３０００， Ｃｈｉｎａ；
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算氨基酸的消化率， 误差较大； 收粪费工费时， 瘘管易 脱落， 所测日粮受限制， 容易出错等不足。为克服这些 不 足 ， Ｆｕｌｌｅｒ 等［３］首 次 提 出 通 过 外 科 手 术 作 回－ 直 肠 吻 合， 回－ 直肠吻合法不必用指示剂就能收到足够的、有 代表性的排泄物， 荷术猪恢复较快， 日粮类型不受限 制， 克服了回肠末端瘘管法的不足， 这种方法已经在世 界范围内得到公认和应用， 是评定猪饲料氨基酸生物 学效价的最适宜方法。
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Ｒ ｅｖｉｅｗ Ｐ ａｐｅｒｓ·综 述
畜禽饲料可消化氨基酸测定及应用中的问题
王康宁， 贾 刚 （ 四川农业大学动物营养研究所， 四川雅安 ６２５０１４）
摘 要： 围绕猪、禽氨基酸消化率评定方法、内源氨基酸的测定、可消化氨基酸的应用方面 进行了综 述 ， 并 就 方 法 学
方面的相关争议点以及近年来国内外研究进展进行了探讨。
关键词： 可消化氨基酸； 饲料； 综述； 畜禽
中图分类号： Ｓ８１６
文献标识码： Ａ
文章编号： ０２５８－７０３３（２００７）０９－００４７－０４
畜禽可消化氨基酸营养体系的采用是必然的趋 势。但有关可消化氨基酸测定方法的复杂与不统一， 以 及理论和技术的局限， 导致其测定值有时变异较大， 从 而给新体系的采用带来困难。为了使可消化氨基酸营 养体系尽早为我国畜禽饲养标准所采用， 本文拟就有 关猪禽饲料氨基酸消化率测定及应用的有关问题作一 探讨。
２ 内源氨基酸的测定
氨基酸的真消化率一般是从表观消化率经内源氨 基酸矫正而获得。内源 ＡＡ 的测定主要采用的是无氮 日 粮 法 、梯 度 回 归 法 及 饥 饿 法 。由 于 这 些 方 法 使 动 物 处 于非正常生理情况下， 能否反映进食正常含氮日粮时 的 情 况 至 今 是 一 个 未 能 彻 底 解 决 的 问 题［１０］。 ２．１ 绝食法 绝食法目前主要应用于家禽。由于该方 法使动物处于非正常生理状态， 缺乏蛋白质、多肽对分 泌细胞的刺激， 以及常规日粮成分对消化道的磨损， 加 上内源物质重吸收增加， 使得该方法的测定值明显偏 低， 不能代表动物在采食正常日粮条件下的内源的排 泄情况。而大动物由于食糜排空时间长， 饥饿状态时可 数天不排粪， 无法收集内源排泄物。 ２．２ 无 氮 日 粮 法（ ＮＦＤ） 无 氮 日 粮 法 可 考 虑 日 粮 纤 维和干物质进食量对内源排泄的影响， 其测定的内源 排泄量比饥饿法高， 但该方法仍未对蛋白质、氨基酸摄 入量对内源排泄的影响进行考虑。动物采食无氮日粮 后， 胰腺分泌的消化酶、淀粉酶和脂肪酶减少， 肠道分 泌的蛋白总量也减少； 在引起大多数内源氨基酸分泌 量减少的同时导致个别氨基酸的重吸收排泄量增加， 而且， 无氮日粮的组成也会影响内源氨基酸的排泄。 ２．３ 蛋 白 质 梯 度 回 归 法（ ＲＥＧ） 该 方 法 可 以 评 价 不
此法不足在于内源物中含有相当部分的氨基酸、 小肽、氨等小分子量物质， 以分子量大于 １０ ０００ ｕ 为内 源理论依据不充分。酶解酪蛋白法另一个严重不足是 该方法没有考虑日粮因素 （ 如日粮成分和高水平的抗 营养因子等） 对内源氮损失的影响， 而以动物采食酪蛋 白条件下的内源损失代表动物采食正常日粮条件下的 内源损失。 ２．８ 差 量 法 根 据 动 物 内 源 氨 基 酸 的 排 泄 规 律 存 在 随着日粮蛋白的升高而升高， 并在达到一定阈值后出 现一平台的情况， 李斌等［１７］和王国兴等［１８］将测定反刍动 物磷真可利用率的原理移植到氨基酸真消化率和内源 氨基酸的测定上。通过测定内源代谢平台期内， 动物在 相邻的高低蛋白水平下食入氨基酸之差和排泄氨基酸 之差， 计算多摄入氨基酸的真消化率为各氨基酸的真 消化率， 进而得到各氨基酸的内源排泄量。除蛋氨酸 外， 用差量法得到的内源氨基酸的排泄量均略高于无 氮日粮法和回归法的测定结果（ １０％￣１５％） 。各日粮蛋 白质水平下的内源氨基酸排泄量随蛋白质水平的升高 而呈曲线上升， 并在蛋白水平达 １０％以后趋于恒定。并 且该方法可以直接测定每种氨基酸的内源排泄情况， 勿须依赖于无氮日粮法的内源氨基酸模式。同时此法 也证明无氮日粮法和梯度回归法测得的内源氮和氨基 酸是接近或近似欲进食正常日粮时的情况。但由于差 量法测定氨基酸真消化率实质上反映的是多食入部分 的氨基酸消化率， 其分子和分母项很小， 很容易引入或 扩大误差， 所以设定范围不宜太小， 建议粗蛋白水平以 相差 ５￣６ 个百分点为宜。
