下载文档原格式
药用植物车前内生真菌分离及其抑菌活性初步分析毕江涛;何萍;王小霞;王静;关晓庆【期刊名称】《世界科学技术：中医药现代化》【年(卷),期】2013(015)003【摘要】目的：研究药用植物车前可培养内生真菌多样性及其抑菌活性特征。
方法：通过组织块法对内生真菌进行分离,并选择小麦全蚀病菌、枸杞黑果病菌、番茄灰霉病菌、黄瓜枯萎病菌和黄瓜立枯病菌5种植物病原真菌和枯草芽孢杆菌、大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和铜绿假单胞菌4种细菌作为指示菌,采用对峙法和改进的菌块法测定抑菌活性。
结果：从车前根茎叶组织器官中分离出13株内生真菌,以茎部最多,叶部次之,根部最少;经形态学初步分类鉴定归于2个目,2个科,5个属;其中有11株菌对1种或多种植物病原真菌指示菌有不同程度的抑制作用,占菌株总数的84.6%,6株内生真菌对1种或多种供试细菌指示菌具有不同程度的抑制作用,占分离菌株总数的46.2%;3株活性菌株PAEFS001、PAEFS007、PAEFS008分别对5种供试植物病原真菌指示菌具有明显抑制作用,菌株PAEFS001属于束丝菌属,菌株PAEFS007和PAEFS008同属于曲霉属;1株活性菌株PAEFS003分别对枯草芽孢杆菌和金黄色葡萄球菌2种供试细菌指示菌有明显的抑制作用,属于梭孢霉属;药用植物车前内生真菌具有明显的抑菌活性,抑制植物病原真菌的范围较宽,对革兰氏阳性菌枯草芽孢杆菌和金黄色葡萄球菌的抑制作用明显,具有一定的选择性。
结论：从药用植物车前内生真菌寻找新的抑菌活性物质是可行的,通过对其进行开发和利用,对提高药用植物车前的综合利用价值具有重要意义。
【总页数】7页(P520-526)【作者】毕江涛;何萍;王小霞;王静;关晓庆【作者单位】【正文语种】中文【中图分类】Q93【相关文献】1.车前草内生真菌的分离及抑菌活性测定 [J], 柴明艳2.药用植物柽柳内生真菌分离及其抑菌活性初步研究 [J], 毕江涛;马萍;杨志伟;关晓庆3.秦岭药用植物防风内生真菌的分离鉴定及抑菌活性研究 [J], 张影珍;马养民;王鹏飞;田从丽4.药用植物车前内生真菌分离及其抑菌活性初步分析＊ [J],5.濒危药用植物南方山荷叶内生真菌分离及其抑菌活性初步研究 [J], 毕江涛;潘润霞;王静;代金霞;贺达汉因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
三种药用植物内生真菌抗真菌活性的研究李治滢;李绍兰;周斌;杨丽源;陈有为【期刊名称】《微生物学杂志》【年(卷),期】2004(24)6【摘要】从雪上一枝蒿(Aconitum brachypodum)、刺五加(Acanthopanax senticosus)和大血藤(Sargentodaxa cuneata)分离获得的162株内生真菌进行抗真菌活性检测,结果具有抗菌活性菌株有74株,雪上一枝蒿15株,刺五加23株,大血藤36株,分别占3种植物各自内生真菌的44.12%,48.94%和44.44%.将具有抗菌活性的菌株进行分类鉴定,分属于6目、7科、23属.【总页数】4页(P35-37,46)【作者】李治滢;李绍兰;周斌;杨丽源;陈有为【作者单位】云南大学微生物研究所,国家教育部微生物资源开放研究重点实验室,云南,昆明,650091;云南大学微生物研究所,国家教育部微生物资源开放研究重点实验室,云南,昆明,650091;云南大学微生物研究所,国家教育部微生物资源开放研究重点实验室,云南,昆明,650091;云南大学微生物研究所,国家教育部微生物资源开放研究重点实验室,云南,昆明,650091;云南大学微生物研究所,国家教育部微生物资源开放研究重点实验室,云南,昆明,650091【正文语种】中文【中图分类】Q939.5【相关文献】1.老瓜头耐盐内生真菌抗真菌活性筛选研究 [J], 刘悦;段海婧;刘成;吴秀丽;陈靖2.两株油樟内生真菌抗真菌活性与降解纤维素研究 [J], 游玲;王涛;王松;杜江3.三种药用植物内生真菌抗菌活性菌株的筛选 [J], 黄银芳;范志英;章方珺;刘幸;姚韶莹;王丽薇4.几种药用植物内生真菌抗真菌活性的初步研究 [J], 李桂玲;王建锋;黄耀坚;郑忠辉;苏文金5.药用植物中具有抗真菌活性的内生真菌及其次级代谢产物的研究 [J], 武艳霜;陆悦;朱作斌;陈莹;李颖因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
