4,7-二氯靛红

二氯靛酚滴定法
一、实验目的
掌握2,6-二氯靛酚测定维生素C的原理和方法。

二、实验原理
还原型抗坏血酸能还原染料2,6-二氯靛酚，该染料在酸性中呈红色，被还原后红色消失。

还原型抗坏血酸还原2,6-二氯靛酚后，本身被氧化成脱氢抗坏血酸。

在没有杂质干扰时，一定量的样品提取液还原标准2,6-二氯靛酚的量与样品中所含维生素C的量成正比。

反应式如下：
三、实验仪器与试剂：
1.仪器：组织捣碎机、天平、50mL锥形瓶、100mL容量瓶、10mL移液管、碱式滴定管、漏斗、漏斗架
2.试剂
(1) 2％草酸溶液：溶解20克草酸结晶于200毫升水中，然后稀释至1000mL。

(2) 1％草酸溶液：取上述2％草酸溶液500mL，用水稀释至1000m1。

(3) 抗坏血酸标准溶液：准确称取20mg抗坏血酸，溶于1％草酸溶液中，移入l00mL容量瓶中，并用1％草酸溶液稀释至100毫升，混匀，置冰箱中保存。

使用时吸取上述抗坏血酸标准溶液5mL，置于50毫升容量瓶中，用1％草酸溶液定容之。

此标准使用液每毫升含0.02mg维生素C。

标定：吸取标准使用液5m1于三角烧瓶中，加入6％碘化钾溶液0.5mL，1％淀粉溶液3滴，再以0.001N碘酸钾标准溶液滴定，终点为淡蓝色。

计算如下：
抗坏血酸浓度（mg/mL）=( V1×0.088)/V2
V1：滴定时所耗0.001N碘酸钾标准溶液的量(mL)。

1、物质的理化常数国标编号: 61876ＣＡＳ:76-44-8 中文名称: 七氯英文名称: Heptachlor；Velsicol 104别名:七氯-四氢-甲撑茚；1，4，5，6，7，8，8-七氯-3a，4，7，7a-四氢-4，7-甲撑茚；七氯化茚分子式: C10H5Cl7分子量:373.35 熔点: 95～96℃ 沸点：135～密度: 1.57～1.59(20/4℃)蒸汽压: 25℃溶解性: 不溶于水，溶于一些有机溶剂如乙醇、醚类、芳烃稳定性: 对光、湿氯、酸、碱氧化剂均很稳定外观与性状: 纯品为具有樟脑气味的无色晶体，挥发性较大；工业品七氯为软蜡状固体，含七氯约72%，熔点46～74℃危险标记: 14(有毒品)用途:非内吸性触杀、胃毒性杀虫剂，有一定熏蒸作用，常加工成乳剂与可湿性粉剂使用2.对环境的影响:一、健康危害侵入途径：吸入、食入、经皮吸收。

健康危害：接触七氯的工人可有皮肤轻度搔痒及发药、头痛、恶心、食欲减退、脉搏稍慢、血压微下降等。

二、毒理学资料及环境行为毒性：七氯与氯丹类似，进入机体后很快转化为毒性较大的环氯化物并贮于脂肪中，主要影响中枢神经系统及肝脏等。

急性毒性：LD50 40mg/kg(大鼠经口)；2000mg/kg(兔经皮)亚急性和慢性毒性：大鼠经口7.5～10ppm×2年，出现肝脏轻微的实质性退行性病变。

七氯在土壤中是持久的和相对稳定的。

然而它可通过下述途径从土壤中减少，即，缓慢地蒸发、氧化成七氯环氧化物(一种具有类似毒性，更持久的难降解产物)、被光合作用转换成光-七氯、或者被土壤菌转换成低毒性的代谢物。

七氯通过这些不同途径减少的速度取决于气候、土壤类型及管理工作(在未开发的土壤中保持时间最长)。

大多数的七氯残留物存在于土壤表层土中，而且很容易连同灰尘颗粒随风扩散。

尽管没有由于七氯而引起大面积水体污染的报告，但已在各种水体的鱼类中发现了七氯残留物。

七氯在水中的溶解度很小。

Vc含量测定_2,6-二氯靛酚滴定法实验十五抗坏血酸含量测定(2,6-二氯酚靛酚法)一、目的学习维生素C的生理功能和性质，掌握用2，6-二氯酚靛酚法测定维生素C的原理和方法。

