建模方法与步骤1
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大鼠急性心梗模型的制作
一. 材料和器材：
1. 实验用鼠：大鼠 雄性 200g-250g
2. 药物： （稀释： 1：3）
麻醉药： 盐酸氯氨酮， 安定； 阿托品。
3. 器材：
手术照明 大鼠固定板（固定线或皮筋5根） 手术洞巾2块 开睑器1 大号弯剪1 持针器1 显微持针器1 血管钳1 眼科弯镊2 皮镊1 眼科剪（直剪，弯剪各1） 手术刀1 培养皿2 小号圆针/三角针若干 动物呼吸机（潮气量指数并非真实数目，要根据手术时情况决定，本文中给出的潮气量为本人实验采用的，仅供参考）
4. 耗材：
非吸收性外科缝线（3/0） 经纬恩线 5/0 碘伏 针管（1ml，2ml，10ml） 无菌纱布 无菌棉球 无菌胶布手套 生理盐水和5％GNS 若干
二．手术步骤：
1. 电子秤秤量大鼠体重，计算药物剂量：
氯氨酮 65-75mg/kg； 安定2-3mg/kg；
阿托品 0.1-0.2mg/kg
2. 麻醉：
盐酸氯氨酮加安定复合麻醉，
腹腔注射。
3. 固定，备皮，消毒，铺巾：
固定不应过紧，备皮用大号弯剪，
剪时保持皮肤紧绷，后碘伏消毒， 铺洞巾。
4. 气管切开，插管：
①斜剪静针软管备插管用。
②选喉结与锁骨上窝间，沿前颈正中线
下方剪开约1.0cm -1.5cm，钝性分离皮下， 从颌下腺下缘分离，显露气管前肌群，钝性 分离胸骨舌骨肌，显露气管下段，弯镊钝性
分离气管旁软组织，后带线穿行，尽量不伤及
气管两侧甲状腺动脉。
剪开气管环间半周。
③弯镊夹软管行插管，插入气管约1cm，打结固定。
④调整指数，接呼吸机：
呼吸频率 70-73 次/分 潮气量 9-18ml 呼吸比 1：1。
5. 开胸：
选胸骨旁纵行切口约2.5cm-3.0cm，
充分显露胸大肌，分离胸大肌与前锯肌，
缝针固定胸大肌于皮肤；分离前锯肌，
缝针固定于皮肤；
减潮气量至
扩大切口至恰好放置开睑器，撑开。
―― 不要为了暴露清楚，肆意的扩大肋间切口，因为1、创伤大，
2.加大关胸难度。
6.缝扎LAD：
* 大鼠心脏
（如左图示）
（1）暴露：
观察心脏搏动和
胸壁活动――如有
自主呼吸，应调整
麻醉深度。
牵起胸腺组织，
剪开心包――心包应
尽量剪开，避免术后
心脏外缩窄。
（2）缝扎LAD：
1）确定进针出针位置：
―― 牵开左心耳，进针点：左心耳根部与肺动脉圆锥夹交点下约3-4mm处；建议进针点不要太上（梗死面积太大，死亡率高），也不要太
下（梗死面积太小或无）。
出针点：绕过心大静脉，近室间隔处。
① 进针前应再次确认进针出针部位，并充分暴露之。
② 暴露方法：自制牵开器牵开左心耳；以小棉球填塞暴露；也可
适当用左手顶住大鼠右胸壁，使心脏向
左侧移动固定。
――以上暴露方法的使用，按术时情况决定。
2）进针与出针：
①尽量一次完成，出针时持针可适度向
术者右侧牵拉，以避免缝至胸壁。
②进针深度1.5mm，跨度可达2.5mm-4mm 。
3）结扎：外科结；
4）最后确认缝扎位置是否正确；
5）增加潮气量至正常：14-16ml。
7. 关胸：
（1）关胸前观察：
① 心脏搏动：节律和频率有无异常；
② 探查胸腔，有无胸腔活动性出血；
吸尽积血；
（2）关胸：
① 减潮气量至9-11ml；