药用植物内生真菌研究现状及其应用前景发表时间：2018-11-07T14:26:43.093Z 来源：《中国误诊学杂志》2018年第26期作者：代娇朱卫波代雨通讯作者[导读] 简要综述了近年来在内生真菌的分离鉴定、发酵、次生代谢产物、与宿主的关系等方面的研究进展。
曲靖医学高等专科学校云南曲靖 655000摘要：随着对药用植物内生真菌研究的深入，从药用植物内生真菌中寻找新的生物活性成分已成为研究热点。
内生真菌对药用植物的生长及活性成分的形成都有影响，内生真菌活性成分已成为发现新颖结构化合物及新药物的潜在资源。
简要综述了近年来在内生真菌的分离鉴定、发酵、次生代谢产物、与宿主的关系等方面的研究进展。
关键词：内生真菌；分离鉴定；发酵；代谢产物；药用价值1 药用植物内生真菌研究现状内生真菌（endophytic fungi）是指生活在健康植物的各种组织和器官内部的真菌，被感染的植物不表现明显的外在病症，可通过组织学方法、从严格表面消毒的植物组织中分离的方法，以及从植物组织内直接扩增微生物 DNA 的方法来证明其内生性。
内生真菌不但可以自身合成药物活性成分，还具有促进宿主植物合成活性成分的能力[1]。
药用植物内生真菌代谢产物的多样性和新颖性，将为利用其进行工业发酵，生产新型活性化合物开辟新的途径。
2 药用植物内生真菌的多样性内生真菌的分离培养是菌株鉴定及其活性物质研究的基础。
由于环境的改变，内生真菌的生长及次生代谢产物的数量、种类等都会受到影响[2]。
通过形态学观察和繁琐的生理生化实验，以及分子生物学鉴定方法进行分类鉴定。
3 内生真菌的次生代谢产物及生物活性3.1抗肿瘤活性物质某些抗肿瘤药用植物中部分内生真菌能够产生与宿主相同或相似的生理活性成分，已有不少学者从具有抗肿瘤作用的药用植物中寻找能产生抗肿瘤成分的内生真菌，并从中发现了一些具有潜在应用前景的抗肿瘤化合物。
1993 年 Stierle 等[11]首次从短叶红豆杉（Taxus brevifolio）的韧皮部分离到一株能产紫杉醇的内生真菌，随后许多学者从不同种红豆杉中也分离得到产紫杉醇的内生真菌。
三种药用植物内生真菌抗菌活性菌株的筛选黄银芳;范志英;章方珺;刘幸;姚韶莹;王丽薇【摘要】目的筛选具有抗多种植物病原真菌活性的药用植物内生真菌菌株.方法以常见的植物病原真菌包括灰葡萄孢( Botrytis cinerea)、尖孢镰孢(Fusarium oxysporum)、终极腐霉(Pythium ultimum)与立枯丝核菌(Rhizoctonia solani)菌株为指示菌,对分离自天南星、多花黄精、银杏三种药用植物的73株内生真菌菌株进行抗菌活性筛选.结果共有20株菌株对至少一种指示菌有抑制活性,占总菌株数的27.4％;其中天南星内生真菌ZJCWF006茎点霉Phoma sp.、多花黄精内生真菌ZJCY610变灰青霉Penicillium canescens与银杏内生真菌TMSFI69团青霉Penicillium commune对四种指示菌均有较强抑制活性.结论药用植物内生真菌对植物病原菌有较高抑制活性.【期刊名称】《健康研究》【年(卷),期】2012(032)002【总页数】5页(P94-96,102,封2)【关键词】药用植物;内生真菌;抗菌活性【作者】黄银芳;范志英;章方珺;刘幸;姚韶莹;王丽薇【作者单位】杭州师范大学健康管理学院药学教研室,浙江杭州310036;杭州师范大学健康管理学院药学教研室,浙江杭州310036;杭州师范大学健康管理学院药学教研室,浙江杭州310036;杭州师范大学健康管理学院药学教研室,浙江杭州310036;杭州师范大学健康管理学院药学教研室,浙江杭州310036;杭州师范大学健康管理学院药学教研室,浙江杭州310036【正文语种】中文【中图分类】R284植物内生菌几乎存在于所有目前己研究过的植物内部组织中，由于内生真菌生境的特殊性，其次生代谢产物非常丰富［1］。