二、原理维生素 C是一种水溶性维生素，是人类营养中最重要的维生素之一，人体缺乏维生素 C时会出现坏血病，因此它又被称为抗坏血酸。

此外维生素 C还具有预防和治疗感冒以及抑制致癌物质产生的作用。

维生素C的分布很广，尤其在水果(如弥猴桃、橘子、柠檬、山植、袖子、草莓等)和蔬菜(觅菜、芹菜、青椒、菠菜、黄瓜、番茄等)中的含量更为丰富。

不同栽培条件、不同成熟度和不同的加工贮藏方法，都可以影响水果、蔬菜的抗坏血酸含量。

测定抗坏血酸含量是了解果蔬品质高低及其加工工艺成效的重要指标。

维生素 C在金属铜和抗坏血酸氧化酶存在下极易氧化，因此，在用铜制品做食品时，维生素 C易丢失。

此外在碱性溶液中，维生素 C也易被破坏，而在酸性溶液中比较稳定。

利用它具有的还原性质可测定其含量。

还原型抗坏血酸能被染料2，6-二氯酚靛酚氧化为脱氢型，该染料在碱性溶液中呈蓝色，在酸性溶液中呈红色，被还原后变为无色。

因此用 2，6-二氯酚靛酚滴定含有维生素 C的酸性溶液时，维生素C尚未全部被氧化时，则滴下的染料立即使溶液变成粉红色，当溶液中的抗坏血酸全部被氧化成脱氢抗坏血酸时，滴入的2，6-二氯酚靛酚立即使溶液呈现淡红色。

用这种染料滴定抗坏血酸至溶液呈淡红色为滴定终点，根据染料消耗量即可计算出样品中还原型抗坏血酸的含量。

三、仪器、试剂和材料1(仪器(1)天平(2)组织捣碎机(3)微量滴定管(5ml)(4)容量瓶(50ml)(5)刻度吸管(5ml，10ml)(6)锥形瓶(100ml)2(试剂(1)l,草酸溶液:草酸1g溶于 100ml蒸馏水中(2)2,草酸溶液:草酸2g溶于100ml蒸馏水中(3)抗坏血酸标准溶液(0.1 mg,ml):精确称取10mg纯抗坏血酸(应为洁白色，如变为黄色则不能用)用1,草酸溶液溶解并定容至100ml。

2,6-二氯靛酚滴定法测定番茄中维生素C的含量摘要自从波兰裔美国科学家卡西米尔·冯克在1912年综合了以往的试验结果，发表了维生素的理论以来，国内外学者进行了广泛的研究。

目前国内测定维生素c的常见方法有:2,6-二氯靛酚滴定法、2,4-二硝基苯肼法、荧光法、碘滴定法、高效液相色谱法[1-3]等。

关键词 2,6-二氯靛酚滴定法；番茄；维生素c；含量1 前言维生素c（Vitamin C ，Ascorbic Acid）又叫L-抗坏血酸，是一种水溶性维生素，是维持机体正常生理功能的重要维生素之一,具有多种重要的生理功能，广泛参与机体氧化、还原等复杂代谢过程,是蔬菜水果中的一项非常重要的营养指标。

维生素c的主要作用是提高免疫力，预防癌症、心脏病、中风，保护牙齿和牙龈等。

另外，坚持按时服用维生素C还可以使皮肤黑色素沉着减少，从而减少黑斑和雀斑，使皮肤白皙。

富含维生素c的食物有番茄、花菜、青辣椒、橙子、葡萄汁等，可以说，在所有的蔬菜、水果中，维生素c含量都不少。

美国专家认为，每人每天维生素c的最佳用量应为200～300毫克，最低不少于60毫克。

而中国营养学会建议的膳食参考摄入量（RNI），成年人为100mg/日，可耐受最高摄入量（UL）为1000mg/日。

市售的蔬果维生素c的含量不近相同，在此特意对番茄进行维生素c的测定，为人们正确补充维生素和合理饮食提供依据和指导。

2 实验部分2.1 实验原理维生素c属己糖衍生物，存在还原型与氧化型两种结构形态。

还原型维生素c分子中第二和第三个碳原子上的两个相邻的烯醇式羟基易离解出H+而具酸性，故又称抗坏血酸。

还原型维生素C在弱酸中稳定，而在碱中或加热条件下均易被破坏，其还原性又使得极易被氧化剂氧化，特别在碱性或中性环境中，或当有微量重金属离子(如Fe2、Cu+2等)存在时，更易被氧化分解。

述原型维生素c氧化后脱氢即转化为氧化型维生素C，后者加氢仍可还原成还原型维生素c，故氧化型结构本身仍具有生物学活性。

1 化学品及企业标识1.1 产品标识符化学品俗名或商品名：靛玉红CAS No.：479-41-4别名：2-(2-氧代-1H-吲哚-3-亚基)-1H-吲哚-3-酮;靛玉紅;2-(2-氧代-1H-吲哚-3-亚基)-1H-吲哚-3-酮;靛红;1.2 鉴别的其他方法无数据资料1.3 有关的确定了的物质或混合物的用途和建议不适合的用途仅供科研用途，不作为药物、家庭备用药或其它用途。

