BcrAbl融合基因荧光定量RTPCR诊断试剂盒说明书

双荧光素酶报告基因检测试剂盒说明一、测定原理：双荧光素酶报告基因检测试剂盒的原理基于双荧光素酶系统。

该系统由两个互补性的荧光素酶组成：荧光素酶1（Fluc）和荧光素酶2（Rluc）。

荧光素酶1通过氧化反应使荧光素发出蓝色荧光，而荧光素酶2通过氧化反应使荧光素发出绿色荧光。

同时，两个荧光素酶都能够自催化反应，从而有效降低假阳性结果的发生。

二、实验步骤：1.取适量细胞或组织，使用含有测试物的培养基或缓冲液进行处理。

2.将细胞或组织溶解，并离心收集上清液。

3.加入测试试剂盒提供的荧光素底物混合液，共孵育一段时间。

4.使用荧光分析仪测量反应混合物中蓝色和绿色荧光的强度。

5.根据荧光信号的强度计算得出相应的基因表达水平。

三、注意事项：1.本试剂盒需要严格按照说明书操作，避免操作失误导致结果错误。

2.在每一步操作前，请先将试剂保持在合适的温度下，以确保试剂的活性。

3.细胞或组织样本的采集、溶解和上清液的收集需要严格按照操作规范进行，避免样本的损失和污染。

4.在孵育过程中，避免剧烈振荡或震动，以免影响荧光素酶反应的进行。

5.在测量荧光强度时，确保荧光分析仪的参数设置正确，并注意避光操作，以免干扰荧光信号的测量。

四、结果解读：根据测量得到的蓝色和绿色荧光强度，可以计算得到相应的基因表达水平。

一般来说，荧光素酶1的荧光强度与被检测基因的表达水平成正比，而荧光素酶2的荧光强度则用作内参对照。

通过计算荧光素酶1与荧光素酶2的比值，可以更准确地反映被检测基因的表达水平。

结果解读时需要注意的是，双荧光素酶报告基因检测试剂盒只能提供相对量化的结果，无法给出绝对的基因表达水平。

因此，在结果解读时需要结合其他实验数据和相关文献进行综合分析。

总结：双荧光素酶报告基因检测试剂盒是一种常用的基因表达水平检测工具，该试剂盒通过双荧光素酶系统实现对基因表达水平的测定。

在使用时需严格按照说明书操作，注意操作规范和注意事项。

结果解读时应综合考虑其他实验数据和相关文献，以得到准确可靠的结论。

abclonal的pcr逆转录的说明书Abclonal 是一家提供各种生命科学试剂和服务的公司，其中包括逆转录PCR（RT-PCR）试剂。

RT-PCR 是一种将RNA转化为DNA的过程，常用于检测和量化特定RNA的表达。

以下是一份Abclonal RT-PCR 试剂的使用说明书的大致内容。

一、实验目的本实验的目的是使用 Abclonal 的 RT-PCR 试剂，逆转录特定 RNA，以便进行后续的定量或定性分析。

二、实验原理逆转录PCR (RT-PCR) 是一种用于检测和量化特定RNA分子的技术。

首先，使用逆转录酶将RNA分子转化为cDNA。

然后，使用PCR技术扩增cDNA，以便进行后续分析。

Abclonal 的RT-PCR 试剂盒包含所有必要的酶和引物，以方便用户进行此实验。

三、所需材料1. Abclonal RT-PCR 试剂盒2. 逆转录酶 (如 M-MLV 或 SuperScript III)3. 随机引物或特异性引物4. RNA样品5. 热稳定DNA聚合酶 (如 Taq DNA 聚合酶)6. dNTPs (脱氧核苷酸)7. 缓冲液和稳定剂8. 离心管和移液器9. 离心机和PCR仪（如果需要）四、操作步骤1. 准备RNA样品：将RNA样品按照标准方法进行分离和纯化。

确保RNA 的质量和浓度适合后续的逆转录和PCR反应。

2. 逆转录：将RNA、缓冲液、dNTPs、随机引物和逆转录酶混合在一个离心管中。

按照试剂盒说明书的指示进行逆转录反应。

3. PCR扩增：将逆转录产物、PCR缓冲液、dNTPs、特异性引物和热稳定DNA聚合酶混合在一个离心管中。

按照试剂盒说明书的指示进行PCR反应。

4. 分析结果：对PCR产物进行电泳、荧光检测或其它适当的分析方法，以确定目标RNA的表达水平。

五、注意事项1. 请遵循所有试剂盒和酶的操作说明，以确保实验的准确性和安全性。

2. 在处理RNA时，要特别注意防止其降解和污染。

人类KRAS基因7种突变检测试剂盒（荧光PCR法）说明书【产品名称】通用名称：人类KRAS基因7种突变检测试剂盒（荧光PCR法）英文名称：Human KRAS Gene 7 Mutations Fluorescence Polymerase Chain Reaction (PCR) Diagnostic Kit【包装规格】12测试/盒【预期用途】KRAS基因是人体肿瘤中常见的致癌基因。