自从1993年Stierle等［2］从短叶红豆杉Taxus brevifolia中分离到一株产紫杉醇的内生真菌Taxomyces andreanae 以来，已经从不同植物的内生真菌中分离到多种结构新颖的化合物，这些物质具有多种生物活性，如抗肿瘤［3］、抗菌［4］、免疫抑制［5］、抗氧化［6］等活性。
乌头枯萎病乌头枯萎病是人们常说的乌头病，是一种由真菌引起的植物病害。
这种病害主要发生在乌头属植物上，如白头翁、麻黄乌头、四川乌头等，以芦荟、黄芩、板蓝根、石菖蒲等药用植物也都易感染。
1.病害症状乌头枯萎病主要表现为乌头植株叶子早衰、枯萎、黄化、甚至全株死亡。
病害初期，病叶色泽变浅，叶片边缘向内卷曲，这是由于叶水分的流失所引起的；其次，病叶呈现干枯、黄色、无光泽，甚至发生脱落；持续发展，就会出现植株整体发黄，叶片失去正常活力，向内卷曲，甚至不利于光合作用。
最后，植株变弱，叶子枯黄，若遇上高温、干旱等外界不利因素，会加速其死亡过程。
2.病害影响乌头枯萎病对于乌头属植物的生长和发展有着非常明显的影响，给种植业和药用业都带来极大的损失。
乌头植株在受到感染后，容易出现萎缩、枯死，导致产量下降，甚至无法收获。
通过观察发现，乌头枯萎病往往在潮湿的季节以及多雨的地区大量繁殖，给农民们带来很大的经济损失。
3.危害原因乌头枯萎病的危害源头是由真菌形成的。
麦角菌属（Ergot）的真菌往往寄生在植株内部，一旦发现开始枯萎、衰败或是花粉、孢子飘出，就说明植株已经感染上乌头枯萎病。
这种麦角菌属的真菌，因生长所败，往往借助风、雨和虫传播，从一处植株传到另一处植株，它们会寄生在植株的各个部位，比如根、茎、叶片、花序等处。
4.防治措施防止乌头枯萎病的最好措施是药物防治，选择性较广的药品包括三氯杀脲、金霉素、多菌灵等药剂，能够有效地防治乌头枯萎病，还可以有效地防止其他真菌类疾病的发生。
此外，还可以采用重修、轮种、间作，多方面加强植株的抗病能力，适量灌溉以保持土壤湿润，增加养分供给，调节植物生长状况，并在病害流行期间加强病害监测，及时发现并处理病株。
通过加强对乌头枯萎病的研究和防治，保护农业，提高产量，也为人们提供了更为健康、安全、优质的药材素材。
高寒草地植物内生真菌多样性及其抑菌活性初步研究高寒草地是指海拔较高、气温低于0℃ 的草原生态系统，主要分布在世界各地的高山地区。
它具有丰富的植物种类和独特的生态环境，为维持生态平衡和保护生物多样性起着重要作用。
然而，高寒草地内生真菌多样性及其抑菌活性的研究仍然相对有限。
在近年来的研究中，通过采集高寒草地中的植物样本，并利用分子生物学技术对其中的内生真菌进行分析，发现了丰富的内生真菌多样性。
这些内生真菌以寄生或共生的方式生活在植物根际内，与植物形成共生关系，对植物的生长和发育起着重要的调控作用。
然而，高寒草地内生真菌多样性的研究仍然相对不足，还有待进一步深入。
最近的一项研究对高寒草地内生真菌进行了初步的抑菌活性研究。
该研究选择了一些典型高寒草地植物，包括翅果莎草、冬红果和细叶露珠草等植物，采集它们的根际土壤样本，并从中分离出内生真菌。
通过对分离出的内生真菌进行培养和筛选，研究人员发现了具有一定抑菌活性的内生真菌。
进一步的研究表明，这些内生真菌对一些常见的病原菌具有显著的抑制作用。