2 危险性概述2.1 GHS分类根据全球化学品统一分类和标签制度（GHS）的规定，不是危险物质或混合物。

2.2 GHS 标记要素，包括预防性的陈述2.3 其它危害物-无3 成分/组成信息3.1 物质分子式 - C16H10N2O2分子量 - 262.264 急救措施4.1 必要的急救措施描述一般的建议请教医生。

向到现场的医生出示此安全技术说明书。

如果吸入用水冲洗眼睛作为预防措施。

在皮肤接触的情况下用肥皂和大量的水冲洗。

请教医生。

在眼睛接触的情况下无数据资料如果误服用水雾,抗乙醇泡沫,干粉或二氧化碳灭火。

4.2 最重要的症状和影响，急性的和滞后的主要症状和影响，急性和迟发效应据我们所知，此化学，物理和毒性性质尚未经完整的研究。

4.3 及时的医疗处理和所需的特殊处理的说明和指示如必要的话,戴自给式呼吸器去救火。

5 消防措施5.1 灭火介质火灾特征无数据资料灭火方法及灭火剂碳氧化物,氮氧化物5.2 源于此物质或混合物的特别的危害使用个人防护用品。

避免粉尘生成。

避免吸入蒸气、烟雾或气体。

避免吸入粉尘。

5.3 救火人员的预防无数据资料5.4 进一步的信息无数据资料6 泄露应急处理6.1 人员的预防,防护设备和紧急处理程序收集和处置时不要产生粉尘。

扫掉和铲掉。

放入合适的封闭的容器中待处理。

6.2 环境预防措施丢弃处理请参阅第3743节6.3 抑制和清除溢出物的方法和材料避免形成粉尘和气溶胶。

在有粉尘生成的地方,提供合适的排风设备。

7 安全操作与储存7.1 安全操作的注意事项无数据资料7.2 安全储存的条件,包括任何不兼容性无数据资料7.3 特定用途根据良好的工业卫生和安全规范进行操作。

二乙酸荧光素使用说明书二乙酸荧光素是一种常用的荧光染料，广泛应用于生物医学研究、药物筛选、分子生物学等领域。

以下是二乙酸荧光素的使用说明书：1. 产品简介：二乙酸荧光素（又称2,3,6,7-四氯吡啶-4-酮）是一种有机化合物，化学式为C10H5Cl4NO2，分子量为318.96。