该基因的突变常见于多种恶性肿瘤，在肺癌患者中的突变率为15～30%，在结直肠癌患者中的突变率为20～50%。

导致KRAS处于激活状态的突变主要位于第12和13密码子上。

KRAS 基因突变一般会使肺癌患者对EGFR酪氨酸激酶抑制剂产生耐药，使结直肠癌患者对抗EGFR抗体类药物产生耐药。

但是，2010年10月的最新研究发现第13密码子上的Gly13Asp（G13D）突变亦对抗EGFR抗体类药物有治疗反应性（参见：De Roock. W. JAMA. 2010;304(16):1812-1820）。

因此，KRAS基因突变检测能提高肿瘤临床治疗的针对性，降低治疗费用，节省宝贵的治疗时间。

大部分肿瘤的突变都是体细胞突变，突变细胞往往与野生型细胞混杂在一起，因此所提取的DNA常带有大量野生型DNA，所以对体细胞突变检测需要较高的特异性，而目前广泛使用的直接测序法检测能力有限，不能完全满足临床需要。

本试剂盒用于检测人类KRAS基因的12和13密码子上7种热点体细胞突变（见表1），试剂盒以DNA为检测样本，提供突变状态的定性评估。

辅助临床医生筛选出可受益于肿瘤靶向药物的大肠癌等癌症患者。

该产品用于组织中提取DNA的KRAS基因7种突变的检测，为临床医生对大肠癌或肺癌患者选择肿瘤靶向药物治疗提供参考。

表1 人类KRAS基因的12和13密码子上7种热点体细胞突变突变名称氨基酸变化碱基变化Cosmic ID 公司命名Gly12Asp 甘氨酸到天门冬氨酸GGT>GAT 521 12-2-A Gly12Ala 甘氨酸到丙氨酸GGT>GCT 522 12-2-C Gly12Val 甘氨酸到缬氨酸GGT>GTT 520 12-2-T Gly12Ser 甘氨酸到丝氨酸GGT>AGT 517 12-1-A Gly12Arg 甘氨酸到精氨酸GGT>CGT 518 12-1-C Gly12Cys 甘氨酸到胱氨酸GGT>TGT 516 12-1-T Gly13Asp 甘氨酸到天门冬氨酸GGC>GAC 532 13-2-A 【检测原理】本试剂盒基于实时PCR平台结合了特异引物和双环探针两种技术，检测DNA样品中含有的突变基因。

北京经济技术开发区宏达北路10号万源商务中心5001室 邮编：100176 北京经济技术开发区宏达北路10号万源商务中心5001室 邮编：100176电话：4006501950 传真：************-816电话：4006501950 传真：************-816AML1-ETO 荧光定量试剂盒使用说明书【产品名称】中文名：AML1-ETO 荧光定量试剂盒英文名：Leukemia related AML1-ETO fusion gene Fluorescent Quantitative PCR DetectionKit （FQ-PCR)【包装规格】 20人份/盒【用 途】本试剂盒适用于白血病AML1-ETO 融合基因定量检测，仅供科研使用，辅助临床诊断及治疗。

【储存条件】储存温度：-20℃。

避光保存。

【有 效 期】有效期：见试剂盒标签。

【原 理】本试剂盒使用荧光标记探针杂交方法，采用核酸扩增技术，对白血病BCR-ABL-190融合基因进行RNA 定量检测。

【试剂盒组分】1.2.未提供组分：淋巴细胞分离液、RPMI1640、生理盐水、离心管、PCR 反应管等耗材试剂。

3.本试剂盒中的参比品、阳性对照品和临界对照品均为克隆质粒DNA 。

4.不同批号试剂盒中的各组分不要交叉使用，以影响结果。

【适用仪器】ABI PRISM 系列Real Time PCR 仪； BIO-RAD iCycler Real Time PCR 仪； ROCHE LightCycler Real Time PCR 仪。