通过接种实验，研究人员发现，这些内生真菌能够明显抑制大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和枯草芽孢杆菌等常见病原菌的生长。
进一步的分析发现，这些内生真菌可能通过产生一些特定的代谢产物来抑制病原菌的生长。
此外，研究人员还对这些抑菌活性物质进行了初步的分离和鉴定。
通过色谱和质谱分析等技术，研究人员鉴定出了其中一种具有较强抗菌活性的化合物，并将其命名为高寒抑菌素。
初步的抗菌机制研究表明，高寒抑菌素可能通过破坏病原菌的细胞壁结构，从而引起其死亡。
总结起来，高寒草地植物内生真菌的多样性及其抑菌活性是一个值得深入研究的方向。
这些内生真菌对高寒草地植物的生长和发育具有重要的调控作用，同时也可能成为发展新型抗菌剂的重要资源。
更深入的研究可以进一步揭示高寒草地植物与内生真菌的互作机制，并发掘更多具有抑菌活性的化合物，为抗菌药物的开发提供新的思路和方向综上所述，高寒草地植物内生真菌具有多样性，并且表现出显著的抑菌活性。
从柏科植物中分离具有抗肿瘤、抗真菌、抗菌活性的内生真菌摘要最近的研究可以看出柏科植物体内分离的内生真菌的生物勘探情况。
本篇文章主要探讨健康寄主植物如柏木属、杉属、侧柏属体内高活性的内生真菌菌种。
本文中，内生链格孢菌、链格孢菌、链格孢属是从健康的桧柏球体内分离出的。
内生真菌生物活性和生物多样性的恢复是一个生物地理学和主机标识。
我们同样研究了链格孢菌的代谢产物，突出了他们的抗增殖、抑制生长的能力以及对稻瘟、梨火疫病菌和丁香假单胞菌等模型目标菌的抗菌活性。
总之，自从链格孢菌被发现，它们总是作为致病性和致敏真菌被报道，我们的研究表明了它们在桧柏植物叶面组织的一个可能的其它生态位。
此外，在这项研究中，我们还报道了柏科植物家族之间内生链格孢属的显著的生物活性。
引言目前正在对从许多寄主植物中分离物种的生物多样性和植物内生菌的生物活性进行调查。
最近的研究强调，柏科植物中寄宿了许多种类的内生菌。
我们的研究进一步表明，柏科植物内生菌具有一定宽度范围的生物活性。
例如，抗真菌、抗细菌和抗增殖活动。
在最近几年，已经常证明寄主植物的内生菌可以产生与寄主植物相同的生物活性分子。
柏科植物家族的物种广泛被用于药材中。
因此，由桧柏球植株体内的内生微生物生产的代谢产物的生物活性可能与植物本身的代谢产物生物活性类似。
因此，一些药物发现的项目表明，可以利用柏科植物体内的一些内生真菌来生物合成抗癌因子。
因此，研究柏科植物中内生真菌的定植可能会发现除真菌多样性之外的其他生物活性分子来源。
链格孢属的真菌（座囊菌纲、子囊菌门）广泛分布在植物，土壤，食品，环境和室内空气中。
链格孢属物种作为植物病原菌、弱兼性寄生菌、腐生菌以及内生菌已经适应了各种各样的生活方式。
特别是在免疫功能低下的人群中一些链格孢属菌已成为人体的病原体，它们是人类常见的过敏原。
其中哮喘，暗色丝孢霉病，灰指甲，鼻窦炎，溃疡皮肤感染，角膜炎，内脏感染骨髓炎都是由链格孢属真菌引起的，其中链格孢是最常见的一种。
几种药用植物内生真菌的分离鉴定及菌丝培养特性研究植物内生菌是一类生活在植物体中的寄生菌,由于其生活环境的特殊性,植物内生菌与宿主植物协同进化,在演化过程中二者形成了一种共生关系。
近年来的研究表明,植物内生菌不仅具有杀虫、抗菌、抗肿瘤、抗病毒、抗氧化等活性,还能够产生促植物生长的物质,如植物生长素、细胞激动素以及赤霉素等能够直接促进植物的生长。
这使得植物内生菌成为人们寻找新型拮抗菌、抗肿瘤药物的重要资源。
本研究主要是以药用植物为分离材料,分离并筛选具有抗菌活性的植物内生菌并测定其拮抗效果,对活性菌株进行形态及分子生物学鉴定,以及对白屈菜内生真菌BY-1的生长条件进行优化。
论文主要得到的实验结果如下：①采用组织块表面消毒方法,从白屈菜、土三七、毛茛等7种药用植物中分离出了27株可在体外培养的植物内生真菌。
②对分离得到的内生真菌进行平板初筛和拮抗性复筛,结果显示14株内生真菌对杨树叶枯病原菌有不同程度的拮抗效果。