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２．７ 酶 解 酪 蛋 白 法 该 方 法 通 过 分 子 量 的 大 小 区 分 内 、外 源 组 分 。酶 解 酪 蛋 白 法 的 最 大 优 点 是 可 以 在 动 物 处于正常的生理状态下直接测定所有氨基酸的内源排 泄量。与无氮日粮相比， 该方法避免了由于日粮蛋白质 缺乏而导致的消化性分泌减少， 对动物采食平衡日粮 时的内源氮损失的估计可能更准确。
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案的确定十分重要。 １．２ 盲肠切除与否 Ｋｅｓｓｌｅｒ 等［９］认 为 家 禽 肠 道 短 ， 除 盲肠外， 后肠其他肠段微生物对 ＡＡ 消化率测定的影 响很小， 从而提出切除盲肠的方法。目前研究发现， 可 消化性高和质量好的蛋白质受盲肠微生物的影响较 小， 而消化性低、质量差的蛋白质受盲肠微生物影响较 大。Ｇｒｅｅｎ［５］的研究表明 ， 去盲肠可以 减 少 微 生 物 的 影 响， 对大多数饲料而言， 去盲肠与未去盲肠鸡的氨基 酸， 真可利用率无显著差异。鉴于对是否切除盲肠存在 着争议，建议重要的是统一方法。 １．３ 氨 基 酸 消 化 率 测 定 的 日 粮 配 制 由 于 饲 料 氨 基 酸消化率主要受蛋白质水平、纤维性质和纤维水平的 影响， 在试验日粮的配制中一般是将高蛋白日粮用淀 粉稀释至 １６％， 但对于低蛋白日粮目前还没有理想处 理办法。纤维水平也没有统一的规定， 一般可将粗纤维 控 制 在 ３％￣５％水 平，但 对 于 纤 维 高 的 饲 料 ， 目 前 也 无 理想的解决办法。至于各种必需矿物元素和维生素， 可 根据营养需要标准， 如按 ＮＲＣ 标准正常添加。如果需 要能量也尽可能一致， 可添加油脂。
同品质、种类的蛋白质对内源氮排泄的影响， 通常被认 为 要 比 无 氮 日 粮 法 优 越 。但 大 量 的 研 究 结 果［１１］却 表 明 ， 回归法测得的内源氨基酸的排泄量与无氮日粮法之间 无显著差异。而且用回归法获得的内源排泄数据具有 更大的变异 （ ０．８９￣３．４４ ｇＮ／ｋｇ ＤＭＩ） 。而且此法假定内 源 ＡＡ 排泄量为恒定值， 仍受到一定质疑。 ２．４ 合 成 氨 基 酸 法 与 无 氮 日 粮 法 加 氨 基 酸 静 脉 灌 注 法 Ｓｋｌｌｔｏｎ 等［１２］和 Ｂｕｔｔｓ 等［１３］采用添加有合成氨基酸的 半纯合日粮， 测定了大鼠和猪的内源氨基酸的排泄量。 Ｌｅｔｅｒｍｅ 等［１４］采 用 了 无 氮 日 粮 加 氨 基 酸 静 脉 灌 注 测 定 了猪的内源氨基酸排泄量。结果表明， 除脯氨酸和甘氨 酸的排泄量显著低于无氮日粮法外， 大多数氨基酸的 内源排泄量与无氮日粮法的测定值之间没有显著的差 异。Ｍｏｕｇｈａｎ 等［１５］认为， 如果动物采食完整蛋白时的内 源氨基酸排泄量确实高于无氮条件， 这种差异只可能 是由蛋白质的分解产物氨基酸和肽所引起。 ２．５ 同 位 素 稀 释 法 同 位 素 稀 释 法 是 目 前 认 为 最 具 有潜力的方法。该方法可分为标记动物和标记日粮 ２ 种类型。标记日粮法只能用于可有效标记的蛋白源， 而 且吸收的标记氨基酸能迅速地重新分泌进入肠腔。因 此， 标记动物认为是更理想的方法。标记动物法可以测 定动物在采食正常日粮条件下的内源氨基酸排泄， 同 时可以通过标记物 Ｎ１５ 亮氨酸的转氨基作用， 标记其 他氨基酸， 进而直接测定其他氨基酸的内源排泄量。由 于氨基酸的再循环十分迅速， 人们对血清 ＴＣＡ（ 三氯醋 酸） 可溶部分是否存在着 Ｎ１５ 富集的稳定态存在 着质 疑。而另一方面， 内源氮不仅来自于血浆， 肠黏膜和后 肠微生物对内源氮都有一定的贡献， 采用不同的前体 得到的结果相去甚远。同时这种方法无法计量那些直 接利用饲料来源氨基酸合成内源氮排泄到肠腔中的部 分， 因此， 此法仍有待完善。 ２．６ 同型精氨酸法（ ＨＡ） 该方法通过将日粮中的 赖 氨酸转变为同型精氨酸， 转化后的赖氨酸不能参与机 体蛋白质的合成， 因而不可能出现在内源排泄物中， 藉 以区分日粮来源和内源排泄的氨基酸。此法虽可测定 动物采食正常日粮条件下内源氨基酸的排泄量， 但却 只能直接测定内源赖氨酸的损失量。Ｍａｒｔｙ 等［１６］根据前 人采用无氮日粮法获得的内源氨基酸模式间接确定了 除赖氨酸以外其他氨基酸的内源排泄量。同型精氨酸 法不足之处是日粮中的赖氨酸不能完全转变为同型精 氨酸， 家禽由于体内缺乏将同型精氨酸转变为赖氨酸 的酶， 从而限制了该方法在家禽上的使用。