【样本要求】1. 本试剂盒适用于骨髓标本检测。

2. 骨髓2~3ml ，建议采用枸橼酸钠或EDTA 抗凝，不能使用肝素抗凝。

3. 建议采用进口无菌离心管及移液吸头，使用无RNase 的耗材和试剂。

北京经济技术开发区宏达北路10号万源商务中心5001室 邮编：100176 北京经济技术开发区宏达北路10号万源商务中心5001室 邮编：100176电话：4006501950 传真：************-816电话：4006501950 传真：************-816【检验方法】1．骨髓单个核细胞分离注意事项：a. 淋巴细胞分离液应置于4℃保存，使用前应从冰箱拿出待恢复至室温后使用。

北京索莱宝科技有限公司
第1页共1页Realtime PCR 荧光定量试剂盒(SYBR Green I)说明书
货号：SR1110
规格：50T（1.25ml）/200T（5ml）
保存：本产品-20℃保存有效期至少一年，4℃保存有效期至少1星期。

避免反复冻融，用量少时可酌情分装。

使用方法：
根据用量取PCR 反应体系1/2体积该预混液，加入相同体积含引物和模板的水溶液混匀即可。

总体积即为PCR 总体系，引物和模板用量可根据此体系计算。

产品简介：
本产品为应用SYBR Green Ⅰ染料进行Realtime PCR 扩增反应的高效预混系统。

该预混系统提供了经过优化的缓冲液、dNTP、HotStart Taq DNA 聚合酶、SYBR Green I 染料和MgCl 2，使用者只需加入适量的引物、模
板和水，即可进行荧光定量PCR 检测。

该预混系统中的优化缓冲液和HotStart Taq DNA 聚合酶等可大大提高PCR 产物的灵敏度和特异性。

Realtime PCR MasterMix 采用高效HotStart Taq DNA 聚合酶，使PCR 反应具有更高灵敏度和特异性。

产品特性：
高特异性：本产品采用热启动DNA 聚合酶，90℃以上2min 后具有扩增活性，可大大提高PCR 产物的特异性。

灵敏度：本产品包含的优化的缓冲液可检测低拷贝数的模板，且重复性好。

高适用性：本产品可适用于任意荧光定量PCR 仪。

荧光定量PCR基因表达检测试剂盒说明书(通用版)前言随着荧光定量PCR技术的成熟和荧光定量PCR仪的普及，用传统的半定量方法检测目的基因表达量的升高或者降低，已经远远不能满足当前科研的需要，针对当前研究的热点基因，闪晶生物及时地从美国biosuper公司引进不同物种、不同基因的荧光定量PCR检测试剂盒。

该试剂盒包含了目的基因和管家基因的引物、taqman探针(荧光探针)、反转录试剂、荧光定量PCR试剂、操作说明书等，用户只需将提好的RNA加入就可以进行荧光定量PCR实验，操作方便简单、适合多种荧光定量PCR仪，同时也避免了自己设计、合成引物探针的烦恼。

基本原理先用随机引物将RNA反转录成cDNA，然后设计特异性的引物和荧光探针(TaqMan探针),进行荧光定量PCR检测。

TaqMan探针是一种寡核苷酸探针，它设计为与目标序列上游引物和下游引物之间的序列配对。

荧光基团连接在探针的5’末端，而淬灭剂则在3’末端。

当完整的探针与目标序列配对时，荧光基团发射的荧光因与3’端的淬灭剂接近而被淬灭，但在进行延伸反应时，qTaq聚合酶的5’外切酶活性将探针进行酶切，使得荧光基团与淬灭剂分离,荧光强度得到检测。

随着扩增循环数的增加，释放出来的荧光基团不断积累，因此荧光强度与扩增产物的数量呈正比关系。

试剂盒规格25 次100次试剂盒组成序号 名称 25次 100次1 RT-buffer 325 ul 1300 ul2 Mix enzyme 50 ul 200 ul3 T-probe 25 ul 100 ul4 T-fluo-PCR buffer 650 ul 2600 ul5 I-probe 25 ul 100 ul6 I-fluo-PCR buffer 650 ul 2600 ul7 qTaq polymerase100 ul 400 ul8 DEPC-H2O 1支 1支9 说明书 1份 1份试剂说明：RT-buffer:含有dNTPs、oligo(N)等Mix enzyme:含有反转录酶、RNA酶抑制剂等T-probe:检测目的基因的荧光探针，5’端fam标记，3’端tamra标记T-fluo-PCR buffer:含有目的基因的特异性引物、dNTPs等I-probe:检测管家基因的荧光探针，5’端fam标记，3’端tamra标记I-fluo-PCR buffer: 含有管家基因的特异性引物、dNTPs等RNA的提取请参照Trizol说明书，本试剂盒不提供RNA提取试剂和操作流程。