其中白屈菜内生真菌BY-1、土三七内生真菌TJ-2和毛莨内生真菌MY-1对杨树叶枯病原菌的抑制效果非常显著,菌丝生长抑制率可达50%。
除此之外,白屈菜内生真菌BY-1、土三七内生真菌TJ-2和毛莨内生真菌MY-1的孢子悬浮液和发酵液对杨树叶枯病原菌也有较好的的抑制作用。
③通过形态培养,显微观察和18S rDNA序列测定结果表明,TJ-2与Fusarium sp同源性为在99%以上,参考形态学及显微特征,将土三七内生真菌TJ-2鉴定为镰孢霉属(Fusarium), Fusarium sp的一个菌株。
MY-1MJ-1、LJ-3与Bionectria ochroleuca同源性最高,为其不同菌株,同源性均在99%以上,因而将毛莨内生真菌MY-1、MJ-1,连钱草内生真菌LJ-3鉴定为生赤壳属(Bionectria), Bionectria ochroleuca的不同菌株。
唐松草内生真菌SJ-2和白屈菜内生真菌BY-1为子囊菌门(Ascomycota)、子囊菌纲(Ascomycetes)、肉座菌目(Hypocreales)、赤壳科(Hypomycesaureo-nitens)、生赤壳属(Bionectria),Bionectria sp的不同菌株。
药用植物乌头内生真菌抗菌活性研究摘要对从乌头(Aconitum Carmichaeli Debx.)植物中分离获得的内生真菌进行抗菌活性筛选,其中59株内生真菌(占总菌数的35.98%)有抗菌活性,高活性菌株(抑菌圈直径>15mm)有42株(占抗菌活性菌株的71.19%),抗菌谱广的菌株有3株,它们分别是曲霉(Asp-ergillus)、毛壳菌属(Chaetomium)和毛霉(Mucor),表明乌头植物内生真菌中广泛分布着有抗菌活性的菌株。
关键词乌头;内生真菌;抗菌活性AntipathogenicActivityofEndophyticFungifromPharmaceuticalPlantofAconitum Carmichaeli Debx.LI Zhi-yingLI Shao-lanYANGLi-yuanCHEN You-weiWU Shao-hua(Institute ofMicrobiology,Yunnan University,Kunming Yunnan 650091)AbstractScreening antipathogenic activity of endophytic fungi from Aconitum Carmichaeli Debx.,59 straims(35.98% of total strains)endophytic fungi had antipathogenic activity,and 42 straims(71.19% of antipathogenic activity strains)had high antimicrobial activities(inhibitone zone diameter>15mm));3 straims of endophytic fungi had a broad antipathogenic spectrum,comprising Aspergillus,Chaetomium and Mucor. It was shown that there were many antipathogenic strains distributed in Aconitum Carmichaeli Debx.Key wordsAconitum Carmichaeli Debx.;endophytic fungi;antipathogenic activity乌头(Aconitum Carmichaeli Debx.)为毛莨科属多年生草本植物,该植物全株有毒,主要成分为二萜类双酯型生物碱。
主治亡阳虚脱、肢冷脉微、阳痿宫冷、心腹冷痛、虚寒吐泻、阴寒水肿、阳虚外感、寒湿痹痛、阴疽疮漏及一切沉寒痼冷疾病[1]。