② 逐层关胸 — 在撑开状态下缝合，一般4-5针8字缝合；
③ 建议切口上下肋骨前缘各缝扎一针，
防止术后肋间出血。
④ 结扎前再次膨肺，挤压胸壁，
排出胸腔积液积气，打结闭合胸腔，
结扎后两结前，胸腔置入静脉留置管，
血液时应再次进胸，发现原因。
8. 复苏，术后管理：
（1）复苏：生理盐水3ml皮下注射；
（2）拔管：待到大鼠自主呼吸基本恢复；
经纬恩线 5/0 8字三针吻合气管；
（3）腹腔注射: 5%GNS 20ml/kg，速尿10-20mg/kg；
（4）白炽灯下复温1小时；
（5）观察术后大鼠活动状态，注意保暖。
三、注意事项：
（以下罗列了本人在实验中遇到的主要问题，及自己的一些见解）
四. 另外再谈几个问题：
1.该手术的要点是暴露。
清晰的暴露是保证缝扎准确，减少术中损伤的基础。
暴露方法：①引进开睑器，并对其改造，适合大鼠胸部切口尺寸，撑开暴露；
②进针出针点的暴露可根据情况采用牵开器牵拉或小棉球填塞的方法。
2. 关于切口肋间的选择：
一般选在第三肋间，因为此处进胸暴露心底部最清楚。
但需事先观察心脏搏动范围，如搏动大部位于第四肋间，可于第四肋间进胸；切口取前正中切口，前端离胸骨端保证有1-2mm，防伤及胸廓内A；后端不应过延，免加大关胸难度。
3．关于关胸：
（1）在撑开状态下缝合，关胸缝合，必须注意避免损伤肺脏，可用镊子尾部垫于胸内遮挡保护。
绝对禁忌盲缝。
（2）关胸前应尽量吸尽积液，但不必强求，因过多擦拭可加重胸膜损伤，致术后胸腔积液加重；也应减小胸腔操作致损伤肺脏可能。
（3）尽量缝合闭紧，以防术后肋间肌出血，致胸腔积血。
4. 小结：
动物模型制作和对病人施行手术是有同有异的。
相同的是，同样需要有条不紊和耐心仔细的操作，能造成手术失败的因素太多，关键步骤一定要细。
不同的是，我们制作动物模型，达不到像病人手术那样的成功率。
因为该方法造模实质是大面积急性心梗（约占左心室40-50%）+ 大切口开胸，创伤是很大的，另外术后模型大鼠又缺乏监护和有效的生命支持。
另外大鼠个体差异是存在的：冠脉的分布、侧支循环的差异，影响了心梗的面积；对手术创伤的耐受力的差异；心梗后发生心律失常的差异，呼吸系统对机械通气的适应性的差异等，这些都直接影响了模型手术的成功率。
换句话说，该模型方法的可行，其实重要原因在于大鼠的耐受力强。
所以个人认为，缝扎LAD 制造AMI模型，完全排除术者原因后，造模成功率也是有限的，估计最高也就能达到85％左右。
所以，1. 设计时，应考虑到手术死亡，适当增加组内样本量； 2. 主观上，首先要尽量排除自身原因，造模前认真准备，造模时细致到位，造模后认真思考总结。
对于手术及术后出现问题的老鼠，找到原因比抢救生命更有实际意义。
3.不要因为手术死亡而丧气，因为造模前期死亡正常，后期死亡也是应该存在。
一定要摆正自己的心态。
4. 个人觉得大鼠造模的准确率是基础，所以应绝对避免结扎点的过分下移，否则到取样时发现模型中大量的阴
性模型后，就难以补救了。
五．倡议:
动物模型的建立和临床手术的掌握类似，都需要学习和积累创新。
大鼠心梗模型是很常用的模型，在急性心梗系列研究中应用广泛，但是建模确有一定的技术难度，希望大家可以在建模的同时，把自己的一些心得和技术改良加以总结记录，对此篇进行修改。
集思广益，精益求精，利于自己加深理解，也能使后来人可以更快更好的掌握这项技术。
2007-06-12。