它具有强烈的荧光性质，可以在紫外光激发下发出绿色荧光。

2. 储存条件：二乙酸荧光素应储存在阴凉、干燥、避光的地方，避免与氧气、湿气、高温和强光接触。

正确存储可延长其保质期。

3. 溶解和稀释：二乙酸荧光素可溶于有机溶剂如二甲基亚砜（DMSO）、甲醇和乙醇等。

建议根据实验需求进行适当的溶解和稀释。

4. 使用注意事项：a. 二乙酸荧光素属于有机化合物，具有一定的毒性，应遵循实验室安全操作规范，佩戴个人防护装备。

b. 避免吸入、摄入或皮肤接触，如不慎接触到皮肤或眼睛，应立即用大量清水冲洗，并寻求医疗帮助。

c. 在使用过程中，应避免长时间暴露在强光下，以免降低荧光强度。

d. 二乙酸荧光素的稳定性较差，应尽量避免反复冻融，避免长时间暴露在空气中。

5. 应用领域：二乙酸荧光素可用于多种实验和应用，包括：a. 生物荧光显微镜实验，可用于标记细胞或组织中的特定分子，观察其在细胞或组织中的分布和定位。

b. 酶联免疫吸附实验（ELISA），可用于检测蛋白质、抗体或其他生物分子的存在和浓度。

c. 药物筛选，可用于高通量筛选药物活性和药物相互作用。

d. 分子生物学实验，可用于核酸杂交、荧光定量PCR等实验。

总结：二乙酸荧光素是一种常用的荧光染料，具有强烈的荧光性质，广泛应用于生物医学研究和分子生物学实验中。

在使用时，需要注意安全操作，正确储存和稀释，避免长时间暴露在强光下。

它在生物荧光显微镜实验、酶联免疫吸附实验、药物筛选和分子生物学实验中发挥重要作用。

靛红分子量：147.13分子式：C8H5NO2别名：二氢吲哚-2,3-二酮，吲哚醌，菘蓝，氧化靛精，橙红色结晶。

熔点203.5℃。

易溶于热乙醇，微溶于乙醚，溶于热水、苯、丙酮，溶于氢氧化钠。

碱性弱。

靛蓝分子式：C16H10N2O2，分子量：262.27性质：熔点390-392°C (dec.)。

水溶性<0.1 g/100 mL。

结构式：吖啶橙分子量：369.96分子式：C17H19N3橙色粉末。

溶于水、乙醇。

吖啶黄素分子量：259.74分子式：C14H14N3Cl吖啶分子量：179.22分子式：C13H9N熔点106-109 °C吖啶红分子量：274.75分子式：C15H15ClN2O别名：丫啶红二氯荧光黄分子量：401.2分子式：C20H10C l2O5别名：二氯荧，熔点280 °C荧光素分子量：332.31分子式：C20H12O5别名：荧光红，荧光黄，荧光橙红，酸性黄喹啉黄分子式C18H11 N O2分子量273.28544黄色粉末。

溶于水和乙醇。

不溶于植物油。

曙红Y 分子量691.85分子式：C20H6Br4Na2O5别名：伊红,朝红,四溴荧光黄,熔点>300°C水溶解度0.1 g/mL,二甲基黄分子量：225.29分子式：C14H15N3；C6H5N=NC别名：甲基黄,对二甲氨基偶氮苯。

熔点114-117℃。

溶于醇、醚，不溶于水。

(BPB)溴酚蓝分子量：669.96分子式：C19H10Br4O5S别名：四溴酚磺酚酞，溴酚兰。

溶于醇、稀碱液液中呈蓝色，溴甲酚绿分子量：698.01分子式：C21H14Br4O5S 别名：溴甲酚蓝;四溴间甲酚磺酚酞;溴甲酚绿ACS级;微溶于水，溶于乙醇、乙醚和苯。

对碱很敏感，遇碱性水溶液呈特殊的蓝绿色。

熔点225 °C溴甲酚紫分子量：540.24分子式：C21H16Br2O5S别名：二溴邻甲酚磺酰酞;溴甲酚紫;不溶于水，溶于乙醇呈黄色，熔点241-242℃。

还原型维生素C 检测试剂盒(二氯酚靛酚滴定法)简介：维生素C(Vitamin C)又称L-抗坏血酸，是高等灵长类动物与其他少数生物的必需营养素。

在生物体内，维生素C 是一种抗氧化剂，为酸性己糖衍生物，是稀醇式己糖酸内酯，保护身体免于自由基的威胁。

Leagene 还原型维生素C 检测试剂盒(二氯酚靛酚滴定法)检测原理是还原型维生素能够还原2,6-二氯酚靛酚，其自身则氧化成氧化型（即脱氢型），在酸性环境下2,6-二氯酚靛酚呈红色，还原后呈无色。

当用2,6-二氯酚靛酚滴定含有维生素C 的酸性溶液时，维生素C 尚未完全被氧化前，滴下的2,6-二氯酚靛酚立即被还原成无色；一旦维生素C 全部被氧化时，滴下的2,6-二氯酚靛酚立即被氧化成酚红色。

组成：操作步骤(仅供参考)：1、 配制组织匀浆液工作液：按组织匀浆液(5×)：蒸馏水=的比例稀释，获得1×组织匀浆液；同时按组织匀浆液(5×)：蒸馏水=9：1的比例稀释，获得0.5×组织匀浆液，待用。

2、 配制Vitamin C 标准液：取少量Vitamin C 标准稀释液加入Vitamin C 标准中，充分混匀，然后完全转移至温浴的Vitamin C 标准稀释液，即为Vitamin C 标准液。

注意：溶解应完全、准确，否则有可能导致标准液不准确。

配制好的Vitamin C 标准液4℃避光保存，4周有效。

3、 配制二氯酚靛酚标准液：取少量二氯酚靛酚稀释液加入二氯酚靛酚中，充分混匀，然后完全转移至温浴的二氯酚靛酚稀释液，即为二氯酚靛酚标准液。

注意：溶解应完全、准确，否则有可能导致标准液不准确。

配制好的二氯酚靛酚标准液4℃避光保存，2周有效。

4、 制备维生素C 样品提取液：清洗干净新鲜蔬菜或水果，用布或吸水纸吸干表面水分或编号 名称TC2055 50T Storage试剂(A): Vitamin C 标准 10mg RT 试剂(B): Vitamin C 标准稀释液 100ml RT 避光 试剂(C): 组织匀浆液(5×) 500ml RT 试剂(E): 二氯酚靛酚稀释液 250ml RT 避光 试剂(F): 碘化钾滴定液(备选) 5ml RT 避光 试剂(G): 淀粉滴定液(备选) 1ml RT 试剂(H): 碘酸钾标准液 50mlRT 使用说明书1份自然晾干。