实时荧光定量PCR仪快速操作指南1.连接电源从包装箱里取出仪器放置在实验台上，拿出电源线和电源适配器，将电源线一端与电源适配器相连，另一端连接至交流220V电源插座（AC85~264V）电源适配器的输出端连接到仪器电源插孔。

接口插入仪器电源插孔，注意插孔方向箭头方向朝上。

打开仪器背面的电源开关开启仪器，仪器自检成功，自动进入到软件界面。

2.样品准备◼准备试剂Q1600实时荧光定量PCR仪使用0.2ml透明离心试管根据试剂要求选用10-100μl合适的加液量。

◼离心操作配置完成试剂样本的试管在放入仪器之前，要用离心机进行离心操作，确保试剂液体处于试管底部，且液体内部不含有气泡。

◼放置样品将反应管按照顺序放入加热孔内。

3.设置程序，运行实验软件操作基本步骤：◼新建实验新建实验，选择运行槽◼基本设置设置实验名称，实验类型，检测项目，选择使用的染料。

◼样本设置设置样品名称，样本ID号，选择样本类型◼程序设置设置需要的反应程序◼保存文件单击保存，保存实验文件◼运行单击运行，运行实验。

4.结果分析◼实验结束，软件自动计算Ct值，根据判定规则自动出结果。

◼如需进行熔解分析和基因分型，在软件分析类型里选择相应的分析功能。

5.结果导出◼导出实验结果单击导出，导出实验数据。

◼结果打印连接配置的热敏打印机，选中要打印的样品孔，单击打印，打印实验结果。

6.关闭仪器◼实验结束，取出反应管◼长按仪器前面板关机按键，关闭仪器◼长时间不使用仪器，请关闭仪器背部左下角电源开关。

曲霉菌属、新型隐球菌及耶氏肺孢子菌核酸检测试剂盒（PCR荧光探针法）说明书【产品名称】通用名称：曲霉菌属、新型隐球菌及耶氏肺孢子菌核酸检测试剂盒（PCR荧光探针法）【包装规格】24人份/盒，48人份/盒【预期用途】本试剂盒用于体外定性检测人痰液样本中曲霉菌属、新型隐球菌和耶氏肺孢子菌的核酸DNA。

本试剂用于肺部曲霉菌属、新型隐球菌和耶氏肺孢子菌真菌感染的辅助诊断，不能单独作为确诊的依据。

适用人群主要为免疫低下、免疫缺陷人群，其他人群应有肺部真菌感染相关指征。

真菌感染常见于免疫低下或缺陷人群，具有较高的发病率和死亡率，其临床症状表现不具有特异性，易被细菌、病毒等感染掩盖，临床上致病菌包括曲霉菌属、隐球菌、耶氏肺孢子菌等，检测多重真菌可用于辅助临床诊断。

本试剂盒的检测结果仅供临床参考，对患者的临床诊治应结合其症状、体征、病史、其它实验室检查及治疗反应等情况综合考虑。

该产品检测阳性不能确定标本中有活病原菌，检测结果应结合其他临床诊断综合判断。

本产品对于曲霉菌属的检测不能确认具体菌种，如有必要临床应考虑对于曲霉菌属阳性结果进一步确认感染的菌种。

【检验原理】本试剂盒分别选取曲霉菌属18s rRNA基因、新型隐球菌ITS基因和耶氏肺孢子菌mtLSUrRNA基因中保守的区域设计特异性引物和探针，在样本DNA核酸纯化之后采用荧光PCR对DNA进行检测。

本试剂盒采用实时荧光定量PCR技术，PCR扩增过程中，探针与模板结合，其5’端报告基团被Taq酶5’→3’外切核酸酶活性切断，使报告基团远离淬灭基团，产生荧光信号。

荧光定量PCR仪器根据检测到的荧光信号自动绘制出实时扩增曲线，并计算出样本Ct值（每个反应管内的荧光信号到达设定的域值时所经历的循环数）。

曲霉菌属、新型隐球菌、耶氏肺孢子菌荧光标记分别为FAM、VIC、CY5。

本试剂盒反应体系含有dUTP-UDG防污染措施，避免操作产生的假阳性结果；采用内源性内标质控体系，通过内标对待测样本的采集、运输和提取过程进行监控，避免检测结果的假阴性，内标基因选择人源管家基因RP，荧光标记为ROX。