现代药理研究证实,乌头具有抗炎、免疫抑制、麻醉止痛、抗肿瘤、调节内分泌等作用。
对心血管系统表现为强心、抗心律失常、降血压、扩张血管和抗休克、降糖和兴奋垂体的作用[2]。
从内生真菌的分离、分类鉴定到活性物质的筛选、分离提取,笔者对乌头植物内生真菌作了系统的研究。
对乌头植物内生真菌的分离和分类鉴定已作了相关报道[3],该文对其抗菌活性筛选报道如下。
1材料与方法1.1植物内生真菌来源从乌头(Aconitum Carmichaeli Debx.)植物中分离获得的内生真菌164株[3]。
1.2指示菌试验所用指示菌均由云南省微生物研究所真菌资源与菌种保藏室提供。
参照国家新药筛选中心的植物内生菌抗菌筛选模型进行选取。
呼吸系统病原菌:金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)(G+)、藤黄八叠球菌(Sarcinalutea)(G+)。
消化系统病原菌:大肠埃希氏杆菌(Escherichia coli)(G-)、铜绿假单孢菌(绿脓杆菌)(Pseudomonas aeruginosa)(G-)。
皮肤致病菌:白假丝酵母(白色念株菌)(Candida albicans)、星形石膏样毛癣菌(须疱毛癣菌)(Trichophyton gypseum aster-oides)。
1.3培养基PDA培养基(马铃薯葡萄糖培养基);营养肉汤培养基(蛋白胨,牛肉膏,NaCl);沙博弱氏培养基(葡萄糖,蛋白胨)。
1.4内生真菌的抗菌活性筛选方法参照文献[4]进行。
2结果与分析2.1乌头植物内生真菌的抗菌活性菌株及其分布从乌头植物中分离获得164株内生真菌,其中有59株对1株或多株病原菌有拮抗作用(表1)。
从表1可以看出,乌头植物根部的抗菌活性菌株有37株,占根部内生真菌的47.44%;茎、叶和花部的抗菌活性菌株的比例分别为20.37%、41.18%和26.67%。
在抗菌活性菌株中,高活性(抑菌圈直径>15mm)菌株最多,有42株,占活性菌株数的71.19%,其中以根部的最高,占根部抗菌活性菌株的83.78%;茎部的最少,只占茎部抗菌活性菌株数的36.36%。
低活性(抑菌圈直径<10mm)菌株很少,只有3株,仅占活性菌株数的5.08%;在根部和花部未出现低活性菌株。
2.2乌头植物内生真菌的抗菌活性2.2.1乌头植物内生真菌拮抗呼吸系统病原菌的活性。
在乌头植物的抗菌活性菌株中,有42株对试验中的呼吸系统病原菌有拮抗作用。
其中根部最多,高达34株,占拮抗呼吸系统病原菌菌株数的80.95%;茎、叶和花部分别只有3株、2株和3株,分别占拮抗呼吸系统病原菌菌株数的7.14%、4.76%和7.14%(表2)。
从表2可以看出,在分离获得的乌头植物内生真菌中,有37株对藤黄八叠球菌(Sarcina lutea)有拮抗作用,占分离菌株数的22.56%,且有28株为高活性菌株(占17.07%);对金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)有拮抗的菌株有24株(占14.63%),高活性菌株有18株(占10.98%)。
在对藤黄八叠球菌有拮抗作用的高活性菌株中,根部分布的最多,有22株,占乌头植物内生真菌对藤黄八叠球菌有高抗活性菌株数的78.57%;茎、叶和花部分布的最少,均仅为2株(占7.14%)。
对金黄色葡萄球菌有高抗活性的菌株中,以根部分布的最多,有16株,占乌头植物内生真菌对金黄色葡萄球菌有高抗作用总菌株数的88.89%;茎部和花上均只有1株(占5.56%);叶上未筛选到对金黄色葡萄球菌有拮抗作用的菌株。
2.2.2乌头植物内生真菌拮抗消化系统病原菌的活性。
在乌头植物的抗菌活性菌株中,有28株对试验中的消化系统病原菌有拮抗作用。
其中根部有23株,占拮抗消化系统病原菌总菌株数的82.14%;茎和花分别只有3株(占10.71%)和2株(占7.14%);叶部未出现有拮抗消化系统病原菌的菌株(表3)。
从表3可以看出,在乌头植物内生真菌中,有24株对大肠埃希氏杆菌(Escherichia coli)有拮抗作用,占菌株数的14.63%,且18株有高抗活性,占总菌株数的10.98%;对铜绿假单孢菌(Pseudomonas aeruginosa)有拮抗作用的菌株有21株(占12.81%),其中有高抗活性的为15株(占9.15%)。
对大肠埃希氏杆菌有高抗活性的乌头植物内生真菌中,根部分布的最多,有16株,占对大肠埃希氏杆菌有高抗活性菌株数的88.89%;茎部和花上均只有1株(占5.56%)。
对铜绿假单孢菌有高抗活性的菌株中,以根部分布的最多,有13株,占对铜绿假单孢菌有高抗活性菌株的86.67%;在茎部和花上均只有1株(占6.67%)。
2.2.3乌头植物内生真菌拮抗皮肤致病菌的活性。
在乌头植物的抗菌活性菌株中,有47株对试验中的皮肤致病菌有拮抗作用。
其中根部分布的最多,有28株,占拮抗皮肤致病菌总菌株数的59.57%;茎部有10株(占21.28%);叶上有6株(占12.77%);花上只有3株(占6.38%)(表4)。
从表4可以看出,在分离获得的乌头植物内生真菌中,有23株对白色念珠菌(Candida albicans)有拮抗作用,占总菌株数的14.02%,其中只有6株有高抗活性(只占3.66%);拮抗星形石膏样毛癣菌(Trichophyton gypseum asteroids)的有35株(占21.34%),且具高抗活性的菌株有19株,占总菌株数的11.59%。
在对白色念珠菌有高抗活性的乌头植物内生真菌中,以根部的为主,有3株,占对白色念珠菌有高抗活性菌株数的50.00%;其次是叶部,有2株(占33.33%);茎部只有1株(占16.67%);花部未出现对白色念珠菌有高抗活性的菌株。
对星形石膏样毛癣菌有高抗活性的内生真菌中,也以根部分布为主,有12株,占高抗菌株数19株的63.16%);茎和叶上均有3株(占15.79%);花上分布的最少,只有1株(占5.26%)。
3讨论乌头植物内生真菌中广泛分布着有抗菌活性的菌株,它们分布于毛霉(Mucor)、曲霉(Aspergillus)、根霉(Rhizopus)、头孢霉(Cephalosporium)等16个属中。
乌头植物各个部位内生真菌的抗菌活性及其属种分布都具有多样性。
对5株及5株以上病原菌有拮抗作用的乌头植物内生真菌多,有16株,占内生真菌总数的9.76%,抗菌活性菌株数的27.12%。
在抗菌活性菌株中,对供试的藤黄八叠球菌和星形石膏样毛癣菌有抑制生长作用的乌头植物内生真菌最多,即对呼吸系统病原菌和皮肤致病菌有拮抗作用的菌株多;在抗菌活性菌株中,高抗活性的菌株多。
在乌头植物的内生真菌中,有抗菌活性且活性高的菌株主要分布在乌头植物的根部,并且有3株内生真菌抗菌谱最广(对6株供试菌都有拮抗作用),它们分别是曲霉、毛壳菌属(Chaetomium)和毛霉(Mucor)各1株。
造成这样的现象可能与根部含乌头碱成分的种类及含量有关。
在抗菌活性菌株中,有6株乌头植物内生真菌对白色念珠菌有高抗活性(抑菌圈直径≥18mm,有的高达34mm),分别是根霉、头孢霉、黑孢(Nigrospora)、盘多毛孢霉(Pestalotia)、组丝核菌属(Phacodium)和未鉴定菌株各1株。
笔者将在今后的工作中有针对性地对活性高的菌株进行有效活性成分的分离、跟踪报道。
4参考文献[1] 郭晓庄.有毒中草药大辞典[M].天津:天津科技翻译出版公司,1992.[2] 符华林.我国乌头属植物的研究概况[J].中药材,2004,27(2):149-152.[3] 李治滢,陈有为,杨丽源,等.药用植物乌头内生真菌研究[J].现代农业科技,2009(7):7-8.[4] 李治滢,杨丽源,李绍兰,等.滇南黄草乌内生真菌抗菌活性的筛选[J].时珍国医国药,2009,20(5):1027-1029